Epigenetic dysregulation comprising DNA hypermethylation and hypomethylation, enhancer of zeste homologue 2 （EZH2） overexpression and altered patterns of histone modifications is associated with the progression of p...Epigenetic dysregulation comprising DNA hypermethylation and hypomethylation, enhancer of zeste homologue 2 （EZH2） overexpression and altered patterns of histone modifications is associated with the progression of prostate cancer. DNA methylation, EZH2 and histone modifications also ensure the parental-specific monoallelic expression of at least 62 imprinted genes. Although it is therefore tempting to speculate that epigenetic dysregulation may extend to imprinted genes, expression changes in cancerous prostates are only well documented for insulin-like growth factor 2 （IGF2）. A literature and database survey on imprinted genes in prostate cancer suggests that the expression of most imprinted genes remains unchanged despite global disturbances in epigenetic mechanisms. Instead, selective genetic and epigenetic changes appear to lead to the inactivation of a sub-network of imprinted genes, which might function in the prostate to limit cell growth induced via the PI3K/Akt pathway, modulate androgen responses and regulate differentiation. Whereas dysregulation of IGF2 may constitute an early change in prostate carcinogenesis, inactivation of this imprinted gene network is rather associated with cancer progression.展开更多
目的研究胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor2,Igf2)基因的印迹状态及其表达在早期自然流产中的作用。方法选择2010年2月至2011年2月在中国医科大学附属盛京医院节育门诊就诊孕妇60例,采用PCR结合限制性片段长度多态性分析(r...目的研究胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor2,Igf2)基因的印迹状态及其表达在早期自然流产中的作用。方法选择2010年2月至2011年2月在中国医科大学附属盛京医院节育门诊就诊孕妇60例,采用PCR结合限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFLP)技术,分析25例正常早孕、35例早孕自然流产绒毛组织中Igf2基因印迹丢失(loss of imprinting,LOI)情况;采用荧光定量PCR方法检测两种绒毛组织Igf2基因mRNA的表达。结果正常绒毛组织中Igf2基因型为杂合子的样本有11例,其中4例被检测出印迹丢失;自然流产绒毛组织中Igf2基因型为杂合子的样本有16例,其中6例被检测出印迹丢失,二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产绒毛组织中Igf2基因mRNA的表达量为(2.29±0.60)×103copy/μgRNA,明显低于正常绒毛组织中Igf2基因的表达量(3.15±0.88)×103copy/μgRNA,两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论 Igf2基因的印迹丢失与自然流产无关,Igf2基因mRNA的表达降低与自然流产有关,在早期自然流产发生中可能存在其他机制调节Igf2基因的表达。展开更多
目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验...目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)标志蛋白表达,以及通过软琼脂克隆形成实验等方法鉴定ASPC胰腺癌干细胞;以测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况;应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达;应用Western blot方法研究胰腺癌干细胞中IGF2在蛋白水平上的表达。结果利用流式细胞分选技术通过CD133抗体标记,从胰腺癌细胞ASPC中分离出胰腺癌干细胞,其可在干细胞培养液中成球培养,连续消化传代后仍保持与原代相同的形态特征;免疫荧光检测发现CSCs标志物CD133和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)在胰腺癌干细胞表面持续阳性表达;软琼脂克隆形成实验显示CSCs的克隆形成能力增强;对分选前后肿瘤细胞CD133表达检测,显示超过90%的成球细胞为CD133阳性;通过测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况,结果显示胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失(loss of imprinting,LOI),而与其对应的非干性肿瘤细胞(non-stem cancer cells,nSCCs)的印记状态为印记保持(maintance of imprinting,MOI);应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高;应用Western blot方法研究CSCs中IGF2在蛋白水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高。结论胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失,从而导致IGF2的高表达,IGF2印记丢失可能是胰腺癌干细胞的标志性特征之一。展开更多
文摘Epigenetic dysregulation comprising DNA hypermethylation and hypomethylation, enhancer of zeste homologue 2 （EZH2） overexpression and altered patterns of histone modifications is associated with the progression of prostate cancer. DNA methylation, EZH2 and histone modifications also ensure the parental-specific monoallelic expression of at least 62 imprinted genes. Although it is therefore tempting to speculate that epigenetic dysregulation may extend to imprinted genes, expression changes in cancerous prostates are only well documented for insulin-like growth factor 2 （IGF2）. A literature and database survey on imprinted genes in prostate cancer suggests that the expression of most imprinted genes remains unchanged despite global disturbances in epigenetic mechanisms. Instead, selective genetic and epigenetic changes appear to lead to the inactivation of a sub-network of imprinted genes, which might function in the prostate to limit cell growth induced via the PI3K/Akt pathway, modulate androgen responses and regulate differentiation. Whereas dysregulation of IGF2 may constitute an early change in prostate carcinogenesis, inactivation of this imprinted gene network is rather associated with cancer progression.
文摘目的研究胰岛素样生长因子2(insulin like growth factor2,Igf2)基因的印迹状态及其表达在早期自然流产中的作用。方法选择2010年2月至2011年2月在中国医科大学附属盛京医院节育门诊就诊孕妇60例,采用PCR结合限制性片段长度多态性分析(restriction fragment length polymorphism,RFLP)技术,分析25例正常早孕、35例早孕自然流产绒毛组织中Igf2基因印迹丢失(loss of imprinting,LOI)情况;采用荧光定量PCR方法检测两种绒毛组织Igf2基因mRNA的表达。结果正常绒毛组织中Igf2基因型为杂合子的样本有11例,其中4例被检测出印迹丢失;自然流产绒毛组织中Igf2基因型为杂合子的样本有16例,其中6例被检测出印迹丢失,二者相比差异无统计学意义(P>0.05)。自然流产绒毛组织中Igf2基因mRNA的表达量为(2.29±0.60)×103copy/μgRNA,明显低于正常绒毛组织中Igf2基因的表达量(3.15±0.88)×103copy/μgRNA,两者比较差异有统计学意义(P<0.001)。结论 Igf2基因的印迹丢失与自然流产无关,Igf2基因mRNA的表达降低与自然流产有关,在早期自然流产发生中可能存在其他机制调节Igf2基因的表达。
文摘目的研究印记基因IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况。方法利用流式细胞分选技术通过CD133抗体从胰腺癌细胞株ASPC分离出胰腺癌干细胞;流式细胞术检测分离前后CD133^+细胞的比例;采用无血清悬浮培养法富集胰腺癌干细胞;通过成球实验、免疫荧光染色、流式细胞术测定肿瘤干细胞(cancer stem cells,CSCs)标志蛋白表达,以及通过软琼脂克隆形成实验等方法鉴定ASPC胰腺癌干细胞;以测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况;应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达;应用Western blot方法研究胰腺癌干细胞中IGF2在蛋白水平上的表达。结果利用流式细胞分选技术通过CD133抗体标记,从胰腺癌细胞ASPC中分离出胰腺癌干细胞,其可在干细胞培养液中成球培养,连续消化传代后仍保持与原代相同的形态特征;免疫荧光检测发现CSCs标志物CD133和乙醛脱氢酶(aldehyde dehydrogenase,ALDH)在胰腺癌干细胞表面持续阳性表达;软琼脂克隆形成实验显示CSCs的克隆形成能力增强;对分选前后肿瘤细胞CD133表达检测,显示超过90%的成球细胞为CD133阳性;通过测序法分析IGF2在胰腺癌干细胞中的印记表达情况,结果显示胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失(loss of imprinting,LOI),而与其对应的非干性肿瘤细胞(non-stem cancer cells,nSCCs)的印记状态为印记保持(maintance of imprinting,MOI);应用qRT-PCR法研究胰腺癌干细胞中IGF2在基因水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高;应用Western blot方法研究CSCs中IGF2在蛋白水平上的表达,结果显示与nSCCs相比,IGF2在CSCs中的表达明显升高。结论胰腺癌干细胞存在IGF2印记丢失,从而导致IGF2的高表达,IGF2印记丢失可能是胰腺癌干细胞的标志性特征之一。
