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补骨脂等5种中药植物雌激素活性的实验研究 被引量：34
1
作者 牛建昭 赵丕文 +3 位作者 王继峰 于杰 王大伟 沈丽霞 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期676-681,共6页
目的评价补骨脂等5种中药的植物雌激素活性及其可能机制。方法正常Wistar雌性大鼠(刚断乳)96只,随机分为12组(溶剂对照组、己烯雌酚组、5个中药组和5个中药+己烯雌酚组)。各组动物给药4d后处死,计算动物子宫系数和体重增幅;取血并分离... 目的评价补骨脂等5种中药的植物雌激素活性及其可能机制。方法正常Wistar雌性大鼠(刚断乳)96只,随机分为12组(溶剂对照组、己烯雌酚组、5个中药组和5个中药+己烯雌酚组)。各组动物给药4d后处死,计算动物子宫系数和体重增幅;取血并分离血清。利用雌激素受体(ER)阳性MCF7细胞,以MTT法检测含药血清对细胞增殖的影响;通过流式细胞术检测含药血清对细胞周期的影响。结果①灌胃补骨脂、川牛膝能明显增加大鼠的子宫系数(P<0.05);灌胃补骨脂、川牛膝、红花可使己烯雌酚引起的大鼠子宫系数的升高受到显著抑制(P<0.05);灌胃川牛膝可使大鼠的体重增幅明显上升(P<0.05);②补骨脂、川牛膝、红花、丹参等中药组含药血清均可使MCF7细胞增殖加速(P<0.01),加入ERβ激动剂DPN可减弱其促增殖效应;在拮抗实验中,中药组含药血清对细胞增殖的促进作用较单独使用己烯雌酚的组别有明显下降,加入DPN可进一步增强其下降效应(P<0.05或P<0.01);③补骨脂、川牛膝、丹参、菟丝子等中药组含药血清均可提高细胞增殖指数;各中药+己烯雌酚组含药血清对己烯雌酚引起的细胞增殖指数的增加均无明显的拮抗作用。结论补骨脂、川牛膝、红花、丹参、菟丝子等5种中药均具有一定的植物雌激素作用,但其作用强弱及途径有所差异。 展开更多
关键词 中药 植物雌激素 子宫系数 mcf7细胞 MTT法 细胞周期 大鼠
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HER2/neu过表达通过PI3K/Akt通路对乳腺癌细胞MCF7中p53基因表达及细胞生长和放疗敏感性的影响 被引量：19
2
作者 郑莉 任加强 +2 位作者 陈琦 张慧萍 朱虹光 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期594-597,共4页
目的研究HER2/neu基因过表达通过磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路对乳腺癌细胞MCF7野生型p53基因表达、细胞增殖及对γ射线照射敏感性的影响。方法以脂质体介导的HER2/neu基因转染MCF7细胞,用G418筛选阳性克隆。通过Westernblot鉴定HER2/neu... 目的研究HER2/neu基因过表达通过磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)通路对乳腺癌细胞MCF7野生型p53基因表达、细胞增殖及对γ射线照射敏感性的影响。方法以脂质体介导的HER2/neu基因转染MCF7细胞,用G418筛选阳性克隆。通过Westernblot鉴定HER2/neu蛋白的表达,并检测p53、信号转导分子Akt和pAkt蛋白含量的变化及PI3K通路抑制剂LY294002对上述蛋白表达水平的影响。以MTT法检测细胞增殖以及细胞对γ射线照射的敏感性。结果共获得18个稳定转染HER2/neu基因的阳性克隆,其中1个克隆有HER2/neu基因过表达。过表达HER2/neu的MCF7细胞pAkt蛋白含量升高,p53蛋白含量低于对照组细胞,LY294002能够抑制pAkt蛋白和p53蛋白的变化。同时,过表达HER2/neu基因的MCF7细胞生长速度高于对照组细胞,对γ射线照射治疗的敏感性降低,而LY294002能够抑制细胞生长并增强放射治疗的敏感性。结论MCF7细胞中HER2/neu基因的过表达,能够通过激活PI3K通路导致野生型p53蛋白含量减少、细胞增殖加快及放疗的敏感性降低,这可能是某些p53蛋白为野生型的肿瘤患者对治疗产生抗性的原因。 展开更多
关键词 过表达 HER2/NEU PI3K LY294002 治疗 Γ射线照射 乳腺癌细胞 mcf7细胞 阳性克隆 P53基因表达
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粉防己碱逆转耐阿霉素的人乳腺癌MCF-7细胞的抗凋亡作用 被引量：4
3
作者 王金华 叶祖光 +4 位作者 孙爱续 李春英 薛宝云 梁爱华 王岚 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期436-440,共5页
肿瘤细胞的多药耐药性与抗细胞凋亡作用关系密切。本研究用抗肿瘤药物阿霉素 (5μmol· L- 1 )处理人乳腺癌敏感和耐药的 MCF- 7细胞 2 4hr后 ,观察到在敏感细胞中 ,有较多的漂浮细胞 ,阿霉素主要分布在细胞核中 ;而在耐药细胞中 ,... 肿瘤细胞的多药耐药性与抗细胞凋亡作用关系密切。本研究用抗肿瘤药物阿霉素 (5μmol· L- 1 )处理人乳腺癌敏感和耐药的 MCF- 7细胞 2 4hr后 ,观察到在敏感细胞中 ,有较多的漂浮细胞 ,阿霉素主要分布在细胞核中 ;而在耐药细胞中 ,细胞形态未发生变化 ,阿霉素主要分布在细胞质中 ,其含量明显减少。阿霉素诱导 MCF- 7细胞的凋亡作用进一步用 An-nexin V - FITC染色法证实。此外 ,用高效逆转耐药性的药物粉防己碱 (2 0μmol· L- 1 )与阿霉素合用处理敏感和耐药的细胞 ,用线粒体荧光染料 Mitosensor TM染色 ,证明合用组凋亡细胞明显增多。通过流式细胞术分析显示 :细胞凋亡的发生与细胞周期无关。本研究表明 :粉防己碱能逆转耐阿霉素的人乳腺癌 MCF- 7细胞的抗凋亡作用。 展开更多
关键词 粉防己碱 逆转 阿霉素 乳腺癌 抗凋亡作用 多药耐药性 细胞凋亡 mcf-7细胞
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固本抑瘤Ⅱ号及其拆方含药血清诱导MCF7细胞自噬的研究 被引量：8
4
作者 杨亨 王笑民 +3 位作者 陈信义 杨国旺 张甘霖 于明薇 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期920-923,I0001,I0002,共6页
目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管... 目的:研究固本抑瘤Ⅱ号(GYⅡ)及其拆方大鼠含药血清对人乳腺癌细胞MCF7自噬的影响。方法:制备GYⅡ及其拆方大鼠含药血清,培养MCF7细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制,单丹磺酰尸胺(MDC)及Hoechst 33342双染色荧光显微镜、微管相关蛋白1轻链3(MAP-LC3)蛋白Ⅱ(MAP-LC3-Ⅱ)染色激光共聚焦及透射电镜观察自噬,MAP-LC3-Ⅱ/DNA双参数流式细胞术同步分析细胞自噬与细胞周期。结果:与空白组比较,全方组、益气组含药血清处理MCF7细胞表现出细胞抑制效应,活血组、鸡血藤组含药血清处理MCF7细胞均表现出明显的自噬。结论:GYⅡ全方和益气组具有抑制MCF7细胞增殖的效应,而活血组和鸡血藤组未见抑制作用,可能与该两组含药血清诱导MCF7细胞自噬有关。 展开更多
关键词 固本抑瘤Ⅱ号 拆方 含药血清 mcf7细胞 细胞抑制 自噬
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影响MCF-7细胞增殖试验相关因素的初步研究 被引量：7
5
作者 朱毅 舒为群 田怀军 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期977-979,共3页
目的　了解影响MCF 7细胞增殖试验相关因素 ,为MCF 7细胞增殖试验检测环境雌激素方法的标准化提供试验依据。方法　对不同来源的MCF 7细胞雌激素敏感性进行检测 ,对筛选出的敏感细胞在不同培养条件、去激素培养基中培养不同时间进行细... 目的　了解影响MCF 7细胞增殖试验相关因素 ,为MCF 7细胞增殖试验检测环境雌激素方法的标准化提供试验依据。方法　对不同来源的MCF 7细胞雌激素敏感性进行检测 ,对筛选出的敏感细胞在不同培养条件、去激素培养基中培养不同时间进行细胞增殖试验。结果　不同来源MCF 7细胞对雌激素敏感不同 ;培养基中酚红、血清中内源性雌激素对MCF 7细胞有刺激增殖作用 ;MCF 7细胞在去激素培养基中培养时间越长 ,对雌激素越敏感。结论　进行MCF 7细胞增殖试验前应进行雌激素敏感试验 ,选用敏感细胞 ; 展开更多
关键词 环境雌激素 mcf-7细胞 17Β-雌二醇 细胞培养
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海蓬子皂苷甲通过mTOR信号通路诱导MCF7细胞发生自噬 被引量：7
6
作者 管福琴 单宇 +8 位作者 黄真真 王奇志 陈雨 印敏 刘飞 徐曙 王鸣 赵友谊 冯煦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期197-201,共5页
目的研究海蓬子皂苷甲(BA)诱导细胞自噬的作用及其机制。方法采用倒置荧光显微镜法、流式细胞仪法和Western blot法从3个不同角度检测细胞自噬;免疫印迹法检测mTOR信号通路;MTT法检测BA单独或联合3-MA作用后细胞的存活率。结果 BA可诱导... 目的研究海蓬子皂苷甲(BA)诱导细胞自噬的作用及其机制。方法采用倒置荧光显微镜法、流式细胞仪法和Western blot法从3个不同角度检测细胞自噬;免疫印迹法检测mTOR信号通路;MTT法检测BA单独或联合3-MA作用后细胞的存活率。结果 BA可诱导MCF7细胞发生自噬,具有剂量依赖性。BA可抑制mTOR磷酸化激活,抑制mTOR下游p70S6K蛋白丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)的磷酸化以及4EBP1的磷酸化。且随着BA浓度升高,Akt和pERK表达降低。3-MA与10μmol·L^(-1)BA联合用药时,细胞存活率明显低于单独使用BA处理的细胞。结论海蓬子皂苷甲通过抑制Akt和p-ERK蛋白表达,进而抑制mTOR激活,最终诱导人乳腺癌MCF7细胞发生自噬。 展开更多
关键词 海蓬子皂苷甲 mcf7细胞 细胞自噬 MTOR AKT ERK
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瘦素诱导乳腺癌细胞中端粒酶反转录酶表达的机制 被引量：6
7
作者 李莎莎 盛俊 +4 位作者 苑占娜 王秀超 赵天锁 任贺 郝继辉 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第34期2386-2388,共3页
目的探讨在乳腺癌细胞（MCF7）中瘦素诱导端粒酶反转录酶（hTERT）表达的分子机制。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）法测定瘦素对沉默信号转导和转录激活因子3（STAq3）基因后MCF7细胞hTERTmRNA表达水平的影响。采用... 目的探讨在乳腺癌细胞（MCF7）中瘦素诱导端粒酶反转录酶（hTERT）表达的分子机制。方法采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT．PCR）法测定瘦素对沉默信号转导和转录激活因子3（STAq3）基因后MCF7细胞hTERTmRNA表达水平的影响。采用Western印迹方法测定MCF7细胞经不同处理后hTERT蛋白的表达变化。采用染色质免疫共沉淀（ChIP）技术观察STA33与hTERT启动子的结合情况。应用双荧光素酶分析，探讨瘦素及P-STAT3抑制剂（AG490）对hTERT启动子转录活性的影响。结果STAT3小干扰片段RNA（siRNA）转染细胞后，瘦素诱导的hTERTmRNA的表达减少。Western印迹结果示hTERT蛋白在瘦素处理组及AG490联合瘦素处理组的蛋白表达分别为3．1094-0．051、1．025±0．031，加入P—STAT3抑制剂AG490后，瘦素诱导hTERT蛋白表达明显减少（P〈0．01）。ChIP结果显示对照组与瘦素处理组mRNA分别为1、3．311±0．017，瘦素（160ng／m1）作用MCF7细胞后，增加了STA33与hTERT启动子之间的结合（P〈0．01）。双荧光素酶分析结果示，经瘦素（160ng／m1）作用后，hTERT启动子活性的变化倍率为80．98±0．18，对照组为20．76±0．31，加入AG490后，hTERT启动子活性的变化倍率为18．65±0．32，瘦素诱导的hTERT启动子的活性明显下降。结论在乳腺癌MCF7细胞中，瘦素／STA33信号通路是上调hTERT表达的可能机制。 展开更多
关键词 瘦素 乳腺肿瘤 mcf7细胞系 端粒酶逆转录酶
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胶艾汤及参芪胶艾汤的雌激素样作用及可能机制 被引量：6
8
作者 赵丕文 牛建昭 +3 位作者 王继峰 于杰 郝庆秀 李亚东 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2503-2507,共5页
目的：观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用，并利用雌激素受体（ER）（＋）MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制。方法：正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只，体重9～12g，按体重均衡和随机的原则分为6组：正... 目的：观察胶艾汤及其加味方参芪胶艾汤的植物雌激素样作用，并利用雌激素受体（ER）（＋）MCF7细胞探讨其发挥雌激素样作用的可能靶点和机制。方法：正常昆明种性未成熟雌性小鼠60只，体重9～12g，按体重均衡和随机的原则分为6组：正常组给予等体积蒸馏水，阳性药己烯雌酚组按0．35mg·kg·d^-1给予己烯雌酚，胶艾汤和参芪胶艾汤低，高剂量组分别按2．5，5．0g·kg·d^-1给予中药方剂，给药持续4d。第5天眼眶取血，分离血清，称取子宫并计算子宫系数。通过MTT细胞增殖实验观察2个方剂含药血清对MCF7细胞增殖的影响；运用实时荧光定量RT—PCR技术检测含药血清对雌激素效应基因pS2及ERα，ERβ表达的调控作用；并以雌激素受体拮抗剂IC1182，780干预，探讨其发挥雌激素样作用的可能机制。结果：高剂量胶艾汤及参芪胶艾汤能够明显提高性未成熟小鼠的子宫系数（P〈0．05）；其含药血清能够显著促进MCF7细胞增殖（P〈0．05或0．01），加入ER拮抗剂IC1182，780可抑制其促增殖作用（P〈0．05或0．01）。与己烯雌酚组一致，2个方剂含药血清也可提高靶细胞pS2表达水平（P〈0．01），加入IC1182，780可抑制pS2表达水平的提高（P〈0．01）；2个方剂含药血清还可明显提高ERα（P〈0．05）和ERβ（P〈0．01）的表达水平。结论：胶艾汤及参芪胶艾汤均具有一定的通过ER介导的雌激素样作用，并可提高靶细胞ER亚型（特别是ERβ）mRNA的表达水平。 展开更多
关键词 胶艾汤 参芪胶艾汤 雌激素样作用 子宫系数 mcf7细胞 细胞增殖 雌激素受体亚型 .
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水飞蓟宾抑制乳腺癌细胞增殖和促进其凋亡的作用及机制 被引量：5
9
作者 周大勇 还勇为 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第6期882-885,共4页
目的:探讨水飞蓟宾抑制乳腺癌细胞增殖和促进其凋亡的作用及机制。方法:MCF7细胞分为对照组和SIL组(处理浓度分别为10、20、40mg/L),各组细胞分别处理24、48、72h。MTT法检测不同浓度SIL对乳腺癌MCF7存活率的影响,TUNEL法(DNA断裂的原... 目的:探讨水飞蓟宾抑制乳腺癌细胞增殖和促进其凋亡的作用及机制。方法:MCF7细胞分为对照组和SIL组(处理浓度分别为10、20、40mg/L),各组细胞分别处理24、48、72h。MTT法检测不同浓度SIL对乳腺癌MCF7存活率的影响,TUNEL法(DNA断裂的原位末端标记法)检测各组细胞凋亡率,caspase-Glo83/7定量试剂盒测定细胞caspase3/7的表达情况,Western blot法检测PUMA蛋白表达水平。结果:MTT结果显示SIL对MCF7细胞增殖有抑制作用(P<0.01),其中用40mg/L SIL处理MCF7细胞72h时抑制效果最明显,结果呈药物浓度时间依赖效应。TUNEL法显示(48h)SIL可以显著增加MCF7细胞的凋亡率(P<0.01)。caspase3/7结果示SIL可以使caspase3/7活性显著升高(P<0.01)。Western blot示SIL可以诱导PUMA蛋白的表达升高。结论:水飞蓟宾能抑制乳腺癌细胞增殖和促进其凋亡,其作用机制之一可能是诱导PUMA蛋白表达。 展开更多
关键词 水飞蓟宾 PUMA 乳腺癌 mcf7细胞
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去氢骆驼蓬碱对MCF7细胞增殖与迁移侵袭的影响 被引量：4
10
作者 王梅林 牛精铃 +4 位作者 高杨 王元培 张露芳 张悦 王萍 《中药材》 CAS 北大核心 2018年第7期1702-1706,共5页
目的:观察去氢骆驼蓬碱对人乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并探究其潜在的分子机制。方法:体外常规培养人乳腺癌MCF7细胞,用不同浓度的去氢骆驼蓬碱(0、2.5、5、10、20、40、80μmol/L)处理细胞,采用MTT法测定其对细胞增殖... 目的:观察去氢骆驼蓬碱对人乳腺癌MCF7细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响,并探究其潜在的分子机制。方法:体外常规培养人乳腺癌MCF7细胞,用不同浓度的去氢骆驼蓬碱(0、2.5、5、10、20、40、80μmol/L)处理细胞,采用MTT法测定其对细胞增殖能力的影响;依据MTT实验结果,确定后续实验组药物作用浓度(0、5、10、20μmol/L),采用克隆形成实验、细胞划痕实验、Transwell实验观察去氢骆驼蓬碱对细胞克隆形成、迁移和侵袭能力的影响;通过Western blot检测N-Cadherin、Vimentin及TGF-β通路相关蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,在浓度为5、10、20μmol/L时,去氢骆驼蓬碱可显著抑制MCF7细胞的增殖(P<0.05),其作用呈浓度及时间依赖性;并能使MCF7细胞克隆形成数、细胞迁移率、细胞侵袭率均显著降低(P<0.05);Western blot结果显示,N-Cadherin、Vimentin、Stat3、TGF-β、Smad2、Smad3、Smad4等蛋白表达均显著下调(P<0.05)。结论:综上所述,去氢骆驼蓬碱可能介导TGF-β通路,抑制相关蛋白的表达,经间充质转换的调节作用,抑制MCF7细胞的增殖、迁移与侵袭能力。 展开更多
关键词 去氢骆驼蓬碱 mcf7细胞 细胞增殖 迁移 侵袭
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miR-1468-3p靶向JAK2调控乳腺癌细胞的凋亡 被引量：3
11
作者 孙莉 赵毅 《解剖学研究》 CAS 2019年第3期182-185,202,共5页
目的探讨miR-1468-3p分子通过Janus激酶2(JAK2)蛋白调控乳腺癌细胞的凋亡。方法运用TargetScan在线分析miR-1468-3p与JAK2的相关性;将JAK2的3′UTR构建进PmirGLO质粒,利用luciferase assay检测miR-1468-3p是否靶向调控JAK2;用脂质体梯... 目的探讨miR-1468-3p分子通过Janus激酶2(JAK2)蛋白调控乳腺癌细胞的凋亡。方法运用TargetScan在线分析miR-1468-3p与JAK2的相关性;将JAK2的3′UTR构建进PmirGLO质粒,利用luciferase assay检测miR-1468-3p是否靶向调控JAK2;用脂质体梯度转染miR-1468-3P mimics或miR-1468-3P inhibitor转入乳腺癌MCF7细胞,通过Western blot检测JAK2的表达量和乳腺癌MCF7细胞凋亡标志蛋白表达情况。结果通过TargetScan分析,miR-1468-3p在3个区域与JAK2具有较高匹配度;通过luciferase assay发现,miR-1468-3p靶向JAK2的3′UTR;梯度转染miR-1468-3P mimics时,JAK2的表达量梯度下降,细胞凋亡标志蛋白cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9、BAX表达量上升,Bcl-2表达量下降(P<0.05);而用梯度转染miR-1468-3P inhibitor进乳腺癌MCF7细胞时,JAK2的表达量梯度上升,cleaved-caspase3/caspase3、cleaved-caspase9/caspase9和BAX表达量下降,Bcl-2表达量上升(P<0.05)。结论 miR-1468-3p能通过降低JAK2的表达来促进乳腺癌MCF7细胞的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 mcf7细胞株 miR-1468-3p JANUS激酶2 细胞凋亡
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沉默GRP94基因对乳腺癌MCF7细胞增殖和凋亡的影响 被引量：3
12
作者 樊建军 武家燕 +2 位作者 李韵 曾帆 宋方洲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期828-831,共4页
目的:研究沉默葡萄糖调节蛋白GRP94(Glucose regulated protein,GRP94)对乳腺癌MCF7细胞增殖、凋亡的影响及潜在机制。方法:设计并化学合成靶向沉默GRP94基因的小干扰RNA,通过脂质体转染入MCF7细胞中,采用qRTPCR和Western blot分别检测G... 目的:研究沉默葡萄糖调节蛋白GRP94(Glucose regulated protein,GRP94)对乳腺癌MCF7细胞增殖、凋亡的影响及潜在机制。方法:设计并化学合成靶向沉默GRP94基因的小干扰RNA,通过脂质体转染入MCF7细胞中,采用qRTPCR和Western blot分别检测GRP94、cyclin D1、Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平;通过流式细胞术检测细胞凋亡比例变化,Hoechst 33258染色检测凋亡细胞核变化、CCK8实验检测细胞增殖能力的变化。结果:GRP94 siRNA组GRP94基因的表达水平被有效抑制;与对照组相比,GRP94-siRNA转染组的细胞凋亡比例明显增加;凋亡细胞核形态发生变化;增殖能力明显下降;mRNA及蛋白水平cyclin D1、Bcl-2表达明显下调,Bax表达增加。结论:沉默GRP94基因可明显抑制乳腺癌MCF7细胞增殖能力,促进细胞凋亡的发生,且其可能通过下调cyclin D1、Bcl-2和上调Bax表达参与其中。 展开更多
关键词 GRP94基因 mcf7细胞 增殖 凋亡
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紫杉醇诱导的乳腺癌MCF-7细胞核凋亡的光电化学表征 被引量：3
13
作者 张春阳 慈云祥 《分析科学学报》 CAS CSCD 2000年第4期265-269,共5页
利用光电分析法研究了紫杉醇诱导的非细胞体系中 MCF- 7细胞核的凋亡。在MCF- 7细胞核凋亡过程中 ,光电流的降低与 DNA断裂和细胞核形态学的变化结果相一致。与传统的琼脂糖凝胶电泳法和荧光显微镜观察法相比 ,光电分析法能快速灵敏地... 利用光电分析法研究了紫杉醇诱导的非细胞体系中 MCF- 7细胞核的凋亡。在MCF- 7细胞核凋亡过程中 ,光电流的降低与 DNA断裂和细胞核形态学的变化结果相一致。与传统的琼脂糖凝胶电泳法和荧光显微镜观察法相比 ,光电分析法能快速灵敏地在早期检测到细胞核凋亡的动力学信息 ,并适时追踪细胞核凋亡的整个过程。 展开更多
关键词 光电检测 紫杉醇诱导 乳腺癌 mcf-7细胞核凋亡
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miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7的凋亡研究 被引量：2
14
作者 张爽 马庆彪 +2 位作者 梁含理 顾帅林 王英飞 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第2期98-102,107,共6页
目的:探讨miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7凋亡的潜在分子机制。方法:通过高通量测序检测正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7中的差异miRNA。在乳腺癌细胞MCF7中过表达差异倍数大于7的miRNA,检测其凋亡水平。通过miRDB在... 目的:探讨miR-134-5p靶向MRPL58调控乳腺癌细胞MCF7凋亡的潜在分子机制。方法:通过高通量测序检测正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7中的差异miRNA。在乳腺癌细胞MCF7中过表达差异倍数大于7的miRNA,检测其凋亡水平。通过miRDB在线分析miRNA潜在的靶标基因。通过过表达或敲低miRNA和荧光素酶报告实验确定miRNA的靶标基因。结果:正常乳腺上皮细胞MCF10A与乳腺癌细胞MCF7的总miRNA高通量测序结果发现,MCF10A细胞中miRNA比乳腺癌细胞MCF7表达量大于7倍的有30种。过表达上述miRNA后,miR-134-5p增强了乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平(P<0.05)。敲低miR-134-5p后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平下降(P<0.05)。miR-134-5p在癌旁组织中的表达水平高于乳腺癌组织(P<0.05)。过表达miR-134-5p后,KIAA0040,ZMAT5,RAB27A,TESMIN,MRPL58,ZFPM2,NUP98的表达水平下降(P<0.05)。敲低上述基因后,敲低MRPL58时乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平上升(P<0.05)。过表达MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平下降。敲低miR-134-5p后,MRPL58的表达水平上升。过表达miR-134-5p后,MRPL58的表达水平下降。同时,miR-134-5p靶向MRPL58的3端非编码区(P<0.05)。同时敲低miR-134-5p和MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平没有显著改变(P>0.05)。同时过表达miR-134-5p和MRPL58后,乳腺癌细胞MCF7的凋亡水平没有显著改变(P>0.05)。结论:miR-134-5p通过靶向MRPL58 mRNA的3端非编码区以降低MRPL58的翻译水平,最终促进了乳腺癌细胞MCF7的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 miR-134-5p MRPL58 mcf7细胞 凋亡
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过表达外源M-CSF促进MCF7细胞增殖 被引量：2
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作者 涂剑 姚志红 +2 位作者 龙治峰 朱炳阳 唐圣松 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期132-136,共5页
为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷... 为探讨过表达外源巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对细胞增殖的影响,将重组载体pCMV/cyto/myc-M-CSF转染MCF7细胞、G418筛选,RT-PCR、Western印迹和免疫荧光鉴定M-CSF的mRNA表达、蛋白表达及定位,通过计算细胞倍增时间、MTT法及反义寡核苷酸抑制实验分析M-CSF对细胞增殖的影响.结果表明,转染M-CSF的MCF7细胞过表达M-CSF mRNA及蛋白,并且定位表达于细胞质;与转染空载体及未转染M-CSF组细胞比较,转染M-CSF的MCF7细胞倍增时间明显缩短、增殖能力显著增强,M-CSF的特异性反义寡核苷酸能抑制转染M-CSF的MCF7细胞的增殖,且抑制率随着反义寡核苷酸浓度的增高而增强;以上结果提示,胞质过表达M-CSF可促进MCF7细胞的增殖. 展开更多
关键词 巨噬细胞集落刺激因子 pCMV/cyto/myc—M—CSF载体 mcf7细胞 胞质 细胞增殖
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氯喹对MCF7细胞增殖的抑制作用及其机制 被引量：2
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作者 丁文评 陆元元 +1 位作者 李琴 陈意红 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第12期1831-1834,共4页
目的:探讨氯喹对乳腺癌细胞MCF7的生长抑制作用及其可能机制。方法:取对数生长期的MCF7细胞,用不同浓度氯喹(0、10、20、30、40μmol/L)作用于MCF7细胞不同时间(0 h、24 h、48 h和72 h),通过MTT法检测细胞增殖情况。使用显微镜观察不同... 目的:探讨氯喹对乳腺癌细胞MCF7的生长抑制作用及其可能机制。方法:取对数生长期的MCF7细胞,用不同浓度氯喹(0、10、20、30、40μmol/L)作用于MCF7细胞不同时间(0 h、24 h、48 h和72 h),通过MTT法检测细胞增殖情况。使用显微镜观察不同浓度氯喹作用MCF7细胞72 h后细胞形态变化。利用Western blot方法检测不同浓度氯喹作用MCF7细胞24 h后细胞内β-catenin蛋白和Cyclin D1蛋白变化情况。结果:与对照组比较,氯喹在一定浓度范围内对MCF7细胞有明显的抑制作用(P<0.05),细胞增殖活性随着剂量和时间增加而逐渐下降。显微镜下观察到氯喹处理MCF7细胞后,细胞数目减少而细胞碎片增加。Western blot结果显示氯喹处理MCF7细胞后,细胞内β-catenin和Cyclin D1蛋白表达出现下调(P<0.05)。结论:氯喹对MCF7细胞增殖具有抑制作用,其机制可能与下调Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 乳腺癌 mcf7细胞 氯喹 Β-连环素 细胞周期蛋白D1
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RT-PCR分析工频磁场暴露后MCF-7细胞p53mRNA的表达 被引量：1
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作者 丁桂荣 郭国祯 +1 位作者 郭鹞 宫越顺二 《第四军医大学学报》 北大核心 2002年第11期1016-1018,共3页
目的　观察工频磁场暴露对 MCF- 7细胞 p5 3m R-NA表达的影响 .方法　将人乳腺癌 MCF- 7细胞暴露或假暴露于 6 0 Hz,5 m T工频磁场中 4 ,8和 2 4 h,采用 RT- PCR方法定量分析照射后不同时间 MCF- 7细胞 p5 3m RNA的表达水平 .结果　工... 目的　观察工频磁场暴露对 MCF- 7细胞 p5 3m R-NA表达的影响 .方法　将人乳腺癌 MCF- 7细胞暴露或假暴露于 6 0 Hz,5 m T工频磁场中 4 ,8和 2 4 h,采用 RT- PCR方法定量分析照射后不同时间 MCF- 7细胞 p5 3m RNA的表达水平 .结果　工频磁场暴露 4 ,8和 2 4 h,MCF- 7细胞 p5 3m RNA的表达水平保持不变 .结论　工频磁场暴露对 MCF-7细胞 p5 3m 展开更多
关键词 RT-PCR 工频磁场 mcf-7细胞 P53 mRNA
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海绵来源的smenospongine诱导乳腺癌MCF7细胞凋亡机制研究
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作者 唐杰 林厚文 孙凡 《药学实践杂志》 CAS 2018年第5期399-402,421,共5页
目的研究海绵Spongia pertusa Esper来源的smenospongine(Sme)诱导乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用机制。方法使用CCK-8法检测Sme对MCF7细胞活力的影响;DAPI染色检测凋亡细胞的细胞核形态;使用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位;Western... 目的研究海绵Spongia pertusa Esper来源的smenospongine(Sme)诱导乳腺癌细胞MCF7凋亡的作用机制。方法使用CCK-8法检测Sme对MCF7细胞活力的影响;DAPI染色检测凋亡细胞的细胞核形态;使用流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位;Western blotting检测Sme对Bax、Bcl2、细胞色素C(cytochorome C)、p-p38和p38蛋白水平表达的影响。结果 CCK-8法检测结果表明,Sme抑制MCF7增殖,IC50值为(16.46±0.88)μmol/L;DAPI染色结果和Annexin VFITC/PI染色结果显示Sme诱导细胞凋亡。随着加药浓度的增加,细胞凋亡率从4.18%逐渐升至21.49%;流式细胞仪检测结果表明Sme引发MCF7细胞内线粒体膜电位下降;Western blotting结果显示Sme激活了内源性凋亡途径和p38丝裂源活化蛋白激酶(MAPK)信号通路。结论 Sme可能通过激活p38 MAPK通路,诱导细胞内源性凋亡发挥抗乳腺癌作用。 展开更多
关键词 smenospongine 乳腺癌 mcf7细胞 细胞凋亡 P38 MAPK
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MKP1对他莫昔芬耐药MCF7细胞耐药性的影响研究
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作者 白静静 马刚 +1 位作者 何建军 潘怡霞 《陕西医学杂志》 CAS 2017年第11期1508-1512,共5页
目的:研究MKP1对他莫昔芬耐药MCF7细胞耐药性的影响及其分子机制。方法:应用Real-time PCR和Western blot分析MKP1在MCF7和他莫昔芬耐药MCF7细胞中的表达变化;Western blot分析MKP1siRNA在他莫昔芬耐药MCF7细胞中对他莫昔芬诱导MAPK成... 目的:研究MKP1对他莫昔芬耐药MCF7细胞耐药性的影响及其分子机制。方法:应用Real-time PCR和Western blot分析MKP1在MCF7和他莫昔芬耐药MCF7细胞中的表达变化;Western blot分析MKP1siRNA在他莫昔芬耐药MCF7细胞中对他莫昔芬诱导MAPK成员活化的影响;MTT比色法分析细胞活力;流式细胞仪分析细胞凋亡;SP600125抑制JNK活化。结果:与MCF7细胞相比,MKP1在他莫昔芬耐药MCF7细胞中表达上调;MKP1siRNA可增加他莫昔芬对耐药MCF7细胞活力的抑制作用;MKP1siRNA组与对照组相比,他莫昔芬介导的耐药MCF7细胞的凋亡显著增加;siRNA组与对照组相比,他莫昔芬诱导的JNK活化显著增强;SP600125抑制JNK活化后,MKP1siRNA组他莫昔芬耐药MCF7对他莫昔芬的耐药性部分恢复。结论:MKP1通过抑制他莫昔芬诱导的JNK活化维持MCF7他莫昔芬耐药细胞对他莫昔芬的耐药性。 展开更多
关键词 药物耐受性 丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶 他莫音芬 @mcf7 细胞凋亡
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双酚A体外类雌激素活性评价及其作用机制的初步研究 被引量：21
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作者 朱毅 舒为群 +2 位作者 卓鉴波 余楠 刘波 《重庆环境科学》 北大核心 2003年第4期20-22,共3页
采用体外 MCF- 7细胞增殖试验检测了双酚 A(BPA)的类雌激素活性 ,并用生长曲线分析、细胞周期分析、他莫昔芬拮抗试验和凋亡检测对其作用机制进行了初步探讨。结果显示 BPA有明显刺激 MCF- 7细胞增殖的类雌激素活性 ;细胞周期分析 BPA... 采用体外 MCF- 7细胞增殖试验检测了双酚 A(BPA)的类雌激素活性 ,并用生长曲线分析、细胞周期分析、他莫昔芬拮抗试验和凋亡检测对其作用机制进行了初步探讨。结果显示 BPA有明显刺激 MCF- 7细胞增殖的类雌激素活性 ;细胞周期分析 BPA组细胞增殖指数均明显高于溶剂对照组 ;BPA刺激 MCF- 7细胞增殖的类雌激素活性可被Tam拮抗 :BPA能明显抑制 MCF- 7细胞凋亡的发生。结果提示 BPA刺激 MCF- 7细胞增殖的类雌激素活性作用机制可能是 BPA与雌激素受体结合后 ,影响细胞增殖及细胞凋亡过程 。 展开更多
关键词 环境雌激素 双酚A mcf-7细胞增殖试验 他莫昔芬 细胞凋亡 类雌激素 活性评价
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