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日本血吸虫信号蛋白14-3-3在虫卵的定位及其免疫诊断价值初探 被引量:19
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作者 王志成 徐元宏 +4 位作者 罗飞 李敏 郑美娟 罗庆礼 沈继龙 《检验医学》 CAS 北大核心 2007年第2期128-131,共4页
目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织... 目的探讨日本血吸虫信号蛋白14-3-3(Sj14-3-3)在虫卵内的定位和重组Sj14-3-3(rSj14-3-3)的免疫诊断价值。方法从日本血吸虫尾蚴感染42 d的兔肝脏中分离虫卵,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Sj14-3-3基因在虫卵期的转录水平;兔肝组织石蜡切片免疫组化染色,观察内源性Sj14-3-3在虫卵内的分布和表达丰度。利用纯化的rSj14-3-3和可溶性虫卵抗原(SEA),采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测急、慢性血吸虫病患者和正常人血清。结果RT-PCR从日本血吸虫成熟虫卵中检出760 bp左右的基因片断;免疫组化显示Sj14-3-3主要分布在虫卵内毛蚴的体壁和两边的侧腺。检测急性、慢性患者和正常人血清抗rSj14-3-3抗原的抗体阳性率分别为91.0%、78.9%、0.0%;上述标本中抗SEA抗体的阳性率分别为97.4%、88.9%和2.5%。结论用ELISA检测抗SEA抗体和rSj14-3-3抗体诊断血吸虫病具有高度的特异性和敏感性,而Sj14-3-3在成熟虫卵阶段高表达,可能是SEA的主要组分,具有实用价值。 展开更多
关键词 日本血吸虫 虫卵 14-3-3 定位 免疫诊断
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西花蓟马化学感受蛋白的cDNA克隆、时空表达分析及组织定位 被引量:19
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作者 张治科 吴圣勇 雷仲仁 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-14,共14页
【目的】研究西花蓟马Frankliniella occidentalis化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)在其嗅觉及化学感受系统中的作用。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆西花蓟马化学感受蛋白基因,用DNAMAN软件进行序列分析,使用BLAST进行同... 【目的】研究西花蓟马Frankliniella occidentalis化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)在其嗅觉及化学感受系统中的作用。【方法】利用RT-PCR和RACE技术克隆西花蓟马化学感受蛋白基因,用DNAMAN软件进行序列分析,使用BLAST进行同源性比较,采用MEGA6的Neighbor-joining法构建了进化树。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测了西花蓟马不同发育期以及成虫不同组织(触角、头、足、胸、腹)中该基因的表达谱。免疫新西兰大白兔制备了Focc CSP1蛋白抗体,与样品切片中Focc CSP1蛋白以及10 nm胶体金颗粒偶联的羊抗兔二抗反应,经透射电镜观察,对该蛋白在西花蓟马成虫组织中进行免疫定位。【结果】克隆并鉴定了一个西花蓟马化学感受蛋白基因,命名为Focc CSP1(Gen Bank登录号:KM527949)。该基因c DNA序列全长597 bp,完整开放阅读框(ORF)288 bp,编码95个氨基酸,成熟蛋白分子量11.377 k D,等电点4.72,具有化学感受蛋白典型的4个保守半胱氨酸位点特征。Focc CSP1与东亚飞蝗Locusta migratoria Lmig CSP(Gen Bank登录号:CAJ01476.1)的氨基酸序列一致性最高,进化关系最近。Focc CSP1在西花蓟马不同发育阶段和成虫不同组织中均有表达,在羽化1 d的雌虫中相对表达量最高,其次是2龄若虫,蛹和成虫后期表达量最低;在触角和足中相对表达量较高。成功构建了重组表达质粒p ET-30a/Focc CSP1,并诱导表达,经Ni柱纯化,获得目的蛋白;免疫定位表明,该蛋白在西花蓟马触角、足、头等部位血淋巴中均大量存在。【结论】明确了西花蓟马化学感受蛋白基因Focc CSP1的核苷酸、氨基酸序列特征。Focc CSP1广泛分布在西花蓟马多个组织及各个发育期,据此推测该基因可能在西花蓟马嗅觉识别、感受机械刺激以及调节生长发育等方面扮演重要角色。 展开更多
关键词 西花蓟马 化学感受蛋白 分子克隆 原核表达 表达谱 免疫定位
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Functional characterization of a Niemann-Pick type C2 protein in the parasitoid wasp Micropfitis mediator 被引量:10
3
作者 Yao Zheng Shan-Ning Wang +6 位作者 Yong Peng Zi-Yun Lu Shuang Shan Ye-Qing Yang Rui-Jun Li Yong-Jun Zhang Yu-Yuan Guo 《Insect Science》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期765-777,共13页
Niemann-Pick type C2 (NPC2) is a type of small soluble protein involved in lipid metabolism and triglyceride accumulation in vertebrates and arthropods. Recent stud- ies have determined that NPC2 also participates i... Niemann-Pick type C2 (NPC2) is a type of small soluble protein involved in lipid metabolism and triglyceride accumulation in vertebrates and arthropods. Recent stud- ies have determined that NPC2 also participates in chemical communication of arthropods. In this work, two novel NPC2 proteins (MmedNPC2a and MmedNPC2b) in Microplitis mediator were identified. Real-time quantitative PCR (qPCR) analysis revealed that Mmed- NPC2a was expressed higher in the antennae than in other tissues of adult wasps compared with MmedNPC2b. Subsequent immunolocalization results demonstrated that NPC2a was located in the lymph cavities of sensilla placodea. To further explore the binding charac- terization of recombinant MmedNPC2a to 54 candidate odor molecules, a fluorescence binding assay was performed. It was found MmedNPC2a could not bind with selected fatty acids, such as linoleic acid, palmitic acid, stearic acid and octadecenoic acid. How- ever, seven cotton volatiles, 4-ethylbenzaldehyde, 3,4-dimethylbenzaldehyde, fl-ionone, linalool, m-xylene, benzaldehyde and trans-2-hexen-l-al showed certain binding abilities with MmedNPC2a. Moreover, the predicted 3D model of MmedNPC2a was composed of seven r-sheets and three pairs of disulfide bridges. In this model, the key binding residues for oleic acid in CjapNPC2 of Camponotus japonicus, Lue68, Lys69, Lys70, Phe97, Thr103 and Phe127, are replaced with Phe85, Ser86, His87, Leu113, Tyr119 and Ile143 in MmedNPC2a, respectively. We proposed that MmedNPC2a in M. mediator may play roles in perception of plant volatiles. 展开更多
关键词 binding ability chemical communication immunolocalization Microplitismediator NPC2 protein 3D model
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达氏鲟生长激素基因cDNA克隆、表达及免疫荧光定位研究 被引量:10
4
作者 单喜双 岳华梅 +3 位作者 陈细华 叶欢 杨晓鸽 李创举 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期307-314,共8页
为研究达氏鲟(Acipenser dabryanus)生长激素(Growth Hormone,GH)基因的功能,合成了达氏鲟垂体SMART c DNA,克隆得到GH全长c DNA序列。达氏鲟GH全长c DNA序列为1008 bp,由52 bp的5′端非编码区(Untranslated region,UTR)、编码214个氨... 为研究达氏鲟(Acipenser dabryanus)生长激素(Growth Hormone,GH)基因的功能,合成了达氏鲟垂体SMART c DNA,克隆得到GH全长c DNA序列。达氏鲟GH全长c DNA序列为1008 bp,由52 bp的5′端非编码区(Untranslated region,UTR)、编码214个氨基酸的645 bp开放阅读框(Open reading frame,ORF)和311 bp的3′UTR构成。运用GH氨基酸序列构建进化树分析发现,达氏鲟与两栖类、爬行类和哺乳类的一致性要高于真骨鱼类。实时荧光定量PCR结果表明,达氏鲟GH m RNA主要在垂体和下丘脑中表达,且垂体中GH的表达量约为下丘脑的110倍;Western-blot研究结果与q RT-PCR一致,仅在垂体和下丘脑中检测到生长激素蛋白,且垂体中GH的表达量远高于下丘脑。免疫荧光定位结果显示,GH主要定位于垂体中部,下丘脑中也有少量荧光信号;苏木精-伊红组织切片染色研究表明,GH主要是由嗜酸性的生长激素分泌细胞分泌。研究为深入研究脊椎动物生长激素基因的进化和人工养殖达氏鲟的生长调控提供了基础。 展开更多
关键词 达氏鲟 生长激素 q RT-PCR WESTERN-BLOT 荧光免疫组化
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烟草柱头和花柱中阿拉伯半乳糖蛋白的定位 被引量:9
5
作者 秦源 陈丹 赵洁 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期307-314,共8页
通过Western印迹法、免疫组织化学和超微细胞化学等技术,研究了烟草柱头和花柱中阿拉伯半乳糖蛋白(arabinogalactan-proteins,AGPs)的分布。结果表明烟草柱头和花柱组织中含有大量的AGPs,主要分布于柱头表皮细胞的细胞质和分泌层细胞的... 通过Western印迹法、免疫组织化学和超微细胞化学等技术,研究了烟草柱头和花柱中阿拉伯半乳糖蛋白(arabinogalactan-proteins,AGPs)的分布。结果表明烟草柱头和花柱组织中含有大量的AGPs,主要分布于柱头表皮细胞的细胞质和分泌层细胞的胞外基质中,且授粉前后AGPs的分布情况差异不明显;而花柱中的AGPs主要分布于表皮细胞的外层细胞壁、维管组织周围细胞的细胞质及引导组织的胞外基质中;花粉管通过后,引导组织胞外基质中AGPs减少,而花粉管细胞质和花粉管壁中检测到大量AGPs。 展开更多
关键词 烟草 柱头 花柱 阿拉伯半乳糖蛋白 免疫定位
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AMP-activated kinase in human spermatozoa: identification, intracellular localization, and key function in the reRulation of sperm motility 被引量:6
6
作者 Violeta Calle-Guisado Ana Hurtado de Llera +5 位作者 David Martin-Hidalgo Jose Mijares Maria C Gil Ignacio S Alvarez Maria J Bragado Luis J Garcia-Marin 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2017年第6期707-714,共8页
AMP-activated kinase (AMPK), a protein that regulates energy balance and metabolism, has recently been identified in boar spermatozoa where regulates key functional sperm processes essential for fertilization. This ... AMP-activated kinase (AMPK), a protein that regulates energy balance and metabolism, has recently been identified in boar spermatozoa where regulates key functional sperm processes essential for fertilization. This work's aims are AMPK identification, intracellular localization, and their role in human spermatozoa function. Semen was obtained from healthy human donors. Sperm AMPK and phospho-Thr172-AMPK were analyzed by Western blotting and indirect immunofluorescence. High- and low-quality sperm populations were separated by a 40%-80% density gradient. Human spermatozoa motility was evaluated by an Integrated Semen Analysis System (ISAS) in the presence or absence of the AMPK inhibitor compound C (CC). AMPK is localized along the human spermatozoa, at the entire acrosome, midpiece and tail with variable intensity, whereas its active form, phospho-Thr172-AMPK, shows a prominent staining at the acrosome and sperm tail with a weaker staining in the midpiece and the postacrosomal region. Interestingly, spermatozoa bearing an excess residual cytoplasm show strong AMPK staining in this subcellular compartment. Both AMPK and phospho-Thr172-AMPK human spermatozoa contents exhibit important individual variations. Moreover, active AMPK is predominant in the high motility sperm population, where shows a stronger intensity compared with the low motility sperm population. Inhibition of AMPK activity in human spermatozoa by CC treatment leads to a significant reduction in any sperm motility parameter analyzed: percent of motile sperm, sperm velocities, progressivity, and other motility coefficients. This work identifies and points out AMPK as a new molecular mechanism involved in human spermatozoa motility. Further AMPK implications in the clinical efficiency of assisted reproduction and in other reproductive areas need to be studied. 展开更多
关键词 AMP-activated kinase human spermatozoa immunolocalization sperm motility sperm quality
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蓖麻毒素被修饰前后在小鼠主要脏器的定位比较研究 被引量:8
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作者 董巨莹 王文学 +2 位作者 曹云新 李玉松 邹伯英 《第四军医大学学报》 1995年第1期17-20,共4页
为探讨引入二硫吡啶硫酮(PDP)基团后,蓖麻毒素(RT)毒性降低和免疫增强的机理,作者将用异型双功能交联剂3-(2-吡啶二硫基)丙酸琥珀酰亚胺酯(SPDP)修饰的蓖麻毒素(RT-PDP)与其未修饰的蓖麻毒素注入小鼠腹... 为探讨引入二硫吡啶硫酮(PDP)基团后,蓖麻毒素(RT)毒性降低和免疫增强的机理,作者将用异型双功能交联剂3-(2-吡啶二硫基)丙酸琥珀酰亚胺酯(SPDP)修饰的蓖麻毒素(RT-PDP)与其未修饰的蓖麻毒素注入小鼠腹腔内,然后取小鼠的心、肝、脾、肺、肾等主要脏器进行了免疫组化定位和计算机辅助图像分析。结果发现,二者都主要集中在网状内皮组织系统如脾、肝中,但RT-PDP含量明显少于RT(P<0.05).从切片上可见RT对组织损伤严重,出现细胞空泡样变性,组织出血,萎缩,坏死等现象;而RT-PDP在组织中未引起上述现象,且对Kupffer细胞有活化趋势。提示RT-PDP对主要脏器组织亲和力和毒性明显降低,且有可能产生一种活化吞噬细胞的新功能,从而为蓖麻毒素的开发应用提供一种新的思路。 展开更多
关键词 蓖麻毒素 化学修饰 免疫组织化学 脏器
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β-catenin在淇河鲫不同组织中的表达研究
8
作者 吴梦帆 吴利敏 《河南水产》 2023年第1期22-25,共4页
β-连环蛋白(CTNNB1,β-catenin)是一种存在于细胞膜、细胞质和细胞核的多种功能性胞内蛋白,在动物胚胎发育和器官发生中起着重要作用。为了研究β-catenin在淇河鲫(Carassius auratus in Qihe river)体内各组织中的表达模式,本实验用... β-连环蛋白(CTNNB1,β-catenin)是一种存在于细胞膜、细胞质和细胞核的多种功能性胞内蛋白,在动物胚胎发育和器官发生中起着重要作用。为了研究β-catenin在淇河鲫(Carassius auratus in Qihe river)体内各组织中的表达模式,本实验用免疫组化法检测β-catenin在孵化后10天淇河鲫的眼、脑、鳃、软骨、肠、肝、脾、肾和孵化后120天的卵巢组织的表达情况。结果显示,β-catenin在肠的杯状细胞,肾小管上皮细胞,鳃小片的泌氯细胞,肝组织的肝细胞,脾脏的巨噬细胞,脑组织的中脑和间脑的支持细胞,卵巢组织的Ⅰ期和Ⅱ期卵母细胞,软骨的软骨基质和软骨膜以及眼组织的全视网膜、色素层和晶状体中表达。以上结果暗示,淇河鲫β-catenin可能参与了器官的发育过程。这些数据将为了解β-catenin调控硬骨鱼器官发生的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 Β-CATENIN 淇河鲫 免疫定位
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猪水通道蛋白AQP1多克隆抗体制备及其在猪体内的免疫定位 被引量:3
9
作者 李明堂 付玉 +1 位作者 王清爽 李洪广 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期218-221,226,共5页
采用分子克隆技术制备了猪AQP1多克隆抗体,并应用所制备的抗体分析了AQP1在猪体内的表达定位。结果表明:获得了特异性较强、效价较高的猪AQP1多克隆抗体;应用该抗体进行的免疫印迹和免疫组织化学试验显示,AQP1在猪小肠中央乳糜管内皮细... 采用分子克隆技术制备了猪AQP1多克隆抗体,并应用所制备的抗体分析了AQP1在猪体内的表达定位。结果表明:获得了特异性较强、效价较高的猪AQP1多克隆抗体;应用该抗体进行的免疫印迹和免疫组织化学试验显示,AQP1在猪小肠中央乳糜管内皮细胞、小胆管上皮细胞、肾脏的近曲小管上皮细胞以及大脑脉络丛上皮细胞表达。 展开更多
关键词 水通道蛋白 多克隆抗体 免疫定位
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Expression of the Thylakoid Membrane Localized PPF1 in Transgenic Arabidopsis Affects Chloroplast Development 被引量:3
10
作者 徐云剑 王大勇 朱玉贤 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2002年第11期1314-1320,共7页
PPF1 is a vegetative growth related gene that encodes a putative membrane protein having high homology with Arabidopsis chloroplast thylakoid protein ALB3. Immunoelectron microscopic assay showed that PPF1 was mainly ... PPF1 is a vegetative growth related gene that encodes a putative membrane protein having high homology with Arabidopsis chloroplast thylakoid protein ALB3. Immunoelectron microscopic assay showed that PPF1 was mainly localized in the thylakold membrane and was highly expressed in well-developed chloroplasts of short day (SD) grown G2 pea while having a very low abundance in chloroplasts of long day (LD) grown plants two weeks after flowering. Comparison of the leaf senescence processes in transgenic Arabidopsis and wild type plants revealed that overexpression of PPF1 delayed leaf senescence, while the depression of its Arabidopsts homologue (ALB3) with PPF1 antisense mRNA accelerated leaf senescence obviously. Ultrastructural analysis of transgenic Arabidopsis plants showed that when PPF1 was overexpressed in Arabidopsis, the chloroplasts were bigger and had much more grana and stroma thylakoid membranes than those of wild type plants. On the contrary, when PPF1 was expressed in antisense orientation to reduce the level of PPF1 homologue in Arabidopsis, the transgenic plants had smaller chloroplasts With less grana. and poorly developed thylakoid membrane systems. These results suggested that the developmental status of chloroplasts was positively correlated with the level of PPF1 or its Arabidopsts homologue, ALB3. Our results suggested that PPF1 gene might regulate plant development by controlling chloroplast development. 展开更多
关键词 PPF1 immunolocalization chloroplast development SENESCENCE
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华支睾吸虫抗原CsSQ1和CsSQ2的免疫学虫体定位 被引量:3
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作者 孙青松 于妮娜 +3 位作者 尚信池 钱瑞程 李国江 刘明远 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1299-1302,共4页
为了对华支睾吸虫重组抗原的特性进行鉴定及虫体定位,进而推测其生物学功能,通过对囊蚴与成虫的cDNA表达文库的免疫学筛选,获得若干个强反应原性抗原蛋白,在此基础上,发现2个含有20~30个氨基酸的高度重复序列CsSQ1和CsSQ2,利用基因序列... 为了对华支睾吸虫重组抗原的特性进行鉴定及虫体定位,进而推测其生物学功能,通过对囊蚴与成虫的cDNA表达文库的免疫学筛选,获得若干个强反应原性抗原蛋白,在此基础上,发现2个含有20~30个氨基酸的高度重复序列CsSQ1和CsSQ2,利用基因序列合成多肽,再将多肽与载体蛋白进行偶联,制备重组抗原rCsSQ1和rCsSQ2,免疫动物制备多克隆抗体,利用硫酸铵沉淀法及亲和层析法纯化抗体,最后利用免疫荧光技术对重组抗原进行免疫学虫体定位。结果显示,重组抗原rCsSQ1和rCsSQ2分别定位于华支睾吸虫的口吸盘和腹吸盘。利用免疫荧光技术成功地确定了华支睾吸虫这两种抗原在虫体中的定位,推测它们可能与华支睾吸虫的免疫黏附作用有关,为华支睾吸虫抗原的免疫学特性及其在诊断中的应用研究提供了依据。 展开更多
关键词 华支睾吸虫 重组抗原 特性 免疫学定位
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中华绒螯蟹卵巢发育期间两种雌激素受体在卵巢和肝胰腺的分布及变化 被引量:3
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作者 柳梅梅 吴旭干 +2 位作者 刘智俊 陈浩 成永旭 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期822-830,共9页
甲壳动物卵巢发育受多种激素联合调控,主要包括类固醇激素、萜类和神经多肽类[1],其中性类固醇激素是在其体内广泛存在的性激素,对于生殖过程起着重要的调控作用[2]。性类固醇激素主要包括雌激素、孕激素和睾酮类,都是由胆固醇转化而来... 甲壳动物卵巢发育受多种激素联合调控,主要包括类固醇激素、萜类和神经多肽类[1],其中性类固醇激素是在其体内广泛存在的性激素,对于生殖过程起着重要的调控作用[2]。性类固醇激素主要包括雌激素、孕激素和睾酮类,都是由胆固醇转化而来,其中雌激素和孕激素对甲壳动物卵巢发育至关重要[3]。 展开更多
关键词 中华绒螯蟹 雌激素受体 免疫定位 卵巢发育 肝胰腺
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Wnt1和Frizzled2在性成熟前小鼠卵巢组织定位及配受体关系鉴定 被引量:3
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作者 庞训胜 林春联 +1 位作者 许雪萍 王正朝 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期289-294,共6页
为揭示Wnt1和Frizzled(Fzd)2参与卵巢和卵泡发育的作用机制,选择12只3周龄小鼠,应用免疫组化研究Wnt1和Fzd2在卵巢组织内的定位,免疫共沉淀鉴定其蛋白间的配受体关系.结果表明:在健康初级、次级卵泡卵母细胞以及腔前和腔后卵泡近基膜颗... 为揭示Wnt1和Frizzled(Fzd)2参与卵巢和卵泡发育的作用机制,选择12只3周龄小鼠,应用免疫组化研究Wnt1和Fzd2在卵巢组织内的定位,免疫共沉淀鉴定其蛋白间的配受体关系.结果表明:在健康初级、次级卵泡卵母细胞以及腔前和腔后卵泡近基膜颗粒细胞的胞质和胞膜中,Wnt1均表现较强的免疫染色,Fzd2在胞质内免疫染色;在卵泡腔周围颗粒细胞和透明带周围卵丘细胞中Wnt1免疫染色弱;从卵巢中心扩展或环绕生长卵泡的条形基质细胞中Wnt1和Fzd2免疫染色阳性,间质腺存在免疫染色细胞;在闭锁卵泡卵母细胞中Wnt1和Fzd2呈非均匀强染色;在卵母细胞裂解液的Wnt1或Fzd2免疫沉淀物的电泳图谱中,分别同时存在Fzd2和Wnt1蛋白条带.表明Wnt1定位于卵母细胞和近基膜颗粒细胞的胞质和胞膜中,Fzd2定位于胞质内;在卵巢基质细胞、卵泡膜细胞和间质腺细胞中存在Wnt1和Fzd2分布;Wnt1和Fzd2之间可能为配体-受体关系. 展开更多
关键词 小鼠 卵巢 WNT1 Frizzled2 免疫定位
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细粒棘球绦虫铜锌超氧化物歧化酶基因的表达与特征分析 被引量:3
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作者 宋星桔 胡丹丹 +8 位作者 钟秀琴 阳爱国 郭莉 毛光琼 王凝 闫敏 汪涛 古小彬 杨光友 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期346-353,共8页
旨在探讨Eg-SOD基因的特征及其在细粒棘球绦虫上的抗氧化作用。通过原核表达得到重组Eg-SOD,对其进行酶活性测定、免疫印迹、ELISA以及免疫荧光定位分析。经原核表达出的重组Eg-SOD蛋白为可溶性蛋白,以羟胺法测定其酶学活性,可达(464.55... 旨在探讨Eg-SOD基因的特征及其在细粒棘球绦虫上的抗氧化作用。通过原核表达得到重组Eg-SOD,对其进行酶活性测定、免疫印迹、ELISA以及免疫荧光定位分析。经原核表达出的重组Eg-SOD蛋白为可溶性蛋白,以羟胺法测定其酶学活性,可达(464.55±19.99)U·mg-1。免疫印迹结果显示,该蛋白质能够被实验室人工感染细粒棘球蚴的小鼠阳性血清所识别,具有较强的反应原性;ELISA分析显示,重组Eg-SOD对人工感染细粒棘球蚴的小鼠血清和自然感染包虫病的绵羊血清检出率均为100%,而对细颈囊尾蚴的交叉反应为37.5%,提示该蛋白质可以作为潜在的诊断候选分子。免疫荧光定位显示该蛋白质广泛分布于成虫和原头蚴的组织间隙,以及少量分布于表皮。本研究对Eg-SOD的特点进行了初步的探讨,并揭示该蛋白质与虫体的抗氧化损伤有着密切的联系。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 铜锌超氧化物歧化酶 荧光定位
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Immunolocalization of gap junction proteins-like matter at mesophyll protoplasts from Vicia faba
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作者 潘照明 娄成后 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1996年第15期1284-1290,共7页
Intercellular connections and communications play very important roles during organisms growth and development. Although plasmodesmata and gap junction as intercellular channels are different in anatomy and structure,... Intercellular connections and communications play very important roles during organisms growth and development. Although plasmodesmata and gap junction as intercellular channels are different in anatomy and structure, they exhibit striking similarities in their functions. It is suggested that they have some similar biochemical regulation mechanism. Connexins are the transfer of cytoplasmic material by conformational changes. 展开更多
关键词 immunolocalization PROTOPLAST gap JUNCTION plasmodesmata.
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Immunolocalization of Arabinogalactan Proteins and Pectins in Floral Buds of Cucumber (Cucumis sativus L.) During Sex Determination
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作者 Yi-BenPENG ChengZOU +3 位作者 Hua-QinGONG Shu-NongBAI Zhi-HongXU Yi-QinLI 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2005年第2期194-200,共7页
Abstract: Arabinogalactan proteins (AGPs) and pectins were detected in the floral buds of cucumber (Cucumis sativus L.) during its sex determination using the following monoclonal antibodies: MAC 207 (recognizes AGP e... Abstract: Arabinogalactan proteins (AGPs) and pectins were detected in the floral buds of cucumber (Cucumis sativus L.) during its sex determination using the following monoclonal antibodies: MAC 207 (recognizes AGP epitopes); JIM 8 (recognizes a subset of AGP epitopes); and JIM 5 and JIM 7 (epitopes of pectins esterified to various degrees). In the stem apex meristem (SAM) of the cucumber, epitopes of MAC 207, JIM 7, and JIM 5 were localized in the cells from second to third peripheral layers when the sex organ primodium began to differentiate; epitopes of MAC 207 and JIM 5 were also detected in the ragged edge cells. A very dense labeling signal with MAC 207 was observed in the carpel and pistil primodium. The AGP epitopes recognized by JIM 8 were localized in the anther of the male flower and the anther-like portion of the stagnant stamen of the female flower. This suggests that the AGPs and pectins in the SAM of the cucumber are closely associated with the differentiation of the SAM, from meristematic cells to floral primodium. The subset of AGPs recognized by JIM 8 may play an important role in stamen formation. 展开更多
关键词 arabinogalactan proteins cucumber (Cucumis sativus L.) floral buds immunolocalization pectins
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Detection of Hepatitis E Virus and Serum Antibodies against Hepatitis E Virus in Livestock in Heilongjiang Province
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作者 LI Ming-tang WANG Qing-shuang YU Yuan-hua 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2011年第6期23-25,共3页
[Objective] To observe the distribution of hepatitis E virus (HEV) in livestock in Hailongjiang Province. [Method] The serum samples collected from two regions of Heilongjiang Province included 719 samples from pigs... [Objective] To observe the distribution of hepatitis E virus (HEV) in livestock in Hailongjiang Province. [Method] The serum samples collected from two regions of Heilongjiang Province included 719 samples from pigs older than 3 months old, 840 samples from pigs younger than 3 months old, 505 bovine serum samples and 515 ovine serum samples. The samples were detected by enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA). [ Result] The pigs had the highest level of antibodies against HEV, and the positive rate of HEV was 89.71%, indicating pigs were more likely to be infected by HEV than other livestock populations. HEV was detected in 59 porcine serum samples, three bovine serum samples and one ovine serum sample collected from Heilongjiang Province. The positive rate of HEV in pigs was higher in Heilongjiang Province than in Jinlin Province and Liaoning Province. [ Conclusion] HEV infection was wide in pigs in Heilongjiang Province, and the infection rate was higher in the old pigs than in the young pigs. 展开更多
关键词 Heilongjiang Province Hepatitis E virus Monoclonal antibodies immunolocalization
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MMP-26在子宫内膜瘤和子宫内膜癌中的表达的研究 被引量:2
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作者 李春江 《黑龙江医药科学》 2004年第5期30-32,共3页
基质金属蛋白酶家族在肿瘤细胞的浸润、发生和生长过程中起着非常重要的作用。本研究通过用免疫组化的方法对 MMP- 2 6在子宫内膜癌和子宫内膜肿瘤的整个月经周期中的分布与定位以及对 MMP- 2 6与子宫内膜瘤各亚型、分期和级别之间的关... 基质金属蛋白酶家族在肿瘤细胞的浸润、发生和生长过程中起着非常重要的作用。本研究通过用免疫组化的方法对 MMP- 2 6在子宫内膜癌和子宫内膜肿瘤的整个月经周期中的分布与定位以及对 MMP- 2 6与子宫内膜瘤各亚型、分期和级别之间的关系进行了研究。研究发现 ,MMP- 2 6在子宫内膜癌和子宫内膜瘤月经周期的不同阶段均有表达。而且 ,在绝经后 ,MMP- 2 6在子宫内膜癌中的表达强于子宫内膜瘤中的表达 ,而不是在月经周期的分泌期。 MMP- 2 6在子宫内膜上皮细胞中的表达最强 ,其次是血管上皮细胞 ,子宫肌层的平滑肌细胞和子宫内膜基质细胞。并且随着肿瘤的浸润深度和根据 FIGO划分的肿瘤级别的升高 MMP- 2 6的表达增强。所以 ,MMP- 2 6在子宫内膜和子宫内膜癌中的分布与表达说明 MMP- 2 展开更多
关键词 子宫内膜癌 子宫内膜瘤 表达 MMP-26 月经周期 子宫内膜肿瘤 上皮细胞 平滑肌细胞 发现 家族
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抱茎独行菜MUM4基因的克隆及分析(英文) 被引量:2
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作者 袁军文 黄代红 +4 位作者 徐栋生 赵娟 李玲 兰海燕 张富春 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1940-1952,共13页
抱茎独行菜(Lepidium perfoliatum L.)为十字花科具典型粘液繁殖体植物,为探究该植物中种皮粘液质基因(MUCILAGE-MODIFIED4,MUM4,该基因在拟南芥中编码NDP-L-鼠李糖合成酶)的功能,通过生物信息学分析设计引物克隆得到抱茎独行菜MUM4基因... 抱茎独行菜(Lepidium perfoliatum L.)为十字花科具典型粘液繁殖体植物,为探究该植物中种皮粘液质基因(MUCILAGE-MODIFIED4,MUM4,该基因在拟南芥中编码NDP-L-鼠李糖合成酶)的功能,通过生物信息学分析设计引物克隆得到抱茎独行菜MUM4基因,命名为LpMUM4。同源比对分析结果表明,LpMUM4与拟南芥AtMUM4基因具有很高的一致性。qRT-PCR结果表明,该基因在抱茎独行菜各组织中均有表达,在角果和根中的表达量最高,且其表达量随角果的发育表现出渐强的趋势。免疫组织化学定位分析表明,LpMUM4基因于角果发育的早期阶段在内珠被和外珠被都有表达,而在外珠被的表皮和亚表皮中表达量更高,至角果发育的最后阶段,其表达集中于表皮和亚表皮层,这可能与抱茎独行菜的外珠被发育成种皮及粘液质的生成有关。将LpMUM4基因转化拟南芥,该基因的过表达对位于粘液质合成途径中的上游基因AtTTG1具有显著的抑制作用。表型比对观察显示,转基因拟南芥与其野生型植株形态无显著差异,这可能是因为抱茎独行菜种皮的发育和粘液质的形成是一个多基因调控的复杂过程,某一基因的过表达或许不会引起明显的表型变化。 展开更多
关键词 抱茎独行菜 粘液质合成 免疫定位 MUM4基因 QRT-PCR 转基因植物
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烟夜蛾G蛋白αq亚基(HassGαq)的抗血清制备及在触角中的免疫定位 被引量:1
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作者 乔奇 李海超 +2 位作者 原国辉 郭线茹 罗梅浩 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1304-1308,共5页
为了明确烟夜蛾Helicoverpa assulta G蛋白αq亚基(HassGαq)在雄性触角中的定位,进而探索该亚基在烟夜蛾嗅觉信号传导过程中的作用,本实验首先以原核表达的HassGαq蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备了抗血清。SDS-PAGE分离雄性烟夜蛾... 为了明确烟夜蛾Helicoverpa assulta G蛋白αq亚基(HassGαq)在雄性触角中的定位,进而探索该亚基在烟夜蛾嗅觉信号传导过程中的作用,本实验首先以原核表达的HassGαq蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠,制备了抗血清。SDS-PAGE分离雄性烟夜蛾触角匀浆上清液后,Western blot检测结果表明,所制备的抗血清可识别HassGαq蛋白,同时也与非目的蛋白发生反应,说明在雄性烟夜蛾触角中HassGαq基因可能有多个转录本,或者可能有多种G蛋白α亚基表达。此外,商品化的anti-Gq/11α抗血清可特异地识别HassGαq蛋白。因此,利用anti-Gq/11α抗血清和免疫组化方法对HassGαq蛋白在雄性烟夜蛾触角中进行定位,结果显示HassGαq在雄性烟夜蛾触角毛形感器和锥形感器的基部以及感器腔中皆有表达。据此推测HassGαq可能参与烟夜蛾的嗅觉信号传导。 展开更多
关键词 烟夜蛾 G蛋白αq亚基 抗血清 免疫定位 嗅觉信号传导
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