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血蓝蛋白是中华绒鳌蟹重要的高分子量过敏原 被引量:4
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作者 张盈莹 朱黎娜 +2 位作者 李韶深 侯丽英 李会强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1375-1379,1388,共6页
目的:证明血蓝蛋白是中华绒螯蟹的一种重要的高分子量过敏原。方法:采用裂解液法提取蟹总蛋白,通过SDS-PAGE、二维电泳及Western blot分析蟹中过敏原组分并进行比对,再通过质谱分析鉴定未知过敏原。以临床中华绒螯蟹过敏患者的血... 目的:证明血蓝蛋白是中华绒螯蟹的一种重要的高分子量过敏原。方法:采用裂解液法提取蟹总蛋白,通过SDS-PAGE、二维电泳及Western blot分析蟹中过敏原组分并进行比对,再通过质谱分析鉴定未知过敏原。以临床中华绒螯蟹过敏患者的血清作为识别抗体,通过斑点免疫印记实验证明疑似蛋白的致敏特性。结果:通过SDS-PAGE及二维电泳分析,证明本实验所提取的蟹总蛋白组分完全。 Western blot结果显示,中华绒螯蟹至少有18种与阳性血清反应的组分,其中,70~80 kD处两个蛋白处于同一等电点,可能为同一蛋白,且反应斑点清晰;质谱分析结果显示疑似蛋白为血蓝蛋白;斑点免疫印记结果显示血蓝蛋白与患者血清的反应频率为61%。结论:血蓝蛋白为中华绒鳌蟹中一种重要的高分子量过敏原。 展开更多
关键词 中华绒鳌蟹 特异性s Ig E 血蓝蛋白 质谱分析 过敏原
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铝胁迫下不同桉树无性系叶差异蛋白表达分析 被引量:1
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作者 马松亚 曹雪宁 +3 位作者 蒋维昕 刘甜 徐圆圆 杨梅 《广西林业科学》 2016年第2期136-142,共7页
为了研究桉树不同无性系在铝处理下的叶片蛋白表达的差异,并从分子生物学角度预测与阐释桉树耐铝性机制,以巨尾桉(Eucalyptus grandis×E.urophylla)9号、巨尾桉(E.grandis×E.urophylla)12号、韦赤桉(E.wetarensis×E.cama... 为了研究桉树不同无性系在铝处理下的叶片蛋白表达的差异,并从分子生物学角度预测与阐释桉树耐铝性机制,以巨尾桉(Eucalyptus grandis×E.urophylla)9号、巨尾桉(E.grandis×E.urophylla)12号、韦赤桉(E.wetarensis×E.camaldulensis)3号和尾叶桉(E.urophylla)4号苗木为材料,并对其进行铝处理。结果表明:从4种无性系叶所得蛋白有明显的上调或下调表达。通过丰度计算,共得蛋白点(P<0.05)98个,巨尾桉9号为14个、巨尾桉12号为38个、尾叶桉4号为33个、韦赤桉3号为13个。经质谱分析,有11个蛋白成功鉴定,包括1个Ru Bis CO、3个Ru Bis CO LSU、1个放氧增强蛋白、1个叶绿素a/b结合蛋白、3个2-半胱氨酸过氧化物酶、1个质体谷氨酰胺合成酶、1个3-磷酸甘油醛脱氢酶,其主要功能与植物自身N和能量代谢以及抗氧化和光合作用等有关。4种不同的桉树无性系应对铝胁迫时有不同的应答机制,差异蛋白质呈现不同的表达量,并且从该角度分析耐铝性最强的是巨尾桉9号,而较弱的是尾叶桉4号。 展开更多
关键词 桉树 铝胁迫 差异蛋白 串联飞行质谱分析(maldi-tof/tof)
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快速分离与鉴定天山堇菜中的天然环肽 被引量:8
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作者 项斌 杜国华 +6 位作者 王煦辰 张书香 秦咸蕴 孔建强 程克棣 李永吉 王伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期1402-1409,共8页
为快速准确地分离鉴定天山堇菜的天然环肽分子,采用50%乙醇浸提、不同极性溶剂萃取,利用Sephadex LH-20对含有环肽的正丁醇部分进行色谱分离,然后直接利用DTT还原分离的组分,结合反相高效液相色谱(RP-HPLC)和质谱跟踪确定含有环肽的组... 为快速准确地分离鉴定天山堇菜的天然环肽分子,采用50%乙醇浸提、不同极性溶剂萃取,利用Sephadex LH-20对含有环肽的正丁醇部分进行色谱分离,然后直接利用DTT还原分离的组分,结合反相高效液相色谱(RP-HPLC)和质谱跟踪确定含有环肽的组分差异洗脱峰,进而分离纯化获得单体分子;利用DTT还原二硫键、碘乙酰胺烷基化保护被还原产生的巯基、蛋白酶Endo-Glu-C、Endo-Lys-C和胰蛋白酶酶解、结合RP-HPLC分离获得肽段;用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI TOF/TOF MS)进行质谱分析,鉴定了2个环肽分子,其中一个新的环肽分子命名为cycloviolacin T1,另一个为已知结构的varv E。通过此研究建立了一套直接利用DTT还原色谱分离组分、结合MALDI TOF/TOF MS检测进而鉴定天然环肽分子的解析方法。 展开更多
关键词 天山堇菜 植物环肽 malditof/tof质谱鉴定
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