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戊型肝炎病毒细胞吸附模型的建立及病毒吸附区域初步研究
被引量：
16
1
作者
何水珍
郑子峥
+4 位作者
吴婷
谢明辉
苗季
张军
夏宁邵
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期426-430,共5页
E.coli中表达的HEV衣壳蛋白片段P239（aa368～606）形成的类病毒颗粒与戊肝患者恢复期血清及中和单抗具有良好的反应性，较好地模拟了天然HEV病毒颗粒的表面空间结构。利用P239吸附HepG2细胞的模型来模拟HEV对宿主细胞的吸附，多株中和...
E.coli中表达的HEV衣壳蛋白片段P239（aa368～606）形成的类病毒颗粒与戊肝患者恢复期血清及中和单抗具有良好的反应性，较好地模拟了天然HEV病毒颗粒的表面空间结构。利用P239吸附HepG2细胞的模型来模拟HEV对宿主细胞的吸附，多株中和单抗对吸附的阻断验证了吸附的特异性。P239与多株传代细胞系的吸附结果则表明了这种特异性吸附的细胞选择性。对阻断P239吸附的线性单抗进行定位，初步确定了P239与细胞相互作用的区域：ORF2上的aa423～443很可能和病毒上的细胞膜受体结合部位非常靠近，或可能直接参与构成了病毒与细胞特异性识别的表位。此本研究为进一步研究HEV与宿主细胞的相互作用提供一定的线索。
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关键词
戊型肝炎病毒(HEV)
类病毒颗粒P239
HEPG2
单抗阻断
下载PDF
职称材料
抗GⅡ.3型诺如病毒阻断型单克隆抗体的制备和鉴定
2
作者
霍玉奇
郑礼钧
刘金瑾
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期98-105,共8页
诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GⅡ.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GⅡ.3型NoV HBG...
诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GⅡ.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GⅡ.3型NoV HBGA阻断型mAbs,并对这些抗体特性进行了初步的鉴定。采用纯化的GⅡ.3型(GenBank登录号:KY767665)NoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫BALB/c小鼠。将GⅡ.3,GⅡ.4(GenBank登录号,KF306214),GⅡ.3S/GⅡ.6P,GⅡ.6S/GⅡ.3P,GⅡ.4-VP1/GⅡ.3-P2主要衣壳蛋白(VP1)抗原或嵌合抗原作为包被抗原采用间接ELISA方法分别对细胞克隆株进行筛选,采用体外HBGA-VLP结合阻断实验对筛选的mAbs进行阻断活性鉴定,利用基于涵盖GⅡ.3突环区(protruding domain,P区)的重叠多肽ELISA和western blot(WB)对阻断抗体结合位点进行特性分析。体外HBGA-VLPs阻断实验显示三株细胞分泌抗体具有阻断活性。挑选目标株制备腹水并对mAbs进行纯化。WB结果显示三株HBGA阻断型mAbs只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白;基于GⅡ.3 P区重叠多肽的间接ELISA结果显示三株HBGA阻断型mAbs与被检测多肽无结合活性。本研究制备了具有HBGAs阻断活性的GⅡ.3 NoV特异性mAbs,全部只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白,且结合位点位于GⅡ.3 VP1 P2区。抗GⅡ.3 NoV HBGAs阻断型mAbs的获得为后续研究GⅡ.3 NoV的进化、感染机制和HBGAs结合位点提供了原材料。
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关键词
GⅡ.3型诺如病毒(NoV)
组织血型抗原(HBGAs)
阻断型单克隆抗体(
blocking
mabs
)
多肽
表位
原文传递
题名
戊型肝炎病毒细胞吸附模型的建立及病毒吸附区域初步研究
被引量：
16
1
作者
何水珍
郑子峥
吴婷
谢明辉
苗季
张军
夏宁邵
机构
厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心福建省医学分子病毒学研究中心
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第6期426-430,共5页
基金
863计划(2005AA2Z3H20)
福建省科技重大专项(2004YZ01)
厦门市重大产业科技项目(3502Z20041008)
文摘
E.coli中表达的HEV衣壳蛋白片段P239（aa368～606）形成的类病毒颗粒与戊肝患者恢复期血清及中和单抗具有良好的反应性，较好地模拟了天然HEV病毒颗粒的表面空间结构。利用P239吸附HepG2细胞的模型来模拟HEV对宿主细胞的吸附，多株中和单抗对吸附的阻断验证了吸附的特异性。P239与多株传代细胞系的吸附结果则表明了这种特异性吸附的细胞选择性。对阻断P239吸附的线性单抗进行定位，初步确定了P239与细胞相互作用的区域：ORF2上的aa423～443很可能和病毒上的细胞膜受体结合部位非常靠近，或可能直接参与构成了病毒与细胞特异性识别的表位。此本研究为进一步研究HEV与宿主细胞的相互作用提供一定的线索。
关键词
戊型肝炎病毒(HEV)
类病毒颗粒P239
HEPG2
单抗阻断
Keywords
hepatitis
E
virus
（HEV）
VLP
P239
HepG2
cell
mabs
blocking
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
下载PDF
职称材料
题名
抗GⅡ.3型诺如病毒阻断型单克隆抗体的制备和鉴定
2
作者
霍玉奇
郑礼钧
刘金瑾
机构
郑州市第六人民医院
出处
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第1期98-105,共8页
文摘
诺如病毒(norovirus,NoV)是引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一。目前国内外还没有关于抗GⅡ.3NoV组织血型抗原(histo-blood group antigens,HBGAs)阻断型单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的报道,本研究制备了抗GⅡ.3型NoV HBGA阻断型mAbs,并对这些抗体特性进行了初步的鉴定。采用纯化的GⅡ.3型(GenBank登录号:KY767665)NoV病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)免疫BALB/c小鼠。将GⅡ.3,GⅡ.4(GenBank登录号,KF306214),GⅡ.3S/GⅡ.6P,GⅡ.6S/GⅡ.3P,GⅡ.4-VP1/GⅡ.3-P2主要衣壳蛋白(VP1)抗原或嵌合抗原作为包被抗原采用间接ELISA方法分别对细胞克隆株进行筛选,采用体外HBGA-VLP结合阻断实验对筛选的mAbs进行阻断活性鉴定,利用基于涵盖GⅡ.3突环区(protruding domain,P区)的重叠多肽ELISA和western blot(WB)对阻断抗体结合位点进行特性分析。体外HBGA-VLPs阻断实验显示三株细胞分泌抗体具有阻断活性。挑选目标株制备腹水并对mAbs进行纯化。WB结果显示三株HBGA阻断型mAbs只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白;基于GⅡ.3 P区重叠多肽的间接ELISA结果显示三株HBGA阻断型mAbs与被检测多肽无结合活性。本研究制备了具有HBGAs阻断活性的GⅡ.3 NoV特异性mAbs,全部只识别非变性的GⅡ.3 VP1蛋白,且结合位点位于GⅡ.3 VP1 P2区。抗GⅡ.3 NoV HBGAs阻断型mAbs的获得为后续研究GⅡ.3 NoV的进化、感染机制和HBGAs结合位点提供了原材料。
关键词
GⅡ.3型诺如病毒(NoV)
组织血型抗原(HBGAs)
阻断型单克隆抗体(
blocking
mabs
)
多肽
表位
Keywords
GⅡ.3
norovirus(NoV)
histo-blood
group
antigens(HBGAs)
blocking
monoclonal
antibodies(
mabs
)
peptide
epitope
分类号
R373.2 [医药卫生—病原生物学]
Q78 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
戊型肝炎病毒细胞吸附模型的建立及病毒吸附区域初步研究
何水珍
郑子峥
吴婷
谢明辉
苗季
张军
夏宁邵
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
16
下载PDF
职称材料
2
抗GⅡ.3型诺如病毒阻断型单克隆抗体的制备和鉴定
霍玉奇
郑礼钧
刘金瑾
《病毒学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
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