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锁核酸探针多重荧光PCR快速检测肉制品中4种动物肉掺假的研究 被引量：6
1
作者 许如苏 周广彪 +3 位作者 魏霜 段建发 刘中勇 陈冠武 《检验检疫学刊》 2016年第2期12-16,共5页
应用锁核酸探针技术建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭4种动物肉掺假的方法。针对动物线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭源性成分的多重Taqman-LNA荧光PCR方法,用于市售肉... 应用锁核酸探针技术建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭4种动物肉掺假的方法。针对动物线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭源性成分的多重Taqman-LNA荧光PCR方法,用于市售肉制品的检测,同时采用标准方法进行验证。结果显示,建立的多重Taqman-LNA荧光PCR方法可同时检测肉制品中上述动物源性成分,检测限均达到肉含量的0.01%。将样品Ct≤30,且|样品Ct-纯肉Ct|≤7判为肉掺假;将样品Ct≤30,且|样品Ct-纯肉Ct|>7判为肉污染。对200份市售肉制品检测发现,有42份样品掺入标签标示以外肉种,有22份样品存在肉污染,其中2份样品暨掺假又污染。多重方法对肉源性成分的检测结果与现行标准方法符合率达99%。本研究建立的方法可同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭4种动物源性成分,具有特异、快速、经济、高通量等优点,设定的肉掺假和肉污染判定标准合理,可有效避免肉污染导致的掺假误判。 展开更多
关键词 动物源性成分 掺假 锁核酸探针 多重Taqman-LNA荧光PCR 肉制品
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锁核酸探针技术快速检测鸭源性成分的试验 被引量：6
2
作者 许如苏 周广彪 +4 位作者 魏霜 段建发 刘中勇 陈冠武 苏建晖 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第9期91-93,共3页
为了建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的改良荧光PCR方法,针对鸭线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸(LNA)探针,建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法,通过设定合理的掺假判定标准,解决肉... 为了建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的改良荧光PCR方法,针对鸭线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸(LNA)探针,建立快速鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法,通过设定合理的掺假判定标准,解决肉污染导致的掺假误判。结果建立的方法对鸭肉DNA的检测灵敏度高达1.64 pg;与猪、牛、鸡等11种动物的DNA无非特异性反应;应用该法检测模拟掺假肉制品,结果与预期相符;应用该法检测80份市售肉制品,发现有5份产品掺有鸭源性成分而标签未标示。表明本试验建立的方法特异、敏感,可快速、准确鉴别肉及肉制品中掺假鸭源性成分。 展开更多
关键词 LNA探针 Taqman-LNA荧光PCR 鸭源性成分 肉及肉制品
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Taqman-LNA荧光PCR快速检测肉制品中马源性成分的研究 被引量：4
3
作者 许如苏 周广彪 +3 位作者 段建发 苏建晖 魏霜 陈冠武 《中国动物检疫》 CAS 2015年第7期62-66,共5页
[目的]建立快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法。[方法]基于马的种属保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立可快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR检测方法。通过对特异性、灵敏度、重复性的检测,... [目的]建立快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR方法。[方法]基于马的种属保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立可快速检测肉制品中马源性成分的Taqman-LNA荧光PCR检测方法。通过对特异性、灵敏度、重复性的检测,对建立的方法进行评价。[结果]建立的Taqman-LNA荧光PCR方法灵敏,可检测到马肉DNA最低限为1.4 pg;特异,与猪、牛、羊、鹿、驴、兔、鸡、鸭、鹅、虾无非特异性反应;可重复,批内和批间的变异系数均小于2%;准确,应用该法检测人为掺入马肉的肉制品,检测结果与预期相符。[结论]本研究建立的方法具有灵敏度高,特异性强,重复性好等优点,适合于肉制品中马源性成分检测。 展开更多
关键词 马源性成分 锁核酸(LNA)探针 荧光定量PCR 肉制品
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利用锁核酸探针技术快速检测肉制品中猪源性成分
4
作者 周广彪 许如苏 +2 位作者 魏霜 段建发 陈文婉 《检验检疫学刊》 2015年第4期12-15,共4页
[目的]建立快速检测肉制品中猪源性成分的锁核酸探针荧光PCR检测方法。[方法]基于猪线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸探针,建立快速检测肉制品中猪源性成分的锁核酸荧光PCR检测方法。通过特异性、灵敏度、重复性测试及应... [目的]建立快速检测肉制品中猪源性成分的锁核酸探针荧光PCR检测方法。[方法]基于猪线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和锁核酸探针,建立快速检测肉制品中猪源性成分的锁核酸荧光PCR检测方法。通过特异性、灵敏度、重复性测试及应用检测对建立的方法进行评价。[结果]建立的锁核酸荧光PCR方法对牛、羊、马、鸡、鸭、鹅均无非特异性扩增;该法可检测低至1.20 pg的猪肉DNA,重复检测结果的变异系数均小于1%。应用该法检测市售肉制品50份,32份标示含有猪肉成分样本的检测结果均与预期相符,另发现1份羊肉丸为猪肉制备、2份鸡肉火腿肠中掺有猪源性成分而未标示。[结论]本研究建立的方法具有特异、灵敏、稳定等优点,适用于大规模快速检测肉制品中猪源性成分。 展开更多
关键词 猪源性成分 锁核酸探针 肉制品
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