期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到6篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
大鼠肺细小动脉平滑肌细胞培养新方法的建立及血小板衍生因子对其增殖迁移的影响 被引量：5
1
作者 朱宁 赵旭勇 +1 位作者 向贻佳 曾春来 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2016年第4期343-346,I0008,共5页
目的：建立一种操作简单、实验仪器要求低的大鼠肺细小动脉平滑肌细胞（PASMCs）分离和培养的方法，并且探索血小板衍生因子（PDGF）介导的增殖、迁移的情况。方法：向右心注射铁及琼脂糖，利用琼脂糖能同时粘附血管内皮细胞、平滑肌细... 目的：建立一种操作简单、实验仪器要求低的大鼠肺细小动脉平滑肌细胞（PASMCs）分离和培养的方法，并且探索血小板衍生因子（PDGF）介导的增殖、迁移的情况。方法：向右心注射铁及琼脂糖，利用琼脂糖能同时粘附血管内皮细胞、平滑肌细胞及铁粉，再结合胶原酶I的消化，通过磁力架吸引铁，特异性地分选出带血管的肺组织，经过3～4周左右的培养及纯化，得到肺细小动脉平滑肌细胞。用倒置相差显微镜观察细胞形态，免疫细胞化学法和免疫荧光染色法进行小平滑肌肌动蛋白鉴定。MTT实验和划痕实验检测PDGF诱导的肺动脉细小平滑肌细胞的增殖和迁移。结果：分离后第14天、第21天及传代后进行鉴定，均表明分离培养的细胞为PASMCs。MTr结果表明，与不加PDGF组相比，PDGF增殖明显增加（P〈0．05）。划痕实验结果显示PDGF刺激组比不刺激组迁移显著增多。结论：本方法分离培养大鼠的PASMCs，操作方便，实验仪器要求低。PDGF能够促进肺细小动脉平滑肌细胞的增殖、迁移。 展开更多
关键词 肺动脉平滑肌细胞 大鼠 分离 原代培养
下载PDF
新生小鼠Lin^- Sca-1^＋心脏干细胞分离培养方案的优化 被引量：1
2
作者 李端端 石山慧 +5 位作者 周密 马秀霞 高建忠 张雅琼 杨丽文 左琳 《生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期477-484,共8页
心脏原位干细胞(cardiac stem cells,CSCs)治疗心肌梗死具有公认的疗效,但是其分离及培养技术尚不完善,这是制约其临床应用的关键技术问题。为解决这一问题,本研究旨在优化Lin^-(lineage-negative)Sca-1^+(stem cell antigen-1-positive... 心脏原位干细胞(cardiac stem cells,CSCs)治疗心肌梗死具有公认的疗效,但是其分离及培养技术尚不完善,这是制约其临床应用的关键技术问题。为解决这一问题,本研究旨在优化Lin^-(lineage-negative)Sca-1^+(stem cell antigen-1-positive)CSCs分离方案。用组织块酶解法(混合酶液)分离C57BL/6J新生(出生0～3天)小鼠Lin^- Sca-1^+ CSCs。在已有的研究基础上,严格控制消化时间、次数、温度、搅拌速度、离心时间和转速等多重因素,结合免疫磁珠分选获得纯度较高的Lin^- Sca-1^+ CSCs。此后,对分离纯化的原代细胞进行培养,优化培养基成分、换液时间和方式。采用流式细胞术及免疫荧光染色技术,检测分选细胞的纯度及传代培养细胞中Sca-1^+细胞的百分比。结果显示:(1)本法分离获得的Lin^- Sca-1^+ CSCs纯度高达(85.03±5.60)%;(2)离体培养过程中,细胞生长状态良好,原代培养5天开始有干细胞克隆球生成,培养7天即可铺满皿底,生长曲线显示,离体培养第3天细胞进入对数增长期;(3)免疫组化染色结果显示:干细胞特异性标志Sca-1的表达随着传代的进行有一定的衰减。流式细胞术检测结果显示,第一代、第三代和第五代培养细胞的Sca-1阳性率分别为(71.82±2.63)%、(58.38±3.70)%、(46.19±4.72)%。以上结果表明,本研究所建立的组织块酶解法结合免疫磁珠分选法可获得纯度较高的Lin^- Sca-1^+ CSCs,同时干细胞离体培养体系相对稳定。本研究所建立的分离及培养方法简单稳定、可靠有效,为进一步研究Sca-1^+ CSCs治疗心肌梗死奠定了良好的方法学基础。 展开更多
关键词 干细胞 分离和纯化 原代培养 鉴定
原文传递
小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养 被引量：1
3
作者 张明凤 张彦定 +2 位作者 王昕 王虹 张龙斌 《福建师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期82-86,97,共6页
用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达（90±2）%,产量为每5只小鼠胎肺收获（23.6±7）×10^6个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12-24 h开始贴壁,在36-48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4-5 ... 用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达（90±2）%,产量为每5只小鼠胎肺收获（23.6±7）×10^6个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12-24 h开始贴壁,在36-48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4-5 d左右细胞开始变形分化.免疫荧光鉴定胎肺Ⅱ型细胞表面活性蛋白C（SP-C）染色阳性,透射电镜观察到细胞内板层小体,细胞中proSP-C蛋白在培养48 h后表达较高.体外病毒转染成功,可见强烈荧光表达.成功建立了小鼠胎肺Ⅱ型上皮细胞的培养模型. 展开更多
关键词 胎鼠 肺泡Ⅱ型细胞 分离 鉴定 原代培养
下载PDF
一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法
4
作者 宋荣景 司霞 +1 位作者 陈月 冯婉玉 《精准医学杂志》 2018年第6期539-541,545,共4页
目的探讨一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法。方法采用改良的简易两步灌注法分离小鼠肝细胞,即使用连有头皮针的注射器进行肝门静脉插管并灌流冲洗,再用Ⅳ型胶原酶灌流消化;分离肝细胞后采用室温静止法进行纯化;利用锥虫蓝染色法... 目的探讨一种改良的简易灌注分离小鼠肝细胞的方法。方法采用改良的简易两步灌注法分离小鼠肝细胞,即使用连有头皮针的注射器进行肝门静脉插管并灌流冲洗,再用Ⅳ型胶原酶灌流消化;分离肝细胞后采用室温静止法进行纯化;利用锥虫蓝染色法鉴定细胞存活率;培养板预先用鼠尾胶原铺备,利用倒置显微镜观察细胞形态;细胞贴壁后1～10d检测培养液上清液中的白蛋白的分泌情况,判断肝细胞的生物学活性和功能。结果成功建立了一种简单易行的分离与培养小鼠原代肝细胞的方法。培养的小鼠肝细胞在接种后4h基本完成贴壁,细胞可稳定贴壁至少1周,成活率可达85%以上且功能良好,可用于后续实验。结论改良的简易两步灌注法是一种简单易行、经济高效的分离纯化小鼠肝细胞的方法,适合小鼠肝细胞的分离。 展开更多
关键词 肝细胞 细胞分离 原代细胞培养 小鼠
下载PDF
干细胞标志Lgr5在糖尿病小鼠小肠上皮中的表达
5
作者 钟献阳 于涛 +3 位作者 黎洁瑶 杨洪生 欧阳慧 陈其奎 《新医学》 2015年第5期289-293,共5页
目的探讨糖尿病小鼠小肠上皮干细胞标志分子G蛋白偶联受体5(Lgr5)的表达及干细胞数量的改变情况。方法采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型,用免疫组织化学检查(免疫组化)检测糖尿病小鼠(6只)与正常小鼠(6只)小肠上皮组织中... 目的探讨糖尿病小鼠小肠上皮干细胞标志分子G蛋白偶联受体5(Lgr5)的表达及干细胞数量的改变情况。方法采用链脲佐菌素腹腔注射的方法建立糖尿病小鼠模型,用免疫组织化学检查(免疫组化)检测糖尿病小鼠(6只)与正常小鼠(6只)小肠上皮组织中Lgr5的表达,并分离糖尿病小鼠与正常小鼠原代小肠上皮细胞,采用流式细胞技术测定Lgr5阳性细胞在上皮细胞中的比例。结果免疫组化结果显示糖尿病与正常小鼠小肠上皮每个隐窝单位的Lgr5阳性细胞数量分别为(3.7±0.5)个及(1.5±0.6)个,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞技术测得糖尿病与正常小鼠小肠上皮Lgr5阳性细胞比例分别为(28.75±3.69)%及(6.55±1.78)%,前者上皮组织中Lgr5阳性细胞比例显著高于后者(P<0.05)。结论链脲佐菌素诱导的糖尿病小鼠小肠上皮Lgr5阳性干细胞数量增加,Lgr5在糖尿病小鼠小肠上皮细胞高表达。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体5 糖尿病 小肠上皮干细胞 原代细胞分离
下载PDF
小鼠原代肝细胞糖异生研究模型的建立 被引量：2
6
作者 李辉龙 万禄明 +8 位作者 杨欢 彭雨蒙 王化鹏 韦猛 莫运海 徐艺心 魏从文 钟辉 吴飞翔 《生物技术通讯》 CAS 2020年第6期704-709,719,共7页
目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型。方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞的葡萄糖产出水平、糖代谢关键酶基因... 目的:分离小鼠原代肝细胞并建立体外糖异生研究模型。方法:利用胶原酶两步灌注法分离并提纯小鼠原代肝细胞,彻底清除细胞内糖原,以丙酮酸和乳酸作为糖异生原料,观察胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞的葡萄糖产出水平、糖代谢关键酶基因表达水平,以及cAMP-PKA信号通路的激活情况,建立小鼠原代肝细胞糖异生研究模型。结果:分离的小鼠原代肝细胞具有典型的肝细胞形态,可见双核,细胞相互接触,排列成肝索样结构。在胰高血糖素作用下,小鼠原代肝细胞糖异生葡萄糖产出量显著增加,小鼠原代肝细胞糖异生关键酶基因表达明显上调,且胰高血糖素能够促进细胞cAMP积累进而诱导PKA激活。结论:小鼠原代肝细胞分离后状态良好,能够在葡萄糖产出水平及细胞内信号通路激活上高效模拟哺乳动物机体糖异生代谢,是一项体外研究糖异生代谢的有效模型。 展开更多
关键词 小鼠原代肝细胞分离 糖异生细胞模型 胰高血糖素
下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部