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根癌农杆菌介导GUS基因对白桦转化的研究 被引量:4
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作者 于景华 祖元刚 +3 位作者 孔瑾 石福臣 聂明珠 唐中华 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期247-251,共5页
本文报道了根癌农杆菌介导GUS基因转化白桦叶盘的研究方法 ,对转化过程中各种因素进行了全面探讨 ,结果表明 :白桦叶盘对卡那霉素的敏感实验 ,得出最适筛选浓度为 5 0mg/l;对头孢霉素和羧苄青霉素的抑菌实验 ,最适抑菌浓度为 5 0 0mg /l... 本文报道了根癌农杆菌介导GUS基因转化白桦叶盘的研究方法 ,对转化过程中各种因素进行了全面探讨 ,结果表明 :白桦叶盘对卡那霉素的敏感实验 ,得出最适筛选浓度为 5 0mg/l;对头孢霉素和羧苄青霉素的抑菌实验 ,最适抑菌浓度为 5 0 0mg /l;1 0 0 μMAS的加入可将抗性不定芽的诱导率提高 3倍 ;3~ 4d的预培是最适合叶盘转化的时间 ;1 0~ 2 0min是最适合叶盘浸染的时间 ;3~ 4d的共培养对于叶盘转化比较合理。在上述最适合的转化条件下 ,农杆菌介导的GUS基因对白桦叶盘的转化获得了抗性再生植株 ,转化率为 2 .8%。 展开更多
关键词 根癌农杆菌 介导 GUS基因 白桦 转化 叶盘法
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鉴定桃砧木对根癌病敏感性的叶圆片转化系统的建立 被引量:10
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作者 王志强 Sfal.,A 《果树科学》 CSCD 北大核心 1996年第3期145-148,共4页
以山桃、毛桃、Missouri和烟草为试材,以T2、2P和NCPPB1651三个根癌农杆菌菌系为病原,在离体条件下,研究建立了用叶圆片转化鉴定桃砧木对根癌病敏感性的方法,探讨了光照和病原菌浓度对接种结果的影响。该系统... 以山桃、毛桃、Missouri和烟草为试材,以T2、2P和NCPPB1651三个根癌农杆菌菌系为病原,在离体条件下,研究建立了用叶圆片转化鉴定桃砧木对根癌病敏感性的方法,探讨了光照和病原菌浓度对接种结果的影响。该系统可以在短时间内对桃砧木的感病性进行评价,筛选抗性种质,并可鉴定病原菌的致病力。 展开更多
关键词 砧木 根癌病 敏感性 鉴定 叶圆片转化
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红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系的优化 被引量:6
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作者 王翠华 刘荇 +5 位作者 杜小云 曾弓剑 谭雅慧 周超 刘开鸿 沈祥陵 《生物资源》 CAS 2020年第2期234-242,共9页
草莓离体组织再生和遗传转化体系的研究对草莓分子育种至关重要。为了优化农杆菌介导草莓品种红颜(Fragaria×ananassa Duch.Benihoppe)的遗传转化体系,本研究以红颜草莓组培苗的离体叶盘作为试验材料,首先确定了其离体再生的最佳条... 草莓离体组织再生和遗传转化体系的研究对草莓分子育种至关重要。为了优化农杆菌介导草莓品种红颜(Fragaria×ananassa Duch.Benihoppe)的遗传转化体系,本研究以红颜草莓组培苗的离体叶盘作为试验材料,首先确定了其离体再生的最佳条件,对影响转化效率的因素进行优化,获得了稳定高效的再生及转化体系。结果表明,红颜草莓离体叶盘最佳暗培养时间为9 d,最佳愈伤诱导培养基为MS+TDZ(2.0 mg/L)+IBA(0.1 mg/L)+2,4-D(0.1 mg/L),最佳愈伤分化培养基为MS+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.1 mg/L),转化体系的最佳组合为预培养2 d、添加300μmol/L的AS、以OD600nm=0.6的EHA105型的农杆菌浸染5 min、共培养5 d。经优化后的红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系对该品种的进一步优化和选育有重要意义。 展开更多
关键词 草莓 农杆菌 叶盘再生 遗传转化
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gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达 被引量:2
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作者 邓晓梅 周根余 《上海农业学报》 CSCD 1996年第4期85-87,共3页
gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达邓晓梅;周根余(上海市农业科学院农业生物技术研究中心上海201106;上海师范大学生物系,上海200234)关键词烟草,共培养转化;gus基因;组织特异性表达烟草是我... gus基因导入烟草获得转基因植株及其组织特异性表达邓晓梅;周根余(上海市农业科学院农业生物技术研究中心上海201106;上海师范大学生物系,上海200234)关键词烟草,共培养转化;gus基因;组织特异性表达烟草是我国重要的经济作物之一,烟草花叶病毒... 展开更多
关键词 烟草 转化 基因 组织特异性表达
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农杆菌介导的苜蓿遗传转化及PDH45转基因苜蓿耐盐性 被引量:3
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作者 金太成 刘雨晴 +3 位作者 许亚男 孟大伟 周晓梅 杨丽萍 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期3190-3195,共6页
耐盐性基因的遗传转化能够提高植物的抗盐胁迫能力,有效解决盐胁迫抑制植物生长的问题。本研究中紫花苜蓿(Medicago sativa)被作为植物材料,利用农杆菌介导的叶盘转化法将PDH45基因转入紫花苜蓿中。影响遗传转化效率的各种条件被优化,... 耐盐性基因的遗传转化能够提高植物的抗盐胁迫能力,有效解决盐胁迫抑制植物生长的问题。本研究中紫花苜蓿(Medicago sativa)被作为植物材料,利用农杆菌介导的叶盘转化法将PDH45基因转入紫花苜蓿中。影响遗传转化效率的各种条件被优化,包括农杆菌菌液浓度的优化、侵染时间的优化和选择培养基中卡那霉素浓度的优化。采用半定量(reverse transcription-PCR,RT-PCR)对PDH45转基因苜蓿进行了检测,结果表明转基因植株中PDH45基因均表达。在Na Cl浓度为50 mmol/L、100 mmol/L、150 mmol/L、200 mmol/L条件下,对PDH45转基因植株进行了耐盐性检测实验,结果表明中度盐胁迫150 mmol/L NaCl条件下,PDH45转基因植株表现出较强的耐受能力。本研究通过实验条件的优化,我们快速地获得了PDH45转基因苜蓿,为耐盐性转基因苜蓿的应用和推广提供了研究基础。 展开更多
关键词 紫花苜蓿 叶盘转化法 PDH45 盐胁迫
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Roi基因在三种植物中转化与表达的比较研究 被引量:2
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作者 吴敏 李宝健 《中山大学学报论丛》 1989年第4期1-6,共6页
通过改良的叶圆盘转化法,将Ti质粒上的Roi基因(细胞分裂素合成酶基因)转化入一种单子叶植物花叶芋和二种双子叶植物花椰菜和甘蓝的基因组中。在转化后组织当中以及再生植株的苗中,甚至再生植株的无性繁殖后代中均可测得Nos基因的产物胭... 通过改良的叶圆盘转化法,将Ti质粒上的Roi基因(细胞分裂素合成酶基因)转化入一种单子叶植物花叶芋和二种双子叶植物花椰菜和甘蓝的基因组中。在转化后组织当中以及再生植株的苗中,甚至再生植株的无性繁殖后代中均可测得Nos基因的产物胭脂碱的存在。这表明,Ti质粒上的外源基因已经在以上三种转基因植物中得到稳定的整合和表达,新的性状可以随着细胞分裂而传代。 展开更多
关键词 Roi基因 TI质粒 叶圆盘转化法
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人生长激素基因转化花叶芋及PEG在转化中的作用 被引量:2
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作者 王金发 许友卿 李宝健 《中山大学学报论丛》 1989年第4期7-11,共5页
将人生长激素基因插入pBR322衍生质粒载体pLGV1103 DNA中,通过三亲交配,将重组原粒pLB-9引入携带Ti质粒pGV3850的农杆菌,经同源重组,获得共整合重组体pGL198(hgh)Ti质粒。用叶盘共培养法,将pGL198(hgh)转化单子叶植物花叶芋,获得转基因... 将人生长激素基因插入pBR322衍生质粒载体pLGV1103 DNA中,通过三亲交配,将重组原粒pLB-9引入携带Ti质粒pGV3850的农杆菌,经同源重组,获得共整合重组体pGL198(hgh)Ti质粒。用叶盘共培养法,将pGL198(hgh)转化单子叶植物花叶芋,获得转基因再生植株。经胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析和DNA分子杂交,证明人生长素基因已整合到花叶芋DNA中。还探讨了聚乙二醇(PEG)在植物转化中的作用。 展开更多
关键词 人生长激素基因 叶盘转化 新霉素磷酸转移酶 胭脂碱 PEG
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TRANSFORMATION OF FOREIGN GENES INTO THE MONOCOTYLEDONOUS PLANT Caladium bicolor MEDIATED BY CONSTRUCTED Ti-PLASMID OF Agrobacterium tumefaciens
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作者 李宝健 吴敏 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1990年第1期52-55,共4页
In recent years, research that focused on applying 'disarmed' and constructed Tiplasmid of Agrobacterium tumefaciens as a dominant vector for plant genetic engineering has developed quickly. Several vector sys... In recent years, research that focused on applying 'disarmed' and constructed Tiplasmid of Agrobacterium tumefaciens as a dominant vector for plant genetic engineering has developed quickly. Several vector systems have become especially useful in plant transformation, and a great number of foreign genes have been transferred to dicot plants by means of the leaf-disc transformation method along with the Ti-plasmid vector. Most of the transgenic plants, which bear the novel trait, can accomplish complete regeneration, and the characteristics of the new genotype can be transmitted from generation to generation in the plant cells. 展开更多
关键词 TI-PLASMID leaf-disc transformation foreign gene expression.
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萤火虫萤光素酶基因转化花叶芋及表达的研究 被引量:1
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作者 王金发 许友卿 李宝健 《中山大学学报论丛》 1989年第4期12-16,共5页
将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移... 将萤火虫萤光素酶基因重组到质粒pBR325中,通过“三亲交配”和同源重组,将萤光素酶基因整合到Ti质粒pGV3850:1103。通过改良的叶盘转化法,用萤光素酶基因转化单子叶植物花叶芋,获得转基因植株。对再生植株的胭脂碱测定、新霉素磷酸转移酶分析、DNA点杂交、萤光素酶基因活性测定,证明萤光素酶基因已转化到花叶芋中并进行了表达。 展开更多
关键词 萤火虫萤光素酶基因 三亲交配叶盘转化 新霉素磷酸转移酶 DNA点杂交
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