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一株产L-木酮糖菌株的分离筛选及鉴定 被引量：5
1
作者 张玉宝 赵祥颖 +2 位作者 杨丽萍 韩延雷 刘建军 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第1期199-203,共5页
通过初筛和复筛从土壤中分离获得1株能够转化木糖醇生产一种稀有糖——L-木酮糖的芽孢杆菌ZN-14。利用该菌株的静息细胞以20 g/L木糖醇为底物,在pH 9.0、37℃条件下转化24 h,转化率达到26.62%。通过对菌株ZN-14形态特征观察、生理生化... 通过初筛和复筛从土壤中分离获得1株能够转化木糖醇生产一种稀有糖——L-木酮糖的芽孢杆菌ZN-14。利用该菌株的静息细胞以20 g/L木糖醇为底物,在pH 9.0、37℃条件下转化24 h,转化率达到26.62%。通过对菌株ZN-14形态特征观察、生理生化特性鉴定以及16S rDNA基因序列同源性的分析,将其鉴定为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)。 展开更多
关键词 l-木酮糖 巨大芽孢杆菌 生物转化
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高效液相色谱法同时测定发酵液中木糖醇和L-木酮糖的含量 被引量：2
2
作者 葛驰宇 蒋洁 +1 位作者 翁旭 张君丽 《中国生化药物杂志》 CAS 2016年第6期191-193,共3页
目的建立高效液相色谱（HPLC）同时测定发酵液中底物木糖醇和产物L-木酮糖含量的方法。方法采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm）,柱温35℃,以乙腈-水（体积比为85∶15）为流动相,流速0.8mL/min。用示差折光检测器检测木糖醇,检测器温度... 目的建立高效液相色谱（HPLC）同时测定发酵液中底物木糖醇和产物L-木酮糖含量的方法。方法采用C18色谱柱（250 mm×4.6 mm）,柱温35℃,以乙腈-水（体积比为85∶15）为流动相,流速0.8mL/min。用示差折光检测器检测木糖醇,检测器温度为33℃。用紫外检测器在室温下检测L-木酮糖,检测波长为210 nm。结果所得木糖醇的线性范围为0.50～30.00 g/L,相关系数为0.9995,最低检出限为0.18 g/L,最低定量限为0.58 g/L;所得L-木酮糖的线性范围为0.30～30.00 g/L,相关系数为0.9986,最低检出限0.15 g/L,最低定量限为0.40 g/L;木糖醇的日内和日间相对标准偏差（RSD）均分别小于0.64%和0.80%,L-木酮糖的日内和日间RSD均分别小于0.31%和0.59%;回收率均在99.00%～101.00%之间。结论建立的HPLC法不受发酵液中其他组分的干扰,可同时测定底物木糖醇和产物L-木酮糖的含量,并实时监控发酵的全过程。 展开更多
关键词 高效液相色谱 同时测定 木糖醇 l-木酮糖 发酵液
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稀少糖家族新成员—L-木酮糖的生物制备研究进展 被引量：1
3
作者 徐铮 刘雅知 +1 位作者 潘森皓 李光耀 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期205-210,共6页
L-木酮糖是自然界罕见的L-型戊酮糖,具有糖苷酶抑制活性能够降低血糖,还可以用作医药中间体。L-木酮糖仅能通过人工合成来大量获得,常用的方法包括利用氧化还原酶催化木糖醇或L-阿拉伯糖醇等。近年来L-木酮糖的生物制备技术获得了较为... L-木酮糖是自然界罕见的L-型戊酮糖,具有糖苷酶抑制活性能够降低血糖,还可以用作医药中间体。L-木酮糖仅能通过人工合成来大量获得,常用的方法包括利用氧化还原酶催化木糖醇或L-阿拉伯糖醇等。近年来L-木酮糖的生物制备技术获得了较为广泛的研究,文章针对L-木酮糖制备关键酶挖掘、制备工艺探索等内容进行了综述,以期为该领域的研究提供理论借鉴。 展开更多
关键词 l-木酮糖 稀少糖 功能糖 酶催化 木糖醇
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重组枯草芽孢杆菌表达4-木糖醇脱氢酶的发酵和反应条件优化 被引量：1
4
作者 朱雯惠 孟青 +1 位作者 江波 张涛 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期21-28,共8页
L-木酮糖(L-苏式-戊酮糖)是一种昂贵的稀有戊糖,而4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase,XDH)是生物合成L-木酮糖(L-xylulose)的关键酶。为了促进L-木酮糖的生产,对枯草芽孢杆菌外源表达4-木糖醇脱氢酶的发酵条件进行优化,并对以木... L-木酮糖(L-苏式-戊酮糖)是一种昂贵的稀有戊糖,而4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase,XDH)是生物合成L-木酮糖(L-xylulose)的关键酶。为了促进L-木酮糖的生产,对枯草芽孢杆菌外源表达4-木糖醇脱氢酶的发酵条件进行优化,并对以木糖醇为底物静息细胞催化反应合成L-木酮糖的反应条件进行研究。通过单因素实验确定了最佳培养基的成分(g/L)为:蔗糖25,尿素6,MgSO_40. 05,MnSO_40. 01,FeSO_40. 01,初始pH值8. 0。最佳发酵条件为:装液量40 mL(250 mL锥形瓶),接种量1. 67%,发酵培养温度28℃。在优化条件下4-木糖醇脱氢酶酶活为5. 183 U/L,与初始酶活相比提高了231. 2%。最优反应条件:底物质量浓度20 g/L,50mmol/L甘氨酸-氢氧化钠缓冲溶液(pH 10. 0),反应温度45℃,优化反应条件下转化率达到17. 74%。通过对菌株发酵和反应工艺条件的优化,为后续L-木酮糖工业化生产奠定了基础。 展开更多
关键词 4-木糖醇脱氢酶(xylitol-4-dehydrogenase XDH) l -木酮糖 重组芽孢杆菌
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二羰基/L-木酮糖还原酶在肾细胞癌发生发展中的功能及潜在机制
5
作者 欧阳清 郑斌 +4 位作者 巫胜攀 王集琛 王雷 李修彬 马鑫 《临床泌尿外科杂志》 CAS 2024年第4期314-320,共7页
目的:探讨糖醛酸代谢相关酶二羰基/L-木酮糖还原酶(dicarbonyl and L-xylulose reductase,DCXR)对人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)细胞增殖、迁移的影响及其潜在机制,并检测DCXR表达水平与肾癌患者的临床相关性... 目的:探讨糖醛酸代谢相关酶二羰基/L-木酮糖还原酶(dicarbonyl and L-xylulose reductase,DCXR)对人肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)细胞增殖、迁移的影响及其潜在机制,并检测DCXR表达水平与肾癌患者的临床相关性。方法:利用生物信息学检测DCXR在泛癌及肾癌中的表达情况。应用定量逆转录聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和蛋白质印迹法方法,检测2022年6月30日—2023年1月30日期间解放军总医院第一医学中心收集的30例新鲜ccRCC组织与配对的癌旁组织,同时检测人ccRCC细胞株786-O、ACHN及人胚肾细胞株293T中DCXR的表达情况。将DCXR过表达载体分别转染入786-O、ACHN细胞,利用qRT-PCR与蛋白印迹法检测过表达效率,CCK-8(cell counting kit-8)实验、克隆形成实验检测细胞增殖;划痕实验、Transwell实验检测细胞迁移。对肾癌组织芯片进行免疫组织化学染色及临床相关性分析。最后通过GSEA富集分析预测DCXR可能参与调节的信号通路。结果:生物信息学显示肾癌中DCXR显著下调。在mRNA及蛋白水平上,肿瘤组织DCXR表达低于配对的癌旁肾组织,差异有统计学意义(P<0.05)。肾癌细胞786-O、ACHN中DCXR表达较人胚肾细胞低。过表达DCXR组786-O、ACHN细胞增殖活力及细胞克隆率均低于空载对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。过表达DCXR组786-O及ACHN细胞划痕愈合面积及Transwell细胞迁移数均低于空载对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。通过对本中心ccRCC组织芯片染色及相关临床数据分析显示,DCXR表达情况与ccRCC预后相关(P<0.05)。结论:DCXR在ccRCC中表达下降,过表达DCXR可抑制ccRCC的细胞增殖、迁移能力,并可能作为预测患者预后判断的生物学标记物。 展开更多
关键词 二羰基/l-木酮糖还原酶 肾透明细胞癌 增殖 迁移
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