Wnt／LRP5／β-catenin信号通骨质疏松发病中的作用路在绝经后 被引量：7

1

作者 王燕 刘岩 +2 位作者 马剑侠 李宝新 李玉坤 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期769-772,共4页

目的探讨Wnt／LRP5／β-catenin信号通路在绝经后骨质疏松发病中的作用。方法选取50只6月龄雌性Wistar大鼠，随机分为对照组（n=24）和去卵巢组（n=26），去卵巢组大鼠行双侧卵巢切除术，对照组打开大鼠腹腔后不作任何处理即缝合。去卵... 目的探讨Wnt／LRP5／β-catenin信号通路在绝经后骨质疏松发病中的作用。方法选取50只6月龄雌性Wistar大鼠，随机分为对照组（n=24）和去卵巢组（n=26），去卵巢组大鼠行双侧卵巢切除术，对照组打开大鼠腹腔后不作任何处理即缝合。去卵巢后0、4和8周分别测定两组大鼠血雌二醇水平和骨密度，4和8周用逆转录-PCR技术检测骨组织中低密度脂蛋白受体相关蛋白5（LRP5）、β连环蛋白（p-catenin）及骨形成关键基因——runt相关基因2（Runx2）mRNA的表达。结果去卵巢组大鼠术后4和8周，出现雌二醇水平明显下降，术后4周时为（92±15）pmol／L，对照组为（117±29）pmol／L；术后8周时为（95±22）pmol／L，对照组为（114±15）pmol／L；两组分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。术后4周时去卵巢组骨密度为（0．076±0．016）g／cm^2，对照组为（0．098±0．016）g／cm^2；术后8周时去卵巢组为（0．052±0．013）g／cm^2，对照组为（0．095±0．028）g／cm^2；两组分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）。去卵巢组大鼠术后4周骨组织中LRP5、β-catenin和Runx2mRNA表达水平明显减少，分别为0．97±0．04、0．58±0．05、0．86±0．03，对照组为1．02±0．06、1．04±0．05、1．07±0．21，两组各指标分别比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Wnt／LRP5／β-catenin信号通路抑制可能是绝经后骨质疏松重要发病机制之一。 展开更多

关键词 骨质疏松 绝经后 Β连环素 ldl受体相关蛋白质类 核心结合因子α1亚 基 雌二醇

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高糖对足细胞表达结缔组织生长因子及其受体蛋白的调节 被引量：4

2

作者 李永强 肖跃飞 +2 位作者 黄海长 李惊子 袁维中 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期262-265,共4页

目的:研究长期高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体———低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及可能涉及的信号途径。方法:以体外培养的小鼠肾小球足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖刺激不... 目的:研究长期高糖对体外培养的足细胞表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体———低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及可能涉及的信号途径。方法:以体外培养的小鼠肾小球足细胞为研究对象,应用Western印迹分析技术,检测高糖刺激不同时间对足细胞表达CTGF蛋白的影响。观察高糖对丝裂素激活蛋白激酶(MAPKS)信号途径活化的影响以及MAPKS信号途径在高糖调节足细胞表达CTGF中的作用,同时检测高糖对足细胞CTGF的受体LRP蛋白的影响。结果:体外培养足细胞表达基础水平的CTGF蛋白,高糖刺激2天后足细胞表达CTGF水平开始升高,第4天达高峰,第6天下降,第8天降至对照组水平。正常糖和甘露醇组CTGF蛋白没有明显变化。高糖可以激活足细胞外信号调节激酶(ERK1/2),于刺激30min时ERK1/2即开始活化,6h达高峰,持续至24h,48h接近基础水平。正常糖和甘露醇在各个时间点均不活化ERK1/2。应用ERK1/2活化特异抑制剂PD98059可以消减高糖刺激CTGF表达增加的效应。在各个时间点,长期高糖环境对足细胞CTGF的受体LRP蛋白没有明显作用。结论:短期(2～4d)高糖通过活化ERK1/2信号通路刺激足细胞CTGF的表达,高糖继续培养(6～8d)对足细胞内的CTGF蛋白表达水平没有影响。长期高糖环境对足细胞上CTGF的受体LRP蛋白的表达无影响。 展开更多

关键词 高糖 结缔组织生长因子 ldl受体相关蛋白质类 足细胞

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重症肌无力患者血清低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体的检测及其临床意义 被引量：4

3

作者 李媛 楚兰 +7 位作者 张艺凡 蔡刚 贺电 徐竹 朱英武 况时祥 夏聪 高洁 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期980-983,共4页

目的检测重症肌无力（MG）患者血清低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体（LRP4-ab）含量，并分析该抗体阳性患者的临床特点。方法共纳入116例MG确诊患者为病例组，40例其他神经免疫疾病患者及40名健康体检者为对照组，采用细胞分析的方法检测... 目的检测重症肌无力（MG）患者血清低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体（LRP4-ab）含量，并分析该抗体阳性患者的临床特点。方法共纳入116例MG确诊患者为病例组，40例其他神经免疫疾病患者及40名健康体检者为对照组，采用细胞分析的方法检测LRP4-ab。结果（1）病例组中共发现LRP4-ab阳性患者2例（1．7％）。所有对照组血清中均未发现LRP4-ab。（2）LRP4-ab阳性MG患者均为同一居住地的年轻女性；分型为OssermanI型，且伴有胸腺异常；经乙酰胆碱酯酶抑制剂及小剂量糖皮质激素治疗后均获得稳定缓解。结论发现2例LRP4-ab阳性的MG患者，提示MG可能存在着另一种发病机制。同时，根据该类患者的免疫学特点采用个体化的治疗方案可能对临床诊疗有着重要意义。 展开更多

关键词 重症肌无力 ldl受体相关蛋白质类 自身抗体

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成人抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体阳性重症肌无力患者的临床特点分析 被引量：4

4

作者 雷霖 李尊波 +9 位作者 沈发秀 刘晴 张雪萍 范志荣 苏圣尧 卢岩 邸丽 王敏 朵建英 笪宇威 《中华神经科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期85-91,共7页

目的探究血清抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体(LRP4-ab)阳性在成人重症肌无力(MG)患者中的发生情况,并总结LRP4-ab阳性MG患者临床特点及对治疗的反应和预后。方法纳入首都医科大学宣武医院MG数据库中于2017年2月至2018年12月入库的成人... 目的探究血清抗低密度脂蛋白受体相关蛋白4抗体(LRP4-ab)阳性在成人重症肌无力(MG)患者中的发生情况,并总结LRP4-ab阳性MG患者临床特点及对治疗的反应和预后。方法纳入首都医科大学宣武医院MG数据库中于2017年2月至2018年12月入库的成人MG(起病年龄≥18岁)患者共355例,采用商用放射免疫测定法检测其血清中乙酰胆碱受体抗体(AChR-ab)和骨骼肌特异性酪氨酸激酶抗体,采用基于细胞底物的实验方法检测LRP4-ab。回顾性分析其中LRP4-ab阳性MG患者的临床特点、对治疗的反应和预后,并与同期入库的LRP4-ab阴性MG患者进行比较。结果355例成人MG患者中,有13例(3.7%)患者血清LRP4-ab阳性,且均同时AChR-ab阳性;男女性别比为2.3∶1,平均起病年龄54岁。其中5例行胸腺手术,病理证实3例为胸腺瘤,2例为胸腺增生。LRP4-ab阳性和阴性MG患者在起病症状、AChR-ab滴度、球肌无力、呼吸肌无力、胸腺瘤和病情最重时的美国重症肌无力基金会(MGFA)临床分型方面差异均无统计学意义,但LRP4-ab阳性MG患者中MGFA分型为Ⅲ型者(病情最重时)的比例明显高于阴性患者[分别为8/13和26.9%(7/26),P=0.08]。13例LRP4-ab阳性患者经治疗后,10例病情缓解,3例临床明显改善,与LRP4-ab阴性患者无明显差异。结论本组MG患者的LRP4抗体阳性率为3.7%,LRP4抗体阳性MG的临床特点与阴性者无明显差别。 展开更多

关键词 重症肌无力 ldl受体相关蛋白质类 受体 胆碱能

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不同月龄大鼠大脑中低密度脂蛋白受体相关蛋白的表达 被引量：3

5

作者 郭军红 蒲传强 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2005年第1期56-58,共3页

目的　探讨不同月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP 1)表达的变化。方法　雄性SD大鼠 15只 ,流式细胞技术检测并计算 1,3,10月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体匀浆单细胞悬液LRP 1表达的平均荧光指数 ;免疫组... 目的　探讨不同月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP 1)表达的变化。方法　雄性SD大鼠 15只 ,流式细胞技术检测并计算 1,3,10月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体匀浆单细胞悬液LRP 1表达的平均荧光指数 ;免疫组织化学技术测定大脑海马CA1区神经细胞、微血管LRP 1表达 ,并应用MIAS图像分析系统进行平均吸光度测定。结果　流式细胞研究显示 ,大鼠海马 1、3月龄LRP 1表达强度均显著高于 10月龄大鼠 ;而额叶及纹状体各月龄组间差异无显著性意义。 1、3月龄大鼠海马区LRP 1表达强度均显著高于额叶及纹状体。免疫组织化学结果显示 ,LRP 1在海马CA1区微血管、神经细胞均有表达。随着月龄的增加 ,LRP 1在微血管的表达显著下降 ,而在海马CA1区神经细胞的表达各月龄组差异无显著性意义。结论　随着月龄的增加 ,海马区LRP 1的表达有下降趋势 ,尤其是海马CA1区微血管LRP 1的表达显著下降。 展开更多

关键词 大脑 海马 ldl受体相关蛋白质类 流式细胞术 大鼠

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Sclerostin／Lrp4调节血管平滑肌细胞钙化的机制研究 被引量：3

6

作者 王健 邱小波 +4 位作者 盛子桐 徐天华 杜银科 王力宁 姚丽 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期208-213,共6页

目的探讨sclerostin／Lrp4在高磷诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth musclecell，VSMC）钙化过程中的可能机制及银杏叶提取物的保护作用。方法提取SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞并鉴定，分为正常对照组，高磷诱导钙化组（10mmol／L β... 目的探讨sclerostin／Lrp4在高磷诱导血管平滑肌细胞（vascular smooth musclecell，VSMC）钙化过程中的可能机制及银杏叶提取物的保护作用。方法提取SD大鼠主动脉血管平滑肌细胞并鉴定，分为正常对照组，高磷诱导钙化组（10mmol／L β-甘油磷酸钠＋50μg／ml抗坏血酸），高磷诱导钙化＋银杏叶提取物干预组（10mmol／L β-甘油磷酸钠＋50μg／ml抗坏血酸＋0．5mg／ml银杏叶提取物），培养基诱导干预14d。VONKOSSA染色、茜素红染色检测各组VSMC钙化情况，实时定量PCR检测β-catenin、骨钙素（bone gamma carboxyglutamic acid containing proteins，BGP）的mRNA表达，Western印迹检测sclerostin、Lrp4的蛋白表达。结果VONKOSSA染色、茜素红染色均显示，与正常对照组相比，高磷诱导VSMC钙化组有明显的钙盐沉积，银杏叶提取物干预组钙盐沉积较钙化组明显减少。实时定量PCR结果显示高磷诱导VSMC钙化组B—catenin、BGP的mRNA表达明显高于正常对照组（均P〈0．05）。银杏叶提取物干预组B．catenin、BGP的mRNA表达明显低于钙化组（均P〈0．05）。Western印迹结果显示，高磷诱导VSMC钙化组sclerostin蛋白表达明显高于正常对照组（P〈0．05），Lrp4蛋白表达明显低于正常对照组（P〈0．05）。银杏叶提取物干预组sclerostin蛋白表达明显低于钙化组（P〈0．05），Lrp4蛋白表达明显高于钙化组（P〈0．05）。结论高磷可通过激活Wnt／β-catenin信号通路诱导VSMC钙化，Sclerostin／Lrp4参与了高磷诱导的VSMC钙化过程，而银杏叶提取物可通过抑制Wnt／β．catenin信号通路减轻高磷诱导的VSMC钙化。 展开更多

关键词 肾功能不全 慢性 钙质沉积 ldl受体相关蛋白质类 骨硬化蛋白 Wnt/β-连环蛋白 银杏叶提取物

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转化生长因子β_1对人胚肺成纤维细胞结缔组织生长因子及低密度脂蛋白受体相关蛋白表达的影响

7

作者 王艳 刘新民 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期506-509,共4页

目的:探讨体外培养人胚肺成纤维细胞(human pulmonary fibroblasts-1,HPF-1)在外源性转化生长因子β1(transforming growth factor beta,TGF-β1)作用下结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)与低密度脂蛋白受体相关... 目的:探讨体外培养人胚肺成纤维细胞(human pulmonary fibroblasts-1,HPF-1)在外源性转化生长因子β1(transforming growth factor beta,TGF-β1)作用下结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)与低密度脂蛋白受体相关蛋白(low density lipoprotein receptor related proteins,LRP)的表达变化及意义。方法:将HPF-1用5μg/L的TGF-β1分别作用0,3,6,12和24h。用RT-PCR方法检测CTGF及LRP mRNA的表达;用蛋白免疫印迹检测LRP蛋白表达变化;用免疫沉淀方法检测TGF-β1作用不同时间,与LRP结合的CTGF的数量变化;用细胞免疫荧光检测细胞中LRP表达情况。结果:相关分析显示,以3h为关键点,CTGF mRNA(131.53±2.86)与LRPmRNA(224.87±7.00)表达变化具有正相关性(r=0.8402,P<0.05);LRP蛋白随TGF-β1作用时间不同,表达水平先升高,于3h达高峰,而后逐渐下降,用免疫印迹法分析,相对于0h组(190.85±2.86),3h组(222.45±3.66)表达具有统计学意义(F=18.06,P<0.05);用免疫荧光标记细胞LRP也得到类似的结果,比较0h组(27.56±6.72)和3h组(88.66±15.72)LRP蛋白表达(F=244.36,P<0.01)差异具有统计学意义。结论:LRP作为CTGF的受体蛋白,在TGF-β1作用不同时间的情况下,表达量发生变化,并与CTGF的表达成正相关,提示其在肺间质纤维发生中发挥作用。 展开更多

关键词 转化生长因子Β 结缔组织生长因子 ldl受体相关蛋白质类 成纤维细胞

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二氢睾酮通过下调LOX-1的表达抑制J774．1细胞向泡沫细胞转化 被引量：1

8

作者 邱阳 胡海地 +6 位作者 胡冰青 陈晓雅 徐品一 崔磊 厉平 刘聪 李玲 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第42期3403-3407,共5页

目的探讨雄激素二氢睾酮（DHT）对雌性巨噬细胞系J774．1细胞的植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）表达及泡沫细胞形成的影响。方法体外培养J774．1细胞，通过氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）诱导巨噬细胞向泡沫细胞转化，采用1&#... 目的探讨雄激素二氢睾酮（DHT）对雌性巨噬细胞系J774．1细胞的植物血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1（LOX-1）表达及泡沫细胞形成的影响。方法体外培养J774．1细胞，通过氧化低密度脂蛋白（OX—LDL）诱导巨噬细胞向泡沫细胞转化，采用1×10^-9mol／L和1×10^-8mol／L浓度的DHT进行预处理，提取细胞mRNA及蛋白行实时定量PCR及Western印迹法检测LOX-1mRNA及蛋白表达，油红O染色观察泡沫细胞形态，按照泡沫细胞数／视野及每个视野中油红染色的颗粒面积进行定量分析。结果与对照组（加入乙醇）相比，ox—LDL明显增加J774．1细胞的LOX-1mRNA（4．71±0．31比1．00±0．06）及蛋白（1．75±0．11比1．04±0．04）相对表达水平（均P〈0．01）。应用1×10^-9mol／L和1×10^-9mol／L浓度的DHT可以降低ox-LDL诱导的LOX-1mRNA（2．81±0．46、2．29±0．21比4．71±0．31，均P〈0．05）和蛋白表达水平（1．35±0．06、1．09±0．04比1．75±0．11，均P〈0．05）。这种作用可通过雄激素受体（AR）阻滞剂逆转87．6％（P=0．004）。油红O染色表明ox—LDL明显增加泡沫细胞形成（45．9±3．7比0．0±0．0，P〈0．01）。应用1×10^-9mol／L和1×10^-8mol／L浓度的DHT可以抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成（泡沫细胞数／视野定量分析：36．0±3．0、29．1±1．3比45．9±3．7，均P〈0．05；油红O相对染色面积定量分析：7983±1035、4060±390比14750±2489，均P〈0．05）。结论1×10^-9mol／L和1×10^-8mol／L浓度的DHT通过AR可以减少雌性巨噬细胞系J774．1细胞的LOX-1表达，并抑制J774．1细胞向泡沫细胞转化。 展开更多

关键词 双氢睾酮 雌性巨噬细胞 ldl受体相关蛋白质类 泡沫细胞 动脉粥样硬化

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苯扎贝特对内皮细胞LOX-1及抗凋亡基因Bcl-2影响

9

作者 薛丽霞 屈巧芳 +1 位作者 张国红 申晓彧 《中国药物与临床》 CAS 2008年第4期290-293,共4页

目的研究苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血凝素氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)及抗凋亡基因Bcl-2的影响。方法体外培养HUVECs,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组LOX-1及Bcl-2 mRNA的变化,West... 目的研究苯扎贝特对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)作用的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血凝素氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)及抗凋亡基因Bcl-2的影响。方法体外培养HUVECs,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察各组LOX-1及Bcl-2 mRNA的变化,Western-blot方法观察各组Bcl-2蛋白的变化。结果ox-LDL组与正常对照组比较LOX-1表达显著增加(P<0.05),抗凋亡基因Bcl-2表达降低(P<0.05),苯扎贝特组LOX-1 mRNA表达减少(P<0.05),Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05)且呈浓度效应依赖关系。结论苯扎贝特可通过下调LOX-1的表达,上调抗凋亡基因Bcl-2表达从而抑制ox-LDL引起的内皮细胞凋亡。 展开更多

关键词 苯扎贝特 内皮细胞 脂蛋白类 ldl ldl受体相关蛋白质类 动脉硬化 基因 BEL-2

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高糖环境对人肾小球系膜细胞表达结缔组织生长因子及其受体蛋白的影响 被引量：6

10

作者 李学刚 刘海英 +3 位作者 柳刚 孙云 李娟 关广聚 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第6期99-102,106,共5页

目的探讨高糖环境对体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC)表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体——低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及相应的信号机制。方法以体外培养的HMC为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)测定... 目的探讨高糖环境对体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC)表达结缔组织生长因子(CTGF)及其受体——低密度脂蛋白受体相关蛋白(LRP)的影响以及相应的信号机制。方法以体外培养的HMC为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ABC-ELISA)测定正常糖组(NG组)、高糖组(HG组)和甘露醇组(MG组)培养液中CTGF、人磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)及LPR的浓度变化,分别观察高糖环境对系膜细胞CTGF蛋白表达、丝裂素激活蛋白激酶(MAPKS)信号通路的活化以及CTGF受体LRP表达的影响。结果 HMC本身存在基础水平的CTGF蛋白表达,HG组培养1 d后,CTGF蛋白表达升高,峰值出现在第3天,自第4天开始下降;而NG组、MG组的CTGF蛋白表达未随时间发生显著变化;高糖环境下HMC外信号调节激酶(ERK)出现动态活化:1 h即开始检测到pERK升高,峰值出现在第8至24小时,于48 h内降至基础水平,而NG组、MG组在各时点均未能检测到pERK表达;加入ERK活化特异抑制剂PD98059后发现高糖环境对HMC表达CTGF蛋白增加的影响被抵消;另外,高糖环境未影响LRP的表达。结论 高糖环境下HMC表达CTGF蛋白增加,但未增加CT-GF受体LRP的表达,初步明确CTGF的高表达是通过磷酸化激活ERK实现的。 展开更多

关键词 高糖 结缔组织生长因子 ldl受体相关蛋白质 人肾小球系膜细胞

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前蛋白转化酶枯草溶菌素9小分子干扰RNA对血管平滑肌细胞增殖的影响 被引量：4

11

作者 谭小青 阳军 +1 位作者 刘悟 邓志雄 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 2016年第7期734-738,共5页

目的研究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因沉默后对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,初步探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)蛋白表达在其中的作用。方法建立PCSK9小分子干扰RNA(siRNA)模型,培养VSMC,分为空白对照组、阴性转染组... 目的研究前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)基因沉默后对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响,初步探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP-1)蛋白表达在其中的作用。方法建立PCSK9小分子干扰RNA(siRNA)模型,培养VSMC,分为空白对照组、阴性转染组和阳性转染组,选取转染效率最高的PCSK9siRNA对VSMC进行干预,分别于12、24、36、48、60h用MTT法测定吸光度(A)值,绘制增殖曲线,观察其对VSMC增殖的影响,转染48h后用Western blot印迹法检测细胞内LRP-1蛋白表达情况。结果与阴性转染组比较,阳性转染组24、36、48和60h的A值明显下降(P<0.05),PCSK9siRNA抑制VSMC的增殖(P<0.05)。与空白对照组和阴性转染组比较,阳性转染组LRP-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论 PCSK9siRNA能有效抑制VSMC的增殖作用,且这种作用可能与LRP-1蛋白表达上调有一定的关系。 展开更多

关键词 前蛋白转化酶类 RNA 小分子干扰 基因沉默 肌细胞 平滑肌 肌 平滑 血管 ldl受体相关蛋白质1

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慢性低氧对小鼠脑微血管内皮细胞RAGE和LRP-1表达的影响 被引量：3

12

作者 庄志清 闫福岭 《中华脑血管病杂志（电子版）》 2009年第1期4-8,共5页

目的研究慢性低氧状态下血脑屏障上β淀粉样蛋白(amyloid β,A β)转运体——晚期糖基化终产物受体(RAGE)及低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的变化。方法将鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)分别进行正常气体培养(正常对照组)以及24h、... 目的研究慢性低氧状态下血脑屏障上β淀粉样蛋白(amyloid β,A β)转运体——晚期糖基化终产物受体(RAGE)及低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的变化。方法将鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)分别进行正常气体培养(正常对照组)以及24h、36h及48h的低氧培养,用RT-PCR法和Western Blot法分别检测细胞RAGE和LRP-1mRNA和蛋白的表达。结果低氧24h组RAGE mRNA和蛋白表达低于正常对照组(P<0.05),低氧48h组RAGE mRNA和蛋白表达高于正常对照组(P<0.05),低氧24h、36h及48h组RAGE mRNA和蛋白表达呈时间依赖性增高(P<0.05);低氧各组LRP-1mRNA和蛋白表达较正常对照组降低,呈时间依赖性(P<0.05);RAGE/LRP-1mRNA和蛋白表达呈时间依赖性增高(P<0.05)。结论在慢性低氧状态下,血脑屏障BMVECs表达RAGE上调,LRP-1下调,RAGE/LRP-1比值增高,推测可能由此增加了Aβ的净入脑量。 展开更多

关键词 慢性低氧 脑微血管内皮细胞 血脑屏障 晚期糖基化终产物受体 低密度脂蛋白受 体相关蛋白-1

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小鼠Lrp5基因启动子的克隆及功能分析 被引量：3

13

作者 吕萍 龚瑶琴 +2 位作者 李江夏 周海斌 陈丙玺 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期72-77,共6页

为分析小鼠LDL受体相关蛋白 5 (Lrp5 )基因启动子的结构与功能 ,采用DNA重组技术 ,构建了 7种含小鼠Lrp5基因启动子荧光素酶报告基因表达体系 ,分别为 :pGL3 10 3(- 10 3bp～ + 132bp) ,pGL3 30 3(- 30 3bp～ + 132bp) ,pGL3 4 99(- 49... 为分析小鼠LDL受体相关蛋白 5 (Lrp5 )基因启动子的结构与功能 ,采用DNA重组技术 ,构建了 7种含小鼠Lrp5基因启动子荧光素酶报告基因表达体系 ,分别为 :pGL3 10 3(- 10 3bp～ + 132bp) ,pGL3 30 3(- 30 3bp～ + 132bp) ,pGL3 4 99(- 499bp～ + 132bp) ,pGL3 70 8(- 70 8bp～ + 132bp) ,pGL3 90 9(- 90 9bp～ + 132bp) ,pGL3 10 34(- 10 34bp～ + 132bp ) ,pGL3 12 2 9(- 12 2 9bp～ + 132bp) .以pRL TK为内参照质粒 ,瞬时转染成骨细胞株 (U2OS )及非成骨细胞株 (COS 7) ,收集细胞测定荧光素酶相对表达活性 .7种荧光素酶表达质粒在 2种细胞中表达无显著差异 ,即在所分析的小鼠Lrp5基因的 136 1bp(- 12 2 9bp～ + 132bp)范围内 ,不存在成骨细胞特异的表达元件 ;而且 7种表达质粒在 2种细胞中呈现相似的变化趋势 ,pGL3 10 3表达活性最高 ,pGL3 12 2 9表达活性显著降低 .表明小鼠Lrp5基因转录所必需的基本启动子序列在 - 10 3bp～ + 1bp范围内 ,- 10 34bp～ - 12 2 9bp之间的 195bp片段内可能含有负调控元件 . 展开更多

关键词 ldl受体相关蛋白5 小鼠 Lrp5基因 启动子 荧光素酶活性

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罗格列酮经LRP-1途径降低糖尿病大鼠脑微／小血管中β-淀粉样蛋白含量的研究 被引量：2

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作者 胥文娟 朱梅佳 +2 位作者 赵张宁 孙忠文 鲍梦馨 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第6期5-9,13,共6页

目的研究罗格列酮对不同病程糖尿病大鼠脑微/小血管中低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响及其清除β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)的机制。方法采用自发性2型糖尿病大鼠(GK大鼠)作为动物模型,将其按病程分为6月龄及3月龄2组,其中6月... 目的研究罗格列酮对不同病程糖尿病大鼠脑微/小血管中低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响及其清除β-淀粉样蛋白(Aβ1-40)的机制。方法采用自发性2型糖尿病大鼠(GK大鼠)作为动物模型,将其按病程分为6月龄及3月龄2组,其中6月龄组再随机分为罗格列酮干预组(DM6RSG组)和非干预组(DM6组),3月龄GK大鼠(DM3组)作为病程对照组;采用免疫组织化学法定位检测各组脑微/小血管上Aβ1-40及LRP-1的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组脑组织中Aβ1-40及LRP-1蛋白的表达量,RT-PCR定量检测脑组织中LRP-1mRNA的表达。结果与DM3组相比,DM6组Aβ1-40的表达明显增加(P<0.01);与DM6组相比,DM6RSG组Aβ1-40的表达明显减少(P<0.01),LRP-1和LRP-1mRNA的表达均明显增加(P均<0.05)。结论随糖尿病病程增长,Aβ1-40在脑微/小血管中沉积明显增多,罗格列酮可上调LRP-1和LRP-1mRNA的表达并明显减少Aβ1-40在糖尿病脑组织微/小血管中的沉积。 展开更多

关键词 糖尿病 大鼠 淀粉样Β蛋白 ldl受体相关蛋白质1 过氧化物酶增殖体激活受体Γ

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腺苷1型受体在糖尿病小鼠肾病早期megalin表达下调中的作用 被引量：2

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作者 田东丽 施潇潇 +4 位作者 王婧 彭晓艳 徐鲁斌 文煜冰 陈丽萌 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期120-125,共6页

目的观察腺苷1型受体（adenosine A1 receptor，A1AR）在1型糖尿病（diabetes mellitus，DM）小鼠模型早期肾小管megalin表达下调中的作用。方法选取周龄、基线体重及空腹血糖匹配的野生型C57BL／6J小鼠，实验前适应性饲养1周后随机分2... 目的观察腺苷1型受体（adenosine A1 receptor，A1AR）在1型糖尿病（diabetes mellitus，DM）小鼠模型早期肾小管megalin表达下调中的作用。方法选取周龄、基线体重及空腹血糖匹配的野生型C57BL／6J小鼠，实验前适应性饲养1周后随机分2组，对照组（n=6）和野生型DM组（n=6），另外同样方法选取雄性A1AR基因敲除C57BL／6J小鼠作为A1AR-/-DM组（n=6），通过腹腔注射链脲菌素建立1型DM模型，测定4周时血糖、体重及肾重量；代谢笼收集24h尿液测定尿总蛋白及尿白蛋白肌酐比；观察肾脏病理改变；免疫组化检测。肾脏megalin表达；Western印迹法检测肾脏组织caspase-1、IL-18及MAR的蛋白表达。结果4周时野生型DM组小鼠的血糖、体重、肾质量及尿白蛋肌酐比均显著高于对照组（P〈0．01）；肾脏病理表现为肾小球体积增大、系膜细胞增生、细胞外基质增多和肾小管肥大；位于近端小管刷状缘上的大分子多配体糖蛋白megalin表达显著降低并与24h尿蛋白量呈负相关（r=-0．645，P〈0．01）；野生型DM组小鼠caspase-1、IL-18及A1AR表达显著高于对照组（P〈0．05）。A1AR-/-DM组小鼠蛋白尿更重，肾脏病理损害更重，megalin降低更为显著，并伴有caspase．1更显著的增加。结论MAR在糖尿病小鼠肾病早期megalin表达中具有一定保护作用，机制可能与caspase一1焦亡信号通路相关，具体机制尚需进一步探索。 展开更多

关键词 糖尿病肾病 ldl受体相关蛋白质2 受体 腺苷A1 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1

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慢性低氧低糖培养对脑微血管内皮细胞RAGE和LRP-1表达的影响 被引量：1

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作者 郑莹 赵凤娣 闫福岭 《中国临床神经科学》 2008年第3期297-301,共5页

目的:研究慢性低氧低糖对小鼠血脑屏障(BBB)上晚期糖基化终产物受体(RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响。方法:将小鼠脑微血管内皮细胞系bEnd.3行不同时间的低氧低糖培养后,分别应用RT-PCR和Western blot方法检测细胞... 目的:研究慢性低氧低糖对小鼠血脑屏障(BBB)上晚期糖基化终产物受体(RAGE)和低密度脂蛋白受体相关蛋白-1(LRP-1)表达的影响。方法:将小鼠脑微血管内皮细胞系bEnd.3行不同时间的低氧低糖培养后,分别应用RT-PCR和Western blot方法检测细胞RAGE、LRP-1 mRNA和蛋白的表达。结果:与对照组相比,低氧低糖培养24、36和48 h组bEnd.3细胞RAGE mRNA和蛋白表达均明显增加(P<0.05),以48 h组最为显著。低氧低糖培养36和48 h组LRP-1 mRNA表达明显下降(P<0.05);24、36和48 h组LRP-1蛋白表达均显著下降(P<0.05);48 h组LRP-1 mRNA和蛋白表达降为最低。结论:慢性低氧低糖环境下,小鼠BBB上RAGE mRNA表达和蛋白表达水平升高,而LRP-1 mRNA表达和蛋白表达水平下降。 展开更多

关键词 脑微血管内皮细胞 低密度脂蛋白受体相关蛋白-1 晚期糖基化终产物受体 脑缺血 低氧 低糖

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代谢综合征与冠心病的载脂蛋白E基因多态性 被引量：3

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作者 尹巧香 侯晓平 +2 位作者 赵玉生 王建昌 缪京莉 《实用医学杂志》 CAS 2005年第1期32-34,共3页

目的:探讨代谢综合征(metabolicsyndrome,MS)与冠心病(coronaryarterydisease,CHD)的载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)基因多态性之间的关联。方法:将203例原发性高血压、糖尿病或原发性高血压合并糖尿病的患者分为代谢综合征组(按WHO定... 目的:探讨代谢综合征(metabolicsyndrome,MS)与冠心病(coronaryarterydisease,CHD)的载脂蛋白E(apolipoproteinE,ApoE)基因多态性之间的关联。方法:将203例原发性高血压、糖尿病或原发性高血压合并糖尿病的患者分为代谢综合征组(按WHO定义,MS+,n=96)和非代谢综合征组(MS-,n=107);冠心病组(CHD+,n=84)和非冠心病组(CHD-,n=119);代谢综合征合并冠心病(MS++CHD,n=55)及代谢综合征非合并冠心病组(MS+,n=39)。采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)确定特定ApoE片段基因型,应用荧光标记自动测序法测定PCR产物,确认单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphisms,SNPs)位点。结果:(1)MS组ApoEε4等位基因频率高于对照组(15.6%vs8.9%,P=0.038);(2)CHD组ε4等位基因频率显著高于对照组(16.8%vs8.8%,P=0.017);(3)MS+CHD组ε4等位基因频率显著高于对照组(21.8%vs7.3%,P=0.006);与之相反,MS+CHD组ε2等位基因频率显著低于对照组(0.9%vs8.5%,P=0.009)。(4)将PCR扩增产物直接测序,共检出2个SNP,均为T→C碱基转换,分别位于E4/E4PCR扩增产物序列的137和210碱基处。与RFLP法检测ApoE基因型相符。结论:ApoE基因的ε4等位基因是MS、CHD的危险因子,当MS合并CHD时这种趋势更加明显。而ApoE基因的ε2等位基因可能? 展开更多

关键词 CHD 代谢综合征 冠心病 MS Ε4等位基因 对照组 APOE基因 碱基 SNP PCR产物

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肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65与低密度脂蛋白受体相关蛋白关联蛋白的结合 被引量：1

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作者 靳更林 张建芝 +4 位作者 苏荣 刘晓颖 吴健 孟麟 寿成超 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期297-301,共5页

目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancerandembryoexpressionprotein65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索。方法: 以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法, 筛选人胚胎组织cDNA表达文库。... 目的:寻找与肿瘤及胚胎组织特异表达蛋白65(cancerandembryoexpressionprotein65,CEP65)相互结合的蛋白分子,为研究CEP65在肿瘤发生中的作用机制提供线索。方法: 以CEP65为诱饵蛋白,通过酵母双杂交方法, 筛选人胚胎组织cDNA表达文库。将获得的阳性克隆cDNA片段分别克隆到原核和哺乳细胞表达质粒,通过GSTpull down和免疫共沉淀对相互作用蛋白作进一步验证。结果: 筛选到能与CEP65相互结合的低密度脂蛋白受体相关蛋白产关联蛋白(lowdensitylipoproteinreceptor relatedprotein associatedprotein1,RAP)。将分别在原核和哺乳细胞中表达的RAP与CEP65进行GSTpull down实验,结果显示,原核表达的GST RAP可以与His CEP65相互结合,而在哺乳细胞共表达的GST CEP65和Myc RAP也能相互结合。结论:RAP可以和CEP65相结合,CEP65有可能通过与RAP相互作用,在肿瘤的浸润、转移及增生中发挥其功能。 展开更多

关键词 低密度脂蛋白受体相关蛋白 特异表达蛋白 胚胎组织 关联 protein CDNA表达文库 receptor 酵母双杂交方法 相互结合 哺乳细胞 CDNA片段 相互作用蛋白 免疫共沉淀 RAP GST 蛋白分子 作用机制 肿瘤发生 诱饵蛋白 表达质粒

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阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白可与低密度脂蛋白受体相关蛋白6直接作用 被引量：1

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作者 常磊 马康涛 张辶西蘅 《北京医科大学学报》 CSCD 2000年第4期366-369,共4页

目的 :研究低密度脂蛋白受体相关蛋白 6 (lowdensitylipoproteinreceptorrelatedprotein6 ,LRP6 )的胞内代谢及其与淀粉样前体蛋白 (amyloidprecursorprotein ,APP)的相关性。 方法 :构建含有APP羧基端 10 6个氨基酸的融合表达质粒 ,用... 目的 :研究低密度脂蛋白受体相关蛋白 6 (lowdensitylipoproteinreceptorrelatedprotein6 ,LRP6 )的胞内代谢及其与淀粉样前体蛋白 (amyloidprecursorprotein ,APP)的相关性。 方法 :构建含有APP羧基端 10 6个氨基酸的融合表达质粒 ,用酵母双杂交系统筛选人胎脑cDNA文库。结果 :发现LRP6的羧基端可以和含有 β淀粉样蛋白和胞内区的APP片段相互作用。结论 :使与AD相关的两个重要蛋白载脂蛋白E和APP联系起来 ,并提示LRP6可能在APP的代谢和 展开更多

关键词 早老性痴呆 淀粉样β前体蛋白 ldl LRP6

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LRP8在结直肠癌中的表达及临床意义

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作者 吴维智 徐晓平 +3 位作者 周洁 刘金沙 揭敏 刘展 《中国医师杂志》 CAS 2022年第5期682-686,共5页

目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,为结直肠癌患者的诊治及预后评估提供理论依据。方法收集湖南省人民医院2020年1月1日至2020年9月1日住院的结直肠癌患者手术切除标本... 目的探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白8(LRP8)在结直肠癌组织中的表达情况及其与临床病理特征之间的关系,为结直肠癌患者的诊治及预后评估提供理论依据。方法收集湖南省人民医院2020年1月1日至2020年9月1日住院的结直肠癌患者手术切除标本(术前未行放化疗及免疫治疗等辅助治疗措施)和相应的癌旁正常组织45例,采用免疫组化检测LRP8在结直肠癌及癌旁正常组织中的表达,并通过单因素logistic回归分析、Spearman相关性分析明确LRP8与结直肠癌患者临床特征的关系。结果免疫组化结果显示45例结直肠癌组织中LRP8蛋白高表达37例(82.22%),低表达8例(17.78%);45例癌旁正常组织中LRP8蛋白高表达17例(37.78%),低表达28例(62.22%);LRP8蛋白在结直肠癌组织和其癌旁正常组织中的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。χ^(2)检验发现LRP8蛋白的表达与结直肠癌的分期、神经侵犯、血管侵犯、癌胚抗原(CEA)、低密度脂蛋白有关(均P<0.05);与性别、年龄、肿瘤分化程度、Ki67、糖类抗原199(CA199)、淋巴结转移、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白无关(均P>0.05);经logistic回归分析发现,TNM分期、血管侵犯、神经侵犯及血清CEA、低密度脂蛋白水平均为结直肠癌患者LRP8高表达的影响因素(均P<0.05)。ApoB与肿瘤分期(r_(s)=-0.382)、淋巴结转移(r_(s)=-0.316)、血管侵犯(r_(s)=-0.311)存在弱的负相关(均P<0.05)。结论LRP8蛋白在结直肠癌组织中表达增加,其表达增加与结直肠癌的分期、神经血管侵犯、低密度脂蛋白水平存在相关性;LRP8高表达的患者,其肿瘤分期更差、更易并发神经及血管侵犯。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 ldl受体相关蛋白质8 因素分析 统计学

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