两种独行菜种子萌发对不同浓度NaCl胁迫的响应 被引量：18

1

作者 李天永 严子柱 姜生秀 《草地学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期88-94,共7页

为探究腺独行菜(Lepidium apetalum Willd)和宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.var.affine C.A.mey)种子萌发耐盐性特征,用玻璃培养皿采用暗发芽的方法,在恒温25℃种子培养箱中进行发芽试验,测定不同NaCl浓度(0,50,100,150,200,250,300... 为探究腺独行菜(Lepidium apetalum Willd)和宽叶独行菜(Lepidium latifolium L.var.affine C.A.mey)种子萌发耐盐性特征,用玻璃培养皿采用暗发芽的方法,在恒温25℃种子培养箱中进行发芽试验,测定不同NaCl浓度(0,50,100,150,200,250,300 mmol·L^-1)胁迫下两种独行菜种子的发芽率、发芽势、日均发芽率、日相对发芽率和种子胚芽、胚根的长度。结果表明:在同等盐胁迫下,腺独行菜种子的发芽率、发芽势等各项指标均显著大于宽叶独行菜种子的。在不同盐胁迫下,随NaCl浓度增大,腺独行菜种子发芽率呈先增大后减小的特征,发芽势呈持续下降趋势;宽叶独行菜种子的发芽率和发芽势均呈显著下降特征,且NaCl浓度达到150 mmol·L^-1后,失去发芽能力;种子胚芽、胚根生长始终表现为腺独行菜优于宽叶独行菜。 展开更多

关键词 腺独行菜 宽叶独行菜 种子萌发 NACL胁迫 发芽率

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2种独行菜萌发对低温胁迫的生理响应 被引量：13

2

作者 杨娜 赵和平 +3 位作者 葛风伟 李艳红 曾卫军 赵惠新 《干旱区研究》 CSCD 北大核心 2015年第4期760-765,共6页

以独行菜(Lepidium apetalum)、抱茎独行菜(Lepidium perfoliatum)为材料,对比研究了2种独行菜种子萌发过程耐受低温的特征及生理响应。结果表明:2种独行菜在不同萌发阶段对低温均有良好的抗性,但随萌发进行抗性有所下降;萌发至中期的... 以独行菜(Lepidium apetalum)、抱茎独行菜(Lepidium perfoliatum)为材料,对比研究了2种独行菜种子萌发过程耐受低温的特征及生理响应。结果表明:2种独行菜在不同萌发阶段对低温均有良好的抗性,但随萌发进行抗性有所下降;萌发至中期的种子在4℃都能存活并生长,但生长速度受到抑制,尤其是独行菜受到抑制更强;萌发中期二者的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性与同工酶谱受低温影响很大,胁迫初期酶活性下降,短时间内又迅速提高并维持在较高水平,较高的酶活性水平对清除低温胁迫产生的有毒害的活性氧等自由基,抵抗低温逆境的伤害有重要作用。酶活性变化受酶谱条带多少及强弱的影响,相比较抱茎独行菜酶活性变化较独行菜更快。 展开更多

关键词 独行菜 抱茎独行菜 萌发过程 低温胁迫 生理响应

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一些十字花科植物组织的化感活性研究 被引量：12

3

作者 韩君 罗小勇 《江西农业学报》 CAS 2008年第10期76-78,83,共4页

采用琼脂混粉法对一些常见十字花科植物组织的化感活性进行了研究。首先以生菜为指示植物对油菜(苏州青、雪克青、矮脚黄)、球果焊菜、播娘蒿、荠菜以及独行菜的不同组织进行了测定,发现以独行菜果实组织的化感活性最高。进而以该组织... 采用琼脂混粉法对一些常见十字花科植物组织的化感活性进行了研究。首先以生菜为指示植物对油菜(苏州青、雪克青、矮脚黄)、球果焊菜、播娘蒿、荠菜以及独行菜的不同组织进行了测定,发现以独行菜果实组织的化感活性最高。进而以该组织为供试材料测定了其不同浓度对生菜、小麦、反枝苋和稗草4种指示植物幼苗生长的影响,发现在低浓度(0.1g/L)下对所有指示植物幼苗的生长均表现出一定的促进作用,而在5、10 g/L的高浓度下,各指示植物胚根(或种子根)和胚轴(或胚芽鞘)的生长均受到明显的抑制,计算对胚根或种子根的有效抑制浓度(EC50)分别为反枝苋(0.2373 g/L)、生菜(0.8172 g/L)、稗草(0.9901 g/L)和小麦(2.8918 g/L);对胚轴或胚芽鞘的EC50分别为反枝苋(0.4869 g/L)、稗草(3.1657 g/L)、生菜(3.6663 g/L)和小麦(5.7276 g/L)。 展开更多

关键词 琼脂混粉法 十字花科植物 化感活性 独行菜

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短命植物独行菜种子萌发过程对低温的耐受特性 被引量：12

4

作者 赵惠新 李群 +1 位作者 周晶 李冠 《云南植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期448-454,共7页

以独行菜(Lepidium apetalum)为材料,研究了其种子在萌发过程中耐受低温的特性,并对耐受低温的机制作了初步的探讨。结果表明:1.萌发至I、II、III期的独行菜种子经过冷诱导处理后,对零下低温-5℃、-10℃胁迫具有较强的耐受性,这种耐受... 以独行菜(Lepidium apetalum)为材料,研究了其种子在萌发过程中耐受低温的特性,并对耐受低温的机制作了初步的探讨。结果表明:1.萌发至I、II、III期的独行菜种子经过冷诱导处理后,对零下低温-5℃、-10℃胁迫具有较强的耐受性,这种耐受性随萌发发展相对有所降低。2.独行菜种子萌发过程中胚根生长速度明显受到低温抑制,但也仍然能够生长。3.适当时间的低温层积能使独行菜萌发势显著提高,对终萌发率影响不大;过长时间的低温层积会使独行菜种子萌发势和最终萌发率降低。4.独行菜种子在4℃条件下不能萌发,但4℃层积2d的种子经25℃处理6h以上后,可耐受4℃低温而萌发,且萌发率随25℃处理时间增加而升高。如果25℃处理时间少于5h则不能在4℃低温下萌发。经4℃层积10d、再经25℃萌发处理1h的独行菜种子就能在4℃低温下萌发。综合分析认为独行菜种子不能耐受4℃低温萌发,原因可能是在露白前存在一个关键的生理阶段,在4℃胁迫逆境中不能越过这个阶段,该阶段之前与之后的萌发过程都能耐受4℃低温,因此对低温胁迫有良好的耐受性。这为探索早春短命植物耐受低温萌发的机制提供了新的思路。 展开更多

关键词 独行菜 种子萌发过程 低温 耐受性

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独行菜C4H基因克隆与表达分析 被引量：11

5

作者 赵乐 马利刚 +2 位作者 杨泽岸 冯卫生 郑晓珂 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期821-831,共11页

以独行菜(Lepidium apetalum)为材料,通过分析独行菜转录组数据,设计特异性引物,克隆了独行菜肉桂酸-4-羟化酶(cinnamate-4-hydroxylase,C4H)基因的cDNA序列,命名为LaC4H,Gen Bank登录号为KX064050,并进行生物信息学分析,原核表达、纯化... 以独行菜(Lepidium apetalum)为材料,通过分析独行菜转录组数据,设计特异性引物,克隆了独行菜肉桂酸-4-羟化酶(cinnamate-4-hydroxylase,C4H)基因的cDNA序列,命名为LaC4H,Gen Bank登录号为KX064050,并进行生物信息学分析,原核表达、纯化,组织特异性分析和诱导表达分析。结果表明:(1)LaC4H基因开放阅读框(ORF)长1 518 bp,编码505个氨基酸,其蛋白质分子质量为57.73 k D。(2)生物信息学分析显示La C4H蛋白包含细胞色素P450的保守基序和5个特征性底物结合位点,是细胞色素P450超家族成员,系统进化分析显示LaC4H蛋白与拟南芥等十字花科植物C4H蛋白同源性较高。(3)通过构建原核表达载体pET-32a-LaC4H在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达LaC4H重组蛋白,利用Ni^(2+)亲和色谱得到了纯化的LaC4H重组蛋白。(4)荧光定量PCR结果表明LaC4H基因在茎中表达量最高,叶和花中次之,根中表达量最低。经茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)诱导后,叶中LaC4H表达量明显上升,诱导后48 h达到最高值,叶中LaC4H的表达量与黄酮含量之间呈正相关。这为进一步研究LaC4H基因在独行菜黄酮类化合物生物合成途径中的功能奠定基础。 展开更多

关键词 独行菜 肉桂酸-4-羟化酶 基因克隆 生物信息学分析 表达分析

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独行菜GRAS转录因子家族分析及LaSCL18基因克隆与冷相关性研究 被引量：9

6

作者 李丽丽 曾卫军 +7 位作者 李艳红 葛风伟 卢函 雷维 杜钰 谢红桃 赵和平 赵惠新 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期3428-3437,共10页

以耐受低温萌发停滞期的种子为实验组,以低温萌发停滞期的种子为对照组,对独行菜(Lepidium apetalum Willd.)种子转录组进行了高通量测序。基于测序数据库资源,本研究对独行菜GRAS类转录因子进行了分析,除去冗余,发现独行菜种子共有GRA... 以耐受低温萌发停滞期的种子为实验组,以低温萌发停滞期的种子为对照组,对独行菜(Lepidium apetalum Willd.)种子转录组进行了高通量测序。基于测序数据库资源,本研究对独行菜GRAS类转录因子进行了分析,除去冗余,发现独行菜种子共有GRAS家族270个成员。其中138个成员相对于低温萌发停滞组,在耐受低温萌发的独行菜种子中上调表达,128个下调表达,4个表达水平无差异。进一步选择了一个极显著上调表达的GRAS基因片段,通过Blastn同源序列比对分析表明,该基因片段与拟南芥GRAS基因家族SCL18全长基因一致性最高,达到96%,故本研究将其命名为La SCL18(Gen Bank登录号KY466159)。结合同源序列克隆法、采用RT-PCR技术克隆获得该GRAS基因c DNA序列,全长1 633 bp,编码一个完整的开放阅读框。生物信息学分析表明,该c DNA序列编码435个氨基酸、具有GRAS转录因子家族特有的保守结构域、亲水性较高、是一个水溶性较好的球状蛋白。编码蛋白分子质量139.883 k D、理论等电点为4.97、不具有跨膜区和DNA结合位点,表明其在调控相关基因转录时可能不直接与DNA序列结合,而是与其它转录因子相互作用后发挥功能。实时荧光定量PCR分析表明,独行菜幼苗在低温胁迫处理后La SCL18基因表达量迅速显著升高,初步推测La SCL18基因表达与独行菜幼苗耐受低温有关。 展开更多

关键词 独行菜 GRAS转录因子 LaSCL18 表达分析 低温耐受

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新疆四种早春短命植物结实性及种子萌发特性初探 被引量：7

7

作者 刘彭 张海波 +3 位作者 秦丽 蒋刚强 兰海燕 张富春 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期247-251,共5页

以新疆四种短命植物为材料,对短命植物植株结实性和种子萌发特性进行了初步研究。研究结果表明,光照对短命植物的分布、形态建成和结实率都有显著的影响。萌发实验结果则表明,光照对四种短命植物种子萌发率没有显著影响;在一定范围内温... 以新疆四种短命植物为材料,对短命植物植株结实性和种子萌发特性进行了初步研究。研究结果表明,光照对短命植物的分布、形态建成和结实率都有显著的影响。萌发实验结果则表明,光照对四种短命植物种子萌发率没有显著影响;在一定范围内温度的升高能够促进独行菜种子的萌发,而温度升高对其它三种短命植物没有显著影响。不同土壤基质的萌发实验表明:孔隙度大的基质(蛭石∶珍珠岩=3∶1)比孔隙度小的基质(花土∶沙土=3∶1)更有利于种子的萌发。四种短命植物的高结实率和种子萌发特性不仅是对早春生境的适应,也为短命植物种群在逆境的繁衍提供了保证。 展开更多

关键词 早春短命植物 独行菜 离子草 菥冥 糙草 结实性 萌发特性

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南葶苈子、北葶苈子核磁共振指纹图谱研究 被引量：6

8

作者 赵璇 李孟 +3 位作者 张志广 张靖柯 郑晓珂 冯卫生 《中医学报》 CAS 2017年第9期1690-1693,1704,共5页

目的:建立南葶苈子、北葶苈子核磁共振指纹图谱,并研究两者之间的差异。方法:采用Bruker AVANCE 500Ⅲ型超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪建立指纹图谱,~1H-NMR条件:谱宽10 330.578 Hz,扫描次数32次,数据点65 536,测试温度25℃,以四甲... 目的:建立南葶苈子、北葶苈子核磁共振指纹图谱,并研究两者之间的差异。方法:采用Bruker AVANCE 500Ⅲ型超导脉冲傅里叶变换核磁共振波谱仪建立指纹图谱,~1H-NMR条件:谱宽10 330.578 Hz,扫描次数32次,数据点65 536,测试温度25℃,以四甲基硅烷为内标物。13C-NMR条件:谱宽29 761.904 Hz,24 000次,延时2 s,测试温度25℃,以氘代甲醇溶剂峰49 ppm为内标物。结果:氢谱δ6-8、碳谱δ100-160为芳氢信号,此区域北葶苈子绝大多数成分为单取代苯环标志峰,而南葶苈子则分布较为杂乱的低矮小峰,可能为芥子酰基或黄酮成分的芳氢信号。氢谱δ3-6、碳谱δ55-100为连氧的碳氢信号,在此区域南葶苈子、北葶苈子均显示各类糖信号,南葶苈子在此区域较北葶苈子更为杂乱,说明其含糖量更丰富,且在δ3.5处,南葶苈子出现多个甲氧基峰,佐证了芥子酰基成分的存在。氢谱δ0-3、碳谱δ0-55为不连氧的碳氢信号,此区域两者都有几根含量较大的甲基峰信号,但是标志性不强。结论:南葶苈子、北葶苈子的主要成分存在显著差异。 展开更多

关键词 南葶苈子 北葶苈子 核磁共振技术 指纹图谱 中药

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益气强心胶囊的质量标准研究 被引量：6

9

作者 聂继红 王萍 刘兆龙 《中国药房》 CAS CSCD 2014年第7期644-646,共3页

目的：建立益气强心胶囊的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对益气强心胶囊中的黄芪、红景天、丹参、葶苈子进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定制剂中丹酚酸B的含量：色谱柱为VP-ODS柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为甲... 目的：建立益气强心胶囊的质量标准。方法：采用薄层色谱（TLC）法对益气强心胶囊中的黄芪、红景天、丹参、葶苈子进行定性鉴别；采用高效液相色谱法测定制剂中丹酚酸B的含量：色谱柱为VP-ODS柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为甲醇-乙腈-2％甲酸溶液（24：9：67，V/V/V），检测波长为286nm，柱温为35℃，流速为1ml／min。结果：黄芪、红景天、丹参、葶苈子的TLC斑点清晰、分离度好，且阴性对照无干扰。丹酚酸B的质量浓度在0．0278～0．1390mg／ml范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系（r=O．9999）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD〈2％；平均加样回收率为100．29％，RSD=1．91％（n=6）。结论：所建标准可用于益气强心胶囊的质量控制。 展开更多

关键词 益气强心胶囊 质量标准 薄层色谱法 高效液相色谱法 黄芪 红景天 丹参 葶苈子 丹酚酸B

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北葶苈子GGPS基因的克隆、序列分析与原核表达 被引量：5

10

作者 马利刚 赵乐 +3 位作者 李英超 冯卫生 匡海学 郑晓珂 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第3期485-491,共7页

目的:获得北葶苈子(Lepidium apetalum)中牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)的编码基因,进行生物信息学分析,在大肠杆菌中表达该蛋白。方法:根据北葶苈子转录组测序结果中的GGPS基因序列,设计... 目的:获得北葶苈子(Lepidium apetalum)中牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS)的编码基因,进行生物信息学分析,在大肠杆菌中表达该蛋白。方法:根据北葶苈子转录组测序结果中的GGPS基因序列,设计特异性引物,通过PCR扩增得到北葶苈子GGPS的c DNA序列,进行TA克隆、测序及序列分析,构建原核表达载体并于大肠杆菌中表达北葶苈子GGPS蛋白。结果:得到北葶苈子GGPS c DNA全长1 146 bp,编码381个氨基酸;序列分析表明北葶苈子GGPS基因编码的氨基酸序列包含类异戊二烯合成酶结构域,氨基酸序列进化关系表明北葶苈子GGPS与拟南芥(Arabidopsis thaliana)和白芥(Sinapis alba)亲缘关系最近;成功构建了p ET-32a-La GGPS原核表达载体,并在大肠杆菌BL21菌株中成功诱导表达。结论:首次克隆得到北葶苈子GGPS基因,并在大肠杆菌中成功表达了北葶苈子GGPS蛋白,为纯化该蛋白并研究其结构和功能奠定了基础。 展开更多

关键词 北葶苈子 GGPS 基因克隆 序列分析 原核表达

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独行菜LaSPS基因的克隆与生物信息学分析及原核表达 被引量：4

11

作者 赵乐 马利刚 +2 位作者 韩杜菀 冯卫生 郑晓珂 《北方园艺》 CAS 北大核心 2016年第6期92-99,共8页

以独行菜(Lepidium apetalum)幼苗叶片为试材,采用PCR方法,扩增得到LaSPS基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建pET-32a-LaSPS原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达LaSPS重组蛋白。结果表明:LaSPS基因ORF长1 269bp,编... 以独行菜(Lepidium apetalum)幼苗叶片为试材,采用PCR方法,扩增得到LaSPS基因的开放阅读框(open reading frame,ORF),构建pET-32a-LaSPS原核表达载体并在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达LaSPS重组蛋白。结果表明:LaSPS基因ORF长1 269bp,编码422个氨基酸,包含茄呢醇焦磷酸合酶结构域,是异戊烯基合成酶家族的成员;序列分析发现,LaSPS蛋白定位于叶绿体中,不含信号肽没有跨膜区;通过序列比对和系统进化分析,显示LaSPS蛋白与拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtSPS2蛋白相似度为91%,亲缘关系最近;在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达LaSPS重组蛋白,为研究LaSPS基因在独行菜质体醌生物合成途径中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 独行菜 茄呢醇焦磷酸合酶 基因克隆 序列分析 原核表达

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独行菜LaMCT基因的克隆、序列分析与原核表达 被引量：3

12

作者 赵乐 马利刚 +2 位作者 李晓阳 冯卫生 郑晓珂 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1225-1231,共7页

强心苷作为药用植物独行菜(Lepidium apetalum)的活性成分,其化学和药理学研究已有良好的基础,但其生物合成途径目前仍不清楚。该研究以独行菜幼苗为材料,通过分析独行菜转录组数据,设计特异性引物,PCR扩增得到了强心苷生物合成MEP途径... 强心苷作为药用植物独行菜(Lepidium apetalum)的活性成分,其化学和药理学研究已有良好的基础,但其生物合成途径目前仍不清楚。该研究以独行菜幼苗为材料,通过分析独行菜转录组数据,设计特异性引物,PCR扩增得到了强心苷生物合成MEP途径的关键酶2-C-甲基赤藓醇-4-磷酸胞苷酰转移酶(MCT)基因的开放阅读框(ORF),命名为LaMCT(Genbank注册号KT832554),并进行序列分析和原核表达。序列分析结果表明:LaMCT基因ORF全长为912 bp,编码304个氨基酸。亚细胞定位和保守结构域分析结果表明:LaMCT蛋白位于叶绿体中,不含信号肽,没有跨膜区,含有类异戊二烯合成酶保守结构域(isoprenoid synthase domain)。系统进化树结果表明:LaMCT蛋白与拟南芥的MCT蛋白具有94%的序列相似性,亲缘关系较近。通过构建pET-32a-LaMCT原核表达载体,成功在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中诱导表达LaMCT重组蛋白,并得到了纯化的LaMCT重组蛋白。该研究首次从独行菜中克隆了LaMCT基因,建立其稳定的原核表达体系,为LaMCT蛋白抗体的制备以及研究LaMCT基因在独行菜强心苷类化合物生物合成途径中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 独行菜 MCT 基因克隆 序列分析 原核表达

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独行菜LaAP2基因克隆、生物信息学分析及表达分析 被引量：3

13

作者 李艳红 曾卫军 +3 位作者 李金玉 葛风伟 朱艳蕾 赵惠新 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期762-770,共9页

AP2/ERF是广泛存在于植物中一类重要的转录因子,调控一些参与非生物胁迫相关基因的表达,帮助植物提高逆境胁迫能力。为了深入探讨LaAP2在独行菜耐受低温萌发及幼苗耐受低温生长中的功能,该研究基于前期对独行菜(Lepidium apetalum)转录... AP2/ERF是广泛存在于植物中一类重要的转录因子,调控一些参与非生物胁迫相关基因的表达,帮助植物提高逆境胁迫能力。为了深入探讨LaAP2在独行菜耐受低温萌发及幼苗耐受低温生长中的功能,该研究基于前期对独行菜(Lepidium apetalum)转录组数据库分析,克隆获得一个显著上调表达的AP2/ERF家族序列LaAP2。该基因cDNA全长为1 005 bp,编码氨基酸序列包含一个AP2和一个B3结构域,属于AP2/ERF转录因子RAV亚家族。推定的LaAP2蛋白分子量为37.744 67 kD,等电点为9.49。该蛋白氨基酸序列同亚麻荠、拟南芥、油菜等物种显示出较高同源性,系统进化分析结果表明与拟南芥亲缘关系较近。氨基酸序列分析预测表明,LaAP2基因所编码的蛋白不具备信号肽区段,无跨膜区,不属于分泌蛋白,可能为亲水性蛋白;定位于细胞质的可能性为56.5%,定位于细胞核的可能性为21.7%;其主要二级结构元件为无规则卷曲、延伸链、α-螺旋。Real-time PCR分析独行菜幼苗中LaAP2在低温4℃处理下的表达,显示LaAP2表达受低温胁迫呈先下降后升高趋势。这表明LaAP2在独行菜幼苗抵抗低温胁迫中起调控作用。 展开更多

关键词 独行菜 AP2/ERF转录因子 LaAP2基因克隆 序列分析 表达分析 低温耐受 分子生物学

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独行菜LaMK基因克隆、生物学信息分析及原核表达 被引量：2

14

作者 赵乐 马利刚 +2 位作者 俎梦航 冯卫生 郑晓珂 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期924-930,共7页

目的克隆独行菜强心苷生物合成途径关键酶甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MK)基因,进行生物信息学分析,原核表达、纯化和组织特异性分析。方法通过分析独行菜转录组数据,设计基因特异性引物,克隆了LaMK基因的cDNA序列,构建p ET-32a-La... 目的克隆独行菜强心苷生物合成途径关键酶甲羟戊酸激酶(mevalonate kinase,MK)基因,进行生物信息学分析,原核表达、纯化和组织特异性分析。方法通过分析独行菜转录组数据,设计基因特异性引物,克隆了LaMK基因的cDNA序列,构建p ET-32a-La MK原核表达载体,诱导表达LaMK重组蛋白。结果 LaMK基因的开放阅读框(opening reading frame,ORF)全长为1 137 bp,编码379个氨基酸。生物信息学分析显示,La MK蛋白可能定位于细胞质中,没有跨膜区不含信号肽,含有GHMP激酶家族保守结构域和ATP结合位点。系统进化分析显示,La MK蛋白与拟南芥等十字花科植物的MK蛋白同源性较高。在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达La MK重组蛋白,利用Ni2+亲和色谱得到了纯化的La MK重组蛋白。荧光定量PCR结果表明,LaMK基因在花中表达量最高,叶和根中次之,茎中较低,在幼苗中表达量最低。结论本实验为下一步制备La MK蛋白抗体,研究La MK基因在独行菜强心苷生物合成途径中的功能奠定了基础。 展开更多

关键词 独行菜 LaMK基因 基因克隆 生物信息学分析 原核表达

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独行菜LaBBX基因低温表达响应与密码子偏性分析 被引量：1

15

作者 周茜 陈芸 +3 位作者 王玉州 王继莲 凯迪日耶·玉苏普 赵惠新 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期1253-1262,共10页

BBX是调控植物非生物胁迫相关基因表达,响应植物逆境胁迫的重要锌指蛋白类转录因子。为探究BBX在独行菜(Lepidium apetalum)幼苗耐受低温生长中的表达响应及其密码子偏好性,本研究基于独行菜转录组数据,筛选独行菜BBX编码基因的cDNA序列... BBX是调控植物非生物胁迫相关基因表达,响应植物逆境胁迫的重要锌指蛋白类转录因子。为探究BBX在独行菜(Lepidium apetalum)幼苗耐受低温生长中的表达响应及其密码子偏好性,本研究基于独行菜转录组数据,筛选独行菜BBX编码基因的cDNA序列,并从独行菜幼苗中克隆获得全长733 bp的基因编码区序列,命名为LaBBX。序列分析表明,LaBBX由242个氨基酸组成,包含2个B-box锌指蛋白结构域,蛋白分子量为61.66 kDa,等电点为5.09,无信号肽和跨膜区。独行菜幼苗受低温胁迫时,LaBBX基因显著上调表达,6 h上调表达至21倍,且24 h内均呈现高水平表达,说明该转录因子可能在独行菜幼苗受低温胁迫时起重要作用。偏好性分析结果显示,独行菜LaBBX基因的ENc、CAI值和GC含量分别为55.453、0.244和46.78%,其密码子使用偏性较弱,相对偏好使用AT,高频密码子有8个,CDS序列及RSCU聚类分析中与十字花科植物最相近;其偏好性的形成与突变和自然选择等诸多因素相关,酵母菌表达系统更适合作为LaBBX基因的异源表达受体,拟南芥是适宜LaBBX基因的遗传转化受体。本研究为了解独行菜LaBBX基因的异源表达及基因功能提供了重要参考。 展开更多

关键词 独行菜 BBX转录因子 基因克隆 表达分析 密码子偏性 聚类分析

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HS-SPME-GC-MS法分析南、北葶苈子的挥发性成分 被引量：1

16

作者 曹利 卢金清 +2 位作者 叶欣 许俊洁 屠寒 《中国药房》 CAS 北大核心 2016年第30期4302-4304,共3页

目的:分析南、北葶苈子的挥发性成分,并比较其差异。方法:采用顶空固相微萃取法对葶苈子的挥发性成分进行提取,采用气相色谱-质谱联用法检测成分,采用面积归一化法计算各成分相对含量。结果:南、北葶苈子的挥发性成分分别为25、18种,分... 目的:分析南、北葶苈子的挥发性成分,并比较其差异。方法:采用顶空固相微萃取法对葶苈子的挥发性成分进行提取,采用气相色谱-质谱联用法检测成分,采用面积归一化法计算各成分相对含量。结果:南、北葶苈子的挥发性成分分别为25、18种,分别占各自挥发性成分总量的75.76%、64.29%,其中含量最高的化学成分分别为β-石竹烯、邻甲基苯腈。结论:该方法操作简便,结果可靠,可用于南、北葶苈子挥发性成分的分析;南、北葶苈子的挥发性成分在种类和含量上差异较大。该研究为快速鉴定南、北葶苈子提供了依据。 展开更多

关键词 南葶苈子 北葶苈子 顶空-固相微萃取 气相色谱-质谱联用法 挥发性成分

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独行菜法尼基焦磷酸合酶基因的克隆与原核表达 被引量：1

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作者 马利刚 赵乐 +3 位作者 付小蝶 冯卫生 匡海学 郑晓珂 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2017年第9期92-97,共6页

从独行菜(Lepidium apetalum)中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(FPS)基因,并在大肠杆菌中表达,为进一步研究独行菜强心苷的合成途径提供参考。分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列... 从独行菜(Lepidium apetalum)中克隆强心苷合成途径的法尼基焦磷酸合酶(FPS)基因,并在大肠杆菌中表达,为进一步研究独行菜强心苷的合成途径提供参考。分析前期获得的独行菜幼苗转录组数据,选择其中注释为FPS且具有完整开放阅读框的序列,从独行菜叶片c DNA中通过PCR克隆该序列,并进行序列分析。结果表明,克隆得到独行菜FPS基因的cDNA序列,Gen Bank登录号KY366218,命名为La FPS。序列长度为1 332 bp,含有1 161 bp的开放阅读框,推测编码386个氨基酸。La FPS蛋白可能不含跨膜结构,定位于线粒体中,含有聚异戊二烯合成酶结构域。La FPS蛋白氨基酸序列与拟南芥(Arabidopsis thaliana)FPS1蛋白相似性高达92%,进化树分析结果表明,La FPS与同为十字花科的拟南芥FPS1、遏蓝菜(Noccaea caerulescens)FPS1、高山南芥(Arabis alpina)FPS亲缘关系最近。构建的载体p ET-32a-La FPS可在大肠杆菌中成功诱导表达。表明成功克隆了独行菜FPS基因,并建立了其原核表达体系。 展开更多

关键词 独行菜 法尼基焦磷酸合酶 基因克隆 序列分析 原核表达

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葶苈子药材生态适宜性区划研究

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作者 吕娇娇 高国香 王艳 《中兽医医药杂志》 CAS 2021年第1期12-17,共6页

对全国葶苈子药材的生态适宜性开展评价,为优质葶苈子药材的栽培与选育提供理论依据。通过网络资料查阅和实地采集,收集了葶苈子药材共839个样点信息,其中播娘蒿430个样点,独行菜409个样点,综合55个生态因子,应用GIS和Maxent模型分析葶... 对全国葶苈子药材的生态适宜性开展评价,为优质葶苈子药材的栽培与选育提供理论依据。通过网络资料查阅和实地采集,收集了葶苈子药材共839个样点信息,其中播娘蒿430个样点,独行菜409个样点,综合55个生态因子,应用GIS和Maxent模型分析葶苈子药材在全国的生态适宜性分布。建立的Maxent模型预测效果良好(训练集和验证集特征曲线下面积均大于0.9),影响全国葶苈子药材生态适宜性的主要环境因子是降雨、温度、海拔、酸碱度、植被类型、土壤亚类等;全国内中药葶苈子最适宜生境主要集中在河北、河南、山西、山东、陕西、宁夏、甘肃南部、四川西部等地。对葶苈子分布区进行了生长等级划分,为葶苈子药材资源的调查研究、人工种植、划分优质产地、资源调查提供理论依据。 展开更多

关键词 播娘蒿 独行菜 生态适宜性

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独行菜UGT74B1基因的序列结构分析及时空表达特性

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作者 王敏 王熙林 +5 位作者 宋钢钢 郁国良 刘家勤 李佳佳 葛风伟 赵惠新 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第10期3243-3250,共8页

芥子油苷是独行菜种子的重要药用活性物质,也是重要的植物代谢调节物。但独行菜芥子油苷的合成途径及其调节还不清楚。为了探讨独行菜芥子油苷合成与生长阶段、组织器官的关系,本研究基于独行菜种子转录组数据库,以UGT(尿苷二磷酸-糖基... 芥子油苷是独行菜种子的重要药用活性物质,也是重要的植物代谢调节物。但独行菜芥子油苷的合成途径及其调节还不清楚。为了探讨独行菜芥子油苷合成与生长阶段、组织器官的关系,本研究基于独行菜种子转录组数据库,以UGT(尿苷二磷酸-糖基转移酶)为关键词筛选在芥子油苷核心结构起修饰作用的关键酶基因序列,并对其结构及表达特性进行分析。结果表明,独行菜种子萌发中有98条Unigenes,其中一条c19350_g1与拟南芥UGT74B1相似性最高。进一步采用RT-PCR技术克隆到独行菜UGT74B1基因,命名为LaUGT74B1,结构分析显示,该基因的c DNA序列编码区为1386 bp,编码产物为461个氨基酸的蛋白,蛋白的理论等电点为5.38,其不稳定系数为34.70,为稳定蛋白质,不具有跨膜结构。其二级结构主要由α螺旋和无规则卷曲构成,与独行菜与琴叶拟南芥、亚麻荠、荠菜的UGT74B1的序列相似性较高。另外,LaUGT74B1表达具有时空特异性,萌发阶段表达量呈现先下降后上升的变化趋势,苗期主要在叶中表达,花期主要在根中,结实期主要在老茎中。本研究结果可为独行菜芥子油苷生物合成途径阐明提供初步的试验基础。 展开更多

关键词 独行菜 芥子油苷 LaUGT74B1 结构分析 时空表达特性

原文传递

葶苈子水提物对狗左心室功能的作用 被引量：109

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作者 吴晓玲 杨裕忠 黄东亮 《中药材》 CAS CSCD 1998年第5期243-245,共3页

iv葶苈子水提物0.2ml/kg(含生药2g/ml),能增加犬的左心室心肌收缩性和泵血功能,并能增加冠脉流量,与iv异丙肾上腺素10μg/kg的作用相似,但葶苈子水提物对心率、动静脉氧分压差及动静脉氧溶解度无明显影响。说明葶苈子水提物具有显著强... iv葶苈子水提物0.2ml/kg(含生药2g/ml),能增加犬的左心室心肌收缩性和泵血功能,并能增加冠脉流量,与iv异丙肾上腺素10μg/kg的作用相似,但葶苈子水提物对心率、动静脉氧分压差及动静脉氧溶解度无明显影响。说明葶苈子水提物具有显著强心和增加冠脉流量的作用且不增加心肌耗氧量。 展开更多

关键词 葶苈子 水提物 左心室功能 冠脉流量 植物药

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