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长期体外培养对人脐血间充质干细胞成骨分化潜能的影响 被引量：6
1
作者 刘广鹏 张文杰 +3 位作者 李宇琳 孙剑 周恒 崔磊 《组织工程与重建外科杂志》 2009年第1期4-6,48,共4页
目的观察体外长期培养对人脐血间充质干细胞(Human umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)成骨分化潜能的影响,探讨其作为组织工程骨种子细胞的可行性。方法流式细胞技术观察长期体外培养的UCB-MSCs细胞表面... 目的观察体外长期培养对人脐血间充质干细胞(Human umbilical cord blood derived mesenchymal stem cells,UCB-MSCs)成骨分化潜能的影响,探讨其作为组织工程骨种子细胞的可行性。方法流式细胞技术观察长期体外培养的UCB-MSCs细胞表面抗原表达的变化规律,并通过Alizarin Red染色及碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白含量和钙离子含量的检测观察长期体外培养对UCB-MSCs成骨特性的影响。结果第10代之前的UCB-MSCs能够高表达间充质干细胞表面标志物,7代之前的细胞体外增殖能力不随传代次数而发生明显变化。Alizarin Red染色及碱性磷酸酶活性、骨钙蛋白含量和钙离子含量的检测显示8代之前的UCB-MSCs仍能保持较强的成骨分化能力。结论7代之前的UCB-MSCs能保持稳定的体外成骨分化特性,有望成为较理想的组织工程骨种子细胞。 展开更多
关键词 人脐血间充质干细胞 组织工程 成骨分化 体外培养
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高龄小鼠来源精原干细胞长期培养体系的建立
2
作者 汤瑞玲 范立青 《湖北科技学院学报（医学版）》 2023年第3期205-211,215,共8页
目的建立高龄小鼠精原干细胞(SSC)体外长期培养体系。方法将5只8月龄昆明白小鼠用于本实验,组织形态学技术评估睾丸生精状态;优化睾丸体细胞去除流程、原代和传代中饲养层与生长因子组合条件,观察小鼠SSC克隆形成、增殖与传代;细胞生物... 目的建立高龄小鼠精原干细胞(SSC)体外长期培养体系。方法将5只8月龄昆明白小鼠用于本实验,组织形态学技术评估睾丸生精状态;优化睾丸体细胞去除流程、原代和传代中饲养层与生长因子组合条件,观察小鼠SSC克隆形成、增殖与传代;细胞生物学与分子生物学技术检测小鼠SSC克隆的干细胞特征。结果高龄小鼠睾丸精曲小管存在生精损害,PLZF^(POS)精原细胞数量增加;优化实验条件后富集的精原细胞数量增加,体外成功培养传代高龄小鼠SSC克隆6个月;高龄小鼠SSC克隆具有AKP活性并表达THY-1、PLZF、OCT-4等精原干细胞标记物。结论本研究通过优化消化、富集、原代和传代培养的多个环节,成功建立高龄小鼠SSC体外长期培养体系。 展开更多
关键词 高龄小鼠 精原干细胞 体外长期培养
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用于人类脂肪干细胞的纯化和体外长期培养的聚合物涂层 被引量：3
3
作者 邱林子 王桂容 +5 位作者 潘艳 王溢文 李新庆 邓林红 Mark Bradley 张嵘 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1897-1905,共9页
采用紫外固化法制备了基于丙烯酸酯类水凝胶的聚合物涂层(PC),并用X射线光电子能谱(XPS)、水接触角(WCA)和原子力显微镜(AFM)分别对PC进行了化学组成和表面性能的表征.在PC表面进行了人类脂肪干细胞(h ASC)的体外长期培养扩增,得到的第... 采用紫外固化法制备了基于丙烯酸酯类水凝胶的聚合物涂层(PC),并用X射线光电子能谱(XPS)、水接触角(WCA)和原子力显微镜(AFM)分别对PC进行了化学组成和表面性能的表征.在PC表面进行了人类脂肪干细胞(h ASC)的体外长期培养扩增,得到的第3代细胞的生物学表征结果表明,干细胞在PC表面能正常黏附生长,流式细胞仪检测发现干细胞对特征标记物CD49d,CD73,CD105的阳性显性比例较高,对HLA-DR和CD31几乎不显性,说明扩增的干细胞具有h ASC特征.对PC上扩增的干细胞进行诱导分化,并用油红O、茜素红和阿利新蓝分别进行染色分析,结果表明,该干细胞保留了h ASC的多能特性:能分化为成脂、成骨和成软骨细胞.含有单体甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(DMC)、甲基丙烯酸环己酯(CHMA)和甲基丙烯酸-2-(二乙氨基)乙酯(DEAEMA)的PC2(质量比为3∶1∶2)在用于h ASC体外长期培养时,比其它PC和TCP更有利于细胞的黏附和增殖,纯化细胞,保持其多能性.实时荧光定量PCR(RT-q PCR)的分析表明PC2上得到的细胞更容易向成骨和成软骨细胞分化. 展开更多
关键词 聚合物涂层 人类脂肪干细胞 体外长期培养 纯化 分化 丙烯酸酯类水凝胶
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人骨髓基质细胞的长期培养及其对病毒的敏感性 被引量：1
4
作者 杨吉成 盛伟华 +3 位作者 李丽娥 董宁征 杨宗华 王晓东 《中国病毒学》 CSCD 2000年第4期336-341,共6页
为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ... 为了长期培养人骨髓基质细胞和研究其对病毒的敏感性 ,我们采用静置贴壁培养法 ,体外长期培养了胎儿、儿童和成人骨髓基质细胞 ,并将传至 5代以上的肌样骨髓基质细胞采用微量细胞病变 (CPE)法 ,开展了对 5种病毒的敏感性试验。结果表明 ,人骨髓基质肌样细胞对滤泡性口腔炎病毒 ,脊髓灰质炎病毒、I型和Ⅱ型单纯疱疹病毒均敏感 ,能产生明显的CPE ,其效价 (TCID50 )可达10 - 3～ 10 - 4,其中胎儿骨髓基质肌样细胞对病毒敏感性至少比儿童高 2倍 ,比成人高 4倍 ,即胎儿>儿童 >成人 ,但对B3型柯萨奇病毒均不敏感。我们的研究结果不仅可为人骨髓基质细胞体外长期培养提供了确实可行的简便方法 ,而且为该细胞对病毒的敏感性提供了实验依据 ,并为该细胞的利用开辟了新的应用前景。 展开更多
关键词 人骨髓基质肌样细胞 体外长期培养 病毒 敏感性
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体外长期培养的人脐血造血细胞表面标志的动态分析 被引量：9
5
作者 文珠 戴育成 +1 位作者 胡爱国 李洁 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第6期285-288,共4页
目的：探讨脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机。方法：用造血干细胞因子，重组人白细胞介素（ｒＩＬ）３，ｒＩＬ１β和ｒＩＬ６长期培养人脐血造血细胞，并对其表面标志进行动态观察。结果：ＣＤ３＋和ＣＤ２０＋的Ｔ、Ｂ淋... 目的：探讨脐血造血细胞体外扩增及移植的最佳时机。方法：用造血干细胞因子，重组人白细胞介素（ｒＩＬ）３，ｒＩＬ１β和ｒＩＬ６长期培养人脐血造血细胞，并对其表面标志进行动态观察。结果：ＣＤ３＋和ＣＤ２０＋的Ｔ、Ｂ淋巴细胞培养第７天升高，１４天后下降至低水平维持。ＣＤ３４＋细胞培养７天后增多，１４天达高峰，继而下降在一定水平维持。ＣＤ３３＋细胞培养第７天显著增多，１４２１天达高峰，第２８天明显下降。ＣＤ４２ｂ＋细胞培养２１天开始增多，２８天达高峰，第３５天仍处于较高水平。ＨＬＡＤＲ＋细胞培养１４２１天时稍有增高。结论：含有上述细胞生长因子的培养体系能够扩增脐血造血细胞并维持其存活。培养１４２１天造血细胞数量最多、状态最佳。 展开更多
关键词 胎血 造血细胞 培养 表面标志 体外扩增
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