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益气养阴方及其拆方对急性髓系白血病细胞细胞凋亡及Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF表达的影响 被引量:16
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作者 张树森 徐瑞荣 +1 位作者 王兆华 王琰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期95-100,共6页
目的:研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对人急性髓系白血病细胞凋亡及细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C),凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1),第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(the sec... 目的:研究益气养阴方及其拆方后的扶正方、祛邪方对人急性髓系白血病细胞凋亡及细胞色素C(Cytochrome C,Cyt-C),凋亡蛋白酶活化因子(apoptotic protease activating factor 1,Apaf-1),第二个线粒体衍生的半胱天冬蛋白酶激活因子(the second mitochondria-derived activator of caspase/direct IAP-blinding protein with low PI,Smac/Diablo),凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factors,AIF)表达的影响,探讨益气养阴方治疗白血病的可能作用机制。方法:采用NOD/SCID小鼠,以KG-1a细胞株建立人急性髓系白血病模型,随机分为全方组、祛邪组、扶正组和空白组,取NOD/SCID小鼠脾细胞制成细胞悬液,应用流式细胞术检测NOD/SCID小鼠细胞凋亡率;采用免疫组化法检测NOD/SCID小鼠骨髓中线粒体相关凋亡因子CytC,Apaf-1,Smac/Diablo和AIF的表达。结果:用药后,用药组小鼠生存时间较空白组显著延长(P<0.01),全方组小鼠生存时间较扶正组与祛邪组显著延长(P<0.01),祛邪组小鼠生存时间较扶正组显著延长(P<0.01)。用药组细胞凋亡率较空白组明显升高(P<0.01),全方组较扶正组与祛邪组显著升高(P<0.01),祛邪组较扶正组显著升高(P<0.01)。用药组小鼠骨髓中Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达较空白组显著升高(P<0.05),其中Cyt-C与Apaf-1表达显著升高(P<0.01);全方组均高于扶正组与祛邪组(P<0.01);祛邪组较扶正组均升高(P<0.05),Cyt-C,Apaf-1和Smac/Diablo表达显著升高(P<0.01)。其中对于各指标的影响全方组均优于扶正组与祛邪组,祛邪组均优于扶正组。结论:益气养阴方能够提高NOD/SCID小鼠的细胞凋亡率,上调线粒体相关凋亡因子Cyt-C,Apaf-1,Smac/Diablo,AIF的表达,并诱导其凋亡,抑制白血病细胞增殖,其机制可能与线粒体凋亡通路有关。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 益气养阴方 kg-1a细胞 线粒体途径 细胞凋亡
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线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分诱导KG1a细胞凋亡中的作用 被引量:12
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作者 贺艳杰 李玉华 +3 位作者 卢会芳 黄宇贤 黄睿 郭坤元 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期356-360,共5页
目的研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡过程中的作用。方法以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态... 目的研究线粒体通路和死亡受体通路在中华眼镜蛇毒组分(naja naja actra venom component,NNAVC)诱导KG1a细胞凋亡过程中的作用。方法以人急性髓系白血病细胞株KG1a细胞为研究对象,采用Annexin V-FITC/PI荧光染色法进行凋亡细胞的形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡率,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3的活性,ELISA法检测胞质内细胞色素C的表达水平,流式细胞仪分析TRAIL死亡受体(DR4、DR5)和诱骗受体(DcR1、DcR2)的改变。结果 NNAVC作用后,荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞,细胞凋亡率随药物作用浓度的增加而升高;Caspase-9、Caspase-8和Caspase-3蛋白被激活,胞质内细胞色素C的表达明显增加;流式细胞仪检测结果显示,NNAVC具有降低死亡受体DR4和诱骗受体DcR1的表达率,而提高DR5和DcR2的表达水平的作用。结论线粒体凋亡通路和死亡受体通路均参与NNAVC诱导KG1a细胞凋亡的过程,这可能是NNAVC发挥抗白血病作用的机制之一。 展开更多
关键词 白血病 中华眼镜蛇毒 kg1a细胞 线粒体通路 死亡受体通路 凋亡
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人参皂苷单体Rh2抑制人白血病KG1-α细胞增殖并促进其凋亡 被引量:10
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作者 游智梅 陈地龙 +4 位作者 魏强 赵亮 夏菁 李丹阳 李静 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期565-568,共4页
目的研究人参皂苷单体Rh2对人白血病细胞KG1-α增殖、凋亡的影响。方法取对数生长期的KG1-α细胞,分别用不同浓度的人参皂苷单体Rb1、Rg1、Rh2诱导,另设空白对照组,阳性对照用阿糖胞苷。运用CCK-8法检测各单体对细胞增殖的影响,筛选出... 目的研究人参皂苷单体Rh2对人白血病细胞KG1-α增殖、凋亡的影响。方法取对数生长期的KG1-α细胞,分别用不同浓度的人参皂苷单体Rb1、Rg1、Rh2诱导,另设空白对照组,阳性对照用阿糖胞苷。运用CCK-8法检测各单体对细胞增殖的影响,筛选出最强作用单体。用筛选出的皂苷单体诱导KG1-α细胞,用annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术检测人参皂苷单体对细胞凋亡的影响,PI染色流式细胞术检测对细胞周期的影响,Western blot法检测人参皂苷单体处理的KG1-α细胞中P53、P21、cylin D1、cleaved caspase-3的表达。结果 CCK-8实验结果显示人参皂苷Rh2、Rb1、Rg1、阿糖胞苷的IC50分别为(75、207、268、1058)μmol/L;与对照组相比,经人参皂苷Rh2诱导24、48 h后,annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞术结果表明凋亡率由(5.37±0.02)%,分别增加至(8.37±0.015)%、(33.22±1.67)%(P<0.05);同样处理,细胞周期检测结果显示:G0/G1期由(26.78±3.14)%,分别上升至(29.26±2.31)%、(44.77±2.26)%;S期由(65.43±2.22)%,分别下调至(51.46±0.57)%、(48.29±1.80)%;Western blot结果显示,cleaved-caspase 3、P53和P21在75μmol/L Rh2处理后表达上调,而cyclin D1表达下调。结论人参皂苷Rh2可抑制KG1-α细胞的增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷单体Rb1 RG1 Rh2 kg1-a 细胞 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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淫羊藿素对KG-1a细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制 被引量:11
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作者 李莉 王黎 +1 位作者 魏广民 陈德森 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期738-742,共5页
目的:分析淫羊藿素抑制Wnt/β-catenin信号通路干预急性髓系白血病KG-1a细胞增殖的可能机制,为开发治疗急性髓系白血病药物提供实验依据。方法:50只c57BL/6小鼠编号后随机分为空白对照、模型对照和淫羊藿素高、中、低剂量共5组(n=10只)... 目的:分析淫羊藿素抑制Wnt/β-catenin信号通路干预急性髓系白血病KG-1a细胞增殖的可能机制,为开发治疗急性髓系白血病药物提供实验依据。方法:50只c57BL/6小鼠编号后随机分为空白对照、模型对照和淫羊藿素高、中、低剂量共5组(n=10只),除空白对照组外均采用腹腔注射人急性髓系白血病细胞KG-1a的方法建模。淫羊藿素高、中、低剂量组分别按80、40和20 mg/kg剂量肌肉注射淫羊藿素治疗3周,模型对照组和空白对照组肌肉注射生理盐水。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测S期激酶相关蛋白2(SKP2)、β-连环蛋白(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及多聚腺素二磷酸核糖多聚酶[poly(ADP-ribose)polymerase;PARP]蛋白表达;采用分光光度法检测细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和天冬酶-3酶原(Procaspase-3)活性;流式细胞术分别检测经淫羊藿素处理后的细胞周期时相分布和细胞凋亡率情况。结果:淫羊藿素可增强Caspase-3活性,降低Procaspase-3的水平,还可上调E-cadherin蛋白的表达,下调SKP2和β-catenin蛋白的表达,呈剂量依赖性增加PARP蛋白表达,经淫羊藿素处理后细胞凋亡明显,KG-1a细胞被阻滞于G_0/G_1期,KG-1a细胞生长明显受到抑制。结论:淫羊藿素能够剂量依赖性地裂解PARP,以诱导人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路及其下游相关基因表达有关。 展开更多
关键词 淫羊藿素 急性髓系白血病 kg-1a细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路
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抗KG1a细胞噬菌体展示ScFv的筛选及鉴定 被引量:4
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作者 隋建华 何一心 +1 位作者 许静 宋增璇 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期572-575,共4页
目的 应用KG1a细胞 (髓系白血病细胞系 )筛选噬菌体抗体库 ,获得能以一定特异性结合KG1a细胞的单链抗体 (ScFv) ,克隆其基因并研究其对应抗原在不同细胞表面的分布。方法 用完整的KG1a细胞筛选一个经KG1a细胞免疫小鼠脾细胞的ScFv噬... 目的 应用KG1a细胞 (髓系白血病细胞系 )筛选噬菌体抗体库 ,获得能以一定特异性结合KG1a细胞的单链抗体 (ScFv) ,克隆其基因并研究其对应抗原在不同细胞表面的分布。方法 用完整的KG1a细胞筛选一个经KG1a细胞免疫小鼠脾细胞的ScFv噬菌体抗体库 ,重复筛选 4轮 ;细胞ELISA鉴定了其中 96个克隆与KG1a细胞的结合反应 ;从 2 6个KG1a细胞ELISA阳性克隆中挑选了 3个克隆 ,进一步用免疫荧光染色、流式细胞仪分析其各自对应抗原在不同细胞表面的分布 ,并对其中2个克隆的ScFv编码基因进行序列测定。结果 流式细胞仪分析结果显示 ,3个克隆所识别的抗原均存在于不同白血病细胞表面 ,但比例分布不同 ,而 3个克隆之间又略有差异 ,其中 2个克隆的DNA序列测定结果显示其核苷酸序列和氨基酸顺序有所不同 ,均属小鼠免疫球蛋白同一可变区基因家族和亚群 ,重链可变区 (VH)属亚群Ⅱ、家族Ⅵ ,轻链可变区 (Vκ)属亚群Ⅲ、家族Ⅸ。结论 用完整细胞筛选噬菌体抗体库可有效分离细胞表面分子的抗体片段及其基因 ,这种方法对于筛选和获得此类难以分离纯化和未知的细胞表面分子的抗体具有良好的应用价值 ;用KG1a细胞筛选所得的抗体及其基因对于进一步研究和发现白血病细胞表面分子具有重要意义。 展开更多
关键词 噬菌体抗体库 单链抗体 kg1a细胞 表面分子 鉴定
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姜黄素对CD34^+人急性髓系白血病细胞增殖抑制作用及机制探讨 被引量:7
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作者 饶佳 张荣艳 +2 位作者 陈国安 李菲 黄仁魏 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期1005-1008,共4页
目的:探讨姜黄素对CD34+人急性髓系白血病细胞株KG1a和Kasumi-1增殖抑制作用及其机制。方法:以不同浓度姜黄素(0、20、40、80μmol/L)处理KG1a和Kasumi-1细胞48 h,采用台盼蓝染色计数法检测细胞活率,Western blot法测定姜黄素对细胞NF-... 目的:探讨姜黄素对CD34+人急性髓系白血病细胞株KG1a和Kasumi-1增殖抑制作用及其机制。方法:以不同浓度姜黄素(0、20、40、80μmol/L)处理KG1a和Kasumi-1细胞48 h,采用台盼蓝染色计数法检测细胞活率,Western blot法测定姜黄素对细胞NF-κB P65核蛋白表达影响,免疫荧光检测姜黄素对细胞NF-κB P65核蛋白移位影响。结果:姜黄素可显著抑制KG1a和Kasumi-1细胞生长,随着姜黄素浓度的增加,细胞数量逐渐下降。姜黄素可下调KG1a和Kasumi-1细胞P65核蛋白表达,抑制NF-κB P65核移位,使NF-κB处于失活状态。结论:姜黄素可抑制KG1a和Kasumi-1细胞增殖,其机制可能与姜黄素抑制NF-κB P65核蛋白表达有关。 展开更多
关键词 姜黄素 急性髓细胞白血病 NF-κB kg1a细胞株 Kasumi-1细胞株
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苦参碱抑制KG1a细胞生长及提高自然杀伤细胞对其杀伤敏感性的研究 被引量:5
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作者 王国征 孙明 +4 位作者 周健 胡亮杉 贾振薇 郭坤元 吴秉毅 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期240-243,共4页
目的:观察苦参碱(matrine)对人急性髓系白血病细胞株KG1a的生长抑制作用,及苦参碱作用前后自然杀伤(natural killer,NK)细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。方法:采用CCK-8法和锥虫蓝染色法检测苦参碱对KG1a细胞的生长抑制作用及细胞存活... 目的:观察苦参碱(matrine)对人急性髓系白血病细胞株KG1a的生长抑制作用,及苦参碱作用前后自然杀伤(natural killer,NK)细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。方法:采用CCK-8法和锥虫蓝染色法检测苦参碱对KG1a细胞的生长抑制作用及细胞存活率,FCM检测苦参碱作用前后KG1a细胞周期的变化及表面NK细胞活化性受体(natural-killer group 2,member D,NKG2D)配体(MICA/B、ULBP1、ULBP2和ULBP3)和人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)Ⅰ类分子的表达,乳酸脱氢酶释放法检测苦参碱作用前后NK细胞对KG1a细胞杀伤敏感性的影响。结果:苦参碱能抑制KG1a细胞的生长,随着药物浓度的升高和作用时间的延长,细胞的生长抑制率逐渐升高、存活率逐渐下降;苦参碱作用后细胞发生G1/S期阻滞;细胞表面NKG2D各配体表达率均明显升高,与作用前相比差异有统计学意义(P<0.05),HLA-Ⅰ类分子表达率无明显变化(P>0.05);当效靶比分别为5:1、10:1和20:1时,苦参碱作用前后NK细胞对KG1a细胞的杀伤敏感性差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:苦参碱可抑制KG1a细胞的生长并改变细胞周期,上调KG1a细胞表面NKG2D各配体的表达率,增强NK细胞对其的杀伤敏感性。 展开更多
关键词 白血病 苦参碱 杀伤细胞 天然 配体 细胞 kg1a
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大黄素诱导白血病KG-1a细胞凋亡及对Bcl-2/Bax mRNA表达的影响 被引量:7
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作者 晁荣 靳蕊蕊 +4 位作者 陈彻 席亚明 楚惠媛 李明 张豪 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第13期1297-1299,共3页
目的本研究观察大黄素(emodin)对人急性髓系白血病KG-1a细胞的增殖及凋亡影响,探讨Bcl-2/Bax基因在其中的作用。方法采用四唑蓝比色试验(MTT)检测大黄素对KG-1a细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)测定细胞周期变化与凋亡情况;RT-PCR法检测... 目的本研究观察大黄素(emodin)对人急性髓系白血病KG-1a细胞的增殖及凋亡影响,探讨Bcl-2/Bax基因在其中的作用。方法采用四唑蓝比色试验(MTT)检测大黄素对KG-1a细胞增殖的影响;流式细胞术(FCM)测定细胞周期变化与凋亡情况;RT-PCR法检测大黄素作用后细胞Bcl-2/Bax mRNA表达的变化。结果大黄素能抑制KG-1a细胞的增殖,作用48 h的半数抑制浓度(IC50)约为171.8μmol/L流式细胞仪分析出现典型的亚二倍体峰(凋亡峰),将细胞阻滞于G0/G1期,大黄素作用后KG-1a细胞Bcl-2基因表达下调,而Bax基因表达上调,并呈量效关系。结论大黄素可诱导KG-1a细胞凋亡,其机制可能与下调Bcl-2,上调Bax基因表达水平有关。 展开更多
关键词 大黄素 kg-1a细胞 BCL-2 BAX 细胞凋亡 干细胞
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人参皂苷单体Rh2(S亚型)对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖、凋亡的影响及其机制 被引量:5
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作者 刘艺 李静 +5 位作者 刘晓岩 姜蓉 王建伟 魏强 赵亮 陈地龙 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第10期1319-1324,共6页
目的探讨人参皂苷单体Rh2(S亚型)对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖、凋亡的影响及其机制。方法取对数生长期的KG1α细胞,分为两组:空白对照组(常规培养)和人参皂苷单体Rh2(S)组,采用MTT法检测细胞的增殖活力,倒置显微镜观察细胞的形... 目的探讨人参皂苷单体Rh2(S亚型)对人急性髓系白血病细胞株KG1α增殖、凋亡的影响及其机制。方法取对数生长期的KG1α细胞,分为两组:空白对照组(常规培养)和人参皂苷单体Rh2(S)组,采用MTT法检测细胞的增殖活力,倒置显微镜观察细胞的形态及数量,透射电镜观察细胞的超微结构,流式细胞仪检测细胞周期的分布,Real-time PCR检测细胞中β-catenin基因mRNA水平,免疫细胞化学法检测细胞中β-catenin、TCF4、CyclinD1蛋白的定位及表达,Western blot检测细胞中β-catenin、TCF4、CyclinD1蛋白的表达水平。结果人参皂苷单体Rh2(S)对KG1α细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。与空白对照组比较,Rh2(S)作用48 h后,可见KG1α细胞分散生长,数量明显减少;可见数量不等,程度不同的凋亡细胞;G0/G1期细胞比例明显上升(P<0.05),G2+M和S期细胞比例明显下降(P<0.05);细胞中β-catenin基因mRNA水平明显降低(P<0.01)。β-catenin、TCF4、CyclinD1蛋白的表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论人参皂苷单体Rh2(S亚型)对KG1α细胞具有明显的增殖抑制作用,其机制可能抑制Wnt/β-catenin/TCF4/CyclinD1信号通路,使细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 人参皂苷单体Rh2(S亚型) kg1a细胞 细胞增殖 细胞凋亡 Β-CATENIN TCF4 CYCLIND1
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急性髓系白血病干细胞NOD/SCID小鼠白血病模型的建立 被引量:5
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作者 李蓉蔚 王诗韵 +4 位作者 董慧娟 陈菲莉 史鹏程 郭绪涛 徐兵 《生物医学工程与临床》 CAS 2013年第3期213-217,共5页
目的探讨用非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠和经流式细胞仪分选出的KG1a中CD34+CD38-的干细胞亚群建立白血病干细胞(LSCs)动物模型,为靶向治疗LSCs的药物筛选奠定体内实验基础。方法 18只雌性NOD/SCID小鼠,体质量18~20... 目的探讨用非肥胖型糖尿病/严重联合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠和经流式细胞仪分选出的KG1a中CD34+CD38-的干细胞亚群建立白血病干细胞(LSCs)动物模型,为靶向治疗LSCs的药物筛选奠定体内实验基础。方法 18只雌性NOD/SCID小鼠,体质量18~20 g,鼠龄6~8周龄。实验组12只,应用流式细胞仪分选KG1a细胞中具有LSCs特性的CD34+CD38-亚群,以2×106个/只尾静脉注射经全身X射线照射2Gy的NOD/SCID小鼠;正常对照组6只,只注射磷酸盐缓冲溶液。观察两组小鼠的一般情况和白血病发生情况,应用形态学、组织病理检查、流式细胞术、骨髓染色体检查等检测实验组小鼠的外周血、骨髓、肝脏、脾脏的白血病细胞标志。结果接种2周后实验组小鼠外周血可见白血病细胞,接种30 d实验组小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解;外周血、骨髓、肝、脾中均可发现大量的白血病细胞浸润;实验组小鼠骨髓细胞中CD13抗原阳性率15.47%~23.66%,并可见KG1a细胞的核型特征。结论尾静脉接种流式细胞仪分选后的CD34+CD38-KG1a细胞于全身亚致死量X射线照射后的NOD/SCID小鼠,能成功建成全身播散的白血病模型,为进一步研究LSCs的靶向治疗药物奠定实验基础。 展开更多
关键词 白血病干细胞 急性髓系白血病 小鼠 CD34+CD38- kg1a细胞 动物模型
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热疗在阿霉素对KG-1a白血病细胞杀伤作用中的增敏作用 被引量:5
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作者 张福明 李哲深 +2 位作者 秦素萍 李强 王玉红 《新乡医学院学报》 CAS 2012年第3期169-171,共3页
目的观察热疗在阿霉素对人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞杀伤作用中的増敏作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化学治疗和热疗联合化学治疗,选择温度40、42℃,体外作用于KG-1a细胞。作用前及作用48 h后... 目的观察热疗在阿霉素对人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞杀伤作用中的増敏作用。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法确定阿霉素的工作浓度,以该浓度进行化学治疗和热疗联合化学治疗,选择温度40、42℃,体外作用于KG-1a细胞。作用前及作用48 h后,采用台盼蓝拒染法检测肿瘤细胞的存活率;MTT法检测对肿瘤细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率的变化。结果各处理组的存活率明显要低于对照组(P<0.01),40、42℃热疗联合化学治疗组的细胞存活率明显低于单纯的热疗组(P<0.01)和化学治疗组(P<0.01)。40、42℃热疗联合化学治疗组的细胞抑制率明显高于化学治疗组(P<0.01)和单纯的热疗组(P<0.01)。各处理组的细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),40、42℃热疗联合化学治疗组细胞凋亡率明显高于化学治疗组(P<0.01)和单纯的热疗组(P<0.01)。结论热疗可以增加阿霉素对KG-1a细胞的杀伤作用,提高肿瘤细胞的凋亡率。 展开更多
关键词 热疗 阿霉素 kg-1a细胞 凋亡
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N-cadherin阳性白血病KG1a细胞系在G_0期抵抗VP16杀伤的作用 被引量:4
12
作者 何侃 于沛 +5 位作者 邢海燕 李艳 田征 王敏 唐克晶 饶青 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2011年第5期1102-1106,共5页
抗药性是白血病干细胞的重要特征,为探索N-cadherin阳性的白血病细胞耐受化疗药物VP16杀伤作用的机制,本研究以白血病细胞系KG1a为研究模型,利用流式细胞术测定N-cadherin阳性和N-cadherin阴性细胞在G0期比例的差异,利用G-CSF诱导KG1a... 抗药性是白血病干细胞的重要特征,为探索N-cadherin阳性的白血病细胞耐受化疗药物VP16杀伤作用的机制,本研究以白血病细胞系KG1a为研究模型,利用流式细胞术测定N-cadherin阳性和N-cadherin阴性细胞在G0期比例的差异,利用G-CSF诱导KG1a细胞进入细胞周期,观察G0期细胞比例的变化,并测定诱导后KG1a细胞对VP16的敏感性;再利用EGTA抑制N-cadherin介导的细胞间黏附后,观察KG1a细胞耐药性的变化。结果显示,N-cadherin阳性的KG1a细胞G0期比例高于N-cadherin阴性的细胞;诱导KG1a细胞进入细胞周期后G0期细胞比例明显下降,KG1a细胞对VP16的敏感性显著升高;利用EGTA处理KG1a细胞24小时抑制N-cadherin的作用后,KG1a细胞在G0期比例降低,KG1a细胞对VP16的药物敏感性显著升高。结论:N-cadherin通过介导白血病细胞之间的黏附作用,使白血病细胞处于G0期的静息状态,从而耐受VP16的杀伤作用。 展开更多
关键词 N-CADHERIN 白血病细胞 kg1a细胞 VP16 G0期细胞比率
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斑马鱼异种异体急性髓系白血病模型的建立 被引量:4
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作者 叶永斌 张明宛 +3 位作者 邱大发 郭子文 何慧清 许晓军 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期35-41,共7页
目的:探讨利用人急性髓系白血病干细胞和斑马鱼建立斑马鱼白血病模型,为白血病的研究及治疗药物的筛选提供更为直接的体外研究模型和体内实验依据。方法:利用MitoRed染料对白血病干样细胞KG-1a细胞进行标记,然后通过显微注射法把KG-1a... 目的:探讨利用人急性髓系白血病干细胞和斑马鱼建立斑马鱼白血病模型,为白血病的研究及治疗药物的筛选提供更为直接的体外研究模型和体内实验依据。方法:利用MitoRed染料对白血病干样细胞KG-1a细胞进行标记,然后通过显微注射法把KG-1a细胞植入斑马鱼胚胎的卵黄囊中,观察移植后斑马鱼胚胎的大体存活状态、细胞在斑马鱼体内的增殖和扩散转移;应用组织学切片观察移植后细胞对斑马鱼组织器官的侵袭作用。结果:KG-1a细胞植入斑马鱼胚胎的卵黄囊后,MitoRed标记的KG-1a细胞数目随时间延长而增多并逐渐扩散至整个腹腔,体外计数结果也显示植入细胞明显增殖,表明植入的白血病干细胞能够在斑马鱼体内存活,增殖并扩散。进一步的研究显示,在斑马鱼肝脏组织发现有白血病细胞的浸润,HE染色提示浸润细胞具有KG-1a细胞核型特征。结论:异种异体的人急性髓系白血病干细胞KG-1a可以植入斑马鱼体内并成功建立斑马鱼的白血病模型。该模型的建立可为白血病的研究及治疗药物的筛选提供一种更为直接高效的体外研究平台。 展开更多
关键词 斑马鱼 急性髓系白血病 白血病干细胞 动物模型 kg-1a细胞
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白藜芦醇诱导KG-1细胞凋亡作用与bcl-2/bax表达相关性研究 被引量:4
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作者 李永军 徐红俊 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第5期1026-1029,共4页
本研究观察白藜芦醇(RES)体外诱导KG-1细胞凋亡的作用,探讨白藜芦醇诱导白血病细胞凋亡的可能作用机制。以不同浓度的白藜芦醇作用于KG-1细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长状态;透射电镜观察KG-1细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术(F... 本研究观察白藜芦醇(RES)体外诱导KG-1细胞凋亡的作用,探讨白藜芦醇诱导白血病细胞凋亡的可能作用机制。以不同浓度的白藜芦醇作用于KG-1细胞,用噻唑蓝(MTT)比色法分析细胞生长状态;透射电镜观察KG-1细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术(FCM)测定细胞凋亡与周期分布;半定量RT-PCR、流式细胞技术检测细胞bcl-2、bax表达水平。结果表明:白藜芦醇可明显抑制KG-1细胞增殖(p<0.05),与对照组比较,白藜芦醇作用后KG-1细胞发生S期阻滞(p<0.01),细胞凋亡增高(p<0.01),bcl-2表达下调(p<0.05),而bax表达明显上调(p<0.01)。结论:白藜芦醇可诱导KG-1细胞凋亡,其机制可能与下调bcl-2、上调bax表达水平有关。 展开更多
关键词 白藜芦醇 kg-1细胞 BCL-2 BAX 细胞凋亡
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大黄素联合AZT对白血病KG-1a细胞的增殖及BCL-2、NF-κB、TGF-β表达的影响 被引量:4
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作者 王丽娜 李子坚 +7 位作者 席亚明 陈彻 马婷 赵丽 贾明峰 李明 张豪 刘春霞 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1265-1271,共7页
目的:探讨中药大黄素(Emodin)和端粒酶抑制剂AZT(3'-azido-3'-deoxythymidine)联合应用对浓集白血病干细胞(concentrated leukemia stem cells,CLSC)的急性髓系白血病KG-1a细胞增殖及BCL-2、NF-κB、TGF-β表达的影响。方法:应... 目的:探讨中药大黄素(Emodin)和端粒酶抑制剂AZT(3'-azido-3'-deoxythymidine)联合应用对浓集白血病干细胞(concentrated leukemia stem cells,CLSC)的急性髓系白血病KG-1a细胞增殖及BCL-2、NF-κB、TGF-β表达的影响。方法:应用5-FU富集白血病KG-1a细胞中肿瘤样干细胞亚群并采用流式细胞术检测富集后CD34+CD38-亚群细胞;采用MTT法检测大黄素和AZT单用及联合应用对CLSC的生长增殖的影响;采用流式细胞术检测药物诱导CLSC的凋亡情况;采用RT-PCR及Western blot法分别检测NF-κB、BCL-2、TGF-βmRNA和蛋白表达变化。结果:大黄素和AZT联合后,细胞生长抑制明显大于大黄素和AZT单药组(P<0.01),具有一定的时间和浓度依赖性;细胞凋亡比例均较各单药组增多,差异具有统计学意义(P<0.01);NF-κB、BCL-2、TGF-βmRNA及蛋白表达在联合组比在各单药组表达量下降。结论:大黄素联合AZT具有协同抑制CLSC增殖并诱导其凋亡的作用,其机制可能与抑制BCL-2活化及降低NF-κB、TGF-β表达有关。 展开更多
关键词 大黄素 AZT kg-1a细胞 白血病干细胞 白血病
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三氧化二砷联合普纳替尼对白血病细胞KG-1的抑制效应
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作者 王薇雅 陶长锐 +4 位作者 晁红颖 王荣轩 樊书 姜玉 张艳 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2024年第10期1362-1368,共7页
目的:探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂普纳替尼联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对人急性髓系白血病细胞KG-1的作用及可能机制。方法:CCK-8法检测普纳替尼及ATO对KG-1细胞增殖的影响;流式细胞术AnnexinⅤ/PI双重染色法检测细胞凋亡;实... 目的:探讨小分子酪氨酸激酶抑制剂普纳替尼联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)对人急性髓系白血病细胞KG-1的作用及可能机制。方法:CCK-8法检测普纳替尼及ATO对KG-1细胞增殖的影响;流式细胞术AnnexinⅤ/PI双重染色法检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR检测细胞凋亡相关基因的表达;Western blot检测凋亡相关蛋白、成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)蛋白及信号通路分子磷酸化水平的表达变化。结果:(1)ATO及普纳替尼对KG-1细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性,两药联合较单药作用具有更高的增殖抑制率、更少的集落形成及更多的细胞凋亡,差异均有统计学意义。(2)与DMSO组相比,ATO或普纳替尼均能显著下调Bcl-2表达,上调Bax及Caspase-3表达(P均<0.05);与单药作用相比,联合用药促进Bax及Caspase-3表达的作用更强(P均<0.01)。(3)普纳替尼显著抑制FGFR1基因及蛋白的表达(P均<0.01),ATO的加入并未使FGFR1表达进一步下降。信号通路研究显示,ATO可以显著抑制m-TOR和MAPK、STAT5的磷酸化(P均<0.001),但对PI3K/AKT、STAT3的磷酸化无明显影响。普纳替尼可以显著抑制FGFR1蛋白表达及STAT3、STAT5的磷酸化(P均<0.001),但对PI3K/AKT及MAPK的磷酸化无明显影响。两药联合后,STAT3的磷酸化水平较ATO或普纳替尼单药组进一步下调(P均<0.01)。结论:普纳替尼及ATO可能通过不同机制抑制KG-1细胞增殖及集落形成并诱导细胞凋亡;两药联合可进一步增强对KG-1细胞株的抑制效应。 展开更多
关键词 三氧化二砷 FGFR1蛋白 kg-1细胞 凋亡
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益气养阴法方药促进KG1a进入细胞周期而增强DNR敏感性的研究 被引量:4
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作者 李红玉 史哲新 +3 位作者 李德冠 杨向东 闫理想 刘富春 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2015年第2期369-372,共4页
目的:探讨益气养阴法方药对白血病干细胞(Leukemia Stem Cells,LSC)KG1a细胞周期及其增殖的影响。方法:WST-8法检测益气养阴方含药血清对KG1a体外增殖的影响;WST-8法检测经益气养阴方含药血清联合柔红霉素(DNR)对的KG1a细胞体外增殖的影... 目的:探讨益气养阴法方药对白血病干细胞(Leukemia Stem Cells,LSC)KG1a细胞周期及其增殖的影响。方法:WST-8法检测益气养阴方含药血清对KG1a体外增殖的影响;WST-8法检测经益气养阴方含药血清联合柔红霉素(DNR)对的KG1a细胞体外增殖的影响;流式细胞术分析益气养阴方含药血清对KG1a细胞周期G0/G1期、S期、G2M期的影响。结果:益气养阴方含药血清对KG1a细胞体外增殖抑制作用不明显,呈一定时间及剂量依赖性,但各浓度相比抑制率无明显差异;含药兔血清20μL、40μL浓度组联合DNR对KG1a细胞有明显的抑制作用,且随浓度的增加和作用时间的延长而增强,且40μL浓度组含药兔血清联合DNR组48 h(72.5%)后抑制率显著高于DNR组(P<0.01);益气养阴方含药血清可促使KG1a细胞由G0期进入细胞周期,并呈剂量依赖性;结论:益气养阴含药血清可能通过促进KG1a细胞由G0期进入细胞周期,从而增强DNR的体外杀伤作用,可显著降低白血病细胞的耐药性。 展开更多
关键词 益气养阴法方药 kg1a细胞 白血病多药耐药 细胞周期
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AZT对白血病细胞株KG-1a细胞增殖和端粒酶活性的影响 被引量:4
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作者 靳蕊蕊 晁荣 +4 位作者 席亚明 陈彻 楚惠媛 李明 张豪 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期277-281,共5页
本研究探索端粒酶抑制剂3'-叠氮-2',3'-脱氧胸腺核苷(AZT)对人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞增殖和端粒酶活性的影响。用MTT法检测不同浓度AZT分别作用24、48、72 h时KG-1a细胞增殖水平;流式细胞术检测AZT对KG-1a细胞周期... 本研究探索端粒酶抑制剂3'-叠氮-2',3'-脱氧胸腺核苷(AZT)对人急性髓系白血病细胞株KG-1a细胞增殖和端粒酶活性的影响。用MTT法检测不同浓度AZT分别作用24、48、72 h时KG-1a细胞增殖水平;流式细胞术检测AZT对KG-1a细胞周期及细胞凋亡的影响;TRAP-PCR-ELISA法检测细胞端粒酶活性;RT-PCR法检测细胞端粒逆转录酶(hTERT)mRNA的表达。结果表明,AZT能抑制KG-1a细胞增殖,抑制作用具有时间和浓度依赖性;随AZT浓度的增加,处于S期的细胞数目减少,G2/M期细胞数目增加,且出现凋亡峰;AZT作用后实验组细胞的端粒酶活性降低,hTERT-mRNA表达下降,下调程度与AZT浓度呈正相关。结论:AZT在体外能明显抑制KG-1a细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制与降低端粒酶活性、下调hTERT mRNA表达有关。 展开更多
关键词 白血病 kg-1a细胞 AZT 端粒酶
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GM-CSF对受辐射KG-1细胞的增值及细胞周期的影响 被引量:2
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作者 郭德煌 董波 +2 位作者 文耕云 罗庆良 毛秉智 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期157-160,共4页
以临床上常用的细胞因子GM-CSF刺激受辐射的人髓性白血病细胞株KG-1,观察细胞的增殖情况及周期变化。结果显示;GM-CSF刺激受辐射KG-1细胞的增殖;并且能促进细胞跳出GO/G1阻滞,对S期似有促进作用及增加G2/M期。对未受照射的KG-... 以临床上常用的细胞因子GM-CSF刺激受辐射的人髓性白血病细胞株KG-1,观察细胞的增殖情况及周期变化。结果显示;GM-CSF刺激受辐射KG-1细胞的增殖;并且能促进细胞跳出GO/G1阻滞,对S期似有促进作用及增加G2/M期。对未受照射的KG-1细胞,GM-CSF刺激效应不如受照射细胞。 展开更多
关键词 辐射 GM-CSF 细胞周期 kg-1细胞 增殖
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骨髓基质细胞中B4GALT1对与其共培养的人急性髓系白血病细胞株增殖的影响 被引量:2
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作者 庞星辰 李鸿姣 +2 位作者 王一 关锋 李想 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期283-289,共7页
目的:探讨骨髓基质细胞糖基转移酶B4GALT1的表达对造血细胞增殖的影响及其上游调控机制。方法:在人骨髓来源基质细胞HS5中过表达B4GALT1,并与急性髓系白血病细胞KG1a共培养,采用流式细胞术检测其对造血细胞增殖的影响;应用双荧光素酶报... 目的:探讨骨髓基质细胞糖基转移酶B4GALT1的表达对造血细胞增殖的影响及其上游调控机制。方法:在人骨髓来源基质细胞HS5中过表达B4GALT1,并与急性髓系白血病细胞KG1a共培养,采用流式细胞术检测其对造血细胞增殖的影响;应用双荧光素酶报告基因检测、实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法对调控基质细胞B4GALT1表达的上游转录因子进行预测和验证。结果:HS5中过表达B4GALT1能显著促进共培养体系中KG1a的增殖。基质细胞中B4GALT1表达与上游c-Jun表达呈正相关,并通过JNK/c-Jun抑制剂进行了验证。结论:糖基转移酶及其引起的相应糖基化差异在造血微环境中起到的调控作用,其作用机制有待更深入的研究。 展开更多
关键词 骨髓基质细胞 B4GALT1基因 kg1a细胞 细胞增殖 C-JUN
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