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Advances in immunotherapy for treatment of lung cancer 被引量:23
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作者 Jean G.Bustamante Alvarez María González-Cao +4 位作者 Niki Karachaliou Mariacarmela Santarpia Santiago Viteri Cristina Teixidó Rafael Rosell 《Cancer Biology & Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期209-222,共14页
Different approaches for treating lung cancer have been developed over time, including chemotherapy, radiotherapy and targeted therapies against activating mutations. Lately, better understanding of the role of the im... Different approaches for treating lung cancer have been developed over time, including chemotherapy, radiotherapy and targeted therapies against activating mutations. Lately, better understanding of the role of the immunological system in tumor control has opened multiple doors to implement different strategies to enhance immune response against cancer cells. It is known that tumor cells elude immune response by several mechanisms. The development of monoclonal antibodies against the checkpoint inhibitor programmed cell death protein 1 (PD-1) and its ligand (PD-L1), on T cells, has led to high activity in cancer patients with long lasting responses. Nivolumab, an anti PD-1 inhibitor, has been recently approved for the treatment of squamous cell lung cancer patients, given the survival advantage demonstrated in a phase III trial. Pembrolizumab~ another anti PD-1 antibod)5 has received FDA breakthrough therapy designation for treatment of non-small cell lung cancer (NSCLC), supported by data from a phase I trial. Clinical trials with anti PD-1/PD-L1 antibodies in NSCLC have demonstrated very good tolerability and activity, with response rates around 20% and a median duration of response of 18 months. 展开更多
关键词 Cytotoxic T-lymphocyte-associated protein 4 (CTlA-4) immune checkpoint inhibitors lung cancer programmed celldeath protein ligand-1 (PD-l1 programmed cell death protein i (PD-1
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子宫颈病变中HPV L1蛋白和p16的表达 被引量:23
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作者 李俐 黄文斌 +4 位作者 黄悦 赵有财 杨小兵 王劲松 赵建华 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期576-579,共4页
目的研究HPV L1蛋白和p16在子宫颈各种病变中的表达情况,探讨它们在子宫颈病变进展中的预测价值。方法应用免疫组化方法检测41例各种子宫颈病变(CIN1级18例、CIN2级9例、CIN3级8例和浸润性鳞状细胞癌6例)中HPV L1蛋白和p16的表达。结果H... 目的研究HPV L1蛋白和p16在子宫颈各种病变中的表达情况,探讨它们在子宫颈病变进展中的预测价值。方法应用免疫组化方法检测41例各种子宫颈病变(CIN1级18例、CIN2级9例、CIN3级8例和浸润性鳞状细胞癌6例)中HPV L1蛋白和p16的表达。结果HPV L1蛋白在各种子宫颈病变中的阳性率为26.8%。其中HPV L1在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为44.4%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均无表达。p16在各种子宫颈病变中的阳性率为68.3%,其在CIN1中的阳性表达率为38.9%,CIN2为77.8%,CIN3和浸润性鳞状细胞癌均表达阳性。100%CIN3和浸润性鳞状细胞癌为p16+/HPV L1-,而61.1%CIN1中为p16-/HPV L1+或p16-/HPV L1-。结论随着子宫颈病变的进展,HPV L1阳性表达率降低而p16阳性表达率增高。p16+/HPV L1-提示子宫颈鳞状上皮内瘤变有进展的可能,而p16-/HPV L1+和p16-/HPV L1-可能为无进展的或潜在消退的子宫颈病变。 展开更多
关键词 子宫颈肿瘤 上皮内瘤变 HPV l1蛋白 P16
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人乳头瘤病毒L1蛋白功能及其临床应用 被引量:17
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作者 郝敏 卞美璐 《中国实用妇科与产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期352-355,共4页
人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白是HPV的主要衣壳蛋白。L1蛋白的表达缺失,将弱化宫颈局部的免疫效应,异常增殖细胞得以生存并将致疾病进展。HPVL1蛋白的功能及其在甄别有潜在恶性可能的宫颈病变患者中具有重要价值。
关键词 宫颈病变 人乳头瘤病毒 l1蛋白
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人乳头瘤病毒E6/E7 mRNA与L1蛋白联合检测在宫颈癌前病变诊断中的临床价值 被引量:14
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作者 王富伟 魏爱婷 邱翠 《中国妇产科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第5期397-399,共3页
目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA和L1蛋白的联合检测在宫颈癌前病变诊断中的临床价值。方法选择353例HPV感染患者为研究对象,分别采用b-DNA技术检测患者TCT标本中E6/E7 mRNA的阳性表达率,免疫组织化学法检... 目的探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)E6/E7 mRNA和L1蛋白的联合检测在宫颈癌前病变诊断中的临床价值。方法选择353例HPV感染患者为研究对象,分别采用b-DNA技术检测患者TCT标本中E6/E7 mRNA的阳性表达率,免疫组织化学法检测患者宫颈石蜡包埋组织标本中L1蛋白阳性表达率。结果 E6/E7 mRNA阳性表达率与宫颈病变严重程度呈正相关(r=0.485,P〈0.001),L1蛋白阳性表达率与宫颈病变严重程度呈负相关(r=-0.471,P〈0.001);在诊断CIN2及以上病变(CIN2+)时,E6/E7 mRNA、HPV L1蛋白单独检测与两者联合检测比较,E6/E7 mRNA检测方法的敏感性和阴性预测值(NPV)均高于其他两种检测方法(均P〈0.05),而联合检测方法特异性均高于E6/E7 mRNA和L1蛋白检测方法(均P〈0.05),联合检测方法阳性预测值(PPV)高于L1蛋白检测方法(P〈0.05)。结论 E6/E7 mRNA与L1蛋白方法联合检测在分流HPV感染患者,帮助医生选择合适的治疗方案及疗效评估方面,应具有非常好的临床应用前景。 展开更多
关键词 宫颈病变 人乳头瘤病毒 E6/E7 MRNA l1蛋白
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人乳头瘤病毒16型L1蛋白B细胞表位预测 被引量:8
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作者 王爱萍 蒋敏 +5 位作者 栗宁 张改平 祁艳华 刘燕凯 席宇 周景明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期442-445,共4页
目的预测人乳头瘤病毒16型L1(HPV-16 L1)蛋白的B细胞表位。方法先从NCBI的蛋白质数据库中获得HPV-16 L1蛋白的氨基酸序列,再采用DNAStar中的Protean模块分析HPV-16型L1蛋白的二级结构、柔韧性、亲水性、表面可及性以及抗原性,然后结... 目的预测人乳头瘤病毒16型L1(HPV-16 L1)蛋白的B细胞表位。方法先从NCBI的蛋白质数据库中获得HPV-16 L1蛋白的氨基酸序列,再采用DNAStar中的Protean模块分析HPV-16型L1蛋白的二级结构、柔韧性、亲水性、表面可及性以及抗原性,然后结合吴玉章等建立的氨基酸抗原性指数方法计算其平均抗原指数(AI),综合分析上述多个参数,预测其可能的B细胞表位区域,并用在线BLAST进行同源性匹配分析。结果综合分析多个参数,预测得出HPV-16 L1蛋白的B细胞表位可能位于第51~58、87~97、214~220、290~296、335~341、351~366、408~418、430~442和475~496肽段,进一步的同源性匹配分析显示肽段51~58、335~341、351~366、408~418、430~442以及475~496为其B细胞表位优势区域,其中肽段51(PIKKPNNN)58、351(SETTYKNTNFKEYLRH)366、408(PPPGGTLEDTY)418和430(KHTPPAPKEDPLK)442的氨基酸序列为HPV-16型L1蛋白所特有,而肽段475(KAKPKFTLGKRKATPTTSSTST)496与HPV-16 E1蛋白具有同源性、335(DTTRSTN)341的氨基酸序列与很多其他型别的HPV的L1蛋白具有同源性。结论综合多种方案预测得到HPV-16 L1的多个B细胞表位优势区域。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 l1蛋白 宫颈癌 B细胞表位 生物信息学
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牛乳头状瘤病毒贵州株L1基因克隆及生物信息学分析 被引量:8
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作者 张海 周碧君 +6 位作者 杨忠成 廖梅 王开功 文明 程振涛 王伟 冯旭芳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第11期2834-2843,共10页
为分析牛乳头状瘤病毒贵州株(BPV-GZ01株)L1基因的分子特征,预测其编码蛋白的生物学功能,本试验对BPV-GZ01株L1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相关软件及方法对BPV-GZ01株L1基因进行序列分析,并对其编码蛋白进行二级... 为分析牛乳头状瘤病毒贵州株(BPV-GZ01株)L1基因的分子特征,预测其编码蛋白的生物学功能,本试验对BPV-GZ01株L1基因进行PCR扩增、克隆及序列测定。应用生物信息学相关软件及方法对BPV-GZ01株L1基因进行序列分析,并对其编码蛋白进行二级结构、三级结构、B细胞表位、保守结构域、跨膜结构域和信号肽预测。结果显示,L1基因序列全长为1 494bp,编码497个氨基酸;与BPV2、BPV2-SW01、BPV2-AKS01、BPV13、BPV1株相应序列核苷酸同源性分别为99.1%、99.8%、99.4%、87.6%和82.8%,氨基酸同源性分别为98.6%、99.4%、98.4%、94.4%和91.3%;系统进化树显示,BPV-GZ01株与BPV2-SW01株亲缘关系最近;L1蛋白二级结构以无规则卷曲、β-折叠和α-螺旋区域所占比例较大,预测此蛋白可能存在6个B细胞优势抗原表位,无跨膜区域,无信号肽区域;三级结构呈弯曲状螺旋结构。本研究结果将为贵州省BPV免疫诊断及核酸疫苗研究提供理论依据。 展开更多
关键词 牛乳头状瘤病毒 l1基因 生物信息学分析 蛋白结构预测
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血清4型禽腺病毒胶体金免疫层析检测方法的建立 被引量:1
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作者 陈乐乐 王凯莉 +5 位作者 刘成 杜旭升 曹胜亮 李玉保 路建彪 司振书 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期7-11,共5页
为建立对血清4型禽腺病毒(FAdV-4)进行快速检测的胶体金免疫层析法,将FAdV-4的hexon-L1蛋白进行原核表达,免疫兔制备多克隆抗体,将多抗包被在检测(T)线,将羊抗兔IgG包被在质控(C)线,用胶体金标记的多抗作为示踪剂,制备胶体金免疫层析检... 为建立对血清4型禽腺病毒(FAdV-4)进行快速检测的胶体金免疫层析法,将FAdV-4的hexon-L1蛋白进行原核表达,免疫兔制备多克隆抗体,将多抗包被在检测(T)线,将羊抗兔IgG包被在质控(C)线,用胶体金标记的多抗作为示踪剂,制备胶体金免疫层析检测卡,用于检测FAdV-4抗原,并对其敏感性和特异性进行评价,用其检测临床样本并与PCR检测结果相比较。结果显示,制备的胶体金检测卡可检出FAdV-4含量为10^(2.094)^(5)EID_(50),FAdV-8、新城疫病毒、禽白血病病毒等均不出现特异性条带,对临床样本的检测与PCR检测的符合率达98%。建立的胶体金检测方法可用于FAdV-4感染的快速检测。 展开更多
关键词 血清4型禽腺病毒 六邻体环1 重组蛋白 胶体金检测方法
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HPV L1壳蛋白与p16^(INK4a)的免疫组化检查在宫颈病变诊断中的应用 被引量:6
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作者 姜晓曼 黄民主 +4 位作者 李成华 郑宝文 张志魁 吴心音 李洪波 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期66-67,71,共3页
目的检测宫颈上皮病变过程中HPV L1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,探讨二者联合在宫颈病变诊断中的应用价值。方法用免疫细胞化学方法检测169例不同级别的宫颈液基细胞学标本中HPVL1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,并与组织病理学检查结果比... 目的检测宫颈上皮病变过程中HPV L1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,探讨二者联合在宫颈病变诊断中的应用价值。方法用免疫细胞化学方法检测169例不同级别的宫颈液基细胞学标本中HPVL1壳蛋白和p16INK4a蛋白的表达,并与组织病理学检查结果比较。结果随着宫颈活检病理分级升高,HPV L1壳蛋白阳性[L1(+)]率降低(P<0.01),p16INK4a阳性[p16(+)]率升高(P<0.01)。HPVL1壳蛋白阳性率与病理分级呈负相关(rs=-0.436,P<0.01);而p16INK4a阳性率与病理分级呈正相关(rs=0.459,P<0.01)。在宫颈上皮内瘤变(CIN)CIN1、CIN2、CIN3及鳞状细胞癌(SCC)中,L1(+)/p16(-)的表达率分别为19.18%、2.44%、0.00%、0.00%,L1(-)/p16(+)表达率分别为30.14%、75.61%、92.86%、100.00%。L1、p16INK4a、L1(-)/p16(+)在CIN1的表达与CIN2、CIN3、SCC比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论HPV L1壳蛋白、p16INK4a均可作为诊断宫颈病变程度的生物学标志;而HPV L1壳蛋白联合p16INK4a不仅能够预测宫颈病变的程度,而且有利于对CIN1患者的随访,可为宫颈癌早期诊断提供新的指标。 展开更多
关键词 l1壳蛋白 P16^INK4A 生物学标志 宫颈病变 免疫组织化学
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双功能化合物靶向降解免疫检查点蛋白PD-L1
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作者 陈从丽 师怀怀 +2 位作者 郝芮 房丽晶 徐华栋 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2024年第6期613-620,共8页
本研究利用整合素促进的靶蛋白溶酶体降解策略,设计合成了识别整合素受体αvβ3的小分子Gua-Azide以替代c(RGDyK)环肽,通过连接子使其与PD-L1抑制剂BMS-8相连,形成双功能小分子降解剂.该降解剂能够通过内吞-溶酶体途径靶向降解细胞膜上... 本研究利用整合素促进的靶蛋白溶酶体降解策略,设计合成了识别整合素受体αvβ3的小分子Gua-Azide以替代c(RGDyK)环肽,通过连接子使其与PD-L1抑制剂BMS-8相连,形成双功能小分子降解剂.该降解剂能够通过内吞-溶酶体途径靶向降解细胞膜上的PD-L1靶标蛋白,为开发癌症免疫治疗相关小分子药物开辟了新途径. 展开更多
关键词 蛋白质靶向降解 IFlD策略 双功能降解剂 PD-l1 肿瘤免疫治疗
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应用噬菌体展示制备人乳头瘤病毒6型L1蛋白中和性单克隆抗体
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作者 秦薇子 陈桂榴 张黎 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2024年第1期67-71,共5页
目的制备人乳头瘤病毒6型L1(HPV6 L1)蛋白特异性单克隆抗体, 探索抗体的结合特点、交叉活性以及中和效果。方法从免疫HPV6 L1蛋白小鼠脾细胞中提取抗体基因, 构建ScFv噬菌体抗体文库。用HPV6 L1蛋白对文库进行富集筛选, 将获得的抗体基... 目的制备人乳头瘤病毒6型L1(HPV6 L1)蛋白特异性单克隆抗体, 探索抗体的结合特点、交叉活性以及中和效果。方法从免疫HPV6 L1蛋白小鼠脾细胞中提取抗体基因, 构建ScFv噬菌体抗体文库。用HPV6 L1蛋白对文库进行富集筛选, 将获得的抗体基因表达成鼠IgG后, 验证抗体与L1蛋白的结合性质以及对假病毒的中和效果。结果成功构建了针对HPV6 L1的ScFv抗体文库, 库容量为6.54×10^(7)。抗体文库经HPV6 L1筛选后获得了两株抗体, 命名为Q9和Q11。经ELISA检测, Q9-IgG与HPV6 L1反应的滴度约为10^(6), 与HPV18和45 L1的滴度为10^(2)。Q11-IgG与HPV6 L1结合的滴度约为4×10^(4), 而与其他型别L1均不结合。经过假病毒中和试验测定, Q9-IgG没有中和活性, 而Q11-IgG针对HVP6假病毒的中和滴度约为10^(4).5。结论 Q9和Q11均为HPV6 L1特异性单克隆抗体, 但二者交叉反应性、抗原识别位点及中和活性均具有明显差异。该抗体可为HPV6病毒的基础研究、免疫学诊断以及治疗制剂研发提供工具抗体。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒6型 l1蛋白 噬菌体展示 单克隆抗体
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保存时间对血浆胞外囊泡及囊泡蛋白的影响
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作者 林真亭 林榕 +6 位作者 张娜 叶春梅 黄连江 周博轩 林纳荣 王卓 兰天舒 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第13期2341-2346,共6页
目的:探讨不同保存时间对血浆胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)及肿瘤相关蛋白PD-L1表达的影响。方法:使用离心和免疫吸附的方法,选取回顾性研究常用的-80℃存放1个月、1年、3年、5年的血浆EVs与新鲜血浆EVs进行对比;使用透射电镜... 目的:探讨不同保存时间对血浆胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)及肿瘤相关蛋白PD-L1表达的影响。方法:使用离心和免疫吸附的方法,选取回顾性研究常用的-80℃存放1个月、1年、3年、5年的血浆EVs与新鲜血浆EVs进行对比;使用透射电镜对提取的EVs的形态进行观察;用NTA检测各组EVs的大小及数量;用ELISA试剂盒测定EVs上肿瘤标志性蛋白PD-L1的表达情况。结果:不同存储时间的血浆总蛋白水平及平均粒径大小无显著差异。而保存时间超过1年,EVs形态出现变形、聚集和碎裂等变化。随着保存时间的延长,EVs上的标志性蛋白CD63逐年减少。保存3年和5年的样本中肿瘤标志蛋白PD-L1水平明显降低。结论:存储时间对EVs表面蛋白及肿瘤标志蛋白影响较大。在以EVs为对象的研究中,需尽量采用随访设计,提取新鲜的血浆样本进行检测。在回溯性研究中,尽量选取样本库中保存一年以内的样本进行检测。 展开更多
关键词 细胞外囊泡 细胞外囊泡蛋白 PD-l1 保存时间
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PD-1、PD-L1、MMR蛋白在子宫内膜癌中的表达及与患者临床病理特征的相关性
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作者 梁伟华 《医学理论与实践》 2024年第2期196-199,共4页
目的:探讨程序性死亡受体1(PD-1)、程序性死亡配体1(PD-L1)、错配修复(MMR)蛋白(MLH1、PMS2、MSH2和MSH6)在子宫内膜癌中的表达及与患者临床病理特征的相关性。方法:选取我院2020年6月—2023年6月收治的80例子宫内膜癌患者作为研究对象... 目的:探讨程序性死亡受体1(PD-1)、程序性死亡配体1(PD-L1)、错配修复(MMR)蛋白(MLH1、PMS2、MSH2和MSH6)在子宫内膜癌中的表达及与患者临床病理特征的相关性。方法:选取我院2020年6月—2023年6月收治的80例子宫内膜癌患者作为研究对象,取患者的子宫内膜组织进行免疫组化检测,检测PD-1/PD-L1、MMR蛋白表达水平。并分析不同病理特征子宫内膜癌患者PD-1、PD-L1表达情况与MMR蛋白缺失情况,最后采用Spearman相关法分析PD-1、PD-L1、MMR蛋白与子宫内膜癌临床病理特征的相关性。结果:80例子宫内膜癌患者中,子宫内膜癌组织PD-1阳性表达率为63.75%,PD-L1阳性表达率为67.50%;MMR蛋白表达缺失率为70.00%;80例子宫内膜癌患者中,PD-1、PD-L1阳性与阴性患者的细胞分化程度、FIGO分期、子宫肌层浸润、淋巴结转移情况对比差异显著,此外PD-L1阳性与阴性病理类型对比差异显著(P<0.05),MMR蛋白基因缺失与基因完整患者的肿瘤部位、细胞分化程度、子宫肌层浸润、淋巴结转移情况对比差异显著(P<0.05);PD-1与子宫内膜癌细胞分化程度、FIGO分期、子宫肌层浸润、淋巴结转移呈正相关,PD-L1与病理类型、细胞分化程度、FIGO分期、子宫肌层浸润、淋巴结转移呈正相关,MMR蛋白与子宫内膜癌肿瘤部位、细胞分化程度、子宫肌层浸润、淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。结论:PD-1、PD-L1、MMR蛋白表达与子宫内膜癌患者的临床病理特征具有密切关系,临床可考虑应用三者对子宫内膜癌的诊断与预后进行评价,为临床提供参考意义。 展开更多
关键词 程序性死亡受体1 程序性死亡配体1 错配修复蛋白 子宫内膜癌 临床病理特征 免疫组化
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HPV L1壳蛋白在宫颈病变诊断及随访中的临床意义 被引量:6
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作者 张爱慕 沈奇 +2 位作者 赵静 廖洪力 朱雪琼 《温州医科大学学报》 CAS 2016年第8期582-585,589,共5页
目的:探讨宫颈脱落细胞HPV L1壳蛋白检测在宫颈病变诊断及随访中的临床意义。方法:选取2013年1月至2014年6月在温州市中心医院宫颈液基细胞学检查(TCT)诊断≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS),HPV病毒基因分型检测高危型HPV阳... 目的:探讨宫颈脱落细胞HPV L1壳蛋白检测在宫颈病变诊断及随访中的临床意义。方法:选取2013年1月至2014年6月在温州市中心医院宫颈液基细胞学检查(TCT)诊断≥未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞(ASCUS),HPV病毒基因分型检测高危型HPV阳性276例患者,检测HPV L1壳蛋白在子宫颈病变中表达情况。结果:1HPV L1壳蛋白在低度鳞状上皮内病变(LSIL)、ASCUS、非典型鳞状上皮-不除外高度病变(ASC-H)/高度鳞状上皮内病变(HSIL)/鳞状上皮浸润癌(SCC)中的表达率分别是70.09%、55.46%、10.00%,3者间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2HPV L1壳蛋白在组织病理学诊断慢性子宫颈炎(CC)、CINI、CINII-III和SCC中的阳性表达率分别是63.55%、75.32%、21.59%、0.00%,不同组间的HPV L1壳蛋白表达率差异有统计学意义(P<0.05)。3在高危型HPV基因阳性妇女中,HPV L1壳蛋白联合TCT及单独TCT对诊断组织病理学≥CINII的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别是88.89%、46.73%;88.65%、96.20%;71.43%、86%和96.15%、78.32%。4对31例CINI妇女随访1年,结果发现CINI妇女中HPV L1壳蛋白阳性者和HPV L1壳蛋白阴性者相比,1年病变自然消退率高,差异有统计学意义(P<0.05);HPV L1壳蛋白预测CINI患者病变消退的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为91.67%、57.89%、57.89%、91.67%。结论:1HPV L1壳蛋白随着子宫颈病变程度增高表达率下降;2在高危型HPV基因阳性妇女中,宫颈脱落细胞HPV L1壳蛋白检测联合TCT比单独TCT预测组织学病理≥CINII有更高的敏感度(88.89%vs46.73%)和阴性预测值(96.15%vs 78.32%);3在CINI随访妇女中,HPV L1壳蛋白阳性妇女CINI自然消退率更高,有较高的预测CINI病变消退的敏感度和阴性预测值,值得临床推广。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 l1 壳蛋白 宫颈上皮内瘤变 随访
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一种关于人乳头瘤病毒中L1蛋白的同源建模算法
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作者 刘洁 《黑龙江中医药》 2023年第5期363-366,共4页
人乳头瘤病毒与宫颈癌等恶性肿瘤的发病率密切相关,从市场疫苗研究基础和病毒组成角度上,其位于晚期转录区的L1蛋白都起到至关重要的作用。目的:获取人乳头瘤病毒中L1蛋白的蛋白模板并通过自主建模方式解析其五聚体结构。方法:首先,采... 人乳头瘤病毒与宫颈癌等恶性肿瘤的发病率密切相关,从市场疫苗研究基础和病毒组成角度上,其位于晚期转录区的L1蛋白都起到至关重要的作用。目的:获取人乳头瘤病毒中L1蛋白的蛋白模板并通过自主建模方式解析其五聚体结构。方法:首先,采取数据库检索对比,获取大量不同亚型的人乳头瘤病毒的L1蛋白结构序列;利用Align序列对比分析,使用SWISS-model同源建模法,计算得到自主建立的蛋白模型,深度分析模型中L1蛋白的疏水簇结构,氢键网络,盐桥结构,相互接触图,并将其进行统计学分析。结果:采用SWISS-model同源建模法获得的蛋白统计学上可信度高,数据分析可用于关于L1蛋白结构的具体研究中。结论:对于L1蛋白结构的现有研究基本是解析其五聚体结构,分析L1蛋白五聚体内部状态,以期望从结构角度深入了解L1蛋白,了解其在疫苗开发中的重要作用,发掘在未来可供药物研究的结构位点基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 l1蛋白 同源性 蛋白结构
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Positive Correlation between PMS2 Deficiency and PD-L1 Expression in Pancreatic Cancer
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作者 Cailing Jiang Chunyan Dang +12 位作者 Ruilong He Limin Cheng Yiying Bai Xinyu Bai Xin Wang Qianhui Chen Hongbin Yang Zhengxin Zhang Xiaotong Zhang Yan Chen Qian Xu Lei Liu Li Zhang 《Advances in Bioscience and Biotechnology》 CAS 2023年第2期74-90,共17页
Background: Pancreatic cancer is one of the most lethal types of cancer, and immunotherapy has become a promising remedy with advancements in tumor immunology. However, predicting the clinical response to immunotherap... Background: Pancreatic cancer is one of the most lethal types of cancer, and immunotherapy has become a promising remedy with advancements in tumor immunology. However, predicting the clinical response to immunotherapy in pancreatic cancer remains a dilemma for clinicians. Methods: GEPIA database was used to analyze the differential expression of MMR and PD-L1 genes in 33 common cancer types including pancreatic cancer. The expression levels of MMR and PD-L1 genes were downloaded from the GEPIA and GEO databases to analyze the correlation between MMR genes and PD-L1, and the clinicopathological and survival information were downloaded from the TCGA databases to analyze the relationship between the expression of MMR, PD-L1 and clinicopathological characteristics, prognosis. Meanwhile, the tumor tissue samples of 41 patients with pancreatic cancer were collected, and the protein expression levels of MMR and PD-L1 were detected by immunohistochemical assay. Furthermore, we analyzed the correlation between MMR and PD-L1, and the correlation between the expression of MMR, PD-L1 and clinicopathological characteristics, prognosis of pancreatic cancer patients. Results: Bioinformatics analysis showed that MLH1, MLH3, MSH2, MSH3, and PMS2 were highly expressed in most cancer types including pancreatic cancer (P P = 0.012), clinical stage (I vs II: P = 0.016), MSH2 expression was related to clinical stage (P < 0.05), T stage (T3 vs T4: P = 0.039), and MSH3 expression was related to T stage (P < 0.05). Besides, both MSH2 expression (P P = 0.044) were significantly associated with prognosis. GEPIA data also showed that MSH2 expression was related to prognosis (P = 0.008). The correlation analysis revealed that the expressions MSH2, MLH1, PMS2 had strong correlations with PD-L1 both in GEPIA and GEO databases. Real-world data indicated that of the 41 pancreatic cancer patients, 5 cases had MLH1 deletion, 5 cases had MSH2 deletion, 4 cases had PMS2 deletion, and 12 cases had PD-L1 positive expression. Notably, PMS2 deletion w 展开更多
关键词 Pancreatic Cancer PD-l1 PMS2 Mismatch Repair protein CORRElATION
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人PD-L1 cDNA的克隆及其胞外区蛋白在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 何贤辉 徐丽慧 +2 位作者 刘毅 蔡小嫦 曾耀英 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期659-663,共5页
目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表... 目的 :克隆人PD L1基因的cDNA并构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌中进行表达。方法 :以RT PCR法从活化的人淋巴细胞总RNA中 ,扩增并克隆PD L1的cDNA ,构建PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,在大肠杆菌BL2 1(ED3)中进行表达并鉴定。结果 :克隆到PD L1cDNA编码区的全长序列 ,经DNA测序证明其与已报道的序列一致。同时构建了在羧基端带有His6标签的PD L1胞外区基因的原核表达载体 ,并在大肠杆菌中表达。免疫印迹分析表明 ,在IPTG诱导后表达的PD L1胞外区蛋白 ,相对分子质量 (Mr)为 2 50 0 0 ,与理论值的大小相符。该重组蛋白能与抗His6标签的单抗 (mAb)特异性反应。结论 :成功地克隆PD L1基因 ,其胞外区蛋白在大肠杆菌中获得表达 ,为利用PD L1转基因修饰移植物或以PD 展开更多
关键词 PD-l1 CDNA克隆 淋巴细胞 重组蛋白
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经基因优化的HPV16L1蛋白在毕赤酵母中的表达 被引量:3
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作者 董金蓉 谢飞 +3 位作者 刘勇 郭仁 彭建新 刘红岩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第5期333-336,共4页
目的利用毕赤酵母表达系统(Pichia pastoris)高效表达HPV16L1蛋白。方法按照Pichia pastoris密码子偏爱性合成HPV16L1基因,构建pAO819r-16L1表达载体,电转化至GS115菌株中,经MD板和不同浓度G418筛选,挑取高拷贝整合菌株,甲醇诱导目的蛋... 目的利用毕赤酵母表达系统(Pichia pastoris)高效表达HPV16L1蛋白。方法按照Pichia pastoris密码子偏爱性合成HPV16L1基因,构建pAO819r-16L1表达载体,电转化至GS115菌株中,经MD板和不同浓度G418筛选,挑取高拷贝整合菌株,甲醇诱导目的蛋白的表达,用HPV16L1抗血清,经Western blot检测蛋白的特异性。结果重组质粒pAO819r-16L1在甲醇营养型酵母菌株中经甲醇诱导后可表达HPV16L1蛋白,在试管中的表达量超过10mg/ml,经Western blot验证,该蛋白可与抗血清特异结合,在相对分子质量55000附近出现目的条带,证明该蛋白确为HPV16L1蛋白。结论利用毕赤酵母表达系统可高效表达HPV16L1蛋白,为研制HPV疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 l1蛋白 毕赤酵母 基因优化
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Changes and significance of serum ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase L1 and glial fibrillary acidic protein in patients with glioma
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作者 Qing-Hua Zhu Jing-Kun Wu Gao-Lei Hou 《World Journal of Clinical Cases》 SCIE 2023年第14期3158-3166,共9页
BACKGROUND Brain gliomas are malignant tumors with high postoperative recurrence rates.Early prediction of prognosis using specific indicators is of great significance.AIM To assess changes in ubiquitin carboxy-termin... BACKGROUND Brain gliomas are malignant tumors with high postoperative recurrence rates.Early prediction of prognosis using specific indicators is of great significance.AIM To assess changes in ubiquitin carboxy-terminal hydrolase L1(UCH-L1)and glial fibrillary acidic protein(GFAP)levels in patients with glioma pre-and postoperatively.METHODS Between June 2018 and June 2021,91 patients with gliomas who underwent surgery at our hospital were enrolled in the glioma group.Sixty healthy volunteers were included in the control group.Serum UCH-L1 and GFAP levels were measured in peripheral blood collected from patients with glioma before and 3 d after surgery.UCH-L1 and GFAP levels in patients with glioma with different clinicopathological characteristics were compared before and after surgery.The patients were followed-up until February 2022.Postoperative glioma recurrence was recorded to determine the serum UCH-L1 and GFAP levels,which could assist in predicting postoperative glioma recurrence.RESULTS UCH-L1 and GFAP levels in patients with glioma decreased significantly 3 d after surgery compared to those before therapy(P<0.05).However,UCH-L1 and GFAP levels in the glioma group were significantly higher than those in the control group before and after surgery(P<0.05).There were no statistically significant differences in preoperative serum UCH-L1 and GFAP levels among patients with glioma according to sex,age,pathological type,tumor location,or number of lesions(P>0.05).Serum UCH-L1 and GFAP levels were significantly lower in the patients with WHO grade I-II tumors than in those with gradeⅢ-IV tumors(P<0.05).Serum UCH-L1 and GFAP levels were lower in the patients with tumor diameter≤5 cm than in those with diameter>5 cm,in which the differences were statistically significant(P<0.05).Glioma recurred in 22 patients.The preoperative and 3-d postoperative serum UCH-L1 and GFAP levels were significantly higher in the recurrence group than these in the non-recurrence group(P<0.05).Receiver operating characteristic curv 展开更多
关键词 GlIOMA Ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 Glial fibrillary acidic protein Surgery Prognosis Clinical significance
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山羊痘病毒L1蛋白的原核表达及其功能分析 被引量:3
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作者 高顺平 吴国华 +5 位作者 颜新敏 赵志荀 于少雄 朱海霞 李健 张强 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1257-1261,共5页
为了探究山羊痘病毒L1蛋白在病毒感染Vero细胞过程中的作用,将山羊痘病毒L1蛋白基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物。表达的目的蛋白经镍亲和柱纯化后免... 为了探究山羊痘病毒L1蛋白在病毒感染Vero细胞过程中的作用,将山羊痘病毒L1蛋白基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物。表达的目的蛋白经镍亲和柱纯化后免疫家兔制备了抗血清,通过蛋白封闭试验和血清抑制试验研究了纯化蛋白及其抗血清对山羊痘病毒感染的抑制作用。结果显示,成功表达了山羊痘病毒的L1蛋白,表达产物为48ku左右的重组蛋白,它能被山羊抗山羊痘病毒阳性血清识别。加入L1蛋白封闭,可使山羊痘病毒感染细胞的病变时间推迟12h,病毒与L1蛋白抗血清作用后效价下降了87.8%。结果表明,L1蛋白可能是山羊痘病毒的受体结合蛋白,并能在病毒侵入宿主细胞的过程中发挥重要作用。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 l1蛋白 原核表达 受体结合蛋白
原文传递
人乳头瘤病毒16型晚期基因L1在原核细胞的表达及免疫效果观察 被引量:3
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作者 刘朝奇 许雪梅 +3 位作者 徐建青 李昆 司静懿 刘世德 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2007年第35期5028-5032,共5页
目的:人乳头瘤病毒16型(HPV16)疫苗的研制可望防治宫颈癌的发生、发展,本实验从中国感染人群中克隆L1基因,期望制备中国人群的HPV16的预防性疫苗。方法:从HPV16阳性的尖锐湿疣临床标本中,PCR扩增HPV16L1基因,克隆、测序,并在... 目的:人乳头瘤病毒16型(HPV16)疫苗的研制可望防治宫颈癌的发生、发展,本实验从中国感染人群中克隆L1基因,期望制备中国人群的HPV16的预防性疫苗。方法:从HPV16阳性的尖锐湿疣临床标本中,PCR扩增HPV16L1基因,克隆、测序,并在原核细胞表达L1蛋白,纯化蛋白经过复性后,电镜观察病毒样颗粒(VLP),VLP免疫动物观察抗体产生情况。结果:克隆的HPV16L1,测序结果发现有4个特异性突变位点是nt6240的C-G、nt6432 A→G、nt6901-03及nt6951-53。将HPV16L1基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),高表达的蛋白应用蛋白转印证实是HPV16L1蛋白,纯化的蛋白复性后可以自组装VLP,免疫动物产生高滴度的抗体。结论:从临床标本克隆表达了HPVl6L1基因,可以在原核细胞高表达及体外组装VLP,并且具有良好的免疫原性。为研制HPV16预防性疫苗探索一条易于推广而经济的制备途径。 展开更多
关键词 HPVl6 l1基因 蛋白表达 免疫
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