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MALDI-TOF MS在临床微生物鉴定中的标准化操作专家共识 被引量:53
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作者 胡继红 马筱玲 +20 位作者 王辉 张建中 罗燕萍 鲁辛辛 苏建荣 张嵘 赵虎 余方友 孙自镛 顾兵 刘小平 赵建宏 胡云建 胡志东 吕火烊 周铁丽 金大智 刘文恩 喻华 徐修礼 杨青 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期241-249,共9页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of- flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,是近年来临床微生物鉴定领域最具代表性的技术之一。每种微生物都由自身独... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of- flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术,简称飞行质谱技术,是近年来临床微生物鉴定领域最具代表性的技术之一。每种微生物都由自身独特的肽/蛋白质组成,通过MALDI-TOF MS检测微生物的肽/蛋白质指纹图谱,经软件处理并与微生物数据库进行比对分析,可在几分钟之内完成对微生物种、属水平的鉴定。与传统的检测微生物表型和生理生化方法相比,MALDI-TOF MS具有快速、准确、高通量、和低成本的优势。除了可鉴定常见细菌和酵母样真菌,更极大提高了临床微生物实验室对苛养菌、厌氧菌、丝状真菌以及分枝杆菌等难鉴定微生物的鉴定效率和能力。对MALDI-TOF MS系统开发耐药性分析、细菌同源性分析及阳性血培养、无菌体液细菌直接鉴定等工作尚处在科研阶段,随着研究的成熟和标准化的实现,有望逐步从研究走入临床应用。 展开更多
关键词 maldi-tof 微生物鉴定 标准化操作 临床应用 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 MS 蛋白质指纹图谱 专家
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植物单宁化学结构分析方法研究进展 被引量:44
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作者 张亮亮 汪咏梅 +2 位作者 徐曼 吴冬梅 陈笳鸿 《林产化学与工业》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第3期107-116,共10页
植物单宁的各种性质,包括自由基清除能力和蛋白质结合能力等主要取决于其化学结构特别是分子质量的大小(聚合度)。因此对植物单宁化学结构的研究已成为近年来国内外相关研究的热点。本文综述了近10年来,国内外对植物单宁化学结构与分析... 植物单宁的各种性质,包括自由基清除能力和蛋白质结合能力等主要取决于其化学结构特别是分子质量的大小(聚合度)。因此对植物单宁化学结构的研究已成为近年来国内外相关研究的热点。本文综述了近10年来,国内外对植物单宁化学结构与分析方法的研究工作新进展。薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)技术可鉴定样品中所含单宁的结构类型;核磁共振(NMR)及质谱(MS)技术可对植物单宁纯化物进行结构测定;近年来发展起来的基质辅助激光解析离子化飞行时间(MALDI-TOF)质谱技术可对植物单宁混合物进行结构分析,并被证明是一种分析多分散的植物单宁聚合物的理想工具。 展开更多
关键词 植物多酚 植物单宁 化学结构 分析方法 maldi-tof MS
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MALDI-TOF MS技术在临床微生物检验领域的应用进展分析 被引量:23
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作者 曹艳 黄一灵 +1 位作者 徐艳玲 顾兵 《临床与病理杂志》 CAS 2015年第1期123-127,共5页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometr y,M A LDI-TOF MS)是近年来开始应用于临床微生物检验领域的一种新技术。本文将系统综述MALDI-TOF MS技术的检测原理... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometr y,M A LDI-TOF MS)是近年来开始应用于临床微生物检验领域的一种新技术。本文将系统综述MALDI-TOF MS技术的检测原理及特点,在临床微生物鉴定、细菌分型、同源性分析和细菌耐药检测中的应用。MALDI-TOF MS技术的采用不仅明显缩短了临床微生物检验的TAT时间,更好地服务于感染性疾病的诊断与抗菌药物合理使用,同时也为临床微生物检验的自动化打下了基础。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 鉴定 同源性分析 耐药性 临床微生物检验
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扇形PAMAM树枝状高分子的合成与表征 被引量:11
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作者 王冰冰 罗宇飞 +4 位作者 贾欣茹 龚泳梅 吉岩 杨岭 危岩 《高分子学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第2期304-308,共5页
An azyl group of ethylene diamine was protected by N-tert-butoxycarbonyl.The remaining azyl group then successively reacted with methyl acrylate, ethylene diamine and methyl acrylate again to afford the compound Boc-N... An azyl group of ethylene diamine was protected by N-tert-butoxycarbonyl.The remaining azyl group then successively reacted with methyl acrylate, ethylene diamine and methyl acrylate again to afford the compound Boc-NH 2-(B-COOCH 3) 4 3 (AB-4).The ester groups and the Boc-end group of 3 were transferred to carboxylate 4 and azyl group 5 via hydrolyzation and deprotection respectively.The fan-shape dendron molecules with 16 exterior groups 6 were obtained by condensation of 4 and 5 in the presence of DCC.The dumbbell-like dendrimer molecules 7 could expediently prepared by coupling the dendrons with two functional groups of hexanedioyl chloride.The paper describes the synthesis procedures,reports the characterization results of FTIR、 1H-NMR、 13C-NMR and MALDI-TOF.Comparing with the PAMAM dendrimers from the divergent method, the synthesized compounds possess accurate structures and few defections. 展开更多
关键词 PAMAM 扇形树枝状高分子 合成 表征 端基保护 脱保护 缩合 分子模拟
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MALDI-TOF质谱技术分析与鉴定病原细菌研究 被引量:20
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作者 其布勒哈斯 田世民 +3 位作者 邹明强 贺银凤 陈艳 赵贵明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期416-426,共11页
基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析供试细菌并获得其蛋白质图谱,确定了与质谱分析有关的最佳培养条件和样品前处理方法,建立了应用MALDI-TOF-MS鉴定细菌的方法。通过对供试的不同细菌属、种和亚种的12株植物... 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析供试细菌并获得其蛋白质图谱,确定了与质谱分析有关的最佳培养条件和样品前处理方法,建立了应用MALDI-TOF-MS鉴定细菌的方法。通过对供试的不同细菌属、种和亚种的12株植物病原细菌全细胞分析后的质谱图结果表明,根据特异性或不同的质量离子峰,MALDI-TOF-MS能进行在细菌属、种、亚种和菌株水平上的区分和鉴定。该方法准确、灵敏度高,且分析过程简单快速,具有广泛的开发和应用意义。 展开更多
关键词 malditof MS 细菌 质量指纹图谱 鉴定
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小细胞肺癌细胞系NCI-H446蛋白质表达谱的建立 被引量:19
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作者 李茂玉 肖志强 +7 位作者 李萃 吴晓英 冯雪萍 易红 李建玲 陈主初 陈平 梁宋平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第10期1116-1121,共6页
背景与目的:小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)是一种侵袭性极强的恶性肿瘤,具有增长迅速、早期转移等特点。目前公开的数据库中尚未见到小细胞肺癌的双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱。本研究目的是建立高分辨率的小细胞肺癌细胞系N... 背景与目的:小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)是一种侵袭性极强的恶性肿瘤,具有增长迅速、早期转移等特点。目前公开的数据库中尚未见到小细胞肺癌的双向电泳参考图谱及其蛋白表达谱。本研究目的是建立高分辨率的小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞双向凝胶电泳图谱,并初步分析其蛋白质表达情况。方法:用固相pH梯度双向凝胶电泳技术(IPG-DALT)分离NCI-H446细胞总蛋白,凝胶银染显色,ImageMaster2D图像分析系统分析,从凝胶中选取分离较好的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术和数据库搜索鉴定蛋白质。结果:获得了背景清晰、分辨率和重复性较好的双向凝胶电泳图谱,三块胶平均蛋白质点数为1506±74,匹配点数为1412±56,匹配率达93.4%,三块胶蛋白质点在位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在IEF方向偏差是(0.96±0.27)mm,在SDS-PAGE方向偏差是(1.24±0.41)mm。胶内酶解-肽质指纹图分析鉴定了58个蛋白质,其中有原癌蛋白、细胞周期调控和信号转导相关蛋白质。结论:建立了小细胞肺癌细胞系NCI-H446双向电泳参考图谱,并应用质谱技术鉴定了部分蛋白质点,为进一步构建其蛋白质表达数据库提供了基础。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 NCI 癌细胞系 蛋白质表达谱 双向凝胶电泳 相关蛋白 侵袭性 固相PH梯度 maldi-tof 双向电泳
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家蚕脂肪体蛋白质组学研究 被引量:14
7
作者 侯勇 赵萍 +3 位作者 刘鸿丽 邹勇 官建 夏庆友 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期867-872,共6页
通过高精度的双向电泳技术对家蚕末龄幼虫的脂肪体组织进行了研究,采用基质辅助质量飞行时间质谱对其中一些表达量较高的蛋白点进行了鉴定,并利用GPMAW软件结合家蚕基因组预测的蛋白质数据库构建了本地的肽质量指纹图谱数据库,对所得到... 通过高精度的双向电泳技术对家蚕末龄幼虫的脂肪体组织进行了研究,采用基质辅助质量飞行时间质谱对其中一些表达量较高的蛋白点进行了鉴定,并利用GPMAW软件结合家蚕基因组预测的蛋白质数据库构建了本地的肽质量指纹图谱数据库,对所得到的肽质量指纹图谱进行了分析。研究发现,经过双向凝胶电泳及其图象分析技术,银染可以分离出722个清晰蛋白点,这些蛋白质主要集中在分子量15~90kD区域,等电点pH4~8之间。MALDI-TOF-MS鉴定的41个蛋白点中都有较强的肽质量指纹信号峰,其中34个蛋白点得到了成功鉴定,其中包括了大量参与代谢的酶类、不同分子量的热激蛋白、重要的血液蛋白30K,Actin3等,这一结果对人们进一步认识家蚕脂肪体提供了有利的帮助。 展开更多
关键词 家蚕 脂肪体 双向电泳 maldi-tof MS
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马面鱼骨胶原多肽的理化特性及其抗氧化活性 被引量:20
8
作者 杨露 丁利君 蓝德安 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期109-112,共4页
以马面鱼骨为原料,采用现代生物酶工程技术制得胶原蛋白多肽酶解液,经冷冻干燥,获取马面鱼骨胶原蛋白多肽粉。采用紫外吸收光谱分析,鱼骨中胶原蛋白多肽的最大吸收峰值约在波长220nm处,符合肽类基本特征;氨基酸自动分析仪测定鱼骨胶原... 以马面鱼骨为原料,采用现代生物酶工程技术制得胶原蛋白多肽酶解液,经冷冻干燥,获取马面鱼骨胶原蛋白多肽粉。采用紫外吸收光谱分析,鱼骨中胶原蛋白多肽的最大吸收峰值约在波长220nm处,符合肽类基本特征;氨基酸自动分析仪测定鱼骨胶原蛋白多肽粉的氨基酸,其中羟脯氨酸含量约为3%。鱼骨胶原多肽液质量浓度60mg/mL的抗氧化效果和谷胱甘肽相当,25mg/mL时对·OH的清除率和DPPH自由基的清除率分别高达95.98%和97.36%。 展开更多
关键词 马面鱼骨 胶原多肽 氨基酸分析 maldi-tof 抗氧化
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高通量飞行时间质谱基因分型方法的研究 被引量:20
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作者 赵辉 王威 +5 位作者 张清润 高扬 赵洪斌 周珺 林伟 曾长青 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第7期667-672,共6页
为了考察飞行时间质谱基因分型方法(MALDI-TOF)的位点分型成功率和分型结果质量的关系,分析了96个SNPs位点的近10000个基因分型数据(用MALDI-TOF“4重”实验方法检测).结果显示,位点分型成功率和分型结果的质量显著正相关.分型成功率低... 为了考察飞行时间质谱基因分型方法(MALDI-TOF)的位点分型成功率和分型结果质量的关系,分析了96个SNPs位点的近10000个基因分型数据(用MALDI-TOF“4重”实验方法检测).结果显示,位点分型成功率和分型结果的质量显著正相关.分型成功率低于82%的SNP位点,其高质量结果占的比例开始逐渐降低.提示82%的分型成功率可以作为衡量分型结果质量的数据点.为了进一步提高通量并降低成本,在MALDI-TOF“4重”实验方法的基础上,发展了两种“准8重”实验方法.用新的实验方法检测了95个样本的32个SNPs位点.结果显示“混合准8重”实验方法与“4重”实验方法相比无显著差异,而“复点准8重”的结果差于“4重”分型方法. 展开更多
关键词 单核苷酸多态性(SNP) 飞行时间质谱 基因分型
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基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌的研究 被引量:19
10
作者 胡燕燕 蔡加昌 +2 位作者 周宏伟 蒋颜 张嵘 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期42-45,共4页
目的:分析基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪( matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry , MALDI-TOF MS)快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。方法收集浙江大学医学院... 目的:分析基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪( matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry , MALDI-TOF MS)快速鉴别甲氧西林耐药和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌。方法收集浙江大学医学院附属第二医院已保存的临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)25株和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)30株用于模型的建立。同时选取34株临床分离株(12株MRSA和22株MSSA)用做模型验证菌株。 MALDI-TOF MS对所有菌株进行鉴定,ClinProTools 3.0软件对MALDI-TOF MS鉴定细菌所产生的质谱峰图进行分析。结果 ClinPro-Tools软件的4种算法所得出的结果基本一致,灵敏度均大于95.0%,其中遗传算法(GA)的灵敏度最高(100.0%);除监督式神经网络算法( SNN)外,其余3种算法的特异性均大于90.0%。质荷比为3279、6485、6555和3299 m/z的质谱峰是用于区分MRSA和MSSA的最为主要的特征性峰。受试者工作特征曲线( ROC)显示,这4个特征性峰的曲线下面积( AUC)均大于0.9;凝胶浏览图显示,MSSA组的3279、6485、6555 m/z峰的蛋白强度高于MRSA组,而3299 m/z峰的蛋白强度低于MRSA组。外部验证显示,GA模型对MRSA组的准确鉴定率为83.3%,对MSSA组的准确鉴定率为90.9%。结论在严格控制实验条件的情况下,MALDI-TOF MS可快速准确地鉴别MRSA和MSSA,具有耗时短,灵敏性高,特异性高的优点。准确鉴定的同时区分MRSA和MSSA,尽早为临床防治MRSA提供参考依据,限制其传播及暴发流行。 展开更多
关键词 maldi-tof MS MRSA MSSA
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食源性致病菌MALDI-TOF MS检测方法的建立与应用 被引量:18
11
作者 周千渝 张延国 +3 位作者 黄成才 谢景丽 高青珍 刘肃 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第18期59-64,76,共7页
建立用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定从鲜食蔬菜中分离到的5种食源性致病菌的方法。以标准菌株为模式菌,考察基质溶液配比、菌株培养条件、溶剂处理方法、点样方法及比例等条件对鉴定结果的影响,确... 建立用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定从鲜食蔬菜中分离到的5种食源性致病菌的方法。以标准菌株为模式菌,考察基质溶液配比、菌株培养条件、溶剂处理方法、点样方法及比例等条件对鉴定结果的影响,确定最优方法,并考察方法的稳定性、重复性和检测限。分别用所建立的方法和16S r RNA基因测序法对7株标准菌株和93株分离株进行分析,比较两者鉴定结果的一致性。结果表明,所建立的方法稳定性良好,检测限为10^6~10^9 cfu/m L,菌株鉴定结果与基因测序鉴定结果具有较高一致性(83%在种水平鉴定一致,94%在属水平鉴定一致)。MALDI-TOF MS法可用于食源性致病菌的准确、快速、低成本、高通量的检测及鉴定。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 食源性致病菌 检测 鉴定
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Mechanism-based anti-anxiety effects of polysaccharides extracted from Shudihuang (Radix Rehmanniae Preparata) by two-dimensional electrophoresis analysis in rat hippocampus proteins 被引量:19
12
作者 Ying Cui Chunlei Rong +5 位作者 Junming Wang Can Cui Li Wang Zhiyi Feng Jing Feng Bing Niu 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2013年第4期524-530,共7页
OBJECTIVE: To investigate mechanism-based anti-anxiety effects of Shudihuang (Radix Rehmanniae Preparata) polysaccharides (RRPPs) through two-dimensional electrophoresis (2-DE) analysis with mass spectrometry (MS) of ... OBJECTIVE: To investigate mechanism-based anti-anxiety effects of Shudihuang (Radix Rehmanniae Preparata) polysaccharides (RRPPs) through two-dimensional electrophoresis (2-DE) analysis with mass spectrometry (MS) of hippocampus proteins in rats treated with monosodium L-glutamate (MSG).METHODS: MSG (4 g/kg) or normal saline (NS) was injected subcutaneously into infant male rats on days 2, 4, 6, 8, 10 after birth. MSG-treated rats at 8 weeks old were given NS, diazepam, or RRPPs daily for seven consecutive days by intragastric administration, while NS-treated rats given the same volume of NS. Elevated plus maze (EPM) and light/ dark transition (LDT) tests were used to observe anti-anxiety effects of RRPPs at 1 h after the last administration. After EPM and LDT tests, hippocampus tissues were excised on ice rapidly from the brains of rats. Thereafter, 2-DE and matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF/MS) were used for detecting differential proteins in hippocampus of rats so as to explore the potential mechanisms. RESULTS: RRPPs (200, 400 mg/kg) could significantly inhibit MSG-induced decrease of time and entries percentages in open zones in EPM test and numbers of light-dark transition in LDT test. Further analysis of 2-DE and MALDI-TOF/MS indicated that β-synuclein, protein DJ-1, peroxiredoxin-2, peroxiredoxin-6, dimethylarginine dimethylaminohydrolase 1 (DDAH-1) and iron-sulfur proteins were all found to be down-regulated significantly in MSG-treated rats, while such down-regulation was significantly inhibited after treatment with RRPPs. CONCLUSION: RRPPs showed anti-anxiety effects and potential mechanisms might be related to inhibiting MSG-induced down-regulation of β-synuclein, DJ-1, peroxiredoxin-2, peroxiredoxin-6, DDAH-1 and iron-sulfur proteins in hippocampus of rats. 展开更多
关键词 ELECTROPHORESIS GEL two-dimensional Beta-synuclein DJ-1 protein Peroxiredoxins Dimethylargininase Iron-sulfur proteins Anti-anxiety agents
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MALDI-TOF MS技术在食品微生物领域的应用研究 被引量:17
13
作者 饶名祯 顾晨荣 +3 位作者 李云霞 陈雯雯 郭鲁申 赵渝 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2015年第6期681-686,共6页
基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)技术在食品、医药、化学等领域得到了广泛的应用.综述了MALDI-TOF MS技术的检测原理及特点,以及其在... 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)技术在食品、医药、化学等领域得到了广泛的应用.综述了MALDI-TOF MS技术的检测原理及特点,以及其在食品微生物鉴定、分型、溯源分析中的应用.MALDI-TOF MS技术在微生物检验检测上具有快速、准确、高效等优点,随着样本处理方式标准化、数据库的完善化、生物信息学工具使用化等问题的解决,这一技术将成为微生物检测鉴定领域的重要辅助工具. 展开更多
关键词 maldi-tof MS技术 鉴定分型 溯源分析
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MALDI-TOF MS分析研究合成高分子的综述 被引量:13
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作者 何美玉 何江涛 《质谱学报》 EI CAS CSCD 2002年第1期43-55,共13页
扼要介绍了基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱,在分析合成高分子中的发展历程、基本原理、主要优点及存在的困难;详细分析了基质、溶剂、盐(阳离子)和样品制样方法等关键因素对实验结果的影响及造成质量歧视的原因;阐明了这一分析技... 扼要介绍了基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱,在分析合成高分子中的发展历程、基本原理、主要优点及存在的困难;详细分析了基质、溶剂、盐(阳离子)和样品制样方法等关键因素对实验结果的影响及造成质量歧视的原因;阐明了这一分析技术在均聚物、混合物、共聚物等合成高分子研究中的应用及展望。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 分析 基质辅助激光解吸电离 合成高分子 分子量分布 飞行时间质谱
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自建MALDI-TOF MS微生物鉴定数据库专家共识 被引量:15
15
作者 罗燕萍 徐英春 +18 位作者 王辉 喻华 崔生辉 鲁辛辛 马莜玲 胡继红 苏建荣 陈茶 赵建宏 顾兵 马小军 林勇平 王明贵 王皓峰 张樱 周巍 陈荣 李松 杨文航 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期414-419,共6页
自20世纪80年代末开始,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorptionionization time-of-flightmass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术以其对微生物种属鉴定的快速、准确、低成本优势,逐步在临床微生物鉴定领域... 自20世纪80年代末开始,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorptionionization time-of-flightmass spectrometry,MALDI-TOF MS)技术以其对微生物种属鉴定的快速、准确、低成本优势,逐步在临床微生物鉴定领域得到广泛认可。该技术对微生物鉴定的理论基础是将设备采集的未知样品图谱与数据库中已知菌种的图谱进行统计学聚类分析,获得鉴定结果。 展开更多
关键词 maldi-tof 微生物鉴定 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 数据库 MS 专家 聚类分析 鉴定结果
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MALDI-TOF MS技术在临床微生物检验中的应用进展 被引量:15
16
作者 鲁辛辛 冯伟明 顾秀丽 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第34期2708-2712,共5页
目前,国内大多数临床微生物实验室仍采用传统鉴定方法,如API或Vitek系统,但耗时、高成本及鉴定能力有限是显而易见的制约瓶颈.16S rDNA测序可直接进行无菌标本微生物鉴定,但方法的标准化、标本前处理以及时效性均未得到解决,因此难以成... 目前,国内大多数临床微生物实验室仍采用传统鉴定方法,如API或Vitek系统,但耗时、高成本及鉴定能力有限是显而易见的制约瓶颈.16S rDNA测序可直接进行无菌标本微生物鉴定,但方法的标准化、标本前处理以及时效性均未得到解决,因此难以成为常规技术.2006年,Fox[1]在Journal of Clinical Microbiology上发表了第一篇有关质谱技术在临床微生物应用的文章,引起同行关注,他认为该技术鉴定细菌还有许多技术难题要克服,不易成为常规方法,但是2009年后微生物质谱技术迅速风靡欧洲、北美和亚洲的一些国家. 展开更多
关键词 临床微生物检验 maldi-tof 应用 临床微生物实验室 生物质谱技术 Vitek系统 标本前处理 MS
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MALDI-TOF MS技术在多重耐药大肠埃希菌同源性分析及自建库中的应用研究 被引量:13
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作者 彭海 周健武 +4 位作者 牟晓明 孙静薇 巢世兰 张倩 徐雯 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第24期3689-3694,共6页
目的评价基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对多重耐药大肠埃希菌同源性分析的能力,并建立多重耐药大肠埃希菌同源性质谱分型及药敏参考数据库。方法对2016年3月-2017年3月医院632株多重耐药大肠埃希菌(ESBLs)Eco进... 目的评价基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对多重耐药大肠埃希菌同源性分析的能力,并建立多重耐药大肠埃希菌同源性质谱分型及药敏参考数据库。方法对2016年3月-2017年3月医院632株多重耐药大肠埃希菌(ESBLs)Eco进行MALDI-TOF MS鉴定,利用MALDI-Biotyper软件进行同源性分析及自建库;使用VITEK 2.0全自动细菌鉴定及药敏分析仪进行药敏实验,用WHONET5.6软件进行药敏结果分析。结果 2016年3月-2017年3月医院临床送检的标本中共检出(ESBLs)Eco 632株,检出率35.91%,检出标本主要有痰、尿液和血液,各科室检出(ESBLs)Eco的检出率分别为泌尿外科10.27%、肾内科8.69%、老年病科7.11%、急诊外科5.21%、血液风湿科4.90%;632株(ESBLs)Eco经MALDI-TOF MS同源性聚类分析,分为质谱数据差异性较大的两大簇六个分型,其中Ⅰa型27.00%、Ⅰb1型11.00%、Ⅰb2型9.00%、Ⅱa1型4.50%、Ⅱa2型33.5%、Ⅱb型15.00%;whonet5.6软件药敏分析显示六个分型的药敏结果也存在一定的差别;普外I、普外II、血液风湿科、急诊外科五个科室(ESBLs)Eco同源性相对较高(≥50%),提示以上科室可能存在院内交叉感染;初步建立了(ESBLs)Eco同源性质谱分型及药敏参考数据库并进行验证,质谱鉴定合格率83.3%;药敏比对合格率76.0%。结论 MALDI-TOF MS同源性聚类分析快速、准确,建立了(ESBLs)Eco同源性质谱分型及药敏参考数据库,大大缩短了实验室多重耐药菌的鉴定及同源性分析时间,并且在菌株鉴定的同时为临床提供药敏结果参考,指导临床第一时间经验用药,为临床多重耐药菌感染的快速诊断及治疗赢得宝贵时间。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 多药耐药 大肠埃希菌 同源性
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MALDI-TOF MS直接鉴定原始尿液中的病原菌 被引量:14
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作者 杨溪 王新华 +4 位作者 隋文君 范艳艳 王玫 黄艳飞 鲁辛辛 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1042-1044,共3页
尿路感染是临床最常见的感染性疾病之一,也是医院获得性感染的主要病因[1].目前国内外诊断尿路感染的“金标准”仍是清洁中段尿培养[2],而此种方法常常需要2~5d才能得出细菌鉴定及药敏结果,不能及时为临床诊断治疗提供病原学依据.基质... 尿路感染是临床最常见的感染性疾病之一,也是医院获得性感染的主要病因[1].目前国内外诊断尿路感染的“金标准”仍是清洁中段尿培养[2],而此种方法常常需要2~5d才能得出细菌鉴定及药敏结果,不能及时为临床诊断治疗提供病原学依据.基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是近些年来发展起来的一种新型软电离有机质谱,可以根据细菌的组分获得其肽质量指纹谱检测并鉴定细菌,其方便、快速、准确的优点对微生物的鉴定具有重要意义[3-5]. 展开更多
关键词 maldi-tof 细菌鉴定 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 病原菌 清洁中段尿培养 医院获得性感染 尿液 MS
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Application of Proteomics in the Study of Tumor Metastasis 被引量:9
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作者 Zhen Cai Jen-Fu Chiu Qing-Yu He 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 CAS CSCD 2004年第3期152-166,共15页
Tumor metastasis is the dominant cause of death in cancer patients. However, the molecular and cellular mechanisms underlying tumor metastasis are still elusive. The identi?cation of protein molecules with their expre... Tumor metastasis is the dominant cause of death in cancer patients. However, the molecular and cellular mechanisms underlying tumor metastasis are still elusive. The identi?cation of protein molecules with their expressions correlated to the metastatic process would help to understand the metastatic mechanisms and thus facilitate the development of strategies for the therapeutic interventions and clini- cal management of cancer. Proteomics is a systematic research approach aiming to provide the global characterization of protein expression and function under given conditions. Proteomic technology has been widely used in biomarker discovery and pathogenetic studies including tumor metastasis. This article provides a brief review of the application of proteomics in identifying molecular factors in tumor metastasis process. The combination of proteomics with other experimental ap- proaches in biochemistry, cell biology, molecular genetics and chemistry, together with the development of new technologies and improvements in existing method- ologies will continue to extend its application in studying cancer metastasis. 展开更多
关键词 PROTEOMICS METASTASIS tumor mechanism protein identification maldi-tof SELDI-ProteinChip
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HPLC与MALDI-TOFMS联用技术分析蛋黄中的磷脂 被引量:11
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作者 李国琛 王颜红 +1 位作者 吴仁安 王世成 《分析试验室》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期30-33,共4页
蛋黄中含有大量磷脂,其中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)最为丰富。本研究采用高效液相色谱法(HPLC)与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用技术分析了蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离,... 蛋黄中含有大量磷脂,其中磷脂酰胆碱(PC)和磷脂酰乙醇胺(PE)最为丰富。本研究采用高效液相色谱法(HPLC)与基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)联用技术分析了蛋黄中磷脂粗提物。将从蛋黄中提取的多种磷脂通过HPLC预先分离,收集各组分后分别进行MALDI-TOF MS分析得到比较清晰的质谱图。通过质谱图解析确定了蛋黄中磷脂酰胆碱、神经鞘磷脂(SM)的脂肪酸组成。 展开更多
关键词 磷脂 磷脂酰胆碱 磷脂酰乙醇胺 神经鞘磷脂 HPLC maldi-tof MS
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