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MDV VP22的N1-18是发挥蛋白转导功能必需的序列 被引量:6
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作者 陈鸿军 秦爱建 +2 位作者 宋翠萍 张晨飞 邓绪芳 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期91-97,共7页
血清Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)CVI988/Rispens弱毒株的VP22蛋白缺失201TKSERT206。为了进一步证实该缺失对MDV-1VP22蛋白转导功能和效率的影响,本研究通过将不同缺失型的VP22与EGFP相融合,转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光方法,检测VP2... 血清Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)CVI988/Rispens弱毒株的VP22蛋白缺失201TKSERT206。为了进一步证实该缺失对MDV-1VP22蛋白转导功能和效率的影响,本研究通过将不同缺失型的VP22与EGFP相融合,转染COS-1细胞,通过间接免疫荧光方法,检测VP22的蛋白转导现象。结果发现,EGFP-VP22具有微管结合、核膜结合、核酸结合、蛋白转导等特性;CVI988VP22与GA株VP22的转导效率相当,且只有完整长度的VP22具有明显的转导功能,其中,N端1~18aa对VP22的核定位及其蛋白转导功能的发挥意义很大。这一发现为利用MDV-1VP22携带其他目的蛋白转导,增强目的蛋白免疫原性及其治疗性功能具有重要的指导价值。 展开更多
关键词 mdv-1 衣被蛋白 VP22 蛋白转导功能
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马立克氏病病毒Ⅰ型CVI988/Rispens疫苗株UL13激酶结构域分析及其偏嗜密码子片段在大肠杆菌中的表达 被引量:1
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作者 张晨飞 秦爱建 +4 位作者 邓绪方 苏钰文 薛敏 尹天燕 王平平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期161-167,共7页
【目的】寻找MDV-1 UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。【方法】用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART(www.gcua.de)分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析... 【目的】寻找MDV-1 UL13激酶催化中心,并体外表达UL13,以便研究UL13蛋白激酶的功能。【方法】用PCR方法从CVI988疫苗株基因组中扩增UL13基因,利用GENEART(www.gcua.de)分析UL13在大肠杆菌中表达时密码子的偏嗜性;通过DNAstar抗原性分析确定UL13的高抗原性片段,进行原核表达,并以切胶免疫方法免疫小鼠制备多抗血清;通过NCBI的protein blast功能及Cn3D 4.1在线软件分析UL13保守结构域。【结果】PCR扩增出UL13基因,序列分析结果表明,UL13的259~400aa、431~513aa两个片段抗原性强,且稀有密码子较少;保守结构域分析发现UL13催化中心主要位于152~297氨基酸残基间,且在激酶SubdomainⅦ的保守甘氨酸残基被丝氨酸替代,SubdomainⅧ的保守非极性脯氨酸残基被极性半胱氨酸残基替换。利用大肠杆菌表达的UL13第259~400aa片段免疫小鼠制备出多抗血清能与真核表达产物反应。【结论】MDV-1UL13催化中心主要位于152~297氨基酸残基间,体外表达的基因产物诱导机体产生了抗UL13激酶的特异性抗体。 展开更多
关键词 mdv-1 CVI988 UL13 序列分析 密码子偏嗜性 表达
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免疫鸡羽毛根中火鸡疱疹病毒的分离与鉴定 被引量:2
3
作者 张训海 陈溥言 蔡宝祥 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期321-324,共4页
用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3... 用常规剂量的商用火鸡疱疹病毒(HVT)冻干苗经腹腔免疫1日龄非免疫鸡,于第3周采集羽毛根,分别采取直接法和间接法(即经过滤获取脱细胞的游离物)接种次代鸡胚成纤维细胞(CEF),以进行病毒的分离。结果显示,在免疫后第3、4、5、6周,2种方法都分离到病毒,第7周仅直接法分离到病毒,而第8周2种方法都没有分离到。根据分离到病毒的细胞病变(CPE)特征,结合地高辛标记的Ⅰ型马立克氏病病毒(MDV-1)核酸探针检测结果,表明HVT免疫鸡羽毛根中含有可脱离细胞的、具有感染性的疫苗株HVT粒子,且其可检出时间具有阶段性。 展开更多
关键词 火鸡 疱疹病毒 细胞病变 核酸探针 分离 鉴定
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重组人腺病毒表达的MDV-1 VP22蛋白的不同定位模式
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作者 张晨飞 秦爱建 +5 位作者 陈娟娟 钱琨 杜静 尹天燕 邵红霞 金文杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期787-790,共4页
目的:研究MDV-1 CVI988 VP22蛋白的转导机制及细胞定位机理,分析该蛋白在表达过程中细胞定位的影响因素。方法:构建表达VP22蛋白的重组人腺病毒,将重组病毒感染的AD-293细胞裂解产物加至正常的MDBK细胞上,通过免疫荧光(IFA)及Western b... 目的:研究MDV-1 CVI988 VP22蛋白的转导机制及细胞定位机理,分析该蛋白在表达过程中细胞定位的影响因素。方法:构建表达VP22蛋白的重组人腺病毒,将重组病毒感染的AD-293细胞裂解产物加至正常的MDBK细胞上,通过免疫荧光(IFA)及Western blot鉴定VP22的蛋白转导功能。观察感染后不同时间VP22在AD-293细胞上的定位,并与瞬时表达的VP22蛋白定位比较。结果:重组人腺病毒表达的VP22在MDBK细胞上能够进入几乎所有的细胞,说明VP22蛋白具有很强的蛋白转导功能。进一步鉴定VP22的细胞定位发现,在重组病毒感染的AD-293细胞中,VP22首先聚集于细胞核周围,随后以特殊的荧光粒子的形式散在于胞质中,而AD-293细胞中瞬时表达的VP22及MDV感染的CEF中VP22均均匀分布于细胞核。结论:重组人腺病毒表达的VP22蛋白具有很强的蛋白转导功能,不同重组病毒表达的VP22在细胞中的定位模式有所差别。 展开更多
关键词 重组腺病毒 mdv-1 VP22 转导 定位
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鸡胚淋巴细胞对卵内感染亲淋巴性病毒的反应
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作者 吕殿红 王刚 《预防兽医学进展》 2000年第2期53-55,共3页
关键词 胚胎接种 mdv1 mdv3 IBDV 淋巴器官 体重
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感染MDV鸡羽髓组织中CyP、LASP1和PCBP1蛋白的表达分析
6
作者 谭成章 张艳萍 +3 位作者 李志杰 郑永胜 郑惠文 刘长军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期603-606,共4页
本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究... 本实验室前期的蛋白质组学研究显示,鸡羽髓组织中亲环素蛋白(CyP)、LIM和SH3蛋白1(LASP1)和多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)3种蛋白为马立克氏病病毒(MDV)感染过程中差异表达蛋白。为进一步检测这3种蛋白在病毒感染过程中的表达水平,本研究以MDV GA强毒株感染SPF鸡,应用荧光定量PCR和westernblot检测病毒感染14 d和21 d后这3种蛋白在羽髓组织中的表达水平。检测结果表明,病毒感染14 d后,羽髓组织中这3种蛋白的mRNA和蛋白表达水平均有不同程度的下调,其中LASP1 mRNA和PCBP1蛋白分别下调62%和48%(p<0.05);在21 d,除CyP蛋白表达基本不变外,其他mRNA和蛋白均不同程度下调,其中LASP1蛋白下调达到46%(p<0.05)。结果表明在两个不同的MDV感染时期,MDV均可以不同程度的抑制羽髓组织中这3种蛋白的表达,本研究为进一步阐释MDV与羽髓组织的相互作用机理提供有价值的参考。 展开更多
关键词 羽髓 马立克氏病病毒 LASP1 CYP PCBP1
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用马立克氏病病毒强毒的BamH-L片段核酸鉴定血清1型毒株
7
作者 陈溥言 李运敏 +7 位作者 陈德胜 张雪莲 魏荣 潘杰彦 戴亚斌 范伟兴 姜焱 丁巧玲 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期536-539,共4页
马立克氏病病毒 (MDV) GA强毒株的 Bam H - L 片段 DNA全长为 2 892 bp,G+C比率为 5 5 .91%。用内切酶将其亚克隆为 6个片段 :Bam H - Pst 、Pst - Pst 、Pst - Cla 、Cla - Sm a 、Sm a - Sma 和 Sm a - Bam H 。用地高辛标记 L 片段 ... 马立克氏病病毒 (MDV) GA强毒株的 Bam H - L 片段 DNA全长为 2 892 bp,G+C比率为 5 5 .91%。用内切酶将其亚克隆为 6个片段 :Bam H - Pst 、Pst - Pst 、Pst - Cla 、Cla - Sm a 、Sm a - Sma 和 Sm a - Bam H 。用地高辛标记 L 片段 DNA或者分别标记其 6个亚片段核酸 ,通过斑点杂交试验都可将 MDV血清 1型毒株与 2型和 3型的毒株区分开来 ,应用 PCR方法可获得相同结果。但 PCR方法更敏感、更快捷。结果表明 ,MDV GA强毒株的Bam H - L片段 DNA对 MDV血清 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 BamHⅠ-L片段 血清1型毒株
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鸡马立克氏病毒UL36^(USP)的pTYB1表达载体的构建及表达分析
8
作者 金雯 王梦云 +3 位作者 余致君 郑海南 邓晨 艾永兴 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期223-227,共5页
UL36USP是马立克氏病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),为获取无冗余氨基酸残基的纯净UL36USP蛋白。试验采用p TYB1表达载体与目的基因UL36USP构建重组表达质粒,并诱导融合蛋白表达,在含有还原剂DT... UL36USP是马立克氏病毒UL36基因编码的蛋白UL36上具有去泛素化酶活性的N-端部分片段(UL36USP),为获取无冗余氨基酸残基的纯净UL36USP蛋白。试验采用p TYB1表达载体与目的基因UL36USP构建重组表达质粒,并诱导融合蛋白表达,在含有还原剂DTT的缓冲液中利用Intein发挥内含肽的剪切活性,将UL36USP从融合蛋白上分离出来,实现目的蛋白UL36USP的单柱纯化,纯化后的蛋白不带有冗余的氨基酸残基,并利用UL36和Intein的特异性抗体进行了Western Blot鉴定。该研究尝试了一种能有利于难表达蛋白的可溶性表达的方法,并利用Intein标签的剪切活性分离产生纯净的目的蛋白,如一些难表达的病毒蛋白,为抗病毒和抗肿瘤疫苗的研究提供材料。 展开更多
关键词 鸡马立克氏病毒 内涵肽 P TYB1 UL36 去泛素化酶 病毒蛋白
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Molecular Comparisons of Marek's disease virus strains of different pathotypes for their gI,gE,pp38 and meq genes
9
作者 CUIZhi-zhong WEIPin +1 位作者 DINGJia-bo ZHUSu-juan 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第1期1-5,共5页
Five to ten serotyqe I Marek’s disease virus (MDV1) strains of different pathotypes were compared for their DNA sequences of gI, gE, pp38 and meq genes. The reference strains were vMDV GA and JM, vvMDV RB1B and Md11(... Five to ten serotyqe I Marek’s disease virus (MDV1) strains of different pathotypes were compared for their DNA sequences of gI, gE, pp38 and meq genes. The reference strains were vMDV GA and JM, vvMDV RB1B and Md11(p16), vv+MDV strains 648A and 584A,vaccine strain CVI988/Rispens; Chinese strains were: v MDV strain N, vvMDV strain G2, vaccine strain 814. Only random aa changes were found in 12 positions within gE of 497 aa among 10 analyzed strains and in 10 positions within gI of 355 aa among 5 strains. There was no relationship found between virus pathotypes and aa changes of both glycoproteins. The aa changes happened in 14 positions within meq of 339 aa among 5 compared strains. But a proline deletion at aa #194 in a proline-rich domain of meq were shared by two vaccine strains CVI988/Rispens and 814, the latter was a non-pathogenic vaccine strain of serotype 1 isolated in 1983 in China. In another hand, vv+MDV strains 648A demonstrated 5 unique aa changes and 4 of them also located in the proline-rich region. The pp38 was very conservative among sequenced 10 strains, there were only two positions at #107 and #109 with aa altered in its 290 aa. All tested MDV1 strains had glutamine at #107, instead, only vaccine CVI988 had arginine at the position and lost its epitope reactive with Mab H19, to which all other tested MDV1 strains were positive. However, CVI988 and vMDV GA shared a Mab T65-recognized epitope when there was glycine at aa#109. It was glutamic acid at aa#109 in all other MDV1 strains which were not reactive with Mab T65. It seems like that there is some relationship between pathotypes and sequences of pp38 and meq, but more strains need to be compared. 展开更多
关键词 家畜病毒学 mdv1 发病机理 分子机理 gⅠ基因 GE基因 PP38基因 MEQ基因
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NEXTBASE MDV1便携式DVD播放器——走遍天下的贴心朋友
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作者 聆琴 《家庭影院技术》 2003年第4期40-41,共2页
近几年来,数字影音产品发展迅猛,新产品层出不穷,尤其是集高质量数字影音和强大交互功能于一身的DVD,已成为市场上最活跃的消费电子产品。中国目前已经是全球最大的DVD生产基地,普通DVD的研发技术门槛大大降低,竞争异常激烈,市... 近几年来,数字影音产品发展迅猛,新产品层出不穷,尤其是集高质量数字影音和强大交互功能于一身的DVD,已成为市场上最活跃的消费电子产品。中国目前已经是全球最大的DVD生产基地,普通DVD的研发技术门槛大大降低,竞争异常激烈,市场早已充斥着价格战,DVD产品的同质化现象越来越严重,大有VCD时代过渡竞争的烙印,许多DVD厂家把精力更多地放在象时装一样频繁更换的外壳和市场推广上。因此,当笔者第一次看到NEXTBASE的MDV1便携式DVD播放器时,有眼前一亮的新鲜感觉,新颖别致的外形和独特的设计理念引起了笔者极大的兴趣。 展开更多
关键词 DVD播放器 NEXTBASE公司 mdv1 外形设计 功能配置
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mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响
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作者 余祖华 高梦茹 +4 位作者 何雷 魏颖 陈建 陈松彪 丁轲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3678-3687,共10页
旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5... 旨在研究马立克病病毒(Marek′s disease virus,MDV)编码的mdv1-miR-M4-5p对MDCC-MSB1细胞增殖和凋亡的影响,将mdv1-miR-M4-5p模拟物、抑制物及其阴性对照转染MDCC-MSB1细胞后48 h,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中mdv1-miR-M4-5p、TGF-β1、Smad2以及caspase-9、caspase-3、cyt-c、cyclinD1、Bcl-2等增殖和凋亡相关分子的转录;CCK-8检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果显示:与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p模拟物转染显著上调MDCC-MSB1细胞中mdv1-miR-M4-5p、cyclinD1、Bcl-2的转录水平,下调TGF-β1、Smad2、cyt-c、caspase-9和caspase-3的表达转录,促进细胞的增殖,减少G1期细胞,增加S和G2细胞,降低细胞凋亡率。与对照组相比,mdv1-miR-M4-5p抑制物转染后MDCC-MSB1细胞的增殖、凋亡及其相关分子转录的结果与mdv1-miR-M4-5p模拟物转染后的结果相反。综上,Mdv1-miR-M4-5p可促进MDCC-MSB1细胞增殖,抑制其凋亡,这可能是通过抑制TGF-β1/Smad2信号通路来实现的。 展开更多
关键词 mdv1-miR-M4-5p mdv 增殖 凋亡 TGF-β1/Smad2
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与线粒体分裂有关的蛋白质研究进展 被引量:7
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作者 孟紫强 耿红 《生命的化学》 CAS CSCD 2002年第2期118-120,共3页
在活细胞内线粒体处于不断的融合与分裂状态 ,线粒体融合与分裂的动态平衡影响着线粒体的形态和数量 ,本文对近年来与线粒体分裂有关的蛋白质研究进行了综述 :(1)酵母 (S .cerevisae)中的Dnm1蛋白或它的同源蛋白质可能通过缠绕于线粒体... 在活细胞内线粒体处于不断的融合与分裂状态 ,线粒体融合与分裂的动态平衡影响着线粒体的形态和数量 ,本文对近年来与线粒体分裂有关的蛋白质研究进行了综述 :(1)酵母 (S .cerevisae)中的Dnm1蛋白或它的同源蛋白质可能通过缠绕于线粒体的收缩部分而影响线粒体外膜分裂 ;(2 )位于线粒体上的 3种同源蛋白Mdv1/Fis2 /Gag3与Dnm1能短暂结合 ,它们都是线粒体分裂装置的组成部分 ;(3)一个插入线粒体外膜的跨膜蛋白Fis1或Mdv2极有可能是线粒体分裂装置的招募因子 ,并且由它启动分裂过程 ;(4)分布于膜间隙 (IMS)中的Mgm1蛋白并不负责线粒体内膜分裂 。 展开更多
关键词 线粒体 外膜 内膜 分裂方式 Dnm1/Drp1 蛋白质 mdv1/Fis2/Gag3 Fis1/mdv2
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蛋白酶抑制剂DUBs-IN-1抑制马立克病病毒在鸡细胞内的增殖
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作者 艾馨 许家翠 +6 位作者 谢佳良 马浩原 于凯 刘洺丞 王馨悦 林俊彦 高旭 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1622-1628,共7页
接种疫苗是防御鸡马立克病的主要手段,但疫苗不能扼制马立克病病毒(MDV)的感染、增殖、传播以及毒力增强,因此,抑制MDV在鸡细胞内的增殖是增强疫苗防御效果的重要手段。本研究以MDV编码的大被膜蛋白MDV049为靶点,应用泛素探针从蛋白酶... 接种疫苗是防御鸡马立克病的主要手段,但疫苗不能扼制马立克病病毒(MDV)的感染、增殖、传播以及毒力增强,因此,抑制MDV在鸡细胞内的增殖是增强疫苗防御效果的重要手段。本研究以MDV编码的大被膜蛋白MDV049为靶点,应用泛素探针从蛋白酶抑制剂库中筛选出一种化合物DUBs-IN-1,可抑制MDV049的酶活性。分子对接分析发现,DUBs-IN-1可以与MDV049的催化活性中心袋口处的7个残基互作,阻止泛素底物与活性中心的CYS98结合,进而抑制MDV049酶的活性。应用CEF细胞病变(CPE)模型研究发现,0.35、0.70μmol/L的DUBs-IN-1可显著抑制MDV所致的CPE,定量分析揭示DUBs-IN-1可显著抑制MDV在CEF细胞内的增殖(P<0.01)。应用感染MDV的鸡进行动物水平的研究发现,使用80和150μg/kg的DUBs-IN-1每日给药处理,DUBs-IN-1可显著抑制MDV在鸡T细胞内的增殖(P<0.01)。总之,本研究发现蛋白酶抑制剂DUBs-IN-1通过竞争性抑制方式抑制MDV049酶活性,并有效抑制MDV在鸡细胞内增殖,这一发现为研发抗MDV的药物奠定了理论基础。 展开更多
关键词 马立克病病毒 蛋白酶抑制剂 DUBs-IN-1 CEF mdv049
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马立克氏病病毒编码的miR-M12-5p对鸡HVCN1基因表达的靶向调控 被引量:5
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作者 李会珍 滕蔓 +5 位作者 党露 冯丽丽 马圣明 赵朴 罗俊 张改平 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2016年第6期121-125,129,共6页
为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子... 为研究miR-M12-5p在马立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)感染过程中的调控作用,利用生物信息学方法对其候选靶基因进行预测分析,发现4个miR-M12-5p的结合靶点。体外双荧光素酶报告试验结果表明,miR-M12-5p可结合宿主鸡的氢离子电压门控通道1(HVCN1)基因mRNA的3'-UTR相应位点并发生特异性相互作用。实时荧光定量PCR分析进一步证实,miR-M12-5p能够在体内下调HVCN1基因的表达水平。上述结果表明,miR-M12-5p可以靶向调控宿主基因HVCN1的表达。 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 miRNA miR-M12-5p 靶基因 HVCN1基因
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马立克病毒基因缺失疫苗与商品化疫苗的分子鉴别方法
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作者 韩妮 张言坤 +3 位作者 陈俊霞 苏帅 赵鹏 崔治中 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期598-604,共7页
为了对马立克病毒(MDV)meq基因缺失疫苗株SC9-1与商品化MD疫苗CVI988/Rispens株、814株和HVT FC-126株进行分子鉴别,本研究根据疫苗株SC9-1与其它MD疫苗株的基因组差异,分别针对I型MDVmeq基因以及SC9-1基因组中的禽网状内皮组织增殖症病... 为了对马立克病毒(MDV)meq基因缺失疫苗株SC9-1与商品化MD疫苗CVI988/Rispens株、814株和HVT FC-126株进行分子鉴别,本研究根据疫苗株SC9-1与其它MD疫苗株的基因组差异,分别针对I型MDVmeq基因以及SC9-1基因组中的禽网状内皮组织增殖症病毒-长末端重复序列(REV-LTR)插入片段,设计三对PCR扩增引物,同时合成针对meq基因和REV-LTR片段的地高辛标记探针,通过PCR扩增和斑点杂交方法区分SC9-1株与其他疫苗株。结果表明,使用针对meq基因的引物F1/R1进行PCR扩增,SC9-1株、CVI988/Rispens株、814株分别扩增出184bp、1 297bp、1 297bp目的片段,HVT FC-126株没有条带;使用针对meq基因的引物F2/R2进行PCR扩增,CVI988/Rispens株、814株均扩增出746bp目的片段,SC9-1株、HVT FC-126株均没有条带;使用针对REV-LTR片段设计的引物F3/R3进行PCR扩增,SC9-1株扩增出512bp目的片段,CVI988/Rispens株、814株、HVT FC-126株均没有条带。同时,使用针对meq基因的探针进行斑点杂交,CVI988/Rispens株、814株均显示阳性结果,SC9-1株、HVT FC-126株均为阴性;使用针对REV-LTR的探针进行斑点杂交,SC9-1株显示阳性结果,CVI988/Rispens株、814株、HVT FC-126株均为阴性。因此,利用本研究设计的特异性PCR引物以及探针,通过PCR扩增和斑点杂交方法可有效区分SC9-1与其他商品化MD疫苗。 展开更多
关键词 马立克病毒(mdv) SC9-1 商品化疫苗 PCR扩增 斑点杂交
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MSB-1培养物上清液对体内MDV作用的研究 被引量:1
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作者 李建伟 杨建德 +3 位作者 马云燕 白侠 宋显梅 徐宜为 《中国畜禽传染病》 CSCD 1998年第4期215-216,共2页
研究了马立克氏病肿瘤细胞系(MSB-1)培养物上清液对体内鸡马立克氏病病毒(MDV)增殖的影响,结果表明,该上清液对体内MDV的增殖无明显抑制作用;相反,可增加MD的发病率。另外,试验中发现,6日龄鸡对MDV的易感性... 研究了马立克氏病肿瘤细胞系(MSB-1)培养物上清液对体内鸡马立克氏病病毒(MDV)增殖的影响,结果表明,该上清液对体内MDV的增殖无明显抑制作用;相反,可增加MD的发病率。另外,试验中发现,6日龄鸡对MDV的易感性明显高于1日龄鸡。 展开更多
关键词 马立克氏病病毒 mdv 培养物上清液
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敲除Meq基因的重组鸡马立克氏病毒与CVI988/Rispens疫苗株免疫保护效力的比较 被引量:1
17
作者 段伦涛 苏帅 +4 位作者 王一新 李思菲 孙鹏 陈文青 崔治中 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1353-1361,共9页
【目的】比较敲除meq基因的马立克氏病毒(MDV)与标准疫苗株CVI988/Rispens对MDV超强毒GX0101攻毒的免疫保护作用。【方法】本实验将1日龄SPF鸡120只随机分成4组,每组30只,分别饲养在正压过滤空气的SPF动物饲养隔离罩内。1日龄时,第1组鸡... 【目的】比较敲除meq基因的马立克氏病毒(MDV)与标准疫苗株CVI988/Rispens对MDV超强毒GX0101攻毒的免疫保护作用。【方法】本实验将1日龄SPF鸡120只随机分成4组,每组30只,分别饲养在正压过滤空气的SPF动物饲养隔离罩内。1日龄时,第1组鸡以2000PFU/只的剂量颈部皮下接种SC9-1;第2组鸡以2000PFU/只的剂量颈部皮下接种CVI988/Rispens;第3、4组为不免疫攻毒对照组。免疫接种后5 d后,第1、2、3组分别以2000PFU/只的剂量腹腔接种MDV GX0101。饲养至90日龄,记录死亡情况,对死亡鸡只剖检,并取疑似马立克特有病变脏器做病理切片。期间,检测不同免疫状态下病毒GX0101的增殖动态以及禽流感、新城疫灭活苗在鸡体诱导产生抗体的水平。对含有MDV母源抗体的海蓝褐鸡的试验方案与SPF鸡一致。【结果】SC9-1株免疫对感染MDV GX0101攻击SPF鸡、海兰褐鸡均提供100%的免疫保护作用;CVI988/Rispens对SPF鸡、海兰褐鸡分别提供86.7%、93%的免疫保护作用。未免疫SPF鸡攻毒组死亡率为53.3%,肿瘤率为16.7%;未免疫海兰褐鸡攻毒组死亡率为36.7%,肿瘤率为6.67%;相比,空白对照组鸡只没有任何病变及死亡。荧光定量结果显示,淋巴细胞和羽毛囊DNA中,SC9-1免疫组鸡体内GX0101的病毒拷贝数显著低于CVI988/Rispens免疫组。血凝抑制试验结果显示,SC9-1免疫攻毒组鸡的产生的AIV、NDV抗体水平高于CVI988/Rispens免疫攻毒组。【结论】SC9-1株免疫无论在SPF鸡还是含有MDV母源抗体的海兰褐鸡均能提供比CVI988/Rispens更好的免疫保护效果。 展开更多
关键词 马立克氏病毒 SC9-1 标准疫菌株CVI988/Rispens 基因meq 免疫保护作用
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1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ的体外诱生
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作者 魏萍 刘宝全 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2001年第12期5-6,共2页
为研究超抗原 (SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV(马立克氏病病毒 )感染的免疫学规律 ,采用NO-释放法 ,设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测 1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN -γ体外诱生的动态变化。结果发... 为研究超抗原 (SAg)在禽类诱导的免疫机理和进一步揭示MDV(马立克氏病病毒 )感染的免疫学规律 ,采用NO-释放法 ,设计用雏鸡骨髓巨噬细胞为靶细胞检测 1日龄雏鸡接种超抗原SEB和MDV后脾与胸腺淋巴细胞IFN -γ体外诱生的动态变化。结果发现 ,超抗原SEB(SAG -SEB)可提高脾与胸腺淋巴细胞IFN -γ体外诱生水平 ,其中 ,高剂量(1ng/只 )引起短时加强后下降 ,而低剂量 (0 .0 1ng)则出现缓升缓降现象 ;而MDV接种则抑制脾与胸腺淋巴细胞IFN-γ体外诱生 ;SAg -SEB能增强雏鸡细胞免疫 ,主要表现于接种初期 (1- 10dPI) ,而MDV却在接种后 1- 2 5d间降低细胞免疫 ;说明超抗原SEB和MDV虽然均可引起鸡T细胞增殖 ,但对鸡免疫细胞IFN -γ的体外诱生作用不同。 展开更多
关键词 超抗原SEB mdv 胸腺淋巴细胞 鸡IFN-γ 体外诱生 1日龄雏鸡 接种
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马立克病抗性选育对鸡感染马立克病病毒后外周血淋巴细胞病毒载量的影响 被引量:1
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作者 金元昌 张艳 李玉峰 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期685-689,共5页
为研究马立克病(MD)抗性选育对鸡马立克病病毒(MDV1)感染后外周血淋巴细胞病毒载量的影响,利用MDV1攻毒后第4、7、10、14、21、28和35天共7次采集并分离的全部试验鸡的外周血淋巴细胞为材料,采用real-time FQ-PCR方法对这些材料中meq基... 为研究马立克病(MD)抗性选育对鸡马立克病病毒(MDV1)感染后外周血淋巴细胞病毒载量的影响,利用MDV1攻毒后第4、7、10、14、21、28和35天共7次采集并分离的全部试验鸡的外周血淋巴细胞为材料,采用real-time FQ-PCR方法对这些材料中meq基因进行绝对定量分析以确定其病毒载量,用来分析比较MDV1在MD抗性鸡与普通鸡以及HVT疫苗免疫鸡与HVT疫苗未免疫鸡体内的增殖情况。结果显示,普通鸡非免疫攻毒组(B组)的MDV1含量于攻毒后第10(P<0.05)、14(P<0.05)、21(P<0.01)、28(P<0.05)、35(P<0.05)天显著高于MD抗性鸡免疫攻毒组(F组),而其他组间均无显著性差异。结果表明,鸡MD抗性选育结合HVT疫苗接种可显著降低鸡体内的病毒载量,从而降低MDV1感染的危害。 展开更多
关键词 马立克病病毒 外周血淋巴细胞 实时定量PCR 抗性选育
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MDCC-MSB1培养基上清液中DNA活性的定性研究
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作者 李建伟 马云燕 +3 位作者 白侠 李曦 徐宜为 刘宝全 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 1999年第5期379-381,共3页
将 M D C C M S B1 48 小时培养物 1000r/m in 离心的上清液分别用 R N A 酶、 D N A 酶和蛋白酶 K 处理后,进行体外试验。结果表明,只有 D N A 酶处理后的上清液失去了体外抑制 M D V“81... 将 M D C C M S B1 48 小时培养物 1000r/m in 离心的上清液分别用 R N A 酶、 D N A 酶和蛋白酶 K 处理后,进行体外试验。结果表明,只有 D N A 酶处理后的上清液失去了体外抑制 M D V“814”增殖的作用。将该上清液 10000r/m in 离心所得的沉淀分别用上述酶处理后进行体内试验。结果表明,只有 D N A 酶处理的样品失去了体内促进 M D V 京1 株致瘤的作用。同时,电泳分析结果证明,该上清液中确实存在 D N A。 展开更多
关键词 MDCC-MSB1 培养物上清液 mdv DNA
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