酶解猪血蛋白中活性肽的纯化和功能研究 被引量：31

1

作者 李艳伟 江波 佟祥山 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第1期61-63,共3页

利用层析、超滤等生物化学手段纯化猪血胰蛋白酶水解液 ,得到的目标产物是一种在高压液相色谱水平上的纯品 ,分子量大约为 3 0 0 0的小肽 .利用 T淋巴细胞转化实验和 E花环形成实验确定目标小肽的存在 ,并分别采用体内、体外的免疫学和... 利用层析、超滤等生物化学手段纯化猪血胰蛋白酶水解液 ,得到的目标产物是一种在高压液相色谱水平上的纯品 ,分子量大约为 3 0 0 0的小肽 .利用 T淋巴细胞转化实验和 E花环形成实验确定目标小肽的存在 ,并分别采用体内、体外的免疫学和药理学实验 ,初步确定了目标小肽对机体免疫活性的增强性质 . 展开更多

关键词 生物活性肽 T淋巴细胞转化实验 猪血胰蛋白酶

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蛹虫草多糖的分离及免疫活性的研究 被引量：32

2

作者 吴光昊 王旻 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2007年第1期73-76,共4页

目的对蛹虫草的多糖成分进行研究找出免疫活性成分。方法通过离子交换和分子筛的分离运用HPLC对其进行含量测定,经气相色谱分析和免疫活性测定确定活性成分。结果得到多糖产物CPS,测定组成为甘露糖,葡萄糖和半乳糖的混合组分,比例为3∶1... 目的对蛹虫草的多糖成分进行研究找出免疫活性成分。方法通过离子交换和分子筛的分离运用HPLC对其进行含量测定,经气相色谱分析和免疫活性测定确定活性成分。结果得到多糖产物CPS,测定组成为甘露糖,葡萄糖和半乳糖的混合组分,比例为3∶10∶1。HPLC测定纯度为98.78%。通过淋巴细胞转化实验证明其对细胞增殖效果明显,对IL-1的诱生也有明显激活作用。结论所得多糖产物以葡萄糖和甘露糖为主,含少量半乳糖,免疫活性测定证明该多糖有免疫增强和抗肿瘤活性。 展开更多

关键词 蛹虫草 多糖组分分离 淋巴细胞转化IL-1

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全血法鸡淋巴细胞转化试验最佳试验条件的研究 被引量：28

3

作者 吴建设 张日俊 +3 位作者 周毓平 郑世军 杨汉春 郭玉璞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期212-216,共5页

通过丝裂原浓度、血液稀释度、灭活犊牛血清浓度和培养时间四个参数的测定，确定了鸡全血淋巴细胞转化试验的最佳培养条件。最佳试验方法如下：采用不含灭活犊牛血清的ＲＰ－ＭＩ１６４０培养液，刺激管中ＣｏｎＡ浓度为４５μｇ／ｍｌ... 通过丝裂原浓度、血液稀释度、灭活犊牛血清浓度和培养时间四个参数的测定，确定了鸡全血淋巴细胞转化试验的最佳培养条件。最佳试验方法如下：采用不含灭活犊牛血清的ＲＰ－ＭＩ１６４０培养液，刺激管中ＣｏｎＡ浓度为４５μｇ／ｍｌ或ＬＰＳ浓度为２５μｇ／ｍｌ，血液稀释度为１２０，４０℃培养５６ｈ，在培养结束前１６ｈ加３Ｈ－胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）。本法简单方便，可检测Ｔ。 展开更多

关键词 肉仔鸡 淋巴细胞转化 刺激指数 刀豆素A 脂多糖

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金针菇菌丝体中多糖的分离、结构鉴定及免疫学活性 被引量：29

4

作者 王玉峰 王旻 尹鸿萍 《中国天然药物》 SCIE CAS CSCD 2008年第4期312-315,共4页

目的:研究金针菇菌丝体的多糖成分进行理化性质及免疫活性。方法:通过热水提取、去蛋白、除色素、乙醇沉淀得到金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharides,FVP),再通过离子交换法、凝胶柱层析法进行进一步纯化得到精品FVP-1,FVP-... 目的:研究金针菇菌丝体的多糖成分进行理化性质及免疫活性。方法:通过热水提取、去蛋白、除色素、乙醇沉淀得到金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharides,FVP),再通过离子交换法、凝胶柱层析法进行进一步纯化得到精品FVP-1,FVP-2。运用高效凝胶渗透色谱(HPGPC),柱前衍生化高效液相色谱(PDHPLC),IR和13CNMR等方法测定两种多糖的结构。由淋巴细胞转化试验检测多糖的免疫活性。结果:FVP-1相对分子质量为Mw=1.48×104,FVP-2为Mw=2.73×104。FVP-1单糖摩尔比为葡萄糖(Glc):半乳糖(Gal):甘露糖(Man)=100:2.5:1.5;FVP-2为Glc:Gal:Man:岩藻糖(Fuc)=100:14:7:4。FVP-1主要以[α-D-Glc(1→4)-]为主链,带有α-D-Glc(1→6)分支。FVP-2结构较复杂,存在多种单糖组成,葡萄糖具有α,β两种构型。FVP、FVP-1、FVP-2均有显著的促进细胞增值作用。结论:FVP-1,FVP-2相对分子质量、单糖组成及连接方式均存在差别,其中FVP-2具有更强的免疫增强活性。 展开更多

关键词 金针菇多糖 分离纯化 结构鉴定 免疫学活性 淋巴细胞转化

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饲喂β-酪啡肽对大鼠免疫功能影响的研究 被引量：11

5

作者 周文华 陈伟华 +2 位作者 邹思湘 张源淑 冉宏志 《畜牧与兽医》 北大核心 2002年第2期13-15,共3页

β 酪啡肽 (β Casomorphinβ CM)是 β 酪蛋白经过酶解所释放的一类小肽 ,具有类似阿片肽的功能。试验通过饲喂 2种 β 酪啡肽 (β Casomor phin 7,β CM 7) ,和β Casomorphin 3 (β CM 3)来探索其对动物机体免疫活性的影响 ,并以谷... β 酪啡肽 (β Casomorphinβ CM)是 β 酪蛋白经过酶解所释放的一类小肽 ,具有类似阿片肽的功能。试验通过饲喂 2种 β 酪啡肽 (β Casomor phin 7,β CM 7) ,和β Casomorphin 3 (β CM 3)来探索其对动物机体免疫活性的影响 ,并以谷胱甘肽 (GSH)作为肽参照组。试验选用SD雄性健康成年大鼠 ,分 3个肽组 (β Casomorphin 7,β Casomorphin 3,GSH)和 1个未给药对照组 ,每组 1 0只。 3种肽均以 1 2× 1 0 - 6 mol/L的浓度添加于饮水中 ,饲喂 3周后 ,分别进行试验检测。淋巴细胞转化试验 (LTT) (n =6)结果表明 :平均刺激指数 (SI)对照组为 1 99;β CM 7组为 2 56 ;β CM 3组为 3 2 3;GSH组为 2 46。3个肽组相对对照组SI有提高趋势 ,其中 β CM 3组相对对照组差异接近显著 (P =0 0 8)。红细胞免疫试验 (EIT ,n=6)测出各组红细胞C3b受体花环率各为 :对照组 4 9% ,β CM 7组 1 6 7% ,β CM 3组 1 5 9% ,GSH组 1 4 7%。 3个肽组相对于对照组均极显著升高 (P <0 0 1 )。腹腔巨噬细胞吞噬活性试验 (MTT ,n =6)测出各组平均OD570 分别为 :对照组 0 2 1 ;β CM 7组 0 2 2 ;β CM 3组 0 2 2 ;GSH组0 3。GSH组相对对照组差异显著 (P <0 0 5)。试验结果表明 β 展开更多

关键词 Β-酪啡肽 淋巴细胞化 红细胞免疫 腹腔巨噬细胞吞噬活性 饲喂 大鼠 免疫功能 饲料 家畜

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重组hIL-10在毕赤酵母X-33的表达及其生物活性鉴定 被引量：17

6

作者 陈富超 孙万邦 +4 位作者 封建凯 杜联峰 黄俊琼 罗军敏 宋明英 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期691-695,共5页

目的:用毕赤酵母表达hIL-10并探索合适的表达条件,为IL-10生物制品研发及临床应用奠定基础。方法:以0.5%甲醇诱导酵母X-33表达rhIL-10,用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定rhIL-10,比较不同温度、不同pH值和有无PMSF条件下rhIL-10的表达... 目的:用毕赤酵母表达hIL-10并探索合适的表达条件,为IL-10生物制品研发及临床应用奠定基础。方法:以0.5%甲醇诱导酵母X-33表达rhIL-10,用SDS-PAGE和Western blot分析鉴定rhIL-10,比较不同温度、不同pH值和有无PMSF条件下rhIL-10的表达水平。用ELISA法测定培养液rhIL-10含量,用Bradford法测定培养液总蛋白含量,计算rhIL-10占总蛋白的比例。以淋巴细胞转化试验分析rhIL-10的生物学活性。结果:SDS-PAGE后可见42 kD左右蛋白条带;Western blot也检测到42kD左右特异性蛋白质条带。pH值为6.0、温度在28℃并加入抑制剂时rhIL-10表达量最高值为20 mg/L,同时段培养液中总蛋白质含量为50 mg/L,rhIL-10占总蛋白比例为40%。在外周血淋巴细胞转化试验中,rhIL-10抑制了淋巴细胞的增殖。结论:hIL-10能在毕赤酵母高效表达,表达产物有较好生物活性;发酵条件对rhIL-10的表达水平影响大,改善发酵条件能促进rhIL-10的表达。 展开更多

关键词 人白细胞介素10 毕赤酵母 细胞增殖 淋巴细胞转化试验

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藏药绿萝花水提物对小鼠免疫功能的影响 被引量：14

7

作者 杨荣 刘群 +2 位作者 康莲莲 王赛 韩金潭 《西南民族大学学报（自然科学版）》 CAS 2015年第3期305-309,共5页

探讨藏药绿萝花对机体免疫功能的影响,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.本研究以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以N2Hmice小白鼠为研究对象,以Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验(CCK-8法)、血凝... 探讨藏药绿萝花对机体免疫功能的影响,为临床合理用药和进一步开发利用提供科学依据.本研究以L9(34)正交设计试验所获得的绿萝花水萃取干膏制剂为研究材料,以N2Hmice小白鼠为研究对象,以Con A诱导小鼠淋巴细胞转化试验(CCK-8法)、血凝和血凝抑制试验及巨噬细胞吞噬试验为研究方法,以(SI)刺激指数、(HI)新城疫抗体效价、吞噬百分率和吞噬指数为检测指标,探讨不同剂量绿萝对机体免疫功能的影响.实验结果显示低剂量绿萝花能够增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数,其增强作用极显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠血清ND抗体产生的作用,作用显著优于空白组;低、中剂量绿萝花组具有促进小鼠外周血淋巴细胞增殖的作用,作用显著优于空白组.研究结果表明低(1.08g/次/d,7d)、中(2.16g/次/d,7d)剂量绿萝花对小鼠免疫功能具有增强作用. 展开更多

关键词 藏药绿萝花 淋巴细胞转化试验 血凝和血凝抑制试验 巨噬细胞吞噬试验

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鸡IL-18基因重组真核表达载体的构建及其表达产物的生物学活性 被引量：9

8

作者 温纳相 黄青云 +1 位作者 陈荣光 束长娥 《中国兽医科技》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期547-550,共4页

从pMDChIL18克隆质粒扩增获得了ChIL18全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切、质粒PCR鉴定和基因测序,鸡IL18全基因被正确重组到pcDNA3.1(+)真核表达质粒上;将重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)ChIL18转染COS7细胞,转染... 从pMDChIL18克隆质粒扩增获得了ChIL18全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)。经酶切、质粒PCR鉴定和基因测序,鸡IL18全基因被正确重组到pcDNA3.1(+)真核表达质粒上;将重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)ChIL18转染COS7细胞,转染细胞中含ChIL18基因的mRNA。SDSPAGE分析表明,表达产物是与ChIL18相符的约23ku的蛋白条带。鸡淋巴细胞转化试验表明,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导转化作用。 展开更多

关键词 IL-18基因 鸡 真核表达 淋巴细胞转化试验

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鸡IL-18重组真核表达载体的构建及其对ND灭活苗的佐剂作用 被引量：4

9

作者 陈红英 李新生 +3 位作者 金钺 张红英 文英会 崔保安 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期793-797,共5页

从pGEM-ChIL-18克隆质粒扩增获得鸡IL-18(ChIL-18)全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pChIL-18)。经PCR、酶切和基因测序证实,所获重组质粒含有目的片段,且连接、构建正确。p... 从pGEM-ChIL-18克隆质粒扩增获得鸡IL-18(ChIL-18)全基因片段,并将其重组到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pChIL-18)。经PCR、酶切和基因测序证实,所获重组质粒含有目的片段,且连接、构建正确。pChIL-18转染Cos7细胞,转染细胞中含ChIL-18基因的mRNA,表达产物对鸡淋巴细胞具有明显诱导转化作用。pChIL-18对ND灭活苗免疫增强作用的研究表明pChIL-18能够提高ND灭活苗诱发的细胞免疫应答,为后续基因疫苗的研究奠定基础。 展开更多

关键词 白细胞介素18 鸡 真核表达 淋巴细胞转化试验

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PPD为丝裂源作淋巴细胞转化试验对结核性胸膜炎的诊断价值 被引量：3

10

作者 陶敏 王光杰 +1 位作者 马家用 陶岳多 《江苏医药》 CAS CSCD 1993年第5期234-236,共3页

以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)为丝裂源作淋巴细胞转化试验,检测结核性(17例)和非结核性(14例)胸膜炎患者的外周血淋巴细胞(PBL)和胸腔积液淋巴细胞(PEL)对PPD 的反应性。结果显示:结核性胸膜炎患者无论PPD 皮试是阳性还是阴性,其PEL 的P... 以结核菌素纯蛋白衍生物(PPD)为丝裂源作淋巴细胞转化试验,检测结核性(17例)和非结核性(14例)胸膜炎患者的外周血淋巴细胞(PBL)和胸腔积液淋巴细胞(PEL)对PPD 的反应性。结果显示:结核性胸膜炎患者无论PPD 皮试是阳性还是阴性,其PEL 的PPD 刺激指数(PPD-SI)都显著高于PBL(P 分别<0.001与<0.01);结核性PEL 的PPD-SI 显著高于非结核性PEL(P<0.001)。提示PPD 胸腔积液淋巴细胞转化试验可作为诊断结核性胸膜炎的有效方法。 展开更多

关键词 胸膜炎 结核性 PPD 丝裂原

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大蒜油对小鼠免疫功能影响的研究 被引量：3

11

作者 郑昱 郑建芳 《河南医学研究》 CAS 2016年第1期15-17,共3页

目的探讨不同剂量大蒜油对正常小鼠免疫功能的影响。方法 160只健康雌小鼠随机分为4批,每批分为4笼,分别编号1~4号,每笼10只;4批小鼠中每批1号笼为空白对照,2、3、4号笼分别按照2.0 mg/kg、4.0 mg/kg、8.0 mg/kg低、中、高3个剂量大蒜... 目的探讨不同剂量大蒜油对正常小鼠免疫功能的影响。方法 160只健康雌小鼠随机分为4批,每批分为4笼,分别编号1~4号,每笼10只;4批小鼠中每批1号笼为空白对照,2、3、4号笼分别按照2.0 mg/kg、4.0 mg/kg、8.0 mg/kg低、中、高3个剂量大蒜油进行喂养31 d,第1批4笼小鼠进行脏器/体质量比值测定;第2批实验小鼠进行碳廓清实验;第3批实验小鼠进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验;第4批小鼠进行小鼠淋巴细胞转化实验。结果2、3、4号笼小鼠脏器/体质量比值与1号笼比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;高剂量大蒜油组小鼠的吞噬指数明显高于其他两组,碳廓清能力提高（P〈0.05）;食用大蒜油小鼠吞噬率均高于未食用的1号笼（P〈0.05）,并且随着食用剂量的增加,吞噬率也成正比增高;食用大蒜油小鼠光密度差值均高于对照1笼小鼠（P〈0.05）。结论大蒜油具有提高小鼠免疫功能的效果。 展开更多

关键词 大蒜油 碳廓清能力 巨噬细胞 淋巴细胞转化实验

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重组鸡IFN-α-IL-18融合基因的酵母分泌表达及其抗IBDV活性研究 被引量：3

12

作者 杨惠 李银聚 +6 位作者 刘一尘 程相朝 杨丹芳 韩海峰 金修哲 颜云飞 何雷 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1759-1764,共6页

为探讨鸡IFN-α和IL-18及其融合蛋白抗IBDV活性,本研究将鸡IFN-α、IL-18及其融合基因分别置于酵母表达载体pPICZ-αA的AOX1启动子下游,构建重组质粒pPICZ-IFN-α、pPICZ-IL-18和pPICZ-IFN-α-IL-18。将重组质粒分别用PmeⅠ酶切线性化,... 为探讨鸡IFN-α和IL-18及其融合蛋白抗IBDV活性,本研究将鸡IFN-α、IL-18及其融合基因分别置于酵母表达载体pPICZ-αA的AOX1启动子下游,构建重组质粒pPICZ-IFN-α、pPICZ-IL-18和pPICZ-IFN-α-IL-18。将重组质粒分别用PmeⅠ酶切线性化,电穿孔方法导入酵母Pichia Pastoris X-33感受态细胞,以1%甲醇诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达蛋白,淋巴细胞转化试验初步检测表达产物生物学活性,鸡胚接种试验对表达产物的抗IBDV效果进行评价。结果表明,在酵母培养上清液中存在相对分子质量分别为22 000、23 000和43 000的目的蛋白,表达的IL-18和IFN-α-IL-18对鸡淋巴细胞具有明显的诱导转化作用(P<0.05)。IFN-α-IL-18融合蛋白能够显著抑制IBDV在鸡胚中的增殖(P<0.01),IFN-α和IL-18酵母表达产物对IBDV也有明显的抑制作用(P<0.05)。这为进一步开展IFN-α-IL-18融合蛋白的功能研究及其在鸡病毒性疫病防控中作用的探索奠定了基础。 展开更多

关键词 IFN-α基因 IL-18基因 融合蛋白 酵母表达 淋巴细胞转化试验 IBDV

原文传递

三取代型钛钨硅酸盐体内抑瘤效应的免疫机制探讨 被引量：3

13

作者 张松龄 梅少林 常雅萍 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期650-652,共3页

目的:探讨三取代型钛钨硅酸盐(WT)体内抑瘤效应的免疫机制。方法:建立荷H22肝癌小鼠模型,WT连续灌胃10d,取出肿瘤称重测定抑瘤率。用MTT比色法测定荷H22肝癌小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性。通过形态学观察和流式细胞仪检测W... 目的:探讨三取代型钛钨硅酸盐(WT)体内抑瘤效应的免疫机制。方法:建立荷H22肝癌小鼠模型,WT连续灌胃10d,取出肿瘤称重测定抑瘤率。用MTT比色法测定荷H22肝癌小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性。通过形态学观察和流式细胞仪检测WT诱导BEL-7402细胞的凋亡。结果:WT可显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长(P<0.05),提高荷瘤小鼠淋巴细胞转化的活性及NK细胞的杀伤活性(P<0.05),并诱导肿瘤细胞发生凋亡。结论:WT的抑瘤作用与机体免疫功能的增强有关。 展开更多

关键词 三取代型钛钨硅酸盐 抑瘤效应 细胞凋亡 淋巴细胞转化 NK细胞

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妊娠17～37周正常和感染胎儿的T细胞免疫 被引量：2

14

作者 杜涛 方群 +4 位作者 孔庆瑜 周 罗艳敏 陈筠虹 陈健生 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第z1期151-154,共4页

目的探讨妊娠17-37周正常和宫内感染胎儿的T细胞免疫。方法超声引导下行脐带穿刺术收集129例胎儿外周血,其中97例为正常对照组胎儿血,32例为宫内感染组胎儿血(单纯疱疹病毒感染、弓形虫感染、风疹病毒感染),采用双色免疫荧光标记流式细... 目的探讨妊娠17-37周正常和宫内感染胎儿的T细胞免疫。方法超声引导下行脐带穿刺术收集129例胎儿外周血,其中97例为正常对照组胎儿血,32例为宫内感染组胎儿血(单纯疱疹病毒感染、弓形虫感染、风疹病毒感染),采用双色免疫荧光标记流式细胞仪技术测定胎儿外周血T细胞亚群百分率,3H-TdR掺入法检测T细胞增殖能力,分析生理状态下胎儿的T细胞亚群和T细胞增殖情况、宫内感染时胎儿T细胞亚群和增殖反应的变化。结果生理状态下胎儿CD3+、CD4+、CD8+T细胞百分率随孕龄增长而增加(P<0.01),相关系数为:r(CD3+)=0.63、r(CD4+)=0.45、r(CD8+)=0.27。CD4+/CD8+比值,CD8+HLA-DR+、CD3+CD45RO+、CD3+CD45RA+T细胞百分率,T细胞增殖能力与孕龄无相关。CD3+CD45RA+T细胞百分率为(96±2)%。宫内感染时,胎儿CD3+、CD4+、CD8+HLA-DR+T细胞百分率减少,CD8+T细胞百分率增多,CD4+/CD8+比值降低,T细胞增殖能力下降,与正常对照组相比差异显著。CD3+CD45RO+、CD3+CD45RA+T细胞百分率无明显变化。结论妊娠17-37周胎儿各T细胞亚群百分率随孕龄增长情况不同,但多数仍处于“初始状态”;宫内感染时,胎儿容易产生T细胞免疫抑制。 展开更多

关键词 胎儿 宫内感染 T细胞亚群 T细胞增殖反应

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重组IFN-α-IL-18体外对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB的影响 被引量：2

15

作者 杨惠 李银聚 +4 位作者 刘一尘 程相朝 杨丹芳 韩海锋 金修哲 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1040-1044,1048,共6页

目的:探讨鸡IFN-α-IL-18融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB(NF-κB)的影响。方法:构建重组酵母表达质粒p PICZ-IFN-α、p PICZ-IL-18和p PICZ-IFN-α-IL-18,电转化酵母菌X-33后以1%甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达I... 目的:探讨鸡IFN-α-IL-18融合蛋白对鸡外周血淋巴细胞转化及核因子κB(NF-κB)的影响。方法:构建重组酵母表达质粒p PICZ-IFN-α、p PICZ-IL-18和p PICZ-IFN-α-IL-18,电转化酵母菌X-33后以1%甲醇诱导,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达IFN-α、IL-18及IFN-α-IL-18蛋白,淋巴细胞转化试验初步检测表达产物生物学活性,双抗体夹心法测定不同时段淋巴细胞中总NF-κB和细胞核中NF-κB的含量。结果:酵母培养上清液中存在分子量分别为22、23和43 k D的目的蛋白;表达的IFN-α-IL-18和IL-18均能明显促进鸡外周血淋巴细胞转化(P<0.05),IFN-α对淋巴细胞转化有促进作用,但总体差异不显著(P>0.05)。与对照组相比,经IFN-α-IL-18和IL-18作用的鸡淋巴细胞中总NF-κB含量明显增加(P<0.05),细胞核中NF-κB含量差异极显著(P<0.01),IFN-α作用的淋巴细胞中总NF-κB含量与对照组相比差异不显著(P>0.05),细胞核中NF-κB含量显著增加(P<0.05)。结论:IFN-α-IL-18及IL-18能够明显促进淋巴细胞转化,IFN-α促进淋巴细胞转化活性较弱,这种促淋转机制与NF-κB的表达、活化及核质转运有关,为进一步研究IFN-α-IL-18融合蛋白的功能及其在疫病防控中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 IFN-α-IL-18 酵母表达 淋巴细胞转化试验 核因子ΚB

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肺炎克雷伯菌与双歧杆菌裂解物的免疫调节作用对比研究 被引量：2

16

作者 黄红莹 许国强 杜耀武 《河南大学学报（医学版）》 CAS 2005年第3期9-10,共2页

目的:对肺炎丸雷伯菌与双歧杆菌裂解物的免疫调节作用做对比研究。方法:上述2种菌经培养后,采用超声破碎法获得其细菌裂解物。对细菌裂解物采用淋巴细胞转化试验和溶血空斑试验检测具对免疫功能的影响。结果:0.625g/L肺炎克雷伯菌和双... 目的:对肺炎丸雷伯菌与双歧杆菌裂解物的免疫调节作用做对比研究。方法:上述2种菌经培养后,采用超声破碎法获得其细菌裂解物。对细菌裂解物采用淋巴细胞转化试验和溶血空斑试验检测具对免疫功能的影响。结果:0.625g/L肺炎克雷伯菌和双歧杆菌裂解物对T细胞和B细胞的激活最显著,与对照组相比有显著性差别(P<0.01)。结论:肺炎克雷伯菌裂解物具有良好的免疫增强作用,在感染性疾病的防治中有良好的应用前景。 展开更多

关键词 肺炎克雷伯菌与双歧杆菌裂解物 淋巴细胞转化实验 溶血空斑实验

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大鼠树突状细胞单抗生物学特性的实验研究 被引量：1

17

作者 潘志超 许化溪 +4 位作者 刘恭植 严俊 邵启祥 李良菊 王胜军 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期94-96,共3页

将分泌抗大鼠树突状细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株，接种ＢＡＬｂ／ｃ小鼠腹腔，取腹水用正辛酸沉淀法纯化得到单克隆抗体ＷＺＤ３．应用该单抗阻断试验，探讨ＷＺＤ３对树突状细胞参与的淋巴细胞转化试验及混合淋巴细胞培养的影响。实... 将分泌抗大鼠树突状细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞株，接种ＢＡＬｂ／ｃ小鼠腹腔，取腹水用正辛酸沉淀法纯化得到单克隆抗体ＷＺＤ３．应用该单抗阻断试验，探讨ＷＺＤ３对树突状细胞参与的淋巴细胞转化试验及混合淋巴细胞培养的影响。实验结果显示，树突状细胞在两种反应系统中的作用受到明显抑制，其抑制程度随ＷＺＤ３稀释度的增加而降低，在淋巴细胞转化试验中的最大抑制率达９６．４％。 展开更多

关键词 树突状细胞 单克隆抗体 淋巴细胞

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鸭白介素-18基因重组真核表达载体的构建及其表达产物的生物学活性 被引量：1

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作者 陈红英 李新生 +3 位作者 崔保安 夏平安 张红英 杨明凡 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1568-1572,共5页

从克隆质粒pGEM-DuIL-18扩增出鸭IL-18全基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA3.1/DuIL-18(简称pDuIL-18)。将重组质粒pDuIL-18转染Cos7细胞,转染细胞中含鸭IL-18基因的mRNA。SDS-PAGE分析表明,表达产物是与鸭IL... 从克隆质粒pGEM-DuIL-18扩增出鸭IL-18全基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组质粒pcDNA3.1/DuIL-18(简称pDuIL-18)。将重组质粒pDuIL-18转染Cos7细胞,转染细胞中含鸭IL-18基因的mRNA。SDS-PAGE分析表明,表达产物是与鸭IL-18相符的约23000的蛋白条带。鸭淋巴细胞转化试验表明,表达产物对鸭淋巴细胞具有明显诱导转化作用。重组质粒pDuIL-18对H9亚型禽流感灭活疫苗免疫增强作用的研究表明重组质粒pDuIL-18能够提高禽流感灭活疫苗诱发的细胞免疫应答,为研究能够更好地防制禽流感的新型疫苗提供了新的思路。 展开更多

关键词 白介素18(IL-18) 鸭 真核表达 淋巴细胞转化试验 HI试验

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硒和灵芝对小鼠免疫的影响 被引量：1

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作者 戴军 吴淑慧 +4 位作者 马志红 褚兆苹 王娜 石玉娥 刘浩 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1938-1939,共2页

目的了解硒和灵芝对免疫系统的影响。方法①质量为18～22 g昆明140只小鼠随机分为7组,其中6组左前腋皮下注射S180,然后分别给予生理盐水、灵芝、富硒灵芝、低硒灵芝、富硒灵芝加环磷酰胺和环磷酰胺处理,未注射S180的一组只给予生理盐水... 目的了解硒和灵芝对免疫系统的影响。方法①质量为18～22 g昆明140只小鼠随机分为7组,其中6组左前腋皮下注射S180,然后分别给予生理盐水、灵芝、富硒灵芝、低硒灵芝、富硒灵芝加环磷酰胺和环磷酰胺处理,未注射S180的一组只给予生理盐水,一周后处死各组动物观察各组脾脏胸腺质量大小、测定血清TNF-α水平变化;②培养EL-4细胞株,分成阴性对照、阳性对照、灵芝、低硒灵芝、富硒灵芝和环磷酰胺组进行淋巴细胞转化实验。结果灵芝能增加胸腺和脾脏质量(P<0.05),提高T淋巴细胞转化率(P<0.05),少量的硒大大减低血清中TNF-α水平(P<0.05),大剂量的硒则能升高血清中TNF-α水平(P<0.05)。结论灵芝能增强小鼠免疫,硒能对小鼠不同的T淋巴细胞群作用不同。 展开更多

关键词 富硒灵芝 灵芝 TNF-Α 淋巴细胞转化实验

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新型LTT优化试验诊断抗结核药物超敏反应的临床价值

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作者 谢知兵 李勇忠 +2 位作者 于红缨 王培 蒋小欢 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期646-649,共4页

目的 研究新型淋巴细胞转化试验(LTT)在诊断抗结核药物超敏反应中的临床价值。方法 选择2018年10月-2019年3月于怀化市第一人民医院确诊的初治结核病和肺外结核病患者90例,以临床药物激发试验(DPT)检测为判定超敏反应的金标准。采集患... 目的 研究新型淋巴细胞转化试验(LTT)在诊断抗结核药物超敏反应中的临床价值。方法 选择2018年10月-2019年3月于怀化市第一人民医院确诊的初治结核病和肺外结核病患者90例,以临床药物激发试验(DPT)检测为判定超敏反应的金标准。采集患者外周静脉血进行传统LTT和新型LTT,比较两种方法的体外刺激指数(S.I),检测灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、阳性预测值和阴性预测值。结果 在DPT阳性患者中,新型LTT的刺激指数均高于传统LTT(P<0.05);DPT共检测出53例抗结核药物所致的超敏反应,新型LTT共检测出阳性例数41例,传统LTT共检测出阳性例数29例,新型LTT检测的阳性例数高于传统LTT检测例数(F=3.572,P=0.007);新型LTT对不同药物导致超敏反应的检测灵敏度均高于传统LTT,假阴性率低于传统LTT。结论 新型LTT可显著提高传统LTT的灵敏度,降低假阴性率,可在抗结核药物超敏反应的临床诊断中推广应用。 展开更多

关键词 抗结核药 超敏反应 淋巴细胞转化试验 CD3^(+)CD_(25)Int/LowT细胞

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