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肾康注射液对肾小管上皮细胞转化生长因子-βmRNA基因表达的影响 被引量:26
1
作者 赵宗江 李宏 +5 位作者 张新雪 傅博 叶一舟 陈香美(指导) 叶传蕙(指导) 牛建昭(指导) 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第12期931-933,共3页
目的 :探讨肾康注射液对体外培养的肾小管上皮细胞LLC PK1转化生长因子 βmRNA(TGF βmRNA)基因表达的影响。 方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、Northern印迹杂交 (Northernblot)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注... 目的 :探讨肾康注射液对体外培养的肾小管上皮细胞LLC PK1转化生长因子 βmRNA(TGF βmRNA)基因表达的影响。 方法 :用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)、Northern印迹杂交 (Northernblot)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因表达的影响。结果 :肾康注射液可以明显下调肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因的表达 ,并呈剂量依赖关系 ,肾康注射液作用明显优于同等含量的单味大黄注射液。结论 :肾康注射液下调肾小管上皮细胞TGF βmRNA基因表达 ,是其防治慢性肾功能衰竭 (CRF)的机理之一。 展开更多
关键词 肾康注射注 慢性肾功能衰竭 llc-pk1 中医药疗法
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肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC-PK_1分泌层粘连蛋白的影响 被引量:33
2
作者 赵宗江 傅博 +3 位作者 陈香美 叶传蕙 张新雪 牛建昭 《中国中西医结合肾病杂志》 2001年第9期505-507,共3页
目的 :探讨肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌层粘连蛋白 (LN)的影响。方法 :用细胞酶联免疫吸附 (ELISA)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌LN含量的影响。结果 :肾康注射液可以... 目的 :探讨肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌层粘连蛋白 (LN)的影响。方法 :用细胞酶联免疫吸附 (ELISA)方法 ,以单味大黄注射液为实验对照组 ,检测肾康注射液对肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌LN含量的影响。结果 :肾康注射液可以显著抑制肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌LN的含量 ,并呈剂量依赖关系 ;肾康注射液作用明显优于同等含量的单味大黄注射液。结论 :肾康注射液抑制肾小管上皮细胞LLC -PK1分泌LN含量 ,是该方延缓慢性肾衰竭进展的机理之一。 展开更多
关键词 肾康注射液 肾小管上皮细胞 llc-pk1 纤维连接蛋白 肾衰竭 CRF
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血管紧张素Ⅱ及其1型受体拮抗剂对猪肾小管上皮细胞株LLC-PK1细胞转分化的作用 被引量:12
3
作者 孙阳 郑法雷 +2 位作者 刘彦信 郑德先 毕增祺 《中华内科杂志》 CSCD 北大核心 2000年第10期703-704,共2页
关键词 肾小管上皮细胞 血管紧张素Ⅱ AT1RA llc-pk1
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镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞LLC-PK_1的凋亡 被引量:7
4
作者 任香梅 蔡云清 +2 位作者 许冬青 王明艳 吴小丽 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期720-721,共2页
关键词 肾近曲小管 上皮细胞 llc-pk1 细胞凋亡 毒性作用
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葛根素对热应激诱导的LLC-PK1细胞HSP70表达的影响 被引量:6
5
作者 王占美 赵园 +4 位作者 陈健伟 国晓瞳 丛霞 姜忠玲 田文儒 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2014年第3期32-35,共4页
为研究不同浓度葛根素对热应激诱导的LLC-PK1细胞HSP70 mRNA和蛋白表达的影响,筛选出葛根素诱导HSP70表达的最佳浓度。选取处于对数增长期的猪肾小管上皮细胞,分为37℃对照组和42℃热应激组,热应激组细胞先在加入不同浓度(0.01~100μm... 为研究不同浓度葛根素对热应激诱导的LLC-PK1细胞HSP70 mRNA和蛋白表达的影响,筛选出葛根素诱导HSP70表达的最佳浓度。选取处于对数增长期的猪肾小管上皮细胞,分为37℃对照组和42℃热应激组,热应激组细胞先在加入不同浓度(0.01~100μmol/L不等)葛根素的培养基中培养,热应激之后,提取总RNA和总蛋白,用RT-PCR和Western Blot检测HSP70 mRNA和蛋白的相对表达量。结果显示,42℃热应激和不同浓度的葛根素均能显著诱导LLC-PK1细胞的HSP70 mRNA和蛋白的表达,并且,随葛根素浓度升高,HSP70表达量增加,在各浓度组中,10μmol/L的葛根素诱导HSP70的表达最显著(P〈0.01)。上述结果证明,葛根素能够诱导热应激条件下LLC-PK1细胞HSP70的表达,并且随葛根素浓度升高,HSP70表达量增加。 展开更多
关键词 热休克蛋白 葛根素 llc-pk1 HSP70
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TiO_2纳米管阵列的表面特性对猪肾小管上皮细胞生长状态的影响 被引量:4
6
作者 柳慧琼 朱文 +2 位作者 刘剑峰 刘喜 仝大利 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第3期249-257,共9页
TiO2纳米管阵列由于其优异的生物相容性及光催化效应,在生物医学领域引起了广泛关注.但能否将肾小管上皮细胞较好地黏附于TiO2纳米管材料并使其发挥肾小管的功能,目前还未见报道.为研究TiO2纳米管材料的表面特性对猪肾小管上皮细胞株(LL... TiO2纳米管阵列由于其优异的生物相容性及光催化效应,在生物医学领域引起了广泛关注.但能否将肾小管上皮细胞较好地黏附于TiO2纳米管材料并使其发挥肾小管的功能,目前还未见报道.为研究TiO2纳米管材料的表面特性对猪肾小管上皮细胞株(LLC-PK1)的黏附及增殖影响,采用阳极氧化法制备新型高强度的TiO2纳米管阵列,利用荧光显微镜考察了TiO2纳米管阵列光照特性、晶型结构及几何形貌参数对LLC-PK1细胞黏附的影响,采用MTT方法检测了黏附细胞的活性;同时使用扫描电子显微镜观察了4种不同管径上细胞生长的形态,并与纯钛片上细胞的生长形态进行对照.结果表明,管径为70nm的TiO2纳米管阵列膜最有利于LLC-PK1细胞的黏附及增殖,且细胞的活性最高;未经紫外光照射时锐钛矿型的TiO2比无定型更有利于细胞的黏附,然而锐钛矿型TiO2经紫外光照射后会导致细胞凋亡.扫描电子显微镜观察显示,细胞在纳米管上延伸为长条状,而在钛片上则呈堆积平板状.证实TiO2纳米管阵列膜具有良好的生物相容性,有助于改善细胞与材料的黏附. 展开更多
关键词 TIO2纳米管阵列 表面特性 生物相容性 猪肾小管上皮细胞 细胞黏附
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黄芩苷对热应激条件下LLC-PK1细胞HSP70表达的影响 被引量:3
7
作者 迟世凯 孙春玲 +5 位作者 李华涛 丛霞 姜忠玲 王新 曹荣峰 田文儒 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期64-67,共4页
为了探讨不同浓度黄芩苷对热应激条件下猪肾小管上皮(LLC-PK1)细胞HSP70表达的影响,筛选出黄芩苷诱导热应激条件下细胞HSP70表达的最佳浓度。将培养的LLC-PK1细胞随机分为7个组,Ⅰ组为37℃常温对照组,Ⅱ组为42℃单纯热应激组,Ⅲ、Ⅳ、... 为了探讨不同浓度黄芩苷对热应激条件下猪肾小管上皮(LLC-PK1)细胞HSP70表达的影响,筛选出黄芩苷诱导热应激条件下细胞HSP70表达的最佳浓度。将培养的LLC-PK1细胞随机分为7个组,Ⅰ组为37℃常温对照组,Ⅱ组为42℃单纯热应激组,Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组和Ⅶ组分别为42℃热应激并用不同浓度黄芩苷(0.01~100μg/m L)处理组,运用实时荧光定量PCR和Western Blot检测HSP70 m RNA及蛋白的表达。结果显示,42℃单纯热应激能显著诱导LLCPK1细胞HSP70的表达;一定浓度范围内的黄芩苷(0.1~10μg/m L)处理的LLC-PK1细胞HSP70表达显著高于42℃单纯热应激;黄芩苷(0.01~100μg/m L)能显著上调热应激条件下LLC-PK1细胞HSP70的表达,且1μg/m L的黄芩苷上调效果最显著。 展开更多
关键词 黄芩苷 llc-pk1 热应激 HSP70
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灯盏乙素抑制热应激诱导猪肾小管上皮细胞凋亡研究 被引量:2
8
作者 丛霞 李华涛 +3 位作者 陈健伟 张东君 曹荣峰 田文儒 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期59-65,84,共8页
灯盏乙素(Scu)为灯盏花中提取的单一黄酮类化合物,具有清热解毒和保护细胞免受热应激损伤的作用。试验将不同浓度Suc培养的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)在42℃下热应激1 h,采用RNA干扰法沉默细胞HSP72基因表达,荧光定量PCR和Western blot... 灯盏乙素(Scu)为灯盏花中提取的单一黄酮类化合物,具有清热解毒和保护细胞免受热应激损伤的作用。试验将不同浓度Suc培养的猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)在42℃下热应激1 h,采用RNA干扰法沉默细胞HSP72基因表达,荧光定量PCR和Western blot检测细胞热休克蛋白(HSP)70、Bcl-2、Bax、细胞色素C(Cyt-c)和caspase-3裂解。结果表明,Scu显著增加细胞Bcl-2蛋白和HSP70蛋白水平,增加Bcl-2/Bax比值,抑制Cyt-c的释放及pro-caspase-3裂解和caspase-3表达;但沉默HSP70后,细胞Cyt-c释放和caspase-3表达均显著增加。由此可知,Scu抑制LLC-PK1凋亡,保护细胞免受热应激损伤。 展开更多
关键词 灯盏乙素 llcpk1 凋亡 热应激 HSP70
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LLC-PK1/BCRP细胞系的建立及其生物学特征 被引量:2
9
作者 田野 屈伯宣 +1 位作者 姚艳 曾苏 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1599-1604,共6页
为建立表达乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)的猪肾小管上皮细胞系LLC-PK1/BCRP,利用脂质体转染的方法将表达载体质粒pcDNA3.1(+)-BCRP转入LLC-PK1细胞。G418筛选后,采用细胞群体倍增试验、流式细胞术和Western b... 为建立表达乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)的猪肾小管上皮细胞系LLC-PK1/BCRP,利用脂质体转染的方法将表达载体质粒pcDNA3.1(+)-BCRP转入LLC-PK1细胞。G418筛选后,采用细胞群体倍增试验、流式细胞术和Western blotting等方法鉴定构建的细胞系。利用体外细胞毒实验检测转基因细胞系对米托蒽醌和阿霉素的耐药指数,荧光倒置显微镜检测其对荧光染料Hoechst 33342的外排作用并以GF120918为BCRP抑制剂观察抑制剂对BCRP外排荧光染料的逆转作用。结果表明,LLC-PK1/BCRP细胞表达BCRP蛋白升高;细胞群体倍增时间较亲本细胞略有延长;对米托蒽醌和阿霉素的耐药指数分别提高了51.95倍和6.09倍;对荧光染料Hoechst 33342的外排作用明显增强,且可被抑制剂GF120918逆转。因此,表达BCRP的猪肾小管上皮细胞系LLC-PK1/BCRP构建成功,可作为进一步研究BCRP生物学特征的模型。 展开更多
关键词 乳腺癌耐药蛋白 llc-pk1 BCRP 多药耐药
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生物人工肾小管对多器官功能衰竭细胞因子及存活时间的影响 被引量:1
10
作者 王笑云 王恒进 +2 位作者 应旭旻 毛慧娟 沈霞 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期286-289,共4页
目的研究用细胞株(LLC-PK1)构建的生物人工肾小管装置(RAD)对多器官功能衰竭(MOF)猪白介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)α及存活时间的影响。方法ARF并MOF猪随机分为3组:(1)RAD组(A组,n=5):将RAD与血滤器相连,行连续静脉静脉血液滤过(CV... 目的研究用细胞株(LLC-PK1)构建的生物人工肾小管装置(RAD)对多器官功能衰竭(MOF)猪白介素(IL)-10、肿瘤坏死因子(TNF)α及存活时间的影响。方法ARF并MOF猪随机分为3组:(1)RAD组(A组,n=5):将RAD与血滤器相连,行连续静脉静脉血液滤过(CVVH)治疗24h;(2)假RAD组(B组,n=5):将RAD换为无细胞的假RAD,余与A组同;(3)未治疗组(C组,n=6)。观察血压、肝肾功能、血气、血IL-10、TNF-α(用特异性猪IL-10、TNF-α抗体检测)和生存时间。结果(1)A组治疗24h低血压状况显著改善;4~20h精神状态明显好转。(2)血IL-10(pg/ml)的峰值A组明显高于B、C组(241.40±86.64比106.30±9.69、102.59±10.21,P<0.05)。(3)血TNF-α(pg/ml)A组治疗后较治疗前明显降低(415.30±34.83比526.67±40.08,P<0.05);B、C两组无明显变化。(4)A组生存时间为(110.25±18.69)h,明显长于B组(81.20±11.76)h和C组(74.96±23.00)h(P<0.05),A组比B、C组分别延长了35.8%、47.1%。结论用RAD治疗明显改善了MOF猪低血压,升高血IL-10、降低TNF-α及延长存活时间。 展开更多
关键词 生物人工肾小管 多器官功能衰竭 细胞因子 存活时间 llc-pk1 RAD 肿瘤坏死因子α
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氧化应激介导达氟沙星诱导LLC-PK1细胞周期阻滞 被引量:1
11
作者 李玉娟 代佳娣 +2 位作者 张大生 孙志良 刘兆颖 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期388-395,共8页
目的探讨达氟沙星诱导LLC-PK1细胞氧化应激后细胞损伤的分子机制。方法不同浓度的达氟沙星处理LLCPK1细胞后,通过WST-1法检测细胞增殖抑制情况,DHE、Amplex Ultra Red法分别检测超氧阴离子自由基(O2·-)、H2O2含量,Rhodamine123法... 目的探讨达氟沙星诱导LLC-PK1细胞氧化应激后细胞损伤的分子机制。方法不同浓度的达氟沙星处理LLCPK1细胞后,通过WST-1法检测细胞增殖抑制情况,DHE、Amplex Ultra Red法分别检测超氧阴离子自由基(O2·-)、H2O2含量,Rhodamine123法检测线粒体膜电位,流式细胞仪检测分析细胞周期及RT-PCR法检测细胞周期相关基因表达含量的变化。结果达氟沙星呈浓度依赖性的抑制LLC-PK1细胞的增殖、升高细胞内O2·-、H2O2含量、诱导细胞周期阻滞,但线粒体膜电位没有显著性下降。100μmol/L浓度达氟沙星处理LLC-PK1细胞后细胞出现G2期周期阻滞,ROS升高含量在自身抗氧化系统修复范围内,细胞并没有出现明显损伤;而浓度达到400μmol/L时细胞发生氧化应激出现可逆性的G1期细胞阻滞,此时细胞周期素抑制蛋白p53、p21、p27m RNA表达显著升高,LLC-PK1细胞对氧化应激造成的损伤进行修复。结论 400μmol/L浓度范围内的达氟沙星处理LLC-PK1细胞24h所致的氧化应激诱导细胞周期阻滞,细胞损伤在自身修复范围之内并未导致细胞凋亡。 展开更多
关键词 达氟沙星 llcpk1 氧化应激 肾毒性 细胞周期
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保元排毒丸对顺铂引起的LLC-PK1细胞凋亡干预作用研究 被引量:2
12
作者 葛信国 耿洁 陆平成 《肿瘤防治杂志》 2005年第24期1850-1853,共4页
目的:观察保元排毒丸对顺铂(DDP)所致猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)凋亡的影响。方法:LLC-PK1细胞分三组培养,空白血清组采用不含药血清进行培养,模型组分别以10和6μg/mL不同浓度的DDP进行培养,模型+含药血清组是在不同浓度的DDP基础上予... 目的:观察保元排毒丸对顺铂(DDP)所致猪肾小管上皮细胞(LLC-PK1)凋亡的影响。方法:LLC-PK1细胞分三组培养,空白血清组采用不含药血清进行培养,模型组分别以10和6μg/mL不同浓度的DDP进行培养,模型+含药血清组是在不同浓度的DDP基础上予以10%保元排毒丸含药血清进行培养。培养24h后分别以荧光显微镜、电镜、流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:与空白血清组比较,荧光显微镜下模型组凋亡细胞增多,而模型+含药血清组凋亡细胞数明显减少;电镜下模型组细胞受损明显,而模型+含药血清组细胞形态基本正常。流式细胞仪检测细胞凋亡率,空白对照组为2·45%;各DDP组明显增加,10μg/mL组和6μg/mL组分别为31·80%和30·98%,与空白对照组比较差异有统计学意义,P<0·001;各含药血清组明显减少,DDP10μg/mL+含药血清组和DDP6μg/mL+含药血清组分别为15·21%和14·27%,与相应模型组比较差异有统计学意义,P<0·001。模型组bcl-2基因及突变型p53基因的表达均明显降低,相应含药血清组的表达均有所上调。结论:保元排毒丸能减轻顺铂所致LLC-PK1细胞的凋亡,上调凋亡抑制基因bcl-2和突变型p53,可预防或降低顺铂引起的肾毒性。 展开更多
关键词 顺铂 肾小管上皮细胞 保元排毒丸 凋亡
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转化生长因子在FK506肾毒性机制中的作用 被引量:1
13
作者 马萍 陈家存 谢叔良 《徐州医学院学报》 CAS 2001年第1期24-26,共3页
目的 探讨转化生长因子 (TGF - β)在FK5 0 6肾毒性机制中的作用。 方法 体外培养肾小管细胞株 ,细胞增殖以3H -thymidine掺入法测定。培养液中TGF - β含量用ELISA法测定。 结果 ①FK5 0 6以浓度依赖方式抑制肾小管细胞的增殖 ,当FK... 目的 探讨转化生长因子 (TGF - β)在FK5 0 6肾毒性机制中的作用。 方法 体外培养肾小管细胞株 ,细胞增殖以3H -thymidine掺入法测定。培养液中TGF - β含量用ELISA法测定。 结果 ①FK5 0 6以浓度依赖方式抑制肾小管细胞的增殖 ,当FK5 0 6浓度为 0 .0 1μmol/L和 10 μmol/L时 ,细胞增殖分别为对照组的 95 %± 7%和 2 0 %± 3% ;②FK5 0 6促进肾小管细胞产生TGF - β ;当FK5 0 6浓度为 0、1、5 μmol/L时 ,TGF - β含量分别为 (4 88.0 3±46 .70 )ng/L、(70 2 .16± 46 .83)ng/L、(6 77.73± 2 4.15 )ng/L ;③外源性TGF - β也以浓度依赖方式抑制肾小管细胞的增殖 ,在 5 μg/L时达最大抑制 ,为对照组的 32 %± 2 %。 结论 促进肾小管细胞TGF - β的过度产生是FK5 0 展开更多
关键词 FK506 转化生长因子 细胞培养 肾小管细胞 肾毒性
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镉通过氧化应激机制诱导LLC-PK1细胞损伤 被引量:2
14
作者 方鑫 李海玲 安彩艳 《中国医药科学》 2014年第3期34-36,共3页
目的探讨镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)毒性及氧化应激在其中的作用。方法用不同浓度的氯化镉刺激细胞9h和25μmol/L的氯化镉刺激细胞不同时间,采用Formazan分析细胞存活率反映镉对细胞的损伤程度;以还原型谷胱甘肽(GSH)为靶点,... 目的探讨镉诱导猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)毒性及氧化应激在其中的作用。方法用不同浓度的氯化镉刺激细胞9h和25μmol/L的氯化镉刺激细胞不同时间,采用Formazan分析细胞存活率反映镉对细胞的损伤程度;以还原型谷胱甘肽(GSH)为靶点,影响GSH浓度的两个试剂BSO和NAC,观察镉诱导细胞损伤中氧化应激的作用。结果随着氯化镉染毒时间延长,细胞存活率下降,同样,随着剂量的增加,细胞的存活率逐渐也下降。同时BSO加重镉诱导的细胞损伤,NAC完全抑制镉诱导的细胞损伤。结论氯化镉对LLC-PK1细胞具有明显的毒性,细胞损伤是通过氧化应激介导,且与细胞内的谷胱甘肽的水平有着密切关系。 展开更多
关键词 氯化镉 猪肾近曲小管上皮细胞 氧化应激
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Mitochondria as the main source of vanadyl acetylacetonate-induced reactive oxygen species generation in renal epithelial cell lines
15
作者 侯聪聪 王刚 杨晓改 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2013年第1期77-80,共4页
In this study, we aimed to clarify the source of the reactive oxygen species (ROS) generation induced by vanadium compounds. We used vanadyl acetylacetonate (VO(acac)2), a highly effective agent in controlling h... In this study, we aimed to clarify the source of the reactive oxygen species (ROS) generation induced by vanadium compounds. We used vanadyl acetylacetonate (VO(acac)2), a highly effective agent in controlling hyperglycemia, to determine the source of ROS generation in two renal cell lines LLC-PK1 and MDCK. Four commonly fluorescent dyes were used to assess VO(acac)2-induced H202 and "02 production and their location. It demonstrated that VO(acac)2 can induce significant ROS generation in both LLC-PKI and MDCK cells, which were primarily derived from mitochondria. The results obtained in this study raised the possibility to reduce ROS level induced by vanadium compounds locally and thus avoid affecting its activity. 展开更多
关键词 VO(acac)2 MITOCHONDRIA Reactive oxygen species llc-pk1 cells MDCK cells
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α-亚麻酸对高糖损伤LLC-PK_1细胞的保护作用及其机制探讨 被引量:1
16
作者 姜明霞 郑锦锋 +4 位作者 虞伟 吕桂兰 许琦 周轶南 翟成凯 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期191-194,共4页
目的建立猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)的高糖损伤模型,观察α-亚麻酸(ALA)对高糖损伤LLC-PK1细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法 CCK-8试剂盒测定葡萄糖对LLC-PK1细胞增殖的影响,流式细胞术测定不同浓度ALA干预高糖损伤LLC-PK1的... 目的建立猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)的高糖损伤模型,观察α-亚麻酸(ALA)对高糖损伤LLC-PK1细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法 CCK-8试剂盒测定葡萄糖对LLC-PK1细胞增殖的影响,流式细胞术测定不同浓度ALA干预高糖损伤LLC-PK1的凋亡率和活性氧(ROS)含量。结果高糖环境可以抑制体外培养的LLC-PK1细胞的增殖,形成体外高糖损伤模型;经适当浓度(50~100μmol/L)的ALA干预后,前干预组和持续干预组细胞的凋亡率显著低于阳性对照组(P<0.05);当ALA浓度为10~100μmol/L时,持续干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05),当ALA浓度为50μmol/L时,前干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论高糖损伤LLC-PK1模型为研究DN肾小管上皮细胞的防治干预提供了良好的体外研究平台,ALA有望成为预防肾小管高糖损伤的保护剂,减少活性氧的产生可能是ALA保护肾小管上皮细胞的作用机制之一。 展开更多
关键词 Α-亚麻酸 高糖损伤 猪肾近曲小管上皮细胞
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马兜铃酸I诱导的LLC-PK1细胞凋亡及其意义 被引量:55
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作者 高瑞通 郑法雷 +4 位作者 刘彦信 郑德先 李雪梅 薄玉红 刘音 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期162-165,共4页
目的探讨在体外条件下马兜铃酸I(AAI)能否诱导肾小管上皮细胞发生凋亡及发生凋亡的条件。方法应用光镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinVFlous凋亡检测试剂盒鉴定细胞凋亡,应用流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果0... 目的探讨在体外条件下马兜铃酸I(AAI)能否诱导肾小管上皮细胞发生凋亡及发生凋亡的条件。方法应用光镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinVFlous凋亡检测试剂盒鉴定细胞凋亡,应用流式细胞仪测定凋亡细胞比例。结果002g/L,004g/L,008g/L的AAI作用24小时可明显诱导LLCPK1细胞凋亡,001g/L的AAI无此作用。随AAI浓度的增高,凋亡细胞比例增加。结论在体外条件下一定浓度的AAI能诱导LLCPK1细胞发生凋亡,其作用与浓度有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 llc-pk1细胞系 马兜铃酸 肾间质纤维化
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马兜铃酸Ⅰ致肾小管上皮细胞DNA损伤的实验研究 被引量:20
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作者 李瑛 刘志红 +4 位作者 郭啸华 苏健 陈朝红 周虹 黎磊石 《肾脏病与透析肾移植杂志》 CAS CSCD 2004年第1期7-12,共6页
目的:研究马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致肾小管上皮细胞(LLC-PK1细胞)DNA损伤和对细胞周期的影响,并探讨其与P53途径的关系。 方法:不同浓度的AAⅠ纯品(80、160、320、640和1280ng/ml)体外刺激LLC-PK1细胞24h,采用单细胞凝胶电泳和流式细胞仪观... 目的:研究马兜铃酸Ⅰ(AAⅠ)致肾小管上皮细胞(LLC-PK1细胞)DNA损伤和对细胞周期的影响,并探讨其与P53途径的关系。 方法:不同浓度的AAⅠ纯品(80、160、320、640和1280ng/ml)体外刺激LLC-PK1细胞24h,采用单细胞凝胶电泳和流式细胞仪观察AAⅠ对LLC-PK1细胞DNA损伤和细胞周期的影响。用免疫荧光染色和流式细胞仪检测小管上皮细胞P53蛋白的表达。 结果:单细胞凝胶电泳实验发现 AAⅠ浓度为160,320,640和1280ng/ml时能导致LLC-PK1细胞产生彗星拖尾现象,且剂量越大,拖尾越明显,尾长和尾部荧光值与对照组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01)。此剂量的AAI使LLC-PK1细胞在G2/M期的比例明显增高,且剂量越大,增高越明显,与对照组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01)。各组小管上皮细胞P53蛋白的表达无明显差异(P>0.05)。 结论:AAⅠ可导致LLC-PK1细胞DNA损伤,使细胞周期阻滞在G2/M期,这可能是马兜铃酸肾毒性损伤后肾小管上皮细胞再生修复能力差和形成泌尿道肿瘤的机制之一。AAⅠ对LLC-PK1细胞DNA损伤和细胞周期阻滞作用是非P53依赖的,具体机制有待进一步研究。 展开更多
关键词 马兜铃酸Ⅰ 肾小管上皮细胞 DNA损伤 细胞周期 单细胞凝胶电泳 流式细胞仪 肾功能衰竭
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绞股蓝黄酮对氧化受损LLC-PK1细胞的保护作用 被引量:17
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作者 蔺曼 王玉荣 +2 位作者 翟新房 邢韶芳 朴香兰 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1193-1200,共8页
利用色谱法从绞股蓝中分离得到4个黄酮类化合物,通过MS及NMR分别被鉴定为槲皮素-3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷(1)、槲皮素-3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-(2″-α-L-鼠李糖基)-... 利用色谱法从绞股蓝中分离得到4个黄酮类化合物,通过MS及NMR分别被鉴定为槲皮素-3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷(1)、槲皮素-3-O-(2″,6″-α-L-二鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、槲皮素-3-O-(2″-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃半乳糖苷(3)和槲皮素-3-O-(2″-α-L-鼠李糖基)-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)。其中化合物1~3为首次从葫芦科中分离得到。这4个黄酮化合物体外对DPPH,·OH和■自由基均有较强的清除作用,尤其是对DPPH自由基的清除能力,IC_(50)分别为71.4,29.5,48.3,79.2μmol·L^(-1)。此外,这4个黄酮化合物对AAPH诱导氧化受损的猪肾小管上皮LLC-PK1细胞具有保护作用,抑制细胞丙二醛(MDA)的升高及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的减少。尽管还需要进一步的研究来证明其在体内和临床试验中的有效性,但这项研究为在绞股蓝中寻找潜在的抗氧化剂提供了可能。 展开更多
关键词 绞股蓝 黄酮 llc-pk1细胞 氧化损伤
原文传递
中药连翘体外抗氧化作用的研究 被引量:10
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作者 朴香淑 朴香兰 +1 位作者 洪承权 刘同祥 《中央民族大学学报(自然科学版)》 2008年第1期77-80,共4页
本文采用活性跟踪组分(bioassay-linked fractionation)方法确定连翘中的有效部位.用二苯代苦味肼基自由基[1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)]消除实验及SIN-1诱导肾上皮细胞LLC-PK1氧化损伤的保护实验方法,对连翘的甲醇提取物及其... 本文采用活性跟踪组分(bioassay-linked fractionation)方法确定连翘中的有效部位.用二苯代苦味肼基自由基[1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)]消除实验及SIN-1诱导肾上皮细胞LLC-PK1氧化损伤的保护实验方法,对连翘的甲醇提取物及其二氯甲烷、正丁醇和水的萃取物进行抗氧化作用评价.结果从连翘的正丁醇萃取物和二氯甲烷萃取物具有很强的抗DPPH自由基的抗氧化活性,其半数有效值IC50分别为79.69和27.75μg/mL.尤其是二氯甲烷萃取物具有最强的抗氧化活性(P<0.05).而且这两个有效部位浓度依赖性地恢复因SIN-1处理而降低的细胞生存能力(P<0.01),进而说明它们对细胞氧化损伤起到保护作用. 展开更多
关键词 连翘 抗氧化 DPPH SIN-1 llc-pk1细胞
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