酵母菌属间原生质体融合获得能发酵乳糖生产酒精的融合体 被引量：19

1

作者 张博润 蔡金科 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期182-188,共7页

本文报道了用聚乙二醇(PEG)诱导酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和乳酸克鲁维酵母(Kluyceromyces lactis)属间原生质体融合。融合体的细胞体积约为两亲株之和;融合体的 DNA 含量约为亲株的两倍;融合体具有双亲株的遗传标记。融合体... 本文报道了用聚乙二醇(PEG)诱导酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和乳酸克鲁维酵母(Kluyceromyces lactis)属间原生质体融合。融合体的细胞体积约为两亲株之和;融合体的 DNA 含量约为亲株的两倍;融合体具有双亲株的遗传标记。融合体不仅能发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖、棉子糖和蜜二糖,而且也能发酵乳糖。在以乳糖为碳源的培养基中,融合体的发酵力是亲株乳酸克鲁维酵母的两倍多;在以葡萄糖为碳源的培养基中,融合体与亲株酿酒酵母的发酵力接近。 展开更多

关键词 酿酒酵母 原生质体融合

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常压室温等离子体诱变筛选高乳糖酶活力酵母的研究 被引量：16

2

作者 邱雯雯 任雅琳 +3 位作者 陈存社 杨菊芳 吴昊 董丽艳 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第2期132-137,共6页

探讨常压室温等离子体(ARTP)诱变筛选高乳糖酶活力乳酸克鲁维酵母的条件。以ARTP诱变育种方法为诱变手段,对乳酸克鲁维酵母进行不同时长(10 s依次增加到300 s)的诱变处理,并结合高通量筛选方法快速筛选出33株乳糖酶活力提高50%以上的突... 探讨常压室温等离子体(ARTP)诱变筛选高乳糖酶活力乳酸克鲁维酵母的条件。以ARTP诱变育种方法为诱变手段,对乳酸克鲁维酵母进行不同时长(10 s依次增加到300 s)的诱变处理,并结合高通量筛选方法快速筛选出33株乳糖酶活力提高50%以上的突变菌株。通过复筛最终得到4株高乳糖酶活力的突变菌株,采用三角瓶摇床培养,结果表明:筛选得到的突变菌株的乳糖酶活力均大于原始菌株,其中最大乳糖酶活力提高到0.257 U/mL,是原始菌株(0.090 U/mL)的2.8倍;4株突变菌株生长速度比原始菌株显著提高。ARTP诱变育种技术结合高通量筛选方法是1种快速、有效的新型微生物诱变育种方法。 展开更多

关键词 常温室压等离子体 诱变 乳糖酶 乳酸克鲁维酵母

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乳酸克鲁维酵母乳糖酶性质的研究 被引量：15

3

作者 张明丽 熊华 +1 位作者 齐金峰 陈望华 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2008年第1期7-9,共3页

采用单因素试验方法研究了乳酸克鲁维酵母乳糖酶的性质,该酶在pH值为6.0～8.4范围内比较稳定,酶作用最适pH值在6.4～6.6;最适反应温度为45℃,并具有良好的热稳定性;Mn2+,Mg2+,Na+等对酶有明显的激活作用,而重金属离子如Zn2+和Cu2+等对... 采用单因素试验方法研究了乳酸克鲁维酵母乳糖酶的性质,该酶在pH值为6.0～8.4范围内比较稳定,酶作用最适pH值在6.4～6.6;最适反应温度为45℃,并具有良好的热稳定性;Mn2+,Mg2+,Na+等对酶有明显的激活作用,而重金属离子如Zn2+和Cu2+等对酶活有抑制作用。实验测定得该酶以ONPG为底物的米氏常数为3.348mmol/L。 展开更多

关键词 乳糖酶 乳酸克鲁维酵母 性质

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乳酸克鲁维酵母β-半乳糖苷酶的分离纯化及性质研究 被引量：13

4

作者 沈为群 郭杰炎 +1 位作者 李永福 陈惠萍 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期348-354,共7页

乳酸克鲁维酵母经高压破壁后的粗提液，其β－半乳糖苷酶比活力为５．５６ｕ／ｍｇ．经硫酸铵沉淀，丙酮沉淀，ＰＡＰＭＡ－Ａｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ柱层析后，乳糖酶比活力达３７０ｕ／ｍｇ，纯化了６６．２倍，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定... 乳酸克鲁维酵母经高压破壁后的粗提液，其β－半乳糖苷酶比活力为５．５６ｕ／ｍｇ．经硫酸铵沉淀，丙酮沉淀，ＰＡＰＭＡ－Ａｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ柱层析后，乳糖酶比活力达３７０ｕ／ｍｇ，纯化了６６．２倍，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定为一条带，分子量８５０００Ｄａ。酶作用的最适ｐＨ在６．４－６．８之间，最适温度４０℃，５０℃保温１５ｍｉｎ酶活丧失９０％，以邻硝基苯－β－半乳糖苷为底物的米氏常数为２． 展开更多

关键词 乳酸 克鲁维酵母 提纯 半乳糖苷酶

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乳酸克鲁维酵母表达外源蛋白研究进展 被引量：7

5

作者 刘波 马清钧 吴军 《生物技术通讯》 CAS 2007年第6期1039-1042,共4页

乳酸克鲁维酵母已成功地应用于多种异源蛋白的表达生产之中。与其他酵母相比,乳酸克鲁维酵母具有许多优点,如超强的分泌能力,良好的大规模发酵特性、食品安全的级别及整合表达能力等,其作为宿主系统表达药用蛋白也已显示出巨大的潜力。... 乳酸克鲁维酵母已成功地应用于多种异源蛋白的表达生产之中。与其他酵母相比,乳酸克鲁维酵母具有许多优点,如超强的分泌能力,良好的大规模发酵特性、食品安全的级别及整合表达能力等,其作为宿主系统表达药用蛋白也已显示出巨大的潜力。从不同的菌属、遗传工程和分子生物学技术(如启动子、表达载体)等方面简要综述了乳酸克鲁维酵母作为蛋白表达宿主系统的优势。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 异源重组蛋白 生物技术

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β-半乳糖苷酶酶学性质及其在低聚半乳糖合成中的应用 被引量：9

6

作者 邢肖肖 齐崴 +3 位作者 王梦凡 尤生萍 苏荣欣 何志敏 《生物加工过程》 CAS 2015年第2期30-34,共5页

研究乳酸克鲁维酵母所产β-半乳糖苷酶的酶学性质及低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)的酶法合成条件。利用高效液相色谱法进行检测,以GOS(聚合度n>3)生成量为指标,考察温度、pH、金属离子种类和浓度对酶活性的影响,以及K+存... 研究乳酸克鲁维酵母所产β-半乳糖苷酶的酶学性质及低聚半乳糖(galactooligosaccharides,GOS)的酶法合成条件。利用高效液相色谱法进行检测,以GOS(聚合度n>3)生成量为指标,考察温度、pH、金属离子种类和浓度对酶活性的影响,以及K+存在时,底物浓度、反应时间、加酶量对乳糖转化率及GOS生成浓度的影响。结果表明:一价离子对β-半乳糖苷酶转糖苷活性具有促进作用,其中K+、NH+4对水解活性同样起促进作用,而Na+起抑制作用;制备低聚半乳糖的最佳工艺条件为37℃、pH8.0、K+0.08mol/L、初始乳糖质量浓度500g/L、反应时间5h、加酶量10μL/g乳糖,此条件下低聚半乳糖的生成质量浓度达到94.74g/L。 展开更多

关键词 Β-半乳糖苷酶 乳酸克鲁维酵母 低聚半乳糖

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适合乳果糖生产的β-半乳糖苷酶高产株的筛选及培养基优化 被引量：4

7

作者 张萃荟 杨瑞金 +2 位作者 张文斌 刘芳 费颖 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期68-70,74,共4页

通过紫外、超声和甲基磺酸乙酯(EMS)诱变乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),筛选出一株适合乳果糖生产的β-半乳糖苷酶高产菌株K1-16-7,其乳果糖产量达到44.88g/L。通过Plackett-Burman实验设计、中心组合实验设计对其摇瓶培养基进... 通过紫外、超声和甲基磺酸乙酯(EMS)诱变乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),筛选出一株适合乳果糖生产的β-半乳糖苷酶高产菌株K1-16-7,其乳果糖产量达到44.88g/L。通过Plackett-Burman实验设计、中心组合实验设计对其摇瓶培养基进行优化,采用优化配方酶活可以达到147.6U/g。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 诱变育种 Β-半乳糖苷酶 乳果糖

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适合乳果糖生产的菌株K．lactisK1-16-7产β-半乳糖苷酶发酵条件的优化 被引量：6

8

作者 张萃荟 杨瑞金 +2 位作者 张文斌 刘芳 费颖 《食品科技》 CAS 北大核心 2008年第7期6-10,共5页

在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对K.lactisK1-16-7菌株的培养基配方进行优化,确定了影响K1-16-7菌株产酶的5个重要因子依次为酵母膏、蛋白胨F403、乳糖、MgSO4和KH2PO4,对这5个因子进行最陡爬坡试验,通过响... 在摇瓶发酵条件下,采用Plackett-Burman设计法和响应面分析法对K.lactisK1-16-7菌株的培养基配方进行优化,确定了影响K1-16-7菌株产酶的5个重要因子依次为酵母膏、蛋白胨F403、乳糖、MgSO4和KH2PO4,对这5个因子进行最陡爬坡试验,通过响应面分析法确定了主要影响因子的最佳条件。优化后的培养基配方为酵母膏10.7g/L、蛋白胨F4039.4g/L、乳糖12.1g/L、MgSO45.6g/L、KH2PO44.7g/L,优化后β-半乳糖苷酶的产量达147.6U/g,比优化前提高了88.7%。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 Β-半乳糖苷酶 乳果糖 Plackett—Burman 响应面分析法

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不同菌种发酵苹果浓缩汁的风味成分变化分析 被引量：8

9

作者 王昕悦 曹少军 +4 位作者 赵华杰 秦静 武晓丹 胡晓慧 陈荣荣 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期238-243,共6页

利用植物乳杆菌EM1L115、乳酸克鲁维酵母EM1Y071发酵苹果浓缩汁,对比分析发酵前后的挥发性香气成分、游离氨基酸、有机酸等的成分及变化。发现EM1L115发酵苹果浓缩汁风味改变不显著,主要贡献成分为乳酸;EM1Y071单菌以及与EM1L115协同发... 利用植物乳杆菌EM1L115、乳酸克鲁维酵母EM1Y071发酵苹果浓缩汁,对比分析发酵前后的挥发性香气成分、游离氨基酸、有机酸等的成分及变化。发现EM1L115发酵苹果浓缩汁风味改变不显著,主要贡献成分为乳酸;EM1Y071单菌以及与EM1L115协同发酵苹果浓缩汁有较明显的风味变化且二者差异性大,主要是发酵代谢生成的酯类、醇类,以及呈味氨基酸和有机酸变化协同改变的结果。 展开更多

关键词 发酵苹果浓缩汁 乳酸克鲁维酵母 植物乳杆菌 香气成分 游离氨基酸 有机酸

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一株乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)发酵条件的优化及其胞内乳糖酶性质的研究 被引量：7

10

作者 徐晨 陈历俊 石维忱 《中国食品添加剂》 CAS 北大核心 2010年第6期155-160,共6页

作为益生元的低聚半乳糖（Galacto-oligosaccharide,简称GOS）可促进肠道内乳酸菌和双歧杆菌的增殖,有利于人体健康。GOS是利用乳糖酶转移半乳糖苷的作用生成的。本实验通过正交试验研究了产乳糖酶乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis... 作为益生元的低聚半乳糖（Galacto-oligosaccharide,简称GOS）可促进肠道内乳酸菌和双歧杆菌的增殖,有利于人体健康。GOS是利用乳糖酶转移半乳糖苷的作用生成的。本实验通过正交试验研究了产乳糖酶乳酸克鲁维酵母（Kluyveromyces lactis 2.1494）的培养条件及其乳糖酶的性质。结果表明,该株乳酸克鲁维酵母的最佳培养条件为：温度28℃,自然pH,接种量3%,乳糖添加量2%,装液量40mL,摇床转速80 r/m in,培养时间22h。在此条件下培养,乳糖酶比活力最高可达24.54U/mg。此酶最适温度为50℃,最适pH为6.6,最适底物浓度为0.6mol/L,在40℃以下,pH6.2-7.0具有较高的稳定性,Mn^2＋、Mg^2＋和Zn^2＋对该酶有一定的激活作用,而重金属Cu^2＋对该酶有强烈抑制作用。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 乳糖酶 正交试验 摇瓶培养

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牛凝乳酶原基因的合成及其在乳酸克鲁维酵母中的表达 被引量：7

11

作者 袁伟 柯涛 +3 位作者 杜敏华 褚学英 胡凡 惠丰立 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1281-1286,共6页

凝乳酶在奶酪加工中应用广泛,为获得高活性的凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母为宿主,首次对经密码子优化的牛凝乳酶原基因进行表达。利用DNAWorks3.0软件辅助设计,用两步PCR法合成了小牛凝乳酶原基因(GenBank Accession No.AA30448)。将... 凝乳酶在奶酪加工中应用广泛,为获得高活性的凝乳酶制剂,采用乳酸克鲁维酵母为宿主,首次对经密码子优化的牛凝乳酶原基因进行表达。利用DNAWorks3.0软件辅助设计,用两步PCR法合成了小牛凝乳酶原基因(GenBank Accession No.AA30448)。将该基因插入酵母表达载体pKLAC1,构建了重组载体pKLAC1-Prochy,并用电脉冲法将线性化的重组质粒转化到乳酸克鲁维酵母GG799中。通过含1%酪蛋白的YEPD平板活性筛选,PCR鉴定,最后获得了一株多拷贝整合的基因工程菌chy1。该菌株可分泌表达牛凝乳酶原,经SDS-PAGE分析,证明重组牛凝乳酶原的分子量约为41kDa,符合预期大小,酸化处理后为36kDa,证明可以正确自我剪切。液体培养96h后,酶活最高达到99.67SU/mL。分别以半乳糖和葡萄糖为碳源的条件下表达,其酶活性差异不大,说明在发酵期间,可以不经过半乳糖诱导即可产生高水平的牛凝乳酶原产物。该工程菌的获得为进一步优化产酶条件及放大工艺提供了条件,并为凝乳酶的工业化生产奠定了基础。 展开更多

关键词 牛凝乳酶原 乳酸克鲁维酵母 基因合成 密码子优化

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人αA干扰素在克鲁氏乳酸酵母中的表达和分泌 被引量：4

12

作者 陈新杰 高卜渝 +1 位作者 史文格 李育阳 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1992年第3期284-288,共5页

pE1是由酵母天然质粒pKD1衍生出来的重组穿梭质粒,在克鲁氏乳酸酵母中具有高拷贝,高稳定性等特点。把人αA干扰素分泌表达单元克隆到pE1载体中,得到分泌型表达质粒pE-IFN1。pE-IFN1在克鲁氏乳酸酵母中相当稳定,在非选择性培养基中生长5... pE1是由酵母天然质粒pKD1衍生出来的重组穿梭质粒,在克鲁氏乳酸酵母中具有高拷贝,高稳定性等特点。把人αA干扰素分泌表达单元克隆到pE1载体中,得到分泌型表达质粒pE-IFN1。pE-IFN1在克鲁氏乳酸酵母中相当稳定,在非选择性培养基中生长50世代后,大多数酵母细胞仍带有质粒。结果表明,分泌表达单元中的酿酒酵母α因子的分泌信号肽能被克鲁氏乳酸酵母的蛋白质分泌系统所识别,人αA干扰素被分泌到细胞外。在摇瓶培养条件下每升发酵液中含有1—2毫克αA干扰素。 展开更多

关键词 基因表达 克鲁乳酸酵母 干扰素

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乳酸克鲁维酵母表面展示系统研究

13

作者 姜巨全 安吉一 +2 位作者 商娜 刘文婷 郑迎迎 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期39-45,57,共8页

酵母表面展示技术通过将目标蛋白锚定在细胞表面,广泛应用于疫苗制备、药物筛选、环境治理、菌株筛选等领域。为在乳酸克鲁维酵母中进行医药蛋白的高效生产并开展蛋白质工程研究,利用酿酒酵母来源的Sed1作为锚蛋白,His Tag作为检测靶标... 酵母表面展示技术通过将目标蛋白锚定在细胞表面,广泛应用于疫苗制备、药物筛选、环境治理、菌株筛选等领域。为在乳酸克鲁维酵母中进行医药蛋白的高效生产并开展蛋白质工程研究,利用酿酒酵母来源的Sed1作为锚蛋白,His Tag作为检测靶标,在乳酸克鲁维酵母中进行表面展示系统的构建,并利用间接法免疫荧光标记和全细胞流式分析相结合的方法进行高通量表征。激光扫描共聚焦显微镜成像结果进一步证实了人血清白蛋白的成功表达。优化检测条件后,最高展示效率达89.8%。研究首次在乳酸克鲁维酵母中建立并系统优化了酵母表面展示系统,为在乳酸克鲁维酵母中开展高效蛋白质生产和蛋白质工程研究奠定了基础。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 酵母表面展示 优化 人血清白蛋白

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基于CRISPR/Cas9和紫外诱变构建高产小牛胰凝乳酶的多拷贝乳酸克鲁维酵母

14

作者 宋悦辰 周婕妤 倪晔 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2983-2997,共15页

小牛胰凝乳酶(bovine chymosin)作为重要的食品酶,广泛应用于乳制品行业中奶酪的生产制造。本研究将密码子优化后的小牛胰凝乳酶酶原基因作为目的基因,构建了分泌表达框,通过基因组整合至乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),单拷贝... 小牛胰凝乳酶(bovine chymosin)作为重要的食品酶,广泛应用于乳制品行业中奶酪的生产制造。本研究将密码子优化后的小牛胰凝乳酶酶原基因作为目的基因,构建了分泌表达框,通过基因组整合至乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis),单拷贝菌株的摇瓶发酵活力达到了40U/mL;基于单拷贝菌株,采用CRISPR/Cas9技术敲除筛选基因amdS,构建了多拷贝整合菌株,双拷贝和三拷贝整合菌株的摇瓶发酵活力分别增加到70U/mL和78U/mL。基于双拷贝整合菌株KLUcym^(D),采用紫外诱变育种技术,在多轮诱变育种后筛选得到一株高产小牛胰凝乳酶的重组菌株KLUcym^(D)-M2,摇瓶发酵酶活力达到270U/mL;5L罐中发酵76h,酶活力达到最高值600U/mL。综上,本研究成功构建了一株高产小牛胰凝乳酶的乳酸克鲁维酵母重组菌株,为进一步工业化放大生产奠定了基础。 展开更多

关键词 小牛胰凝乳酶 乳酸克鲁维酵母 合成生物学 多拷贝整合 紫外诱变育种

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产乳糖酶酵母Kluyveromyces lactis培养产酶发酵条件的研究 被引量：5

15

作者 张明丽 刘文群 +3 位作者 熊华 陈望华 肖芳 简霜泉 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第12期428-432,共5页

通过正交试验和单因素试验确定了本实验室乳酸克鲁维酵母菌株产乳糖酶的发酵培养基组分(W/V,%)为乳糖8、葡萄糖0.5、酵母膏0.7、尿素0.15、KH2PO41.5、MgSO40.1、MnCl20.01,并考察了其发酵工艺条件,优化得到的最高产酶量平均达到1.930ON... 通过正交试验和单因素试验确定了本实验室乳酸克鲁维酵母菌株产乳糖酶的发酵培养基组分(W/V,%)为乳糖8、葡萄糖0.5、酵母膏0.7、尿素0.15、KH2PO41.5、MgSO40.1、MnCl20.01,并考察了其发酵工艺条件,优化得到的最高产酶量平均达到1.930ONPGU/ml。 展开更多

关键词 乳糖酶 乳酸克鲁维酵母 发酵条件

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基于乳酸克鲁维酵母的高纯度低聚半乳糖的扩试制备工艺开发

16

作者 杨瑞 吴昊 +3 位作者 邢起国 尤生萍 苏荣欣 齐崴 《南开大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期46-51,共6页

以乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)为研究对象,开发了一套扩试制备高纯度GOS的工艺包,包括透性细胞p-cells催化反应、全细胞np-cells发酵纯化.在实验室反应阶段(25 mL),以单位酶活来定义加酶量,消除了以湿细胞浓度为准引起不同实... 以乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)为研究对象,开发了一套扩试制备高纯度GOS的工艺包,包括透性细胞p-cells催化反应、全细胞np-cells发酵纯化.在实验室反应阶段(25 mL),以单位酶活来定义加酶量,消除了以湿细胞浓度为准引起不同实验批次的结果偏差.PBS浓度从50降至5 mmol/L后,对GOS催化制备无影响,但大幅度降低了GOS产品盐含量.在扩试反应阶段(1 L),通过改进加料方式,将最佳反应时间缩短了4倍,消除了放大效应对反应速率的影响.对搅拌转速优化后可得最优条件(加酶量100 U/mL、PBS浓度5 mmol/L、转速400 r/min)下,GOS收率达到19.15%.在扩试纯化阶段(1 L),经优化可得最佳条件(总糖质量浓度100 g/L、全细胞添加量50 g/L)下纯化所得GOS粗液,经喷雾干燥,GOS纯度达到96.21%,未检测到杂糖,盐含量仅为3.79%,达到低聚糖国标要求. 展开更多

关键词 低聚半乳糖 乳酸克鲁维酵母 扩试 透性化处理 生物代谢法

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外源接菌对发酵辣椒微生物群落和挥发性风味化合物的影响 被引量：2

17

作者 唐鑫 张艺馨 +4 位作者 刘卫红 史巧 刘毕琴 李宏 罗义勇 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第10期132-141,共10页

利用乳酸克鲁维酵母Km和植物乳杆菌QB3制备了多种发酵辣椒制品,理化指标分析发现QB3发酵辣椒消耗最多还原糖,导致发酵液的pH值下降最快,并且使短链脂肪酸和VA含量分别提高了62.5%和13.8%。发酵辣椒中微生物多样性和挥发性代谢组分析表明... 利用乳酸克鲁维酵母Km和植物乳杆菌QB3制备了多种发酵辣椒制品,理化指标分析发现QB3发酵辣椒消耗最多还原糖,导致发酵液的pH值下降最快,并且使短链脂肪酸和VA含量分别提高了62.5%和13.8%。发酵辣椒中微生物多样性和挥发性代谢组分析表明,接种QB3发酵具有生长优势并降低了微生物的α多样性;发酵辣椒中共检出73种挥发性化合物,46种挥发性化合物可能对风味具有贡献,相关性分析表明148种微生物可能参与71种化合物的合成,植物乳杆菌和乳酸克鲁维酵母可能参与26种挥发性化合物的合成,并且乳酸克鲁维酵母是风味物质形成的关键,而挥发性化合物的合成多数与植物乳杆菌呈负相关。该研究结果为通过接种乳酸菌和酵母菌发酵制备多种风味发酵辣椒制品提供理论依据和技术支撑,为发酵食品风味的多元化提供参考。 展开更多

关键词 发酵辣椒 乳酸克鲁维酵母 植物乳杆菌 多样性 代谢组 相关性

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双歧杆菌与乳酸克鲁维酵母共发酵对酸奶品质及风味的影响 被引量：6

18

作者 贡佳欣 李思宁 唐善虎 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期98-101,107,共5页

为了探讨改变乳酸克鲁维酵母添加量与双歧杆菌共发酵对酸奶的理化性质、感官品质、质构及挥发性风味成分的影响,测定和分析了后熟24 h后酸奶的滴定酸度、持水力、p H、感官得分和质构特性,并对后熟酸奶中挥发性物质进行了鉴定。结果表明... 为了探讨改变乳酸克鲁维酵母添加量与双歧杆菌共发酵对酸奶的理化性质、感官品质、质构及挥发性风味成分的影响,测定和分析了后熟24 h后酸奶的滴定酸度、持水力、p H、感官得分和质构特性,并对后熟酸奶中挥发性物质进行了鉴定。结果表明:添加2.0%~3.0%乳酸克鲁维酵母能促进乳酸菌产酸,提高酸奶的保水力,改善质构和感官特性。添加乳酸克鲁维酵母的酸奶中检出的醇类、酯类及烃类物质的个数高于不添加酵母的酸奶,且醇类和酯类的相对百分含量要高于不添加酵母的酸奶。当乳酸克鲁维酵母添加量为2.0%,与双歧杆菌制备的共发酵酸奶的感官、产酸能力、质构及风味最好。 展开更多

关键词 乳酸克鲁维酵母 双歧杆菌 共发酵酸奶 品质 风味物质

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扣囊复膜孢酵母α-淀粉酶基因在乳酸克鲁维酵母中的表达与重组酶性质 被引量：5

19

作者 郭玉婉 沈微 +3 位作者 王一恬 樊游 陈献忠 王正祥 《工业微生物》 CAS CSCD 2014年第2期25-30,共6页

通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的α因子信号肽下游,构建重组表达载体pKLAClSfA。重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799,筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平... 通过PCR方法从扣囊复膜孢酵母基因组DNA中克隆获得α-淀粉酶基因成熟肽编码区(SfA),插入乳酸克鲁维酵母表达载体pKLACl的α因子信号肽下游,构建重组表达载体pKLAClSfA。重组载体转化乳酸克鲁维酵母GG799,筛选获得表达α-淀粉酶SfA水平较高的重组菌。酶活检测和SDS-PAGE电泳检测均显示,重组菌分泌重组酶SfA到发酵液中。酶学性质研究表明:SfA最适温度为45℃,最适pH5.0,在pH4.5~5.5、50℃条件下保持稳定。Ca^(2+)等二价金属离子对SfA酶活有激活作用,EDTA强烈的抑制SfA活性。HPLC分析显示SfA水解糊精获得麦芽寡糖和少量葡萄糖,其中麦芽三糖是主要产物,占水解产物总量的52%。 展开更多

关键词 扣囊复膜孢酵母 α-淀粉酶 乳酸克鲁维酵母 麦芽三糖

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蜡样芽胞杆菌磷脂酶C在乳酸克鲁维酵母中重组表达、纯化及酶学性质分析 被引量：5

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作者 肖超 张梁 +3 位作者 李颜颜 辛瑜 陈国安 杨盛荣 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期87-96,共10页

【目的】构建蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)的重组乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)菌株、纯化重组蛋白并对其进行酶学性质分析。【方法】以B.cereus基因组DNA为模板,PCR扩增得到磷脂酶C基因(bcplc)... 【目的】构建蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus)磷脂酶C(Phospholipase C,PLC)的重组乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)菌株、纯化重组蛋白并对其进行酶学性质分析。【方法】以B.cereus基因组DNA为模板,PCR扩增得到磷脂酶C基因(bcplc),构建重组乳酸克鲁维酵母表达质粒并转化到乳酸克鲁维酵母中,实现bcplc基因的表达。利用镍柱亲和层析纯化和脱盐柱得到电泳纯的重组磷脂酶C(rbcPLC)。【结果】成功构建产磷脂酶C的重组乳酸克鲁维酵母并纯化了重组磷脂酶C,纯化后rbcPLC经SDS-PAGE分析在40 kDa附近出现显性条带。NPPC法测得rbcPLC酶活为19251 U/mg,最适反应温度为80°C,最适pH为9.0。在低于40°C时,pH 7.0-8.0时,rbcPLC重组酶较稳定。Cu^(2+)和Co^(2+)对其有明显的抑制作用;Zn^(2+)、Mn^(2+)、Ca^(2+)、Mg^(2+)对其有明显的促进作用。【结论】首次实现了对蜡样芽胞杆菌来源的磷脂酶C在乳酸克鲁维酵母中的重组表达、纯化及其酶学性质分析,为其它食品安全性微生物来源的磷脂酶C的研究提供了借鉴意义。 展开更多

关键词 蜡样芽胞杆菌 乳酸克鲁维酵母 重组表达 纯化 酶学性质

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