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非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗株的构建和免疫保护特性 被引量:30
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作者 张艳艳 陈腾 +35 位作者 张静远 齐宇 缪发明 薄宗义 王立冬 郭晓宇 周鑫韬 杨金梅 王晓虎 高玉龙 汪春雨 鲍晨沂 米立娟 孙雪霏 冯娜 杨金金 王承宇 万忠海 李记平 孟轲音 田多 李楠 王述超 王颖 张菲 张锦霞 蒋依倩 刘晔 张守峰 张中洋 钱莺娟 朱鸿飞 高玉伟 陈鸿军 李金祥 扈荣良 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1421-1427,共7页
以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18... 以我国首例非洲猪瘟疫情中分离的流行毒株(SY18)为亲本株构建了多基因家族(MGF)基因和CD2v基因缺失的非洲猪瘟病毒基因缺失疫苗候选株,针对基因缺失株的安全性和免疫保护效果进行了特性研究。结果显示,MGF和CD2v双基因缺失株(ASFV SY18ΔMGF/ΔCD2v)对猪安全,接种猪能够100%抵抗亲本强毒株SY18株的攻击,对照猪全部死亡;说明该毒株可作为非洲猪瘟疫苗候选株。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 基因缺失 MGF基因 CD2v基因 疫苗候选株 安全性 免疫保护
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日本血吸虫rSj338及膜蛋白rSj22.6抗原表位联合免疫对小鼠的保护性研究 被引量:13
2
作者 胡雪梅 张兆松 +6 位作者 吴海玮 李春林 苏川 季旻珺 王勇 朱翔 吴观陵 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第2期88-91,共4页
目的 观察日本血吸虫 (中国大陆株 )的线粒体相关蛋白 r Sj338及膜蛋白 r Sj2 2 .6有效抗原表位混合后对小鼠的免疫保护性 ,为将来复合疫苗的研制提供理论依据。方法 分别用特异性抗r Sj338抗体和抗 r Sj2 2 .6的抗体筛选噬菌体随机 1... 目的 观察日本血吸虫 (中国大陆株 )的线粒体相关蛋白 r Sj338及膜蛋白 r Sj2 2 .6有效抗原表位混合后对小鼠的免疫保护性 ,为将来复合疫苗的研制提供理论依据。方法 分别用特异性抗r Sj338抗体和抗 r Sj2 2 .6的抗体筛选噬菌体随机 12肽库 ,将获得的 r Sj338的有效抗原表位与r Sj2 2 .6有效抗表位混合后免疫 BAL B/ c小鼠 ,并与 r Sj338的有效抗原表位混合免疫组进行比较。结果  r Sj338的 4种表位和 r Sj2 2 .6抗原的 4种表位混合免疫组小鼠获得了 4 5 .4 % (P<0 .0 1)的减虫率及 5 9.1% (P<0 .0 1)肝总减卵率 ,r Sj338的 4种表位混合免疫组小鼠获得了 34.2 % (P<0 .0 1)的减虫率及 4 6 .8% (P<0 .0 1)肝总减卵率 ;r Sj3384种表位和 r Sj2 2 .6的 4种表位混合免疫组获得的减虫率和肝总减卵率均高于 r Sj338的 4种表位混合免疫组 ,差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 展开更多
关键词 日本血吸虫 抗原表位 rSj338 rSj22.6 免疫保护 膜蛋白 动物实验
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溶藻弧菌外膜蛋白(Va-OMP)的免疫原性及免疫保护性 被引量:19
3
作者 黄志坚 何建国 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期538-543,共6页
利用初步制备的溶藻弧菌外膜蛋白(outer membrane protein of Vibrio alginolyticus,Va-OMP)、溶藻弧菌蛋白分子量58kD外膜蛋白(Va-OMP58)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,Va)灭活菌苗、溶藻弧菌脂多糖(lipopolysaccharides o... 利用初步制备的溶藻弧菌外膜蛋白(outer membrane protein of Vibrio alginolyticus,Va-OMP)、溶藻弧菌蛋白分子量58kD外膜蛋白(Va-OMP58)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus,Va)灭活菌苗、溶藻弧菌脂多糖(lipopolysaccharides of Vibrio alginolyticus,Va-LPS)菌苗等进行主动保护性和被动保护性的实验比较,Va-OMP、Va-OMP58免疫组小鼠免疫后用活菌攻击,免疫保护率为62.5%~86.7%,而Va-LPS组和Va灭活菌苗组的免疫保护率为50%~62.5%,对照组的免疫保护率仅为6.7%。用不同抗血清免疫小鼠,活菌攻击后,Va-OMP组存活率达到53.3%和66.7%,Va-OMP58组次之,存活率为40%和50%,Va灭活菌组的存活率为33.3%和46.7%,对照组为13.3%。与对照组相比较,Va-OMP组差异较显著,保护效果较好。溶藻弧菌外膜蛋白和蛋白分子量58kD外膜蛋白的保护性效果高于溶藻弧菌灭活菌苗和溶藻弧菌脂多糖的保护性效果,证明外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)具有较强的免疫原性。迟发性超敏反应试验也证明,OMP能诱发变态反应,间接证明OMP具有较强的引起细胞介导免疫反应的能力。因此实验证明,Va-OMP、Va-OMP58是能在小鼠产生体液免疫和细胞介导免疫的保护性抗原。 展开更多
关键词 溶藻弧菌 外膜蛋白 免疫原性 免疫保护性
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Echinococcus Granulosus 14-3-3 Protein:A Potential Vaccine Candidate Against Challenge with Echinococcus Granulosus in Mice 被引量:19
4
作者 LI Zong Ji WANG Ya Na +1 位作者 WANG Qi ZHAO Wei 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2012年第3期352-358,共7页
Objective To investigate the protective immunity against Echinococcus granulosus in mice immunized with rEg14-3-3. Methods ICR mice were subcutaneously immunized three times with rEg14-3-3, followed by the challenge w... Objective To investigate the protective immunity against Echinococcus granulosus in mice immunized with rEg14-3-3. Methods ICR mice were subcutaneously immunized three times with rEg14-3-3, followed by the challenge with Echinococcus granulosus protoscoleces intraperitoneally and then sacrificed after six months of post-challenge to detect the proliferation of splenocytes by MTT assay, and to measure the secretion of IL-2, IL-4, IL-20, and IFN -y by ELISA. The rate of reduced hydatid cyst and the levels of IgE, igG and IgG subclasses in sera were examined. Results Mice vaccinated with rEg14-3-3 and challenged with protoscoleces revealed significant protective immunity of 84.47%. ELISA analysis indicated that the immunized mice generated specific high levels of IgG and the prevailing isotypes of IgG were IgG1 and IgG2a. Splenocytes from mice immunized with rEg14-3-3 showed a significant proliferation response. The secretion of IFN-V and IL-2 increased significantly in the vaccinated mice whereas there was no significant difference in IL-4 and IL-20 levels between vaccinated and control mice. Conclusion The results indicate that the rEg24-3-3 vaccine could induce a high level of protective immunity as a promising vaccine candidate to prevent cystic echinococcosis. 展开更多
关键词 Eg14-3-3 Echinococcus granulosus VACCINE immunoprotection
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卵形鲳鯵对刺激隐核虫的免疫应答和免疫保护研究 被引量:21
5
作者 但学明 李安兴 +2 位作者 林小涛 柏建山 张海发 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期13-18,共6页
用刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)的幼虫对卵形鲳鯵(Trachinotus ovatus)进行腹腔注射和体表感染,然后每隔一周用阻动试验(Immobilization assay)检测免疫鱼的抗血清和皮肤培养液对刺激隐核虫幼虫的阻动效价,在第14周中,分别用亚致... 用刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)的幼虫对卵形鲳鯵(Trachinotus ovatus)进行腹腔注射和体表感染,然后每隔一周用阻动试验(Immobilization assay)检测免疫鱼的抗血清和皮肤培养液对刺激隐核虫幼虫的阻动效价,在第14周中,分别用亚致死剂量和致死剂量的刺激隐核虫幼虫对免疫鱼攻毒以检测所产生的免疫保护力。实验结果显示:两种免疫方法都能让卵形鲳鯵的血清和皮肤生成阻动刺激隐核虫幼虫的特异性抗体,并能使被免疫鱼获得明显的免疫保护,但是体表感染免疫组的血清和皮肤培养液的阻动效价都要比腹腔注射免疫组高,所获得的免疫保护力也更强。同时还发现,免疫鱼血清和皮肤培养液中的抗体存在明显的差异:两者的最初生成时间、达到峰值的时间、变化规律以及阻动效价等都不一致。因此,我们推测鱼类的系统免疫应答和皮肤黏膜免疫应答有可能是相互独立的,或者是不同步的。鱼类的体液免疫应答,特别是黏膜免疫应答对抵御刺激隐核虫的感染起了重要的作用,采用刺激隐核虫虫体疫苗可能成为预防海水鱼类白点病的一种选择。 展开更多
关键词 免疫应答 免疫保护 主动免疫 刺激隐核虫 卵形鲳鯵
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日本血吸虫22.6kDa有效抗原表位对小鼠免疫保护性的研究 被引量:14
6
作者 胡雪梅 张兆松 +6 位作者 李春林 吴海玮 苏川 季旻珺 王勇 刘丰 吴观陵 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2001年第2期86-89,共4页
目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 ) 2 2 .6 k Da有效抗原表位对小鼠的免疫保护性 ,预测其在抗血吸虫感染中的作用。方法 用纯化的抗 Sj2 2 .6 k Da的多克隆抗体 Ig G对噬菌体 12肽库进行 5轮免疫学筛选 ,挑取克隆 ,经 Western- blot... 目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 ) 2 2 .6 k Da有效抗原表位对小鼠的免疫保护性 ,预测其在抗血吸虫感染中的作用。方法 用纯化的抗 Sj2 2 .6 k Da的多克隆抗体 Ig G对噬菌体 12肽库进行 5轮免疫学筛选 ,挑取克隆 ,经 Western- blot免疫识别、动物初筛及序列分析后 ,将获得的阳性克隆免疫 BABL/ c小鼠。结果 共获得 4个有效抗原表位 ,各免疫组和对照组相比 ,4种表位混合免疫组小鼠 ,获得了 39.5 % (P<0 .0 5 )的减虫率及 5 7.1% (P<0 .0 1)肝总减卵率 ;4种表位分别免疫4组小鼠 ,各组分别获得了 2 7.5 % (P<0 .0 5 )、5 .4% (P<0 .0 5 )、2 2 .8% (P<0 .0 5 )、11.6 % (P<0 .0 5 )的减虫率及 41.4% (P<0 .0 1)、2 9.7% (P<0 .0 5 )、32 .2 % (P<0 .0 5 )、30 .9% (P<0 .0 5 )肝总减卵率。结论 所获得 4种有效抗原表位均可诱导宿主抗血吸虫感染的部分保护力 。 展开更多
关键词 日本血吸虫 噬菌体肽库 表位 Sj22.6kDa 免疫保护
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EnMIC2重组减毒沙门氏菌的构建及免疫保护效果研究 被引量:14
7
作者 谢明权 覃宗华 +4 位作者 蔡建平 艾哈迈德 彭新宇 魏文康 吴惠贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期705-710,共6页
成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix... 成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDSPAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6%,分子量大小约为35ku,与抗E.necatrix的高免血清进行WesternBlotting,结果为阳性。将重组减毒沙门氏菌以108和109CFU/鸡免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后2周血清中可检测到特异性IgG,3周时抗体水平达到峰值,同时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫接种后3周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.necatrix(GD)孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;但108和109CFU免疫组的卵囊总产量分别能降低26.62%和48.92%。 展开更多
关键词 毒害艾美耳球虫 微线蛋白-2 减毒沙门氏菌 免疫保护
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日本血吸虫22.6kDa重组蛋白对小鼠的免疫保护性研究 被引量:14
8
作者 苏川 马磊 +7 位作者 王荣芝 胡雪梅 陈淑贞 邵莉君 吴海玮 沈蕾 张兆松 吴观陵 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期288-291,共4页
目的:研究日本血吸虫(中国大陆株)22.6 kDa 抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能,并探讨Sj22.6/Sj26 GST 融合蛋白作为复合疫苗的可能性。方法:用亲和层析法制备Sj22.6/Sj26 GST融合蛋白。将这两种蛋白分别免疫BALB/c小鼠后进行攻击感... 目的:研究日本血吸虫(中国大陆株)22.6 kDa 抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能,并探讨Sj22.6/Sj26 GST 融合蛋白作为复合疫苗的可能性。方法:用亲和层析法制备Sj22.6/Sj26 GST融合蛋白。将这两种蛋白分别免疫BALB/c小鼠后进行攻击感染试验。结果:Sj22.6 重组蛋白和Sj22.6/Sj26 GST 融合蛋白分别可诱导小鼠产生32.1% (P< 0.005) 和34.9% (P< 0.02)的成虫减虫率, 28.4% (P< 0.02)和45.1% (P< 0.005)的总减卵率。结论:rSj22.6 与Sj22.6/Sj26 展开更多
关键词 日本血吸虫 22.6kDa抗原 融合表达 免疫保护
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堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究 被引量:12
9
作者 覃宗华 谢明权 +2 位作者 蔡建平 艾哈迈德 叶秀华 《寄生虫与医学昆虫学报》 CAS 2005年第1期6-13,共8页
用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱... 用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架 (ORF) ,与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E-coliX6 2 12 ,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)X4 5 5 0。经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S typhimurium的高效表达 ,表达产物占菌体总蛋白的 9 2 % ,重组蛋白分子量约为 19kDa。将重组减毒S typhimurium分别以 10 8或 10 9CFU 鸡经口免疫 4日龄岭南黄肉鸡 ,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG ,3周时抗体水平达到峰值 ;2 5日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌。免疫后 3周 ,试验鸡分别经口攻击感染 5 0 0个E acervulina孢子化卵囊 ,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线 ;计数攻虫感染后第 3 5~ 9 5天卵囊总产量 ,2个免疫组分别能降低 2 5 . 1%和 4 6 . 4 %的卵囊产生。 展开更多
关键词 堆型艾美耳球虫 减毒沙门氏菌 效果研究 免疫保护 大肠杆菌E.coli 减毒鼠伤寒沙门氏菌 表面抗原基因 质粒表达载体 特异性IgG PCR方法 孢子化卵囊 重组质粒 高效表达 IPTG 表达产物 重组蛋白 抗体水平 子孢子 广东株 电转化
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加味玉屏风汤对免疫抑制小鼠免疫器官的保护效应 被引量:7
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作者 魏彦明 陈智华 项光华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期181-182,共2页
应用动物试验和病理组织学方法 ,研究了传统中药方剂加味玉屏风汤对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾和胸腺等免疫器官的保护作用。结果表明 ,加味玉屏风汤能明显拮抗环磷酰胺所致脾白髓、骨髓造血组织和胸腺淋巴细胞容量下降 ( P <0 .0 1... 应用动物试验和病理组织学方法 ,研究了传统中药方剂加味玉屏风汤对环磷酰胺所致免疫抑制小鼠脾和胸腺等免疫器官的保护作用。结果表明 ,加味玉屏风汤能明显拮抗环磷酰胺所致脾白髓、骨髓造血组织和胸腺淋巴细胞容量下降 ( P <0 .0 1 ) ,能显著升高下降的胸腺和脾指数 ( P <0 .0 1 )及减少的外周血白细胞和体重 ( P <0 .0 1 ) ;同时对健康小鼠以上指标也有不同程度的促进作用。提示加味玉屏风汤对脾和胸腺等免疫器官具有一定的保护作用 。 展开更多
关键词 加味玉屏风汤 脾脏 胸腺 骨髓 免疫保护
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我国新生儿乙肝疫苗免疫后效应概述及相关问题 被引量:14
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作者 姚红玉 陈陶阳 +1 位作者 曲春枫 陆玲玲 《科学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第20期1911-1917,共7页
我国开展新生儿乙肝疫苗免疫接种后,随着全程接种覆盖率和首针及时接种率的逐年提高,婴儿围产期和幼儿时期乙肝病毒(HBV)的传播得到有效阻断,城乡儿童慢性乙肝病毒表面抗原(HBsAg)流行率和HBV感染率持续下降,儿童和青少年乙肝和肝癌发... 我国开展新生儿乙肝疫苗免疫接种后,随着全程接种覆盖率和首针及时接种率的逐年提高,婴儿围产期和幼儿时期乙肝病毒(HBV)的传播得到有效阻断,城乡儿童慢性乙肝病毒表面抗原(HBsAg)流行率和HBV感染率持续下降,儿童和青少年乙肝和肝癌发病率降低.疫苗抗原的特异性免疫记忆与青少年人群中所存在的持久免疫力和长期免疫保护效果相关,免疫记忆反应与疫苗接种者早期的乙肝表面抗体(抗-HBs)滴度水平相关.我们通过对江苏启东地区新生儿乙肝疫苗接种者长期连续性的随访研究结果表明,接受了新生儿乙肝疫苗全程免疫注射者在20岁之前尚不需要进行普遍性的加强免疫.本文还对江苏启东等地区疫苗接种人群中出现的HBV母婴传播阻断失败、抗-HBs无/低应答、HBV隐匿性感染、HBV基因型及基因变异和单项HBV核心抗体(抗-HBc)阳性等问题进行了讨论. 展开更多
关键词 新生儿乙肝 疫苗接种 免疫保护 免疫记忆 加强免疫
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问号钩端螺旋体血清群LipL41基因型分析及其表达产物的免疫学鉴定 被引量:10
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作者 丁威 严杰 毛亚飞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第11期859-865,共7页
目的 确定我国 15群 15株问号钩端螺旋体 (简称钩体 )参考标准株和 2群 2株双曲钩体国际标准株携带LipL4 1基因情况 ,构建该基因的原核表达系统 ,鉴定表达产物的免疫原性。方法常规酚 氯仿法提取上述 17株钩体基因组DNA ,高保真PCR扩... 目的 确定我国 15群 15株问号钩端螺旋体 (简称钩体 )参考标准株和 2群 2株双曲钩体国际标准株携带LipL4 1基因情况 ,构建该基因的原核表达系统 ,鉴定表达产物的免疫原性。方法常规酚 氯仿法提取上述 17株钩体基因组DNA ,高保真PCR扩增全长LipL4 1基因片段 ,T A克隆后测序分型。构建LipL4 1基因原核表达系统 ,SDS PAGE检测重组目的蛋白 (rLipL4 1)表达情况。分别用钩体属特异性TR patocⅠ抗原、rLipL4 1兔抗血清的Westernblot鉴定其免疫反应性和抗原性。分别用显微镜凝集试验 (MAT)、钩体黏附J774A .1细胞模型检测兔抗rLipL4 1血清的交叉凝集效价和黏附阻断作用。结果  15株问号钩体均有LipL4 1基因 ,并可分为LipL4 1 1和LipL4 1 2两种基因型 ,2株双曲钩体则否。 11个LipL4 1 1基因和 4个LipL4 1 2基因克隆之间的核苷酸和氨基酸序列相似性分别为88.6 1%~ 88.6 7%和 93.2 4 %~ 97.18%。所构建的原核表达系统rLipL4 1 1和rLipL4 1 2的表达量分别占钩体总蛋白的 30 %和 4 0 %。rLipL4 1 1和rLipL4 1 2均能与TR patocⅠ抗血清发生结合反应 ,免疫家兔能产生抗体。rLipL4 1 1和rLipL4 1 2兔抗血清对上述 15株问号钩体MAT效价为 1∶8~ 1∶12 8、1∶16~1∶2 5 6稀释时均能有效地阻断钩体对细胞的黏附。结? 展开更多
关键词 钩体 问号钩端螺旋体 基因 原核表达系统 免疫学鉴定 免疫反应性 血清群 兔抗血清 高效表达 表达产物
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柔嫩艾美耳球虫GZ株λMzp5-7重组抗原的免疫保护性实验 被引量:8
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作者 秦睿玲 张西臣 +4 位作者 李建华 徐占云 尹继刚 扬举 张伟信 《热带医学杂志》 CAS 2003年第4期407-410,共4页
目的用柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)孢子表面蛋白基因在大肠杆菌中的表达产物免疫雏鸡,观察其诱导产生的免疫应答反应和对球虫攻击的保护性作用。方法重组抗原经肌肉注射菌体蛋白和口服工程活菌分别于7、14、28日龄3次免疫海兰小公雏... 目的用柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)孢子表面蛋白基因在大肠杆菌中的表达产物免疫雏鸡,观察其诱导产生的免疫应答反应和对球虫攻击的保护性作用。方法重组抗原经肌肉注射菌体蛋白和口服工程活菌分别于7、14、28日龄3次免疫海兰小公雏,同时设菌体蛋白+小剂量活卵囊组、未免疫攻毒组、未免疫未攻毒组作对照,采用间接ELISA法、流式细胞仪技术检测鸡体产生的免疫应答反应。于末次免疫后2w(42日龄)用5×104个E.tenella卵囊进行攻毒,观察其诱导产生的保护力。结果口服工程活菌组无论从卵囊记数、盲肠病变记分、相对增重、抗体产生水平以及细胞免疫水平上均优于其它免疫组。结论λMzp5-7基因在大肠杆菌中的表达产物对鸡柔嫩艾美耳球虫的攻击有一定的免疫保护作用。 展开更多
关键词 柔嫩艾美耳球虫 λMzp5-7重组蛋白 免疫保护性
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日本血吸虫pcDNA3/SjCWL01核酸疫苗的构建及其对小鼠免疫效果观察 被引量:8
14
作者 彭先楚 汪世平 +5 位作者 何卓 吕志跃 李庆华 周松华 李文凯 徐绍锐 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期752-756,共5页
目的构建日本血吸虫pcDNA3/SjCWL01核酸疫苗并进行免疫保护效果观察,评价其作为疫苗的潜能。方法将日本血吸虫基因SjCWL01亚克隆入真核表达载体pcDNA3,构建目的基因真核表达质粒,将pcDNA3/SjCWL01质粒转化大肠杆菌DH5α,大量制备DNA疫... 目的构建日本血吸虫pcDNA3/SjCWL01核酸疫苗并进行免疫保护效果观察,评价其作为疫苗的潜能。方法将日本血吸虫基因SjCWL01亚克隆入真核表达载体pcDNA3,构建目的基因真核表达质粒,将pcDNA3/SjCWL01质粒转化大肠杆菌DH5α,大量制备DNA疫苗并免疫小鼠3次,间隔2w,末次免疫后2w,用ELISA法检测免疫鼠血清特异性抗体效价,日本血吸虫尾蚴进行腹部皮肤攻击感染,感染后45d剖杀冲虫,分别计算减虫率,每克肝、粪卵减少率。结果重组DNA疫苗(pcDNA3/SjCWL01)与对照组比较,虫荷、每克肝卵、每克粪卵数分别下降了27.6%,39.5%,45.9%。结论表明pcD-NA3/SjCWL01疫苗可诱导小鼠产生部分抗血吸虫感染的保护力。 展开更多
关键词 日本血吸虫 SjCWL01 DNA疫苗 免疫保护
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日本血吸虫脂肪酸结合蛋白重组抗原对小鼠免疫保护性的研究 被引量:8
15
作者 赵巍 苏川 +7 位作者 吴海玮 胡雪梅 沈蕾 季敏君 王荣芝 马磊 陈淑贞 张兆松 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2002年第3期42-44,73,共4页
目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )脂肪酸结合蛋白 (Sj FABPc)重组抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能 ,并探讨Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白作为复合疫苗的可能性。 方法 用亲和层析法制备Sj FABPc重组抗原和Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋... 目的 研究日本血吸虫 (中国大陆株 )脂肪酸结合蛋白 (Sj FABPc)重组抗原作为血吸虫病疫苗候选分子的潜能 ,并探讨Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白作为复合疫苗的可能性。 方法 用亲和层析法制备Sj FABPc重组抗原和Sj FABPc/Sj2 6GST融合蛋白。将两种蛋白分别免疫BALB/c小鼠后进行攻击感染试验。结果 Sj FABPc及Sj FABPc/Sj2 6GST分别诱导小鼠产生了 2 3 6 0 % (P <0 0 5 )和 2 1 72 % (P >0 0 5 )的成虫减虫率 ,5 9 36 % (P <0 0 0 1)和 4 9 6 8% (P <0 0 0 1)的总减卵率。 展开更多
关键词 日本血吸虫 脂肪酸结合蛋白 重组抗原 融合表达 免疫保护 血吸虫病 动物实验
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大肠埃希菌外膜蛋白OmpC的原核表达与免疫保护作用研究 被引量:11
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作者 俱雄 陈春琳 +3 位作者 刘祥 张涛 吴三桥 张晓娟 《生命科学研究》 CAS CSCD 2015年第2期131-136,共6页
Omp C蛋白为大肠埃希菌主要外膜蛋白,具有提高宿主免疫能力的作用,在疫苗上有很好的应用前景。通过分子克隆获得Omp C蛋白的表达菌株;Western-blotting法证实Omp C抗体可与表达的重组蛋白很好的结合。利用切胶纯化获得Omp C蛋白,免疫小... Omp C蛋白为大肠埃希菌主要外膜蛋白,具有提高宿主免疫能力的作用,在疫苗上有很好的应用前景。通过分子克隆获得Omp C蛋白的表达菌株;Western-blotting法证实Omp C抗体可与表达的重组蛋白很好的结合。利用切胶纯化获得Omp C蛋白,免疫小鼠产生抗体,然后攻毒大肠埃希菌肠道致病菌,结果显示保护率达到63.64%,与对照相比较具有显著差异。利用正交试验,获得Omp C菌株的最佳表达条件为:诱导时菌液OD600值0.5,IPTG终浓度0.3 mmol/L,诱导时间8 h,温度32℃;最佳培养条件为:葡萄糖浓度0%,转速230 r/min,装液量50 m L。为Omp C工业发酵、蛋白功能与疫苗开发研究奠定了基础。 展开更多
关键词 OmpC蛋白 免疫保护 正交试验 诱导条件
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弓形虫pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗免疫保护性的研究 被引量:10
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作者 李瑾 肖婷 +5 位作者 黄炳成 仲维霞 修海迪 王英婷 韩广东 魏庆宽 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期56-61,共6页
目的研究pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗的免疫保护作用。方法 150只BALB/c小鼠随机分为5组,其中3实验组,每鼠分别肌肉注射pcDNA3-p30-ROP2-HSP70、pcDNA3-p30-ROP2、pcDNA3-ROP2各50μg;2对照组每鼠分别注射pcDNA3空质粒50μg、PBS... 目的研究pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗的免疫保护作用。方法 150只BALB/c小鼠随机分为5组,其中3实验组,每鼠分别肌肉注射pcDNA3-p30-ROP2-HSP70、pcDNA3-p30-ROP2、pcDNA3-ROP2各50μg;2对照组每鼠分别注射pcDNA3空质粒50μg、PBS 50μL。共免疫3次,每次间隔2w,末次量加倍。末次免疫后2w,各组分别取6只小鼠的血清和脾组织,检测CD4+、CD8+及各细胞因子。各组其余小鼠腹腔注射RH株弓形虫速殖子500个/每鼠,观察其存活时间等。结果 pcDNA3-p30-ROP2-HSP70复合核酸疫苗能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应。小鼠血清抗体滴度高并能识别重组ROP2蛋白抗原;免疫接种后CD4+和CD8+均增殖明显,组间有显著性差异(F=45.00,P<0.01;F=15.01,P<0.01),实验组CD4+/CD8+比值增加明显,各组间有显著性差异(F=9.17,P<0.01);其脾、淋巴结细胞培养液及血清中白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)均有不同程度的升高,尤其是血清中升高最为显著。弓形虫攻击感染后,实验组与对照组比较,实验组小鼠存活时间明显延长。结论该复合核酸疫苗具有较强的免疫原性,能产生良好的免疫保护作用。 展开更多
关键词 刚地弓形虫 核酸疫苗 免疫保护
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右美托咪定对急性心理应激的免疫保护作用 被引量:10
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作者 杨海涛 熊鹰 周峰 《大连医科大学学报》 CAS 2011年第5期479-482,共4页
[目的]探索右美托咪定在局麻手术中对急性心理应激的免疫保护作用。[方法]择期局麻下行乳腺包块切除术的病人80例,随机平分为两组。实验组在局麻的同时复合静脉泵注右美托咪定;对照组只行局麻。两组病人均于术前及术毕时抽血检测CD4、C... [目的]探索右美托咪定在局麻手术中对急性心理应激的免疫保护作用。[方法]择期局麻下行乳腺包块切除术的病人80例,随机平分为两组。实验组在局麻的同时复合静脉泵注右美托咪定;对照组只行局麻。两组病人均于术前及术毕时抽血检测CD4、CD8,行VAS疼痛评分、SCL-90心理评估,随访术后并发症。[结果]右美托咪定组术后SCL-90评分(110.15±11.87)及VAS评分(0.33±0.32)低于对照组的(163.17±20.17)和(3.65±0.24),术后CD8(28.11±1.34)低于对照组的(31.25±1.70),CD4/CD8(1.53±0.17)高于对照组的(1.43±0.15),差异有显著性意义(P<0.05)。[结论]右美托咪定对局麻手术中的急性心理应激有免疫保护作用。 展开更多
关键词 右美托咪定 心理应激 免疫保护
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猪胸膜肺炎放线杆菌溶血毒素的克隆表达及其对小鼠免疫保护作用 被引量:8
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作者 杜爱庆 刁有祥 +3 位作者 张伟 张瑞平 臧大鹏 刘芳娜 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期342-348,共7页
将猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型分离株的ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA基因和血清5型分离株的ApxⅠA基因分别克隆到原核表达载体pGEX-5X-3,并在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果表明重组菌表达的最佳条件为诱导时间2小时和IPTG终浓度1mmol/... 将猪胸膜肺炎放线杆菌血清3型分离株的ApxⅡA、ApxⅢA、ApxⅣA基因和血清5型分离株的ApxⅠA基因分别克隆到原核表达载体pGEX-5X-3,并在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果表明重组菌表达的最佳条件为诱导时间2小时和IPTG终浓度1mmol/L。通过硫酸铵盐析和SephadexG-200凝胶过滤层析纯化表达产物。Westernblot检测结果显示表达产物具有免疫活性。按照不同组合将表达产物与弗氏佐剂等比例混合,制备3种亚单位疫苗。并在30日龄和45日龄免疫小白鼠,在60日龄分别用血清1、3、5、7和10型胸膜肺炎放线杆菌攻毒。血清1、5和7型胸膜肺炎放线杆菌攻毒后,3种亚单位疫苗分别提供58.4%、66.6%和91.7%的保护率。试验结果表明重组蛋白具有免疫保护作用,且含有四种融合蛋白的亚单位疫苗免疫保护效果最佳。 展开更多
关键词 胸膜肺炎放线杆菌 溶血毒素 克隆与表达 免疫保护
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D型产气荚膜梭菌ε毒素基因表达及其免疫保护作用的初步研究 被引量:10
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作者 王光华 蔺国珍 +4 位作者 郑福英 曹小安 宫晓炜 周继章 邱昌庆 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第3期36-41,共6页
利用PCR技术,从D型产气荚膜梭菌标准株(C60-2)染色体DNA中扩增出ε毒素基因。该基因产物大小为906bp,序列分析结果表明,与GenBank报道的产气荚膜梭菌参考菌株ε毒素基因序列同源性大于99%。将扩增的ε毒素基因定向克隆到原核表达载体pET... 利用PCR技术,从D型产气荚膜梭菌标准株(C60-2)染色体DNA中扩增出ε毒素基因。该基因产物大小为906bp,序列分析结果表明,与GenBank报道的产气荚膜梭菌参考菌株ε毒素基因序列同源性大于99%。将扩增的ε毒素基因定向克隆到原核表达载体pET32a中,得到重组质粒pET32a-ETX,将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)plys中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE分析可见大小为54ku的特异条带;经Western blotting和ELISA检测结果表明,表达的ε毒素能与抗天然ε毒素抗体发生特异性反应,说明ε毒素蛋白具有较好的反应原性。将表达的ε毒素蛋白用0.4%的甲醛溶液制成类毒素疫苗,免疫小鼠后,具有一定的保护力,这表明该重组菌株有望成为产气荚膜梭菌基因工程类毒素疫苗的候选菌株。 展开更多
关键词 D型产气荚膜梭菌 ε毒素 类毒素 免疫保护
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