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甘草水溶物诱导MGC-803细胞凋亡中胞内Ca^(2+)、pH与线粒体△ψ_m的变化 被引量:4
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作者 马靖 李玉梅 +1 位作者 庞大本 徐安龙 《中国生物化学与分子生物学报》 CSCD 2000年第4期556-558,共3页
Changes of intracellular Ca 2+ ,pH value and mitochondria membrane potential(△Ψ m) in the apoptosis of MGC 803 cells induced by water soluble constituents of Glycyrrhiza uralensis Fisch(WSCG) were investigated.MGC 8... Changes of intracellular Ca 2+ ,pH value and mitochondria membrane potential(△Ψ m) in the apoptosis of MGC 803 cells induced by water soluble constituents of Glycyrrhiza uralensis Fisch(WSCG) were investigated.MGC 803 cells were incubated with 0.5,0.75,1.0 and 1.5 g/L WSCG for 1,4,7,11,15,19 and 23 hours respectively.The percentage of apoptosis and intracellular Ca 2+ content increased in a dose and time dependent manner,except that the intracellular Ca 2+ content of 1.5 g/L WSCG treated cells started to decrease after 11 hours.The cells were alkalized after various treatments,except that 1.5 g/L WSCG treated cells turned to acidify after 11 hours.It was found that the mitochondria △Ψ m of all treated cells decreased drastically at the first hour,then kept decreasing slowly until the 23rd hour.The results indicated that intracellular Ca 2+ ,pH and mitochondria △Ψ m all played pivotal roles in the apoptosis of MGC 803 cells induced by WSCG. 展开更多
关键词 甘草 细胞凋亡 胞内ca^2+ 胞内PH 线粒体△Ψm
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脑出血对大鼠脑细胞内Ca^(2+)浓度的影响及羚蝎胶囊的干预作用 被引量:3
2
作者 卫洪昌 吕嵘 +3 位作者 吴倩 朱晓梅 孙平龙 徐敏华 《上海中医药大学学报》 CAS 2000年第3期47-50,共4页
为了解脑出血对脑细胞内Ca2 + 浓度的影响及羚蝎胶囊的干预作用 ,采用胶原酶复制大鼠脑出血模型 ,通过胰蛋白酶消化制备脑细胞悬液 ,以Fura -2 /AM为荧光指示剂 ,应用双波长荧光分光光度计测定用羚蝎胶囊 (羚羊角、全蝎、三七、水蛭等 ... 为了解脑出血对脑细胞内Ca2 + 浓度的影响及羚蝎胶囊的干预作用 ,采用胶原酶复制大鼠脑出血模型 ,通过胰蛋白酶消化制备脑细胞悬液 ,以Fura -2 /AM为荧光指示剂 ,应用双波长荧光分光光度计测定用羚蝎胶囊 (羚羊角、全蝎、三七、水蛭等 )前后大鼠脑细胞内Ca2 + 浓度。结果 :在细胞外Ca2 + 浓度为 1mmol/L情况下 ,正常组大鼠脑细胞内Ca2 + 浓度为 32 0± 83nmol/L ,假手术组为 35 5± 48nmol/L ,模型组为 10 10± 118nmol/L ,羚蝎胶囊组为 930± 84nmol/L ,清开灵组为 910± 5 9nmol/L。提示脑出血大鼠脑细胞内存在严重的Ca2 + 超载现象 ,羚蝎胶囊能有效地降低脑出血大鼠脑细胞内Ca2 展开更多
关键词 脑出血 脑细胞内ca^2+浓度 荧光测定 羚蝎胶囊
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激光共焦显微镜测量细胞内钙离子时的几个关键因素 被引量:1
3
作者 王小兵 李志辉 《医疗设备信息》 2001年第6期10-10,47,共2页
本文根据实际经验指出应用激光共焦显微镜测量细胞内钙离子的几个关键因素 。
关键词 激光共焦显微镜 钙离子 测量
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用激光共焦显微镜测量细胞内钙离子时加药方式的研究 被引量:1
4
作者 王小兵 李志辉 《医疗设备信息》 2001年第5期6-6,11,共2页
本文对激光共焦显微镜测量细胞内钙离子时的两种加药方式的利弊进行了分析 ,供在实验设计、具体操作以及实验结果分析时参考 ,以避免由此造成的实验偏差。
关键词 激光共焦显微镜 钙离子 加药方式
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电针“内关”穴对心肌缺血再灌注大鼠心肌组织一氧化氮、一氧化氮合酶和细胞内钙的影响 被引量:52
5
作者 王超 田岳凤 +4 位作者 周丹 杨孝芳 林亚平 常小荣 严洁 《针刺研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期113-117,共5页
目的:观察电针"内关"穴对实验性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞内钙超载及内源性保护物质一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,为针刺防治心血管疾病及经脉脏腑相关理论提供实验依据。方法:50只Wistar雄性大鼠随机分为假... 目的:观察电针"内关"穴对实验性心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞内钙超载及内源性保护物质一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)的影响,为针刺防治心血管疾病及经脉脏腑相关理论提供实验依据。方法:50只Wistar雄性大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、电针内关组、电针列缺组、电针合谷组。采用冠脉结扎法建立心肌缺血再灌注模型,各电针组于冠脉结扎前后各电针20 min(30 Hz/100 Hz,2~4 mA)。硝酸还原酶比色法检测各组心肌组织NO、NOS的含量,在Fluo-3/AM染色后于激光共聚焦显微镜下检测心肌细胞内Ca2+荧光强度。结果:与假手术组比较,模型组心肌组织NOS含量明显降低(P<0.05),心肌细胞内Ca2+荧光强度明显升高(P<0.01);电针心包经"内关"穴组与模型组比较,心肌组织NO、NOS含量明显升高(P<0.05),心肌细胞内Ca2+荧光强度明显降低(P<0.01);电针肺经"列缺"穴及电针大肠经"合谷"穴与模型组比较,各指标的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针心包经"内关"穴可上调心肌内源性保护物质的水平,降低Ca2+超载,且这种效应存在经脉(穴)与脏腑间的相对特异性联系。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 电针 内关 一氧化氮 一氧化氮合酶 钙离子 经脉脏腑相关
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丹参酮ⅡA对主动脉内皮细胞功能损伤的保护机制 被引量:36
6
作者 李永胜 王进 +3 位作者 王照华 冯俊 梁黔生 郑智 《中国急救医学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期720-723,共4页
目的通过观察猪主动脉内皮细胞在血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)作用后,丹参酮ⅡA对血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白、mRNA表达和细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的变化,探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法... 目的通过观察猪主动脉内皮细胞在血管紧张肽Ⅱ(AngⅡ)作用后,丹参酮ⅡA对血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白、mRNA表达和细胞内游离钙离子([Ca2+]i)浓度的变化,探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞的保护作用。方法采用硝酸还原法、免疫组织化学法、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和激光共聚焦扫描显像系统,分别检测NO水平、eNOS蛋白和mRNA表达,以及细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)水平的变化。结果①随着AngⅡ浓度的增加、作用时间的延长,内皮细胞NO的产生及eNOS的基因表达呈顺序下降(P<0.01),表现出剂量、时间依赖性的负性作用。②丹参酮ⅡA可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS表达的负性作用(P<0.01),但尚不能恢复到空白对照组水平(P<0.05)。在丹参酮ⅡA作用1、6h,A组的抑制效应明显强于B组(P<0.05);随着作用时间延长至24h,两组间差异无统计学意义(P>0.05)。③AngⅡ可引起主动脉内皮细胞[Ca2+]i显著升高(P<0.01),丹参酮ⅡA可部分抑制AngⅡ诱导的内皮细胞[Ca2+]i升高(P<0.05)。结论丹参酮ⅡA通过增加血管内皮细胞eNOS基因表达及细胞分泌NO水平和降低内皮细胞[Ca2+]i水平来发挥对血管内皮细胞的保护作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 血管紧张肽Ⅱ 内皮型一氧化氮合酶 内皮细胞 细胞内钙离子
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茶多酚体外诱导人肺癌细胞凋亡的机理研究 被引量:26
7
作者 谢珏 陈清勇 +3 位作者 周建英 王彦刈 杨凌 江中勇 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期244-247,共4页
目的探讨茶多酚诱导人肺癌细胞的凋亡作用及其相关机理。方法采用MTT法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪技术 ,体外观察茶多酚对肺癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果不同浓度的茶多酚 (5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg/ml)对肺癌细胞均... 目的探讨茶多酚诱导人肺癌细胞的凋亡作用及其相关机理。方法采用MTT法、激光共聚焦显微镜和流式细胞仪技术 ,体外观察茶多酚对肺癌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。结果不同浓度的茶多酚 (5 0、10 0、2 0 0、4 0 0 μg/ml)对肺癌细胞均有抑制作用 ,呈剂量依赖关系 ,抑制率 (% )分别为 2 8.6 9± 1.2 7、4 6 .19± 1.79、6 4.6 1± 1.2 9、75 .90± 1.96。在细胞增殖受到明显抑制时 ,细胞被阻滞于G0 /G1期 ,不能进入S期及G2 /M期 ,同时诱导肺癌细胞凋亡 ,凋亡率 (% )分别为 4 .76± 0 .11、5 .78± 0 .38、10 .0 6± 0 6 7、2 4 .4 4± 0 .4 4。激光共聚焦显微镜双荧光标记可见细胞凋亡的形态学改变 ,与对照组比较 ,随着茶多酚浓度的增高 ,细胞内Ca2 +浓度、AnnexinV表达和蛋白酪氨酸磷酸酶基因 (PTEN)蛋白表达逐渐增高 ,细胞周期调控蛋白D1蛋白表达水平则呈逐渐下降。结论茶多酚可诱导人肺癌细胞的凋亡 ,其作用机制与改变细胞内Ca2 +浓度。 展开更多
关键词 茶多酚 体外诱导 肺癌 细胞凋亡
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钙荧光探剂的研究及其在生命科学中的应用 被引量:21
8
作者 张川里 吴本 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期37-42,共6页
钙荧光探剂测量活细胞胞浆游离Ca2+浓度的方法在钙研究中已成为一种越来越重要的技术。特别是由于新的一代荧光探剂的合成和激光共聚焦显微镜的发展,使其应用更加广泛。由于国内使用这种技术的实验室逐渐增多,本文将系统介绍钙荧... 钙荧光探剂测量活细胞胞浆游离Ca2+浓度的方法在钙研究中已成为一种越来越重要的技术。特别是由于新的一代荧光探剂的合成和激光共聚焦显微镜的发展,使其应用更加广泛。由于国内使用这种技术的实验室逐渐增多,本文将系统介绍钙荧光探剂的发展、测量原理和方法、新的常用钙荧光探剂的比较及其在生命科学中的应用。 展开更多
关键词 细胞 钙荧光探剂 钙离子浓度 细胞学技术
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三七总皂苷对脑细胞内游离钙浓度的影响 被引量:27
9
作者 马丽焱 肖培根 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第8期467-469,共3页
目的:研究三七总皂苷(saponinsofPanaxnotoginseng,PNS)对不同状态下脑细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法:采用Fura2作为荧光指示剂,测定新生大鼠脑细胞中荧光强度的变化... 目的:研究三七总皂苷(saponinsofPanaxnotoginseng,PNS)对不同状态下脑细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响。方法:采用Fura2作为荧光指示剂,测定新生大鼠脑细胞中荧光强度的变化。结果:PNS100,400mg·L-1对高钾(50mmol·L-1)、谷氨酸(100μmol·L-1)诱导的以及缺氧引起的[Ca2+]i增高均有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 三七总皂甙 细胞 三七 中药药理学
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齐墩果酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及与细胞内Ca^(2+)水平关系的研究 被引量:22
10
作者 黄敏珊 黄炜 +4 位作者 吴其年 罗惠玲 张志凌 张东方 杨凤仪 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2004年第16期58-60,63,共4页
目的研究齐墩果酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化的关系。方法25~125μmol/L浓度梯度的齐墩果酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。50μmol/L,75μmol/L和10... 目的研究齐墩果酸对人乳腺癌细胞(MCF-7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化的关系。方法25~125μmol/L浓度梯度的齐墩果酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。50μmol/L,75μmol/L和100μmol/L齐墩果酸处理细胞24h,用末端脱氧核苷转移酶介导dUTP末端标记法和AnnexinV流式细胞仪法检测凋亡细胞。75μmol/L齐墩果酸处理细胞24h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。结果从50μmol/L齐墩果酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.05和P<0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为88.36μmol/L。75μmol/L和100μmol/L齐墩果酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01);齐墩果酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.01)。结论齐墩果酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导调亡的作用;其诱导凋亡可能依赖于细胞内Ca2+水平上调。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 齐墩果酸 凋亡 增殖 细胞内ca^2+
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丹参酮Ⅱ_A对血管紧张素Ⅱ所致主动脉内皮细胞游离钙离子及产生一氧化氮的影响 被引量:20
11
作者 李永胜 王照华 +1 位作者 梁黔生 郑智华 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期882-886,共5页
目的 通过观察猪主动脉内皮细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用下时,不同浓度和不同作用时间的丹参酮ⅡA(TSN)对血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)及其内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响、细胞内游离钙离子浓度的变化,探讨TSN... 目的 通过观察猪主动脉内皮细胞在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用下时,不同浓度和不同作用时间的丹参酮ⅡA(TSN)对血管内皮细胞分泌一氧化氮(NO)及其内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响、细胞内游离钙离子浓度的变化,探讨TSN对血管内皮细胞的保护作用。方法采用硝酸还原法、免疫组织化学法,首先分别检测不同浓度(10^-8~10^-6mol/L)和不同作用时间(1、6、24h)的AngⅡ对培养的猪主动脉内皮细胞产生NO及其eNOS蛋白质表达的影响;然后比较在10^-6mol/L的AngII作用的不同点(0h点为A组、6h点为B组)加入不同浓度(10、50mg/L)TSN,分别检测作用1、6、24h后内皮细胞的NO生成和eNOS的蛋白质表达变化。用激光共聚焦扫描显像系统检测内皮细胞内游离钙离子浓度([-Ca^2+]i)水平的变化。结果 (1)随着AngⅡ浓度的增加、作用时间的延长,内皮细胞NO的产生及eNOS的表达呈顺序下降(P〈O.01),表现出剂量、时间依赖性的负性作用。(2)TSN可抑制AngⅡ对内皮细胞分泌NO及eNOS表达的负性作用(P〈0.01),但尚不能恢复到空白对照组水平(P〈0.05);此作用与TSN的浓度无明显关系(P〉0.05)。在TSN作用1、6h,A组的抑制效应明显强于B组(P〈0.05);随着作用时间延长至24h,两组间差异无显著性(P〉0.05)。(3)AngⅡ可引起主动脉内皮细胞[-Ca^2+]i显著升高(P〈0.01),TSN可部分抑制AngII诱导的内皮细胞[-Ca^2+]i升高(P〈0.05)。结论 TSN可抑制AngⅡ对血管内皮细胞分泌NO以及细胞eNOS蛋白质表达的负性作用,可能通过多种途径对血管内皮细胞及其功能起到保护作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 血管紧张素Ⅱ 内皮型一氧化氮合酶 内皮细胞 细胞内钙离子
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厚朴酚对大鼠白细胞5-脂氧合酶活性和细胞内钙离子浓度的影响 被引量:17
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作者 李杰萍 梁统 周克元 《广东医学院学报》 2002年第3期177-178,共2页
目的 :探讨厚朴酚对 5-脂氧合酶活性的影响 ,以阐明其抗炎机理。方法 :以大鼠胸腔白细胞为材料 ,分别用高效液相色谱法和荧光分光光度法测定白三烯 B4 (LTB4 ) ,5-羟二十碳四烯酸 (5- HETE)的生成和细胞内钙离子水平。结果 :厚朴酚对白... 目的 :探讨厚朴酚对 5-脂氧合酶活性的影响 ,以阐明其抗炎机理。方法 :以大鼠胸腔白细胞为材料 ,分别用高效液相色谱法和荧光分光光度法测定白三烯 B4 (LTB4 ) ,5-羟二十碳四烯酸 (5- HETE)的生成和细胞内钙离子水平。结果 :厚朴酚对白细胞 L TB4 和 5- HETE的生物合成有较强的抑制作用 ,其 IC50 值分别为 8.5μmol/ L和 3.1μmol/ L;厚朴酚还可以抑制趋化三肽 (f MLP)刺激的白细胞内钙升高 ,但对静息状态的白细胞内钙离子水平没有明显的影响。结论 :厚朴酚可以明显影响白细胞的功能 ,抑制炎性介质 L TB4 和 5 - HETE的生成 。 展开更多
关键词 厚朴酚 大鼠 白细胞 5-脂氧合酶 细胞内钙离子浓度 影响 酶活性 抗炎机理
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18β-甘草次酸诱导人乳腺癌细胞凋亡及其细胞内Ca^(2+)水平的变化 被引量:18
13
作者 黄炜 陈新美 +2 位作者 张志凌 罗惠玲 张东方 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第2期102-106,共5页
背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的... 背景与目的:18-甘草次酸是甘草的重要成分,近年来的研究发现18-甘草次酸具有抑制人淋巴细胞性白血病、肝癌和肺癌的细胞增殖。本研究探讨18-甘草次酸对人乳腺癌MCF-7细胞诱导凋亡的作用。目前研究已证实细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的动态变化在诱发细胞凋亡过程的多个环节中起重要作用,因此本研究也探讨由18-甘草次酸诱导的MCF-7细胞凋亡发生与[Ca2+]i变化的关系。方法:用50~250μmol/L浓度梯度的18β-甘草次酸处理MCF-7细胞24h,用MTT比色法测定细胞增殖能力。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用末端脱氧核苷酸转移酶介导dUTP末端标记法、Annexin V流式细胞仪法和单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。150μmol/L 18β-甘草次酸处理细胞24 h,用Fura-2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。分别用100μmol/L BAPTA-AM和0.5 mmol/L EGTA与150μmol/L 18β-甘草次酸联合处理MCF-7细胞24 h,用单细胞凝胶电泳法检测凋亡细胞。结果:从100μmol/L 18β-甘草次酸浓度起对MCF-7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01和P<0.05),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC 50)为234.33μmol/L。100μmol/L和150μmol/L 18β-甘草次酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01和P<0.05);18β-甘草次酸处理组的[Ca2+]i也明显高于对照组(P<0.05)。18β-甘草次酸与BAPTA-AM联合处理组和18β-甘草次酸与EGTA联合处理组的凋亡率均明显低于单纯的150μmol/L18β-甘草次酸处理组(P<0.05和P<0.01)。结论:18-甘草次酸具有抑制MCF-7细胞增殖和诱导其凋亡的作用,而18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡的作用在抑制该细胞增殖方面起主要作用。18-甘草次酸诱导MCF-7细胞凋亡依赖于细胞内Ca2+水平上调,而细胞外Ca2+内流是导致细胞内Ca2+水平上调的原因之一。 展开更多
关键词 人乳腺癌细胞 18Β-甘草次酸 凋亡 增殖 细胞内ca^2+
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龙葵碱诱导HepG_2细胞凋亡的线粒体通路研究 被引量:20
14
作者 季宇彬 高世勇 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期272-275,共4页
目的观察龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体通路的关系。方法MTT法测定龙葵碱对HepG2细胞的细胞毒作用;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察龙葵碱对HepG2细胞形态学的影响;TMRE和Fluo-3/AM双染,激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体... 目的观察龙葵碱诱导HepG2细胞凋亡与线粒体通路的关系。方法MTT法测定龙葵碱对HepG2细胞的细胞毒作用;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察龙葵碱对HepG2细胞形态学的影响;TMRE和Fluo-3/AM双染,激光共聚焦扫描显微镜同时观察细胞线粒体膜电位和细胞内[Ca2+]i的变化。结果龙葵碱对HepG2细胞有细胞毒作用;龙葵碱诱导HepG2细胞形态出现凋亡形态时TMRE和Fluo-3/AM双染观察表明,龙葵碱在降低线粒体膜电位的同时能够升高细胞内[Ca2+]i浓度。结论龙葵碱降低膜电位,开放细胞膜PT通道,使细胞内Ca2+顺浓度梯度转运,从而升高细胞内Ca2+浓度启动细胞凋亡机制。 展开更多
关键词 龙葵碱 HepG2 人肝癌 细胞内ca^2+ 膜电位 激光共聚焦扫描显微术
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Ca^2+信号参与铝诱导黑麦根系分泌有机酸的调控 被引量:11
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作者 唐新莲 黎晓峰 +2 位作者 凌桂芝 顾明华 玉永雄 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期2279-2285,共7页
【目的】揭示铝诱导根系分泌有机酸的机制,探讨胞质钙信号对铝诱导黑麦根系分泌有机酸的调控作用。【方法】采用药理学研究方法和激光共聚焦扫描显微技术探讨铝胁迫下根尖胞质游离钙离子浓度([Ca2+]cyt)及其与有机酸分泌的关系。【结果... 【目的】揭示铝诱导根系分泌有机酸的机制,探讨胞质钙信号对铝诱导黑麦根系分泌有机酸的调控作用。【方法】采用药理学研究方法和激光共聚焦扫描显微技术探讨铝胁迫下根尖胞质游离钙离子浓度([Ca2+]cyt)及其与有机酸分泌的关系。【结果】铝不仅诱导黑麦根系分泌柠檬酸和苹果酸,而且使根尖细胞Ca2+的荧光强度增强、波动加剧。铝引起的根尖细胞Ca2+荧光强度的变化在受Ca2+通道抑制剂异搏定、胞内Ca2+通道阻断剂辽红干扰后,显著减少了铝诱导的有机酸分泌。铝诱导的根尖[Ca2+]cyt的升高及有机酸分泌还受CaM阻断剂三氟拉嗪的干扰和抑制。钙螯合剂EGTA处理不仅减弱了铝诱导的Ca2+荧光信号、加大了Ca2+信号的波动幅度,而且显著抑制铝诱导的柠檬酸分泌。此外,在铝胁迫下,根系有机酸分泌受阴离子通道抑制剂尼氟灭酸的抑制。【结论】根尖[Ca2+]c可能是介导铝诱导黑麦根系分泌有机酸的胞内信号因子,而质膜上的阴离子通道可能是铝诱导的钙信号传导途径中的下游效应器。 展开更多
关键词 黑麦 有机酸分泌 胞质ca^2+ 信号转导
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镉致大鼠大脑皮质神经细胞凋亡的机理及N-乙酰半胱氨酸的保护作用 被引量:13
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作者 袁燕 张英 +4 位作者 卞建春 刘学忠 李丹 孙娅 刘宗平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1107-1110,共4页
对神经细胞用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒和N-乙酰半胱氨酸(NAC)(100μmol/L)进行保护,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡率、[Ca2+]i和活性氧(ROS)水平。结果表明,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平... 对神经细胞用不同浓度(0、5、10、20μmol/L)醋酸镉染毒和N-乙酰半胱氨酸(NAC)(100μmol/L)进行保护,通过流式细胞仪检测了细胞凋亡率、[Ca2+]i和活性氧(ROS)水平。结果表明,与对照组相比,各染毒组细胞凋亡率、细胞内[Ca2+]i和ROS水平明显升高,呈剂量-效应关系,除5μmol/L组ROS水平外,均差异极显著(P<0.01)。添加NAC组与相应染毒组比较,神经细胞凋亡率有降低趋势,但差异不显著(P>0.05);10、20μmol/L组细胞内[Ca2+]i和ROS水平显著降低(P<0.05或P<0.01)。表明镉可诱导神经细胞凋亡,其机理可能与细胞内Ca2+和ROS水平升高有关,NAC对其有一定的保护作用。 展开更多
关键词 皮质神经元 细胞凋亡 细胞内ca2+浓度 活性氧 N-乙酰半胱氨酸
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甘草酸对人乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究 被引量:7
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作者 张志凌 黄炜 +4 位作者 罗惠玲 黄敏珊 吴其年 张东方 杨凤仪 《实用癌症杂志》 2004年第1期16-18,共3页
目的 探讨甘草酸对人乳腺癌细胞 (MCF 7)增殖抑制和诱导凋亡的作用 ,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2 + 浓度( [Ca2 + ]i)变化的关系。方法  2 .5~ 12 .5mmol/L甘草酸处理MCF 7细胞 2 4h ,采用MTT比色法测定细胞增殖能力。 5 .0mmol/L、7.... 目的 探讨甘草酸对人乳腺癌细胞 (MCF 7)增殖抑制和诱导凋亡的作用 ,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2 + 浓度( [Ca2 + ]i)变化的关系。方法  2 .5~ 12 .5mmol/L甘草酸处理MCF 7细胞 2 4h ,采用MTT比色法测定细胞增殖能力。 5 .0mmol/L、7.5mmol/L和 10 .0mmol/L甘草酸处理MCF 7细胞 2 4h ,用末端脱氧核苷转移酶介导dUTP末端标记法和AnnexinV流式细胞仪法检测凋亡细胞。 7.5mmol/L甘草酸处理MCF 7细胞 2 4h ,采用Fura 2荧光负载方法测定 [Ca2 + ]i的变化。结果 甘草酸从 5 .0mmol/L浓度起对MCF 7细胞的增殖抑制率显著升高 (P <0 .0 1) ,呈剂量依赖性 ;半增殖抑制浓度 (IC50 )为 15 .8mmol/L。 7.5mmol/L和 10 .0mmol/L甘草酸使细胞凋亡率显著升高 (P <0 .0 5和P <0 .0 1)。甘草酸处理组的 [Ca2 + ]i明显低于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 甘草酸具有抑制MCF 7细胞增殖和诱导凋亡的作用 ;其诱导细胞凋亡可能与细胞内Ca2 + 展开更多
关键词 甘草酸 人乳腺癌细胞 增殖 诱导 凋亡
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4′-甲醚-黄芩素诱导绒毛膜癌JAR细胞凋亡的实验研究 被引量:8
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作者 杨最素 罗莉 +2 位作者 朱利群 仇黎丽 徐昌芬 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1203-1206,共4页
目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对... 目的探讨4′-甲醚-黄芩素(4-MS)对人绒毛膜癌JAR细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡的相关机制。方法应用MTT法、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞术和实时定量PCR法,体外观察4-MS对JAR细胞的影响。结果不同质量浓度(10、20、40mg/L)的4-MS对JAR细胞均有增殖抑制作用,呈剂量依赖,作用72h后其增殖抑制率分别为(14.14±0.75)%、(34.34±2.99)%、(61.11±2.99)%(P<0.01);4-MS作用72h后细胞内Ca2+浓度分别为81.3±6.7、103.3±5.9、120.7±11.0,与对照组相比差异有显著性(P<0.05)。40mg/L4-MS作用12、24、36h后其早期凋亡率分别为(2.36±0.19)%、(4.22±2.44)%、(7.34±0.56)%,明显高于对照组(P<0.01)。20、40mg/L4-MS作用48h后hTERT mRNA的表达量为0.05±0.01和0.02±0.01,明显低于对照组(P<0.01)。结论4-MS能抑制人绒毛膜癌JAR细胞的增殖,诱导凋亡,其机制与提高细胞内Ca2+浓度、降低hTERT mRNA的表达有关。 展开更多
关键词 4'甲醚-黄芩素(4-MS) JAR细胞 早期凋亡 细胞内ca^2+浓度 人端粒酶逆转录酶(hTERT)
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代谢综合征大鼠肠系膜脂肪组织中肾素-血管紧张素系统的变化 被引量:8
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作者 马丽群 张莉莉 +5 位作者 张雅萍 王利娟 李志冰 曹廷兵 刘道燕 祝之明 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期770-775,I0007,共7页
目的探讨代谢综合征(MS)大鼠肠系膜脂肪组织中肾素-血管紧张素系统(RAS)变化及拮抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对脂肪细胞成脂作用的影响。方法30只8周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为MS组和正常对照组,分别给予高脂饲料和普通饲料喂养24周,造成M... 目的探讨代谢综合征(MS)大鼠肠系膜脂肪组织中肾素-血管紧张素系统(RAS)变化及拮抗血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对脂肪细胞成脂作用的影响。方法30只8周龄健康雄性Wistar大鼠随机分为MS组和正常对照组,分别给予高脂饲料和普通饲料喂养24周,造成MS模型后,取出肠系膜脂肪组织,应用RT-PCR和Westernblot法检测脂肪组织中mRNA和蛋白质表达。同时,将前脂肪细胞(3T3-L1)进行诱导分化,油红O染色观察脂滴形成情况,比率荧光倒置显微镜检测脂肪细胞内钙水平([Ca2+]i)。给予AngⅡ刺激,并观察血管紧张素Ⅱ受体阻断剂(ARB)坎地沙坦或血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)巯甲丙脯酸对脂滴形成及细胞内钙水平([Ca2+]i)的作用。结果MS大鼠肠系膜脂肪组织的血管紧张素原(AGT)、血管紧张素转换酶(ACE)和血管紧张素Ⅱ受体亚型1(AT1R)表达均显著高于正常对照组(P<0·05,P<0·01);未诱导前脂肪细胞和经AngⅡ处理的成熟脂肪细胞未见明显脂滴形成,给予ACEI和ARB的成熟脂肪细胞有明显的脂滴形成;AngⅡ可致前脂肪细胞内钙水平([Ca2+]i)显著增加(P<0·01),巯甲丙脯酸和坎地沙坦可阻断其效应,而对成熟脂肪细胞,AngⅡ介导的细胞内钙水平([Ca2+]i)升高受到抑制,但坎地沙坦能恢复AngⅡ的效应,巯甲丙脯酸与AngⅡ组比较细胞内钙水平([Ca2+]i)差异无显著性。结论代谢综合征大鼠肠系膜脂肪组织中RAS系统处于激活状态,拮抗RAS能恢复脂肪细胞的基本功能。 展开更多
关键词 肾素-血管紧张素系统 血管紧张素Ⅱ 3T3-L1前脂肪细胞 脂肪组织 细胞内钙
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单细胞内Ca^(2+)时空变化的激光共聚焦显微测定 被引量:5
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作者 杨小毅 颜坤 黄有国 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第5期442-445,共4页
应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/... 应用激光扫描共聚焦显微系统(LSCM)和Fluo-3/AM荧光探剂标记技术,测定了单个活细胞胞内游离Ca2+的动态变化与立体分布影像.结果显示,在37℃,Fluo-3/AM终浓度为6μmol/L的条件下,C57BL/6J小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获得良好的标记效果.相反,若探剂浓度太高或负载时间太长,胞内荧光强度太强,影响在共聚焦显微镜镜下分辨细胞内结构.因此用LSCM研究细胞内游离Ca2+变化时,荧光探剂的负载应以获得最适荧光信号而不是以最大荧光强度为标准.上述方法在其他如平滑肌细胞、卵母细胞中的测定亦获得满意的结果,这对进一步研究各种生理和病理条件下细胞内Ca2+信号的动态变化、与跨膜Ca2+梯差的关系及对活细胞功能活动的调节提供了一种可行的、直观的研究手段。 展开更多
关键词 细胞 钙离子 激光 共聚焦显微系统
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