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冬虫夏草的微循环产孢及其无性型的分离 被引量：37
1
作者 莫明和 迟胜起 张克勤 《菌物系统》 CSCD 北大核心 2001年第4期482-485,共4页
从采自云南德钦白马雪山的冬虫夏草子实体上,利用改进的子囊孢子弹射法获得其无性型中国被毛孢,并利用冬虫夏草子囊孢子的微循环产孢和无性型菌丝的载片培养,证明我们获得纯培养是冬虫夏草的无性型。
关键词 冬虫夏草 微循环产孢 分离方法 无性型
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采空场处理的研究进展 被引量：39
2
作者 李俊平 钱新明 郑兆强 《中国钼业》 2002年第3期10-15,共6页
论述了采空场处理的意义 ,回顾了其相关领域—岩移与地表沉陷的研究历史 ,综述了现有的5类采空场处理方法 :即崩落法、充填法、支撑法、封闭和隔离法和在它们基础上的联合法 ,提出联合法是空场处理方法中较有发展前途的一种方法。应结... 论述了采空场处理的意义 ,回顾了其相关领域—岩移与地表沉陷的研究历史 ,综述了现有的5类采空场处理方法 :即崩落法、充填法、支撑法、封闭和隔离法和在它们基础上的联合法 ,提出联合法是空场处理方法中较有发展前途的一种方法。应结合实践 ,依靠 4类基本方法创新和发展联合法 。 展开更多
关键词 空场处理 崩落 充填 支撑 封闭 隔离 联合法
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植物内生真菌分离方法的研究 被引量：40
3
作者 何佳 刘笑洁 +1 位作者 赵启美 陈钧 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第15期180-183,共4页
目的:对准确分离植物内生真菌的方法和适宜的培养条件进行研究。方法:采用75%乙醇、次氯酸钠溶液(活性氯含量1.3%～5.2%)浸泡和无菌水洗涤工艺对植物材料进行表面灭菌,以灭菌强度逐步递减的方式,确定最佳分离植物内生真菌的表面灭菌强度... 目的:对准确分离植物内生真菌的方法和适宜的培养条件进行研究。方法:采用75%乙醇、次氯酸钠溶液(活性氯含量1.3%～5.2%)浸泡和无菌水洗涤工艺对植物材料进行表面灭菌,以灭菌强度逐步递减的方式,确定最佳分离植物内生真菌的表面灭菌强度;设置超净工作台无菌状态检测对照、漂洗液无菌检测对照和组织印迹无菌检测对照3种对照处理,确保适度的表面灭菌强度;采用不同的培养基分离培养内生真菌。结果:高浓度杀菌剂短时间处理比低浓度杀菌剂长时间处理更适合植物内生真菌的分离;使用10%马铃薯葡萄糖双抗培养基、22℃低温培养,能抑制快生型菌株的疯长,从而使慢生型菌株拥有一定的生长空间,最大限度地分离所有植物内生真菌;同时设置3种对照处理可以确保植物内生真菌分离的准确性。结论:设计合适的表面灭菌方法、表面灭菌效果检测方法和分离培养方法对植物内生真菌的分离至关重要。 展开更多
关键词 药用植物 内生真菌 分离 表面灭菌 培养方法
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植物多糖的提取分离方法探讨 被引量：37
4
作者 舒任庚 蒋跃平 蔡永红 《中国药房》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1052-1055,共4页
目的:探讨植物多糖的各种提取分离方法,以期为植物多糖研究者提供参考依据。方法:根据实际工作经验并参考近几年的文献,从多糖的提取效率、分离纯化的效果以及多糖的活性等方面,对植物多糖的各种提取分离方法的优缺点进行分析。结果与结... 目的:探讨植物多糖的各种提取分离方法,以期为植物多糖研究者提供参考依据。方法:根据实际工作经验并参考近几年的文献,从多糖的提取效率、分离纯化的效果以及多糖的活性等方面,对植物多糖的各种提取分离方法的优缺点进行分析。结果与结论:通过比较优缺点,可以有效地选出一种较佳的植物多糖的提取分离方法。 展开更多
关键词 植物多糖 提取 分离 方法
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食用菌基因工程研究进展 被引量：24
5
作者 王丕武 王东昌 李玉 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期23-27,共5页
对近年来食用菌基因工程研究已取得的研究成果进行了综述 ,主要包括食用菌染色体组学、基因分离和克隆、遗传转化的选择标记和途径等相关内容。
关键词 染色体组学 基因分离 选择标记 转化方法 食用菌 遗传育种
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小麦线粒体DNA的高效提取方法 被引量：29
6
作者 李文强 张改生 +2 位作者 汪奎 牛娜 潘栋梁 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期771-775,共5页
以小麦黄化苗为材料,通过简单差速离心、DNaseⅠ处理得到无核DNA杂质的线粒体,用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,经酚/氯仿抽提除去蛋白,并用RNase A消化而得到单纯线粒体DNA(mtDNA)。对所提取的mtDNA进行紫外吸收光度分析,A260/A280平均为1.92... 以小麦黄化苗为材料,通过简单差速离心、DNaseⅠ处理得到无核DNA杂质的线粒体,用SDS和蛋白酶K裂解线粒体,经酚/氯仿抽提除去蛋白,并用RNase A消化而得到单纯线粒体DNA(mtDNA)。对所提取的mtDNA进行紫外吸收光度分析,A260/A280平均为1.92,A260/A230平均为2.09,平均每克黄化苗可提取mtDNA26.85μg;并对mtDNA进行琼脂糖凝胶电泳和RAPD扩增,均得到清晰的电泳图谱。结果表明:此提取方法得到的mtDNA,不但产率高、结构完整,而且能有效去除核DNA、RNA和蛋白质等杂质,获得高质量的mtDNA用于PCR反应和各种遗传学分析。研究还发现,通过调整线粒体裂解温度(先50℃裂解1h,再37℃裂解1h),亦可大幅度提高mtDNA的产率。 展开更多
关键词 小麦 线粒体 MTDNA 提取方法 RAPD
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基础隔震技术的发展及其对未来建筑设计思想的影响 被引量：13
7
作者 黄永林 孔建国 +1 位作者 章熙海 张雪亮 《工程抗震》 2000年第1期24-29,共6页
采用基础隔震技术建造的现代建筑已经遍布全世界 ,不少隔震房屋经受了强地震的考验 ,表现出良好的抗震性能。有些国家已颁发了隔震结构的技术规程 ,预计基础隔震技术将越来越多地用于不同形式的结构上。隔震技术的出现使我们有更多的设... 采用基础隔震技术建造的现代建筑已经遍布全世界 ,不少隔震房屋经受了强地震的考验 ,表现出良好的抗震性能。有些国家已颁发了隔震结构的技术规程 ,预计基础隔震技术将越来越多地用于不同形式的结构上。隔震技术的出现使我们有更多的设计方案选择。依据所要达到的安全程度 ,可选择采用主动隔震结构控制技术、被动隔震结构控制技术或传统的抗震设计方法。每一种设计方案将保证建筑物内的人员安全、财产安全或设施的正常运行。这种概念以及相应的技术规程已经开始进行研究 ,并可能在本世纪初得以实现。 展开更多
关键词 基础隔震 设计方法 技术规程
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固井二界面封隔能力评价方法研究 被引量：30
8
作者 顾军 杨卫华 +2 位作者 秦文政 张玉广 高玉堂 《石油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期451-454,共4页
利用测井评价方法和界面胶结强度评价方法均难以获得固井二界面的实际封隔能力。基于固井二界面封隔失效机理,设计了固井二界面封隔能力仿真评价装置,建立了固井二界面封隔能力评价方法。该方法把固井二界面作为独立的测试对象,直接沿... 利用测井评价方法和界面胶结强度评价方法均难以获得固井二界面的实际封隔能力。基于固井二界面封隔失效机理,设计了固井二界面封隔能力仿真评价装置,建立了固井二界面封隔能力评价方法。该方法把固井二界面作为独立的测试对象,直接沿固井二界面来评价流体的窜通能力,并以固井二界面当量渗透率为指标,实现了固井二界面封隔能力的定量评价。同时,解决了固井二界面胶结强度评价方法无法模拟环空窜槽的问题。验证结果表明,该方法能比较客观地反映固井二界面的实际封隔能力,可为难采储层薄隔层压裂工艺的选择提供科学依据。 展开更多
关键词 难采储层 层间窜流 固井二界面 封隔能力 评价装置 评价方法
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人参主要化学成分及皂苷提取方法研究进展 被引量：30
9
作者 宋齐 《人参研究》 2019年第4期43-46,共4页
人参(Panax ginseng C.A.Meyer)的干燥根入药,其茎、叶、花、果也可药用.人参作为我国的名贵中药材之一,从古至今都受到人们的广泛重视,有大补元气、补脾益肺、生津安神益智之功效.人参化学成分复杂,生物活性较为广泛,药理作用独特,应... 人参(Panax ginseng C.A.Meyer)的干燥根入药,其茎、叶、花、果也可药用.人参作为我国的名贵中药材之一,从古至今都受到人们的广泛重视,有大补元气、补脾益肺、生津安神益智之功效.人参化学成分复杂,生物活性较为广泛,药理作用独特,应用价值极高,被应用在医学、药学、保健食品、化妆品等多个领域,市场广泛.经过人们长期的探索研究和临床应用的积累,人参的成分和功效也越来越清晰.通过查阅梳理近几年国内外人参相关文献,针对其主要化学成分皂苷、多糖、挥发油等进行了综述,并综述了人参皂苷提取方法. 展开更多
关键词 人参 化学成分 提取
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薯蓣皂苷元的提取与分离分析方法 被引量：22
10
作者 鲁鑫焱 赵怀清 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期465-468,共4页
目的介绍薯蓣皂苷元主要的提取和分离分析方法。方法通过查阅近年来国内外有关薯蓣皂苷元的文献 ,对不同提取和分离分析方法及应用进行综述。结果薯蓣皂苷元作为一种重要的活性化合物和原料药 ,已得到国内外学者的广泛关注 ,并已建立了... 目的介绍薯蓣皂苷元主要的提取和分离分析方法。方法通过查阅近年来国内外有关薯蓣皂苷元的文献 ,对不同提取和分离分析方法及应用进行综述。结果薯蓣皂苷元作为一种重要的活性化合物和原料药 ,已得到国内外学者的广泛关注 ,并已建立了比较成熟的提取和分离分析方法。结论对于薯蓣皂苷元的研究 。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷元 提取 分离 分析方法
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从针叶树营养体组织中提取高纯度DNA的方法 被引量：17
11
作者 尹佟明 韩正敏 黄敏仁 《南京林业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1998年第4期87-90,共4页
ＤＮＡ提取质量是影响ＤＮＡ分析实验结果的关键因素之一，保持不同样本间ＤＮＡ质量的一致性对实验结果的可靠性至关重要，这要求在材料选择和提取方法两个方面都要加以考虑。介绍了从针叶树营养体组织中提取高纯度ＤＮＡ的方法，提取... ＤＮＡ提取质量是影响ＤＮＡ分析实验结果的关键因素之一，保持不同样本间ＤＮＡ质量的一致性对实验结果的可靠性至关重要，这要求在材料选择和提取方法两个方面都要加以考虑。介绍了从针叶树营养体组织中提取高纯度ＤＮＡ的方法，提取的关键是选择合适的材料，不同于通常采用针叶进行ＤＮＡ提取，本实验选用尚未木质化的针叶树嫩梢进行ＤＮＡ提取，可以在较为简单的实验条件和实验程序下提取高质量ＤＮＡ。按照作者提供的提取方法，可以获得高纯度的，质量较为一致的ＤＮＡ，适用于不同针叶树的ＤＮＡ提取，省时且实验成本较低。 展开更多
关键词 针叶树营养体 DNA提取 SDS法 CTAB法
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花生幼胚RNA提取方法研究 被引量：22
12
作者 张君诚 魏彦飞 +3 位作者 唐荣华 官德义 刘思衡 庄伟建 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2004年第1期1-4,共4页
花生(ArachishypogaeaL.)幼胚体积很小,不易剥取且富含多糖、酚类等化合物,因此以花生幼胚为材料提取RNA时会遇到很大困难.采用改进的Trizol法和异硫氰酸胍一步法成功提取出了高质量的花生幼胚总RNA,后续实验证明具有良好的逆转录活性.... 花生(ArachishypogaeaL.)幼胚体积很小,不易剥取且富含多糖、酚类等化合物,因此以花生幼胚为材料提取RNA时会遇到很大困难.采用改进的Trizol法和异硫氰酸胍一步法成功提取出了高质量的花生幼胚总RNA,后续实验证明具有良好的逆转录活性.介绍了花生幼胚快速剥取的方法. 展开更多
关键词 幼胚 花生 RNA提取方法 剥取 总RNA 异硫氰酸胍 逆转录 取出 多糖 酚类
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4种快速提取棉花总DNA方法的比较 被引量：20
13
作者 曲延英 张强 +1 位作者 孔祥祯 王辉 《新疆农业大学学报》 CAS 1999年第4期320-322,共3页
通过对 4种提取棉花总DNA的方法 :氯仿—异戊醇法、CTAB法、β 巯基乙醇法 (暂定名 )及PVP法分析比较 ,得出CTAB法较为理想 ,能大量、快速提取棉花总DNA。
关键词 棉花 总DNA提取 提取方法
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白菜花药组织总RNA提取方法比较及其分析 被引量：16
14
作者 史公军 侯喜林 易金鑫 《西北农业学报》 CAS CSCD 2004年第3期97-99,共3页
以白菜花药组织为试材,利用异硫氰酸胍法和改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。结果显示两种方法提取RNA的产量都较高,异硫氰酸胍法提取纯度低,但省时高效,适用于对模板要求低的RNA提取。而改良Tris-硼酸法提取花药RNA的产量高、质量好、纯... 以白菜花药组织为试材,利用异硫氰酸胍法和改良Tris-硼酸法提取花药总RNA。结果显示两种方法提取RNA的产量都较高,异硫氰酸胍法提取纯度低,但省时高效,适用于对模板要求低的RNA提取。而改良Tris-硼酸法提取花药RNA的产量高、质量好、纯度高,适用于mRNA差异显示及基因表达的Northern印迹等的RNA提取。 展开更多
关键词 白菜 花药组织 总RNA 提取 异硫氰酸胍法 改良Tris-硼酸法
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油菜种子高质量总RNA提取的一种有效方法 被引量：18
15
作者 丁勇 刘英 +1 位作者 杨鸯鸯 甘莉 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期465-468,共4页
设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法，有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测，可见28S和18SrRNA的2条清晰的带型，完整无降解，其A260／A280在1．8～2．0之间... 设计了1种从油菜种子中分离高质量总RNA的方法，有效的排除了种子中富含的多酚、多糖和蛋白质等杂质的污染。分离的总RNA经甲醛变性凝胶电泳和紫外光检测，可见28S和18SrRNA的2条清晰的带型，完整无降解，其A260／A280在1．8～2．0之间。研究结果证明，利用本方法提取的油菜种子总RNA具有很高的质量和纯度，且得率高，完全能满足后续的RT-PCR、全长基因的克隆和Northern blotting分析等分子生物学研究。 展开更多
关键词 油菜种子 RNA提取 多酚 多糖 方法
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微卫星位点获取方法的研究进展 被引量：18
16
作者 孙波 鲍毅新 +2 位作者 赵庆洋 张龙龙 胡知渊 《生态学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2130-2137,共8页
微卫星标记(simple sequence repeat,SSR)是进行分子遗传学研究的一种有效手段,并以其多态性高、信息含量大、保守性等特点成为最受人们欢迎的分子标记之一。但微卫星标记具有种族特异性,必须采用特异引物进行PCR检测,因而存在引物开发... 微卫星标记(simple sequence repeat,SSR)是进行分子遗传学研究的一种有效手段,并以其多态性高、信息含量大、保守性等特点成为最受人们欢迎的分子标记之一。但微卫星标记具有种族特异性,必须采用特异引物进行PCR检测,因而存在引物开发的问题。本文就筛选基因组文库法、微卫星富集法、数据库查找法、近缘物种筛选法、TOMMI法和FI-ASCO法等具有代表性的微卫星标记开发策略进行了综述,旨在为分子生态学研究过程中微卫星位点筛选方法的选择提供参考。 展开更多
关键词 微卫星位点 分离方法 数据库查找 近缘物种 基因组DNA
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β-内酰胺类抗生素中高分子杂质的分离与检测方法进展 被引量：19
17
作者 王勇跃 陈悦 洪利娅 《中国药事》 CAS 2015年第6期608-612,共5页
β-内酰胺类抗生素中的高分子杂质是导致不良反应的主要因素,关于用Sephadex G10凝胶色谱法控制β-内酰胺抗生素中高聚物的研究已有较多报道,但对其他质量控制方法的研究报道较少。本文主要对β-内酰胺抗生素中高分子杂质的检测方法包... β-内酰胺类抗生素中的高分子杂质是导致不良反应的主要因素,关于用Sephadex G10凝胶色谱法控制β-内酰胺抗生素中高聚物的研究已有较多报道,但对其他质量控制方法的研究报道较少。本文主要对β-内酰胺抗生素中高分子杂质的检测方法包括高效凝胶色谱法、高效液相色谱法、LC-MS、柱切换技术等进行综述。 展开更多
关键词 Β-内酰胺抗生素 高分子杂质 杂质 分离方法 分析方法
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人骨髓间充质干细胞分离鉴定方法的改进 被引量：11
18
作者 吴洁莹 廖灿 +2 位作者 许遵鹏 陈劲松 辜少玲 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期557-560,共4页
本研究的目的是建立一种基于临床移植需要的分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)的方法,为配合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础。采用Percoll分离液(1.073g/ml)从新鲜成人骨髓穿刺液中分离MSC,应用贴... 本研究的目的是建立一种基于临床移植需要的分离、培养、鉴定人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)的方法,为配合造血干细胞移植的临床应用提供实验基础。采用Percoll分离液(1.073g/ml)从新鲜成人骨髓穿刺液中分离MSC,应用贴壁筛选法传代培养,流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨诱导体系(地塞米松0.1μmol/L、β-甘油磷酸钠10mmol/L、抗坏血酸磷酸盐50μmol/L)及脂肪诱导体系(地塞米松1μmol/L、牛胰岛素5mg/L、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤0.5mmol/L、消炎痛60μmol/L)分别诱导MSC定向分化,通过细胞形态观察及免疫化学染色进行鉴定。结果表明:从成人骨髓液中分离培养出MSC,稳定表达CD73、CD105、CD166,不表达CD34、CD45。定向诱导的成骨细胞表达碱性磷酸酶活性,脂肪细胞内出现明显的脂滴。结论:采用密度梯度离心联合贴壁筛选法并通过流式细胞术检测及定向诱导分化,能够从成人骨髓液中分离出MSC,并完成细胞表型及多向分化潜能的初步鉴定。本操作方案具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 间充质干细胞 分离方法 鉴定方法 细胞培养 定向分化
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β-内酰胺类抗生素中高分子聚合物杂质检查方法的研究综述 被引量：18
19
作者 夏鸣 杭太俊 +1 位作者 李小敏 张斐 《药学进展》 CAS 2007年第11期501-507,共7页
综述青霉素类、头孢类、碳青霉烯类等β-内酰胺类抗生素中高分子聚合物杂质的分离与检查方法的研究进展,其中包括凝胶色谱法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法、离子交换色谱法、大孔树脂法等。
关键词 Β-内酰胺类抗生素 高分子聚合物杂质 分离 检查方法
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中国的捕食线虫真菌Ⅰ. 被引量：13
20
作者 张克勤 周薇 何世川 《真菌学报》 CSCD 北大核心 1991年第2期132-140,共9页
采用8种不同分离方法从我国贵州、云南、四川、广西等省的土壤、食用菌菇床上分离到10种捕食线虫真菌。8种方法中,以改良Drechsler法和直接分离法较好。10种捕食线虫真菌中,除Arthrobotrys oligospora曾记载腐生于河北棉桃外,其余均为... 采用8种不同分离方法从我国贵州、云南、四川、广西等省的土壤、食用菌菇床上分离到10种捕食线虫真菌。8种方法中,以改良Drechsler法和直接分离法较好。10种捕食线虫真菌中,除Arthrobotrys oligospora曾记载腐生于河北棉桃外,其余均为我国新纪录种,它们是:Arthrobotrys superba,A.conoides A.oviformis,A.haptotyla,A.haptospora,A.cladodes,Monacrosporium lysipaga,M.ellipsopora,M. 展开更多
关键词 捕食线虫真菌 线虫 真菌
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