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反义Bmi-1对Jurkat细胞的抑制作用 被引量:19
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作者 刘卫红 孟秀香 +2 位作者 刘丹丹 单路娟 赵心宇 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期554-556,共3页
目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,... 目的观察反义Bmi-1表达质粒在体外对T淋巴细胞白血病Jurkat细胞的生长抑制作用。方法选择Bmi-1基因起始密码子及与锌指结构对应的171bp核苷酸片段,反向连接于pLNCX2质粒上,得到反义Bmi-1表达质粒;通过脂质体转染将质粒导入Jurkat细胞中,以G418进行筛选得到阳性克隆;以MTT法和体外集落形成实验检测反义Bmi-1表达质粒对Jurkat细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞周期;采用免疫荧光组化法检测反义Bmi-1对Jurkat细胞P16蛋白的上调作用。结果转染反义Bmi-1表达质粒组与对照组(空白对照及空质粒组)相比较,生长速度明显变慢,克隆形成能力明显下降,空白对照组Jurkat细胞集落数为(90.70±9.07)/103细胞,空质粒组Jurkat细胞集落数为(83.30±6.11)/103细胞,转染反义质粒组Jurkat细胞集落数为(56.00±5.56)/103细胞(P<0.01);P16蛋白表达也明显增强。结论反义Bmi-1对Jurkat细胞的体外生长具有明显的抑制作用,并上调了P16蛋白的表达。 展开更多
关键词 细胞系 jurkat 寡核苷酸 反义 基因 Bmi-1 jurkat细胞 生长抑制作用 转染反义 P16蛋白表达 T淋巴细胞白血病 体外集落形成 t细胞集落
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三氧化二砷对NB4及Jurkat细胞系端粒酶活性的抑制效应 被引量:9
2
作者 王韫芳 孙红琰 +1 位作者 李昕权 王全立 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2003年第4期359-362,共4页
为了探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对白血病细胞系NB4及Jurkat细胞端粒酶活性的调节作用和机制 ,采用MTT、基因组DNA电泳、蛋白 /DNA双参数流式细胞术 ,端粒重复扩增 (TRAP) SYBRGreenⅠ染色及RT PCR等方法研究了As2 O3 对两种细胞的增殖... 为了探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对白血病细胞系NB4及Jurkat细胞端粒酶活性的调节作用和机制 ,采用MTT、基因组DNA电泳、蛋白 /DNA双参数流式细胞术 ,端粒重复扩增 (TRAP) SYBRGreenⅠ染色及RT PCR等方法研究了As2 O3 对两种细胞的增殖及端粒酶活性的影响。研究发现 ,随着As2 O3 作用时间的延长 ,NB4及Jurkat细胞增殖明显受到抑制 ,DNA电泳出现“梯状”条带 ;流式细胞术检出亚G1峰 ,细胞周期阻滞于G1和G2 /M期 ,端粒酶活性显著降低 ,部分细胞周期及凋亡相关的调控蛋白的表达发生变化。结论 :As2 O3 在抑制NB4及Jurkat细胞增殖和诱导其凋亡过程中导致端粒酶的活性下调 ,细胞周期及凋亡相关蛋白的表达改变可能参与了部分作用机制。 展开更多
关键词 三氧化二砷 NB4细胞系 jurkat细胞系 端粒酶 细胞周期
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紫杉醇诱导Jurkat细胞凋亡及其机制探讨 被引量:5
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作者 周晓燕 许良中 +4 位作者 何开玲 张太明 朱伟萍 李小妹 金爱萍 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期298-300,共3页
目的 观察抗微管药物紫杉醇对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究bcl 2基因家族在此过程中的作用。方法 将不同浓度的紫杉醇作用于Jurkat细胞 ,观察其作用的时间效应及剂量效应 ;在光镜和电镜下观察其形态变... 目的 观察抗微管药物紫杉醇对T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat是否具有凋亡诱导作用 ,并进一步研究bcl 2基因家族在此过程中的作用。方法 将不同浓度的紫杉醇作用于Jurkat细胞 ,观察其作用的时间效应及剂量效应 ;在光镜和电镜下观察其形态变化 ;用流式细胞术分析细胞DNA含量的改变并作DNA片段分析 ;用免疫组织化学及半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法观察在紫杉醇作用过程中凋亡调节基因bcl 2家族的mRNA和蛋白表达的变化。结果 紫杉醇能抑制Jurkat细胞生长 ,在一定剂量和时间范围内 ,主要引起细胞凋亡 ,并显示剂量和时间效应 ,在这个过程中bax转录及蛋白表达增加 ,并出现bcl xs的转录。结论 紫杉醇能特异地诱导Jurkat细胞凋亡 ,这为紫杉醇应用于T细胞淋巴瘤的治疗提供了依据 ,并为研究淋巴瘤细胞凋亡的基因调控提供了极好的模型 ,bax和bcl xs参与了紫杉醇诱导Jurkat细胞凋亡的基因调控。 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞凋亡 细胞株 jurkat T细胞淋巴瘤
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膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系 被引量:9
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作者 杨长永 谢大兴 +2 位作者 周毅 黄丹 龚建平 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期576-581,共6页
背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因... 背景与目的:线粒体介导的细胞凋亡大部分与细胞周期相关,但膜受体介导的细胞凋亡是否与细胞周期有关尚不清楚。本研究旨在观察膜受体介导的人类细胞凋亡与细胞周期特异性,阐明膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期的关系。方法:用肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体分别处理指数生长期的Molt-4、Jurkat以及健康人外周血淋巴细胞;应用AnnexinV/PI和API等方法,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期特异性。结果:处于静止期的外周血淋巴细胞对凋亡诱导剂不敏感,凋亡率是6%~8%。Molt-4、Jurkat细胞以及加入植物血凝素刺激的外周血淋巴细胞经肿瘤坏死因子-α、抗Fas抗体诱导后出现了明显的细胞凋亡,凋亡率是15%~28%。膜受体介导的细胞凋亡主要发生在细胞周期的早G1期。结论:膜受体介导的细胞凋亡与细胞周期相关,具有细胞周期特异性。 展开更多
关键词 膜受体 细胞周期 凋亡 白血病 Molt-4细胞株 jurkat细胞株 外周血淋巴细胞 增殖
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PI3K/Akt/mTOR在表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用 被引量:9
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作者 赵陈琛 顾康生 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2012年第9期780-784,共5页
目的探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在表阿霉素抑制人T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法用0、1.25、2.5、5、10μmol/L表阿霉素和0、0.25、0.5、1、2μmol/L PI3K/mTOR双重抑制剂(NVP-BEZ235)对Jurkat细胞作用48h后,... 目的探讨PI3K/Akt/mTOR信号通路在表阿霉素抑制人T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法用0、1.25、2.5、5、10μmol/L表阿霉素和0、0.25、0.5、1、2μmol/L PI3K/mTOR双重抑制剂(NVP-BEZ235)对Jurkat细胞作用48h后,CCK-8试剂盒检测Jurkat细胞株增殖抑制情况;采用AnnexinⅤ/PE双染法流式细胞术检测上述药物作用Jurkat细胞48h的凋亡率以及5μmol/L表阿霉素和2μmol/L NVP-BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞0、12、24、36、48h的凋亡率;Western blotting法检测5、10μmol/L的表阿霉素作用Jurkat细胞0、6、12、24、48h,以及5μmol/L表阿霉素与2μmol/LNVP-BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞24、48h的PI3K/Akt/mTOR信号通路中Akt、mTOR、p70s6k等表达变化。结果表阿霉素能够抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,且凋亡作用呈浓度依赖性,5μmol/L表阿霉素作用Jurkat细胞48h的凋亡率为57.72%。在表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡过程中伴随Akt、mTOR、p70s6k的表达变化,NVP-BEZ235能够降低Jurkat细胞Akt、p70s6k的磷酸化水平,显著提高表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡的作用,5μmol/L表阿霉素和2μmol/L NVP-BEZ235联合作用Jurkat细胞48h的凋亡率达78.31%,明显高于5μmol/L表阿霉素的57.72%。结论表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡与PI3K/Akt/mTOR信号通路有关,当该通路抑制剂与表阿霉素联用时,Jurkat细胞对于表阿霉素敏感性有一定程度的提高。 展开更多
关键词 表阿霉素 NVP—BEZ235 jurkat细胞株 细胞凋亡
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华蟾素对Jurkat细胞株的体外作用和动物实验研究 被引量:8
6
作者 王焰 李军民 +1 位作者 张莉 沈志祥 《诊断学理论与实践》 2005年第4期308-312,共5页
目的:通过体外实验和动物实验,探索华蟾素对白血病细胞株的作用。方法:通过四氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst荧光染色法、原位末端标记(TUNEL)法、DNA凝胶电泳及流式细胞术(FCM)观察华蟾素对人白血病细胞株Jurkat的增殖、细胞凋亡、bcl-2... 目的:通过体外实验和动物实验,探索华蟾素对白血病细胞株的作用。方法:通过四氮唑蓝(MTT)比色法、Hoechst荧光染色法、原位末端标记(TUNEL)法、DNA凝胶电泳及流式细胞术(FCM)观察华蟾素对人白血病细胞株Jurkat的增殖、细胞凋亡、bcl-2表达的影响;在DBA/2小鼠的腹腔中注射L1210细胞,比较治疗组和对照组小鼠的生存期,评价药物疗效。结果:与对照组相比,1∶100~1∶25浓度的华蟾素能明显抑制Jurkat细胞生长,Hoechst荧光染色可见典型的凋亡形态学改变,TUNEL可见深棕色凋亡细胞,DNA电泳出现凋亡特有的“梯子”式条带,AnnexinV/PI双染色的FCM也证实凋亡的存在。在经1∶100、1∶50、1∶25浓度的华蟾素处理2d后,细胞凋亡率分别为18.78%、24.40%和40.29%。凋亡细胞的bcl-2表达由44.07%下调至16.30%。动物实验中,L1210白血病腹水瘤小鼠经华蟾素治疗后,生存期延长35.90%。结论:华蟾素能抑制Jurkat细胞生长并诱导凋亡,可能是通过下调bcl-2的表达来实现。动物实验证实,华蟾素能延长L1210白血病腹水瘤小鼠的生存期。 展开更多
关键词 华蟾素 jurkat细胞株 凋亡 bcl-2 DBA/2 L1210
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IL-12逆转顺铂对人NK细胞免疫功能的抑制及其机制 被引量:8
7
作者 沈娟 吴琼丽 +1 位作者 杨滨燕 吴长有 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期872-877,共6页
目的:探讨IL-12逆转化疗药物对NK细胞免疫功能的抑制及其机制。方法:纯化的NK细胞在PMA和Ionomycin刺激条件下、加或不加化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)和IL-12,用ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α的分泌水平,流式细胞术检测IFN-γ和T... 目的:探讨IL-12逆转化疗药物对NK细胞免疫功能的抑制及其机制。方法:纯化的NK细胞在PMA和Ionomycin刺激条件下、加或不加化疗药物顺铂(cisplatin,DDP)和IL-12,用ELISA法检测培养上清中IFN-γ和TNF-α的分泌水平,流式细胞术检测IFN-γ和TNF-α、肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand, TRAIL)和转录因子(T-bet和pSTAT-4)的表达百分率;纯化NK细胞加或不加化疗药物和IL-12预处理48 h,流式细胞术检测其对白血病Jurkat细胞株的杀伤效应。结果:化疗药物明显抑制NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α以及TRAIL的表达,IL-12可以明显逆转DDP对NK细胞分泌IFN-γ、TNF-α和TRAIL的抑制(P<0.05或P<0.01)。DDP抑制IFN-γ和TNF-α的转录因子p-STAT-4的表达,而IL-12通过上调磷酸化STAT-4恢复了NK细胞的IFN-γ和TNF-α的分泌功能(P<0.01)。杀伤实验显示,DDP抑制NK细胞对白血病细胞Jurkat的杀伤,而IL-12通过上调TRAIL恢复NK细胞的杀伤功能(P<0.05或P<0.01)。结论:化疗药物DDP抑制NK细胞的杀伤功能以及细胞因子(IFN-γ和TNF-α)的分泌,IL-12通过上调TRAIL和转录因子STAT-4的磷酸化恢复NK细胞的免疫功能,为临床应用IL-12重建肿瘤化疗患者的免疫功能提供实验依据。 展开更多
关键词 NK细胞 顺铂 IL-12 免疫抑制 jurkat细胞株
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人参皂苷诱导人T淋巴细胞白血病细胞株凋亡的研究 被引量:6
8
作者 陈小红 高瑞兰 +1 位作者 钱煦岱 金锦梅 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2005年第4期217-219,共3页
目的通过观察人参皂苷(GS)诱导人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)凋亡,探讨GS影响T淋巴白血病细胞增生作用的机制。方法选用人T淋巴细胞株(Jurkat细胞)作靶细胞,采用MTT法和半固体集落培养法观察不同浓度的GS对Jurkat细胞增生的抑制... 目的通过观察人参皂苷(GS)诱导人T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)凋亡,探讨GS影响T淋巴白血病细胞增生作用的机制。方法选用人T淋巴细胞株(Jurkat细胞)作靶细胞,采用MTT法和半固体集落培养法观察不同浓度的GS对Jurkat细胞增生的抑制效应;用An-nexinV-FITC试验法分析Jurkat细胞的凋亡百分率,并进行DNA片段分析(DNALadder)。结果MTT法和半固体集落培养法均显示GS在50μg/mL浓度下能够明显抑制Jurkat细胞增生,并随浓度增加抑制作用增强;流式细胞术显示GS在一定浓度和时间范围内可引起细胞凋亡。结论GS在一定浓度范围内可抑制Jurkat细胞增生,并能够诱导其凋亡,为临床应用提供理论依据。 展开更多
关键词 人参皂苷 细胞凋亡 jurkat细胞株
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环磷酰胺诱导白血病细胞株凋亡及FasL、FADD基因蛋白表达 被引量:4
9
作者 刘家浩 唐洪丽 +2 位作者 阮为勇 王伟 唐月华 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期710-712,共3页
目的研究环磷酰胺(CP)诱导白血病细胞株(Jurkat)凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶(PI)染色细胞DNA,流... 目的研究环磷酰胺(CP)诱导白血病细胞株(Jurkat)凋亡的机制,进一步探讨FasL和FADD在CP诱导白血病细胞凋亡中的作用。方法CP刺激人T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat,分别培养12、24、48h,在相应的时间点收获细胞,碘化丙啶(PI)染色细胞DNA,流式细胞术(FCM)检测DNA片段的亚二倍体峰(subG1)阳性的凋亡细胞;并用WesternBlot技术测定FasL和FADD的表达。结果CP3mg/L刺激Jurkat白血病细胞12h几乎未见细胞凋亡(P>0.05),在24h也只有26.40%的细胞出现凋亡;但随着时间的延长,CP诱导细胞凋亡明显增加,到48h则有74.95%的细胞发生凋亡(P<0.01)。CP也上调FasL和FADD的表达,并随CP刺激细胞时间的延长其表达量也逐渐增加。结论CP诱导白血病细胞株Jurkat凋亡的起效时间较晚,诱导细胞DNA片段形成,上调FasL和FADD的表达,表明CP诱导白血病细胞凋亡依赖于Fas/FasL通路。 展开更多
关键词 环磷酰胺 细胞凋亡 FASL FADD jurkat细胞株
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γ-干扰素诱导Jurkat细胞表达B7.1/CD80、B7.2/CD86分子 被引量:2
10
作者 戴振声 陈勤奋 +1 位作者 谢弘 谢毅 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2001年第6期287-289,共3页
目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5~ 10 0 0 0u/ml浓度下有... 目的研究观察γ 干扰素 (γ IFN)诱导Jurkat细胞株表达B7.1、B7.2分子的作用。方法不同浓度的γ IFN体外孵育Jurkat细胞 48h后 ,流式细胞仪检测细胞表达B7.1、B7.2的百分率。结果与对照组相比 ,γ IFN在312 .5~ 10 0 0 0u/ml浓度下有轻微提高Jurkat淋巴白血病细胞表达B7.1、B7.2分子的作用。在 2 5 0 0u/ml浓度时达到高峰 ,B7.1的表达比对照组提高 3.47% ,B7.2表达提高 2 .39% ,B7.1与B7.2双表达提高 1.85 %。结论γ IFN可轻度诱导Jurkat细胞表达B7.1、B7. 展开更多
关键词 Γ-干扰素 jurkat细胞株 B7.1 B7.2
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盐霉素增强长春新碱诱导急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞株凋亡研究 被引量:4
11
作者 刘平平 朱锦灿 +2 位作者 刘革修 税朝祥 李小梅 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期653-657,共5页
目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检... 目的:本文旨在研究长春新碱(vincristine,VCR)与盐霉素(salinomycin,Sal)联合作用对急性T淋巴细胞白血病jurkat细胞株增殖、凋亡的影响及其可能的机制。方法:CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测各实验组细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白BCL-2、caspase-3和caspase-8表达水平。结果:VCR、Sal单独及联合处理Jurkat细胞株均显示出明显的增殖抑制作用,两药联合使用的增殖抑制作用更显著(P<0.05),具有协同作用。联合用药组BCL-2蛋白水平较VCR和Sal单独处理组明显减少,而caspase-3和caspase-8水平明显增高;VCR和Sal联合用药组细胞凋亡率较VCR和Sal单独处理组明显提高(P<0.05)。结论:长春新碱联合盐霉素作用于Jurkat细胞具有协同抑制增殖及诱导凋亡的作用。 展开更多
关键词 长春新碱 盐霉素 急性T细胞白血病 jurkat细胞株 细胞凋亡
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转染B7-1基因的Raji和Jurkat细胞诱导细胞因子mRNA表达的研究 被引量:3
12
作者 贾丽萍 克晓燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2002年第4期322-326,共5页
为探讨B7共刺激分子在T细胞活化和分化中的作用,利用脂质体介导的转基因技术将B7基因导入恶性血液病细胞系Raji和Jurkat细胞,用流式细胞术检测转基因前、后B7-1基因的表达,用RT-PCR检测T细胞表面细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γ mRNA的表达及... 为探讨B7共刺激分子在T细胞活化和分化中的作用,利用脂质体介导的转基因技术将B7基因导入恶性血液病细胞系Raji和Jurkat细胞,用流式细胞术检测转基因前、后B7-1基因的表达,用RT-PCR检测T细胞表面细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γ mRNA的表达及这3种细胞因子在转基因后4,12,20及48小时的时间动态变化。结果发现,B7^+ Raji细胞可诱导T细胞分泌细胞因子IL-2,IL-4和IFN-γ,B7^+ Jurkat细胞可诱导IL-2和IFN-γ的分泌,而B7^- Raji细胞及B7^- Jurkat细胞均未诱导细胞因子的分泌。IL-2和IL-4在T细胞活化4小时即可检测到,IFN-γ在T细胞活化12小时可检测到,在20小时出现峰值。结论:B7-1基因的导入可有效地增强肿瘤细胞的免疫原性,激活T细胞,B7-1在T细胞活化和分化中起着更主要的作用。 展开更多
关键词 B7-1基因 基因转染 T细胞 细胞因子 Raji细胞系 jurkat细胞系 恶性血液病
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独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体构建及体外表达 被引量:4
13
作者 李闯 吴秀丽 +4 位作者 李扬秋 周羽竝 陈少华 杨力建 朱康儿 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期30-33,共4页
目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8... 目的:构建Jurkat细胞株独特型TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,转染后了解其体外表达情况。方法:根据聚合酶链反应-基因扫描(PCR-Genescan)检测Jurkat细胞株TCR Vα及Vβ亚家族表达情况,分别将其所表达的单克隆性的TCR Vα1及TCR Vβ8亚家族基因片段克隆至质粒pIRES的多克隆位点A(MCS A)和多克隆位点B(MCS B)中。通过限制性酶切分析、序列分析、RT-PCR、间接免疫荧光、流式细胞术(FCM)手段鉴定重组表达载体的正确性以及转染A549和Molt4细胞后基因及蛋白的表达情况。结果:构建了2组TCR Vα1-pIRES-TCR Vβ8表达载体,该表达载体转染A549和Molt4细胞后,在mRNA和蛋白水平检测到了TCR Vα1和TCR Vβ8的表达。结论:成功构建了2种独特型Vα1-pIRES-TCR Vβ8真核表达载体,为利用特异性TCR基因修饰T细胞的研究提供方法学依据。 展开更多
关键词 jurkat细胞株 T细胞受体 转基因
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Down-regulation of β-catenin Nuclear Localization by Aspirin Correlates with Growth Inhibition of Jurkat Cell Line 被引量:2
14
作者 胡丽华 时杰 王琳 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第6期731-734,共4页
In this study, we examined the effects of aspirin on the growth rates, subcellar distribution of β-catenin protein, the expression of β-catenin/TCF signaling pathway target gene cyclinD1 mRNA, and cell cycle of Jurk... In this study, we examined the effects of aspirin on the growth rates, subcellar distribution of β-catenin protein, the expression of β-catenin/TCF signaling pathway target gene cyclinD1 mRNA, and cell cycle of Jurkat cell line (Human T-acute lymphoblastic leukemia). Our results showed that the treatment with aspirin inhibited the growth of Jurkat cell line. Jurkat cells treated with 3 mmol/L of aspirin could significantly decrease nuclear localization of β-catenin, and at 5 mmol/L of aspirin, the nuclear localization of β-catenin was undetectable. QRT-PCR showed that the target gene cyclinDl mRNA expression was gradually decreased with the dosage of aspirin. Aspirin induced G0/G1 cell cycle arrest in Jurkat cells. We are led to conclude that aspirin acts through β-catenin-independent mechanisms. The effects of aspirin include down-regulation of β-catenin nuclear localization and G0/G1 cell cycle arrest, which might serve as a means of growth inhibition in aspirin-treated human Jurkat cell line. 展开更多
关键词 jurkat cell line β -catenin ASPIRIN
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异硫氰酸苯已酯抑制T细胞白血病Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号通路的研究 被引量:3
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作者 林娟 黄轶群 马旭东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期361-365,共5页
本研究目的在于探索研究异硫氰酸苯己酯(PHI)在体外对人类T细胞白血病Jurkat细胞Wnt/β联蛋白(catenin)信号通路及组蛋白调控、细胞凋亡和增殖的影响。用MTT方法检测PHI作用后Jurkat细胞的增殖率变化;用流式细胞术观察细胞凋亡;用Wester... 本研究目的在于探索研究异硫氰酸苯己酯(PHI)在体外对人类T细胞白血病Jurkat细胞Wnt/β联蛋白(catenin)信号通路及组蛋白调控、细胞凋亡和增殖的影响。用MTT方法检测PHI作用后Jurkat细胞的增殖率变化;用流式细胞术观察细胞凋亡;用Western blot观察Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号转导通路相关蛋白β-catenin、TCF、c-myc、cyclinD1水平的变化,以及组蛋白甲基化H3K4,H3K9、乙酰化H3,H4的变化。结果表明,PHI可抑制Jurkat细胞增殖,诱导细胞凋亡,呈浓度和时间依赖性,48 h的IC50约为20μmol/L;PHI处理3 h后上调组蛋白乙酰化H3、H4和组蛋白甲基化H3K4,下调组蛋白甲基化H3K9,7 h时作用更明显;PHI作用3 hβ-catenin表达水平无变化,7 h后Wnt/β-catenin信号转导通路β-catenin及其周期相关基因TCF、c-myc、cyclinD1表达均下降。结论:PHI抑制Jurkat细胞Wnt/β-catenin信号转导通路,调控组蛋白甲基化、乙酰化,从而诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 异硫氰酸苯己酯 T细胞白血病 jurkat细胞系 WNT/Β-CATENIN信号转导通路 组蛋白乙酰化
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去甲斑蟊素诱导T淋巴细胞白血病Jurkat细胞凋亡作用及其机制 被引量:3
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作者 李晓辉 王亚君 +2 位作者 陈丽丽 宋飞飞 张剑白 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2016年第2期81-86,共6页
目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)在体外对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞凋亡的作用及其机制。方法取对数生长期的Jurkat细胞分别加入不同浓度的NCTD和(或)10 mg/L的长春新碱(VCR),倒置显微镜下观察不同时间Jurkat细胞... 目的研究去甲斑蝥素(norcantharidin,NCTD)在体外对急性T淋巴细胞白血病细胞株Jurkat细胞凋亡的作用及其机制。方法取对数生长期的Jurkat细胞分别加入不同浓度的NCTD和(或)10 mg/L的长春新碱(VCR),倒置显微镜下观察不同时间Jurkat细胞形态、密度及结构的变化;采用MTT比色法测定NCTD及VCR两种药物作用于细胞72 h后对细胞增殖抑制作用的影响;实时荧光定量RT-PCR法对p53及survivin基因表达量进行检测。结果 NCTD及VCR作用组细胞形态出现不规则,胀大、变形现象明显,分布稀疏,大量细胞死亡,两者在相同时间点上对细胞的影响无明显差别。MTT法检测结果表明:NCTD增殖抑制作用呈现时间-浓度依赖关系,最佳浓度及时间在20 mg/L,作用72 h时。NCTD与VCR两者对Jurkat细胞均有抑制作用(P<0.05),两者的抑制率相比无显著性差异(P>0.05),且两者联合可增加细胞增殖抑制率(P<0.05)。应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因,结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株明显上升(P<0.001),相反survivin基因较对照组明显下降(P<0.01)。结论(1)NCTD抑制Jurkat细胞株的增殖抑制作用具有时间-浓度依赖关系;(2)NCTD与VCR对细胞增殖均有抑制作用,两者的影响无显著性差异,且两者联合可增强对细胞的增殖抑制作用;(3)NCTD促进Jurkat细胞株细胞凋亡、抑制增殖的机制可能与上调p53基因表达量及下调survivin基因表达量有关。 展开更多
关键词 T淋巴细胞白血病 jurkat细胞株 去甲斑蝥素 p53基因 SURVIVIN基因
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几种抗肿瘤药物诱导Jurkat细胞凋亡的研究 被引量:1
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作者 毛咏秋 李喜荣 雷松 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第4期681-685,共5页
本研究评价几种临床常用的抗肿瘤药物顺铂(CDDP)、羟基喜树碱(HCPT)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MIT)在白血病治疗中的作用,并分析其在诱导Jurkat细胞凋亡的作用,为白血病的临床治疗提供新的理论依据和思路。用AnnexinV/PI双参数流... 本研究评价几种临床常用的抗肿瘤药物顺铂(CDDP)、羟基喜树碱(HCPT)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MIT)在白血病治疗中的作用,并分析其在诱导Jurkat细胞凋亡的作用,为白血病的临床治疗提供新的理论依据和思路。用AnnexinV/PI双参数流式分析方法,检测这几种抗肿瘤药物诱导Jurkat细胞凋亡和死亡的效应。结果表明MIT和HCPT在加药处理早期4小时(P<0.05)和后期第8小时(P<0.05)都有明显的诱导Jurkat细胞凋亡的效应。HHT有明显诱导Jurkat细胞凋亡的效果,但各剂量组之间无显著差异。CDDP在高浓度和长时间作用时才显示较弱的细胞凋亡效应,明显弱于前3者。各种药物作用后均未观察到明显的细胞死亡效应。结论MIT诱导Jurkat细胞凋亡的作用最显著,AnnexinV流式分析方法可作为一种可靠的临床药物筛选的方法。 展开更多
关键词 抗癌药物 细胞凋亡 jurkat细胞系 ANNEXIN V
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人BclGL基因慢病毒表达载体构建及其对T淋巴细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 罗娜 吴毅 +6 位作者 费蕾 郭晟 杨承英 吴胜昔 陈永文 吴玉章 郝飞 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期252-256,260,共6页
目的构建针对人BclGL的慢病毒表达载体,检测其对Jurkat T淋巴细胞系凋亡的影响,为进一步研究BclGL在细胞内信号转导及分子功能奠定基础。方法RT-PCR方法扩增人全长BclGL基因,克隆于pGFP-N1质粒中构建BclGL绿色荧光蛋白融合基因(BclGL-GF... 目的构建针对人BclGL的慢病毒表达载体,检测其对Jurkat T淋巴细胞系凋亡的影响,为进一步研究BclGL在细胞内信号转导及分子功能奠定基础。方法RT-PCR方法扩增人全长BclGL基因,克隆于pGFP-N1质粒中构建BclGL绿色荧光蛋白融合基因(BclGL-GFP),将融合基因克隆于慢病毒载体FUGW并转染293FT细胞包装浓缩慢病毒颗粒。将浓缩慢病毒感染Jurkat细胞,同时设立PBS对照及FUGW病毒阴性对照组,流式细胞术及荧光定量PCR鉴定BclGL在Jurkat细胞中的表达,Annexin V-APC/PI双染检测细胞凋亡变化。结果酶切及测序证实人BclGL慢病毒表达载体构建成功,转染Jurkat细胞72h后Jurkat细胞凋亡明显增加。结论成功构建了高效稳定表达人BclGL的重组慢病毒转染系统,并证实其对Jurkat淋巴细胞的促凋亡效应,为进一步探讨BclGL的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 BclGL 慢病毒表达载体 jurkat细胞 凋亡
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低氧对Jurkat细胞低氧诱导因子-1α及其类泛素化的影响及意义 被引量:3
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作者 黄滨滨 修冰 +2 位作者 陆惠娜 秦伟 梁爱斌 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期394-397,共4页
目的 探讨低氧条件下Jurkat细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)类泛素化的变化对其基因转录活性和蛋白稳定性的影响,以及对下游靶基因转录活性调控的影响和意义.方法 氯化钴(CoCl2)化学缺氧法模拟肿瘤缺氧不同时间,分别用荧光定量PCR、W... 目的 探讨低氧条件下Jurkat细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)类泛素化的变化对其基因转录活性和蛋白稳定性的影响,以及对下游靶基因转录活性调控的影响和意义.方法 氯化钴(CoCl2)化学缺氧法模拟肿瘤缺氧不同时间,分别用荧光定量PCR、Western blot法检测HIF-1α基因及蛋白稳定性的变化,类泛素-1(SUMO-1)、类泛素蛋酶-1(SENP-1)蛋白水平的表达,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1和survivin等基因转录活性的变化.结果 在缺氧诱导4、8、16、48、72 h后,HIF-1α基因转录活性分别为缺氧诱导前的(0.79 ±0.19)、(2.65±2.05)、(4.19±4.72)、(2.77±3.37)、(0.09±0.05)、(0.69±0.55)倍(P〉0.01),而蛋白稳定性逐渐增高后减低(P〈0.01).SEN-1蛋白的表达与SUMO-1蛋白表达呈相反趋势,前者逐渐增高后减低,而后者逐渐减低后增高(P〈0.01).除survivin 基因外,VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1基因转录水平与HIF-1α蛋白稳定性相平行.结论 缺氧引起SENP-1表达变化,通过减低HIF-1α蛋白类泛素化作用而影响HIF-1α稳定性,从而改变下游VEGF、mdr1、mdr3、Mcl-1等基因的转录活性而最终影响细胞牛物学过程. 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1Α 类泛素化修饰 靶基因 jurkat细胞
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β-连环素在白血病细胞株的异常定位研究 被引量:3
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作者 时杰 王琳 胡丽华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第6期1096-1100,共5页
β-连环素是Wnt信号通路关键的信号传递子,其在细胞的异常定位引起下游靶基因的转录是多种实体肿瘤发生的原因之一。由于造血细胞缺少典型的黏着连接(adherens junction,AJ),因此对β-连环素在血液肿瘤的表达及定位并无较多的研究。本... β-连环素是Wnt信号通路关键的信号传递子,其在细胞的异常定位引起下游靶基因的转录是多种实体肿瘤发生的原因之一。由于造血细胞缺少典型的黏着连接(adherens junction,AJ),因此对β-连环素在血液肿瘤的表达及定位并无较多的研究。本研究探讨4种常见的白血病细胞株(Daudi, Jurkat, K562和Thp-1)中β-连环素蛋白的定位及β-连环素基因mRNA的表达水平,了解血液肿瘤中是否有β-连环素蛋白的定位异常,以期发现白血病新的发生机制,为寻找新的特异治疗靶点提供线索。用免疫细胞化学法检测β-连环素在白血病细胞系中的定位,用实时定量RT-PCR法测定β-连环素mRNA表达水平。结果表明4种白血病细胞株有两种(Jurkat、Thp-1)存在β-连环素的异常定位,且β-连环素mRNA表达增高,但在Jurkat和Thp-1细胞中的β-连环素mRNA低于Daudi和K562细胞。这4种白血病细胞株中β-连环素基因的mRNA表达水平与其异常定位无相关性。结论β-连环素定位异常可能参与部分血液肿瘤的发生,引起β-连环素定位异常的机制并不是发生在转录水平。 展开更多
关键词 Β-连环素 白血病细胞株 DAUDI K562 jurkat THP-1
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