新生儿糖尿病致病基因分析及其对疗效的影响 被引量：5

1

作者 陈秀丽 沈水仙 +9 位作者 罗飞宏 章淼滢 李堂 陈临琪 胡敏 杜虹 曹凌峰 程若倩 赵诸慧 支涤静 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期488-491,共4页

14例新生儿糖尿病（neonatal diabetes mellitus）入选，比较胰岛素（n=5）和格列本脲（n=9）的疗效。扩增6例患儿KCNJll、ABCC8、INS基因并测序。共发现2例存在ABCC8基因突变，1例KCNJIl基因突变，1例为INS基因突变，1例为6q24甲基化... 14例新生儿糖尿病（neonatal diabetes mellitus）入选，比较胰岛素（n=5）和格列本脲（n=9）的疗效。扩增6例患儿KCNJll、ABCC8、INS基因并测序。共发现2例存在ABCC8基因突变，1例KCNJIl基因突变，1例为INS基因突变，1例为6q24甲基化减低，1例突变基因不清。9例新生儿糖尿病格列本脲治疗者8例血糖控制良好（88．9％）。5例采用胰岛素治疗后均失访或死亡。提示新生儿糖尿病胰岛素治疗依从性差，格列本脲可有效降低血糖。 展开更多

关键词 新生儿糖尿病 格列本脲 KCNJ11基因 ABCC8基因 ins基因 突变

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胰岛素基因新变异所致永久性新生儿糖尿病患儿1例的临床及遗传学分析

2

作者 李玛丽 李佳 +2 位作者 邱世超 宋娜 汪治华 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期66-70,共5页

目的分析1例永久性新生儿糖尿病(PNDM)患儿的临床及遗传学特征。方法选取2019年8月于西安市儿童医院就诊的1例PNDM患儿为研究对象。收集患儿的临床资料及实验室检查结果,应用靶向捕获高通量测序进行变异位点分析,针对筛选出的候选靶基因... 目的分析1例永久性新生儿糖尿病(PNDM)患儿的临床及遗传学特征。方法选取2019年8月于西安市儿童医院就诊的1例PNDM患儿为研究对象。收集患儿的临床资料及实验室检查结果,应用靶向捕获高通量测序进行变异位点分析,针对筛选出的候选靶基因用Sanger测序进行家系验证。结果患儿系4个月26天女婴,以酮症酸中毒起病,空腹血糖24.4 mmol/L,尿糖阳性,血清C肽降低,糖化血红蛋白9.58%,糖尿病自身抗体阴性。基因检测发现患儿胰岛素INS基因存在c.314T>G(p.L105R)杂合变异。Sanger测序证实患儿父母均未携带上述变异,为新发变异。该变异尚未见文献及数据库报道,根据美国医学遗传学与基因组学学会指南,评级为疑似致病变异。结论INS基因c.314T>G(p.L105R)变异可能是该患儿的遗传学病因。对于临床疑似PNDM的患儿建议早期行基因检测。 展开更多

关键词 永久性新生儿糖尿病 ins基因 酮症酸中毒 基因变异

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一例青少年的成人起病型糖尿病10型患儿的1NS基因变异分析

3

作者 康惠敏 方昕 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 2020年第2期159-161,共3页

目的对1例青少年的成人起病型糖尿病10型(MODY10)患儿的INS基因进行分析,明确其致病原因。方法应用高通量测序技术对患儿的INS基因进行突变筛查,使用Sanger测序技术验证变异位点并筛査患儿父母的相应位点。结果基因变异分析提示患儿及... 目的对1例青少年的成人起病型糖尿病10型(MODY10)患儿的INS基因进行分析,明确其致病原因。方法应用高通量测序技术对患儿的INS基因进行突变筛查,使用Sanger测序技术验证变异位点并筛査患儿父母的相应位点。结果基因变异分析提示患儿及其母亲INS基因第1外显子存在c.130G>A(p.Gly44Arg)杂合变异。蛋白质结构预测及ACMG指南评估,均提示该变异存在致病性。结论INS基因第1外显子c.130G>A(p.Gly44Arg)变异可能为患儿的致病原因。 展开更多

关键词 青少年的成人起病型糖尿病 ins基因 基因变异

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INS基因遗传多态性与2型糖尿病发病风险及血清IAA-Ab水平相关性研究

4

作者 李泉 乔正荣 +7 位作者 刘钉宾 曾建涛 张吉 柏艳 向勤 胡渠 吴逊 董姗姗 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第23期3210-3212,3215,共4页

目的探讨INS基因启动子区单核苷酸多态性与2型糖尿病发病风险和血清IAA-Ab水平的相关性。方法利用Sequenom MassArray SNP分型检测技术,对该院497例2型糖尿病患者（病例组）和500例健康体检人员（对照组）INS的3个启动子区单核苷酸多态... 目的探讨INS基因启动子区单核苷酸多态性与2型糖尿病发病风险和血清IAA-Ab水平的相关性。方法利用Sequenom MassArray SNP分型检测技术,对该院497例2型糖尿病患者（病例组）和500例健康体检人员（对照组）INS的3个启动子区单核苷酸多态性位点（rs689、rs71464177和rs3842738）进行基因分型并分析两组间分布情况;检测糖尿病患者IAA-Ab水平。用χ2检验统计分析病例组和对照组,病例中IAA-Ab阳性组和阴性组的SNP位点基因型频率分布,采用非条件Logistic回归分析,校正性别、年龄影响,计算比数比（OR）和95%置信区间（CI）,评价多态性位点与2型糖尿病易感性和血清IAA-Ab水平的相关性。结果 rs689AA、TT、AT基因型在病例组的分布频率分别为58.75%、28.77%和12.47%,在对照组的分布频率分别为50.40%、35.60%和14.00%,两组间差异有统计学意义（χ2=3.923,P〈0.05）;且相对于AA基因型,TT基因型者患糖尿病的危险性减少,风险度OR值为0.35（95%CI：0.18-1.06）。AA、TT、AT各基因型在IAA-Ab阳性患者的分布频率与IAA-Ab阴性患者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论中国人群INS基因rs689位点多态性与中国人群2型糖尿病发病风险相关,并且可能与IAA-Ab水平相关。 展开更多

关键词 糖尿病 2型 多态性 单核苷酸 IAA-Ab ins基因

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同型半胱氨酸及代谢酶基因多态性与脑卒中的相关性研究 被引量：15

5

作者 傅毅 刘建荣 +2 位作者 倪培华 应雅韵 陈生弟 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期413-417,共5页

目的进一步确定亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚β合成酶(CBS)基因844ins68、T27796C和甲硫氨酸合成酶(MS)基因A2756G这4种基因突变在脑卒中发病中的意义。方法选择年龄及性别基本匹配的脑梗死组78例、脑出血组26例、神... 目的进一步确定亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚β合成酶(CBS)基因844ins68、T27796C和甲硫氨酸合成酶(MS)基因A2756G这4种基因突变在脑卒中发病中的意义。方法选择年龄及性别基本匹配的脑梗死组78例、脑出血组26例、神经系统其他疾病组29例和健康老年组50例,采用酶联免疫分析法测定受检者血浆同型半胱氨酸(Hcy)浓度,并运用多聚酶链反应限制性内切酶片段长度多态性技术,检测基因表型。结果脑梗死组和脑出血组血Hcy浓度明显高于神经系统其他疾病组和健康老年组。CBS844ins68及MSA2756G突变频率较国外报道明显低。此外,C677T纯合突变型的Hcy水平均高于野生型和杂合突变型,CBST27796C基因杂合子突变则可能使Hcy水平降低;而4种基因各组之间基因型频率差异无统计学意义。结论Hcy水平与脑卒中的发生有一定联系。CBS844ins68和MSA2756G突变可能存在种族或地域差异,MTHFRC677T纯合子突变可能是导致血浆总Hcy(tHcy)水平升高的遗传决定簇,而CBST27796C基因杂合子突变可能引起tHcy水平的降低;4种基因突变符合遗传平衡定律。 展开更多

关键词 代谢酶基因多态性 脑卒中 相关性研究 限制性内切酶片段长度多态性技术 亚甲基四氢叶酸还原酶 844ins68 胱硫醚Β-合成酶 血浆同型半胱氨酸 基因C677T 甲硫氨酸合成酶 酶联免疫分析法 多聚酶链反应 基因突变 其他疾病 神经系统

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番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析 被引量：11

6

作者 叶开和 王婧茹 +4 位作者 马锦锦 王小康 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1681-1687,共7页

目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（... 目的考察番石榴酸（guavenoic acid，GA）对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响，并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞，给予GA（0.3、1、3、10、30 n·L^－1），并设空白对照组、溶媒对照组（0.1％ DMSO）、分泌模型组及阳性药组（150 nmol·L^－1格列苯脲含1‰DMSO），药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素，用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^－1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型（BIS）、高糖刺激胰岛素分泌模型（GSIS），用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响，结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较，GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖（P ＜0.01）并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量（P ＜0.01），0.3～30 nmol·L －1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用（P ＜0.05或 P ＜0.01），0.3～30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。3、30 nmol·L^－1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达（P ＜0.01）。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖；增加细胞内胰岛素含量与分泌量，可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。 展开更多

关键词 番石榴酸 ins-1胰岛β细胞 增殖 胰岛素合成 胰岛素分泌 基因表达

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NF-κB信号转导通路与复发性口腔溃疡的相关性分析 被引量：9

7

作者 张敬 令狐瑞琦 +3 位作者 沙晶晶 胡欣培 李丹 李梦源 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期513-517,共5页

目的:研究NF-κB信号转导通路与复发性口腔溃疡(RAU)易感性的相关性。方法:采用ELISA方法检测124例RAU患者和133例健康对照者中NFκBp50、NFκBp65、IκBα、IKK的血清含量,则用限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应(RFLP-PCR)进行NFκB... 目的:研究NF-κB信号转导通路与复发性口腔溃疡(RAU)易感性的相关性。方法:采用ELISA方法检测124例RAU患者和133例健康对照者中NFκBp50、NFκBp65、IκBα、IKK的血清含量,则用限制性片段长度多态性-聚合酶链式反应(RFLP-PCR)进行NFκB-94 ins/del ATTG位点的基因多态性分析,用比值比(OR)和95%可信区间(95%CI)估计相对危险度,采用SPSS 20.0软件包对数据进行统计学分析。结果:RAU组患者血清NFκBp50、NFκBp65、IKK水平均显著低于正常对照组(P<0.05),RAU组患者血清IκBα水平均显著高于正常对照组(P<0.05)。NFκB-94ins/del ATTG位点在基因型频率与等位基因频率的分布上,病例组与正常对照组之间均有显著差异(P<0.05)。NFκB-94 ins/del ATTG位点基因型ID(OR=3.073,95%CI=1.557-6.067)与DD(OR=4.851,95%CI=2.264-10.393)为高风险基因型,D等位基因为高风险等位基因(OR=2.079,95%CI=1.462-2.957)。结论:NF-κB信号转导通路与复发性口腔溃疡有一定关系。NFκB-94 ins/del ATTG位点是RAU患者的易感基因位点。NFκB-94 ins/del ATTG位点携带D等位基因,患RAU的风险性是携带I等位基因的2.079倍。 展开更多

关键词 NFκB-94 ins/del ATTG 复发性口腔溃疡 信号转导通路 基因多态性

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同型半胱氨酸相关酶基因多态性与高血压伴周围动脉闭塞性疾病的关系 被引量：3

8

作者 刘建伟 叶玲 +1 位作者 刘静 李小鹰 《中华老年医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期332-335,共4页

目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚β合成酶(CBS)基因844ins68和甲硫氨基合成酶(MS)基因A2756G3种同型半胱氨酸(Hcy)代谢相关酶基因多态性与北京社区汉族老年人群中原发性高血压(EH)、EH伴周围动脉闭塞性疾病(PAOD... 目的探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T、胱硫醚β合成酶(CBS)基因844ins68和甲硫氨基合成酶(MS)基因A2756G3种同型半胱氨酸(Hcy)代谢相关酶基因多态性与北京社区汉族老年人群中原发性高血压(EH)、EH伴周围动脉闭塞性疾病(PAOD)易感性的关系。方法PCR扩增老年EH(EH组)、老年EH伴PAOD(EHPAOD组)患者和老年健康对照组的MTHFRC677T、CBS844ins68、MSA2756G基因突变点,直接或经限制性内切酶消化后行凝胶电泳,确定基因型并统计基因突变频率。结果EH组100例MTHFR基因3种基因型频率为:C/C290%,C/T450%,T/T260%;EHPAOD组59例为:C/C159%,C/T355%,T/T486%;对照组100例为:C/C310%,C/T500%,T/T190%。3组MTHFR基因的C677T单核苷酸突变中T突变位点的频率分别为485%、644%、440%。EHPAOD组与对照组和EH组比较,MTHFRT/T基因型频率和T等位基因频率差异均有统计学意义。而CBS844ins68、MSA2756G各种基因型频率和等位基因频率在EH组、EHPAOD组和对照组之间差异无统计学意义。结论MTHFR基因C677T单核苷酸突变可能是北京社区汉族老年人PAOD的遗传性危险因素之一,可能与EH无关。且CBS基因844ins68、MS基因A2756G的突变可能都不足以成为EH和PAOD的遗传危险因子。 展开更多

关键词 周围动脉闭塞性疾病 酶基因多态性 同型半胱氨酸 844ins68 相关 亚甲基四氢叶酸还原酶 基因C677T 基因型频率 MTHFR基因 PAOD 核苷酸突变 原发性高血压 基因突变频率 等位基因频率 北京社区 PCR扩增 健康对照组 基因突变点

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大鼠Ins1基因启动子区域DNA甲基化状态的研究 被引量：3

9

作者 王小莉 尹世学 +2 位作者 刘乔 江德巧 李东升 《湖北医药学院学报》 CAS 2012年第2期114-118,92,共6页

目的:研究大鼠Ins1(Insulin 1)基因启动子在各种组织中DNA甲基化的状态及在转化分化过程中甲基化的变化情况,为从表观遗传学方面研究Ins1基因表达调控的机制奠定基础。方法:通过RT-PCR检测大鼠胰岛、大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)及大鼠肝干... 目的:研究大鼠Ins1(Insulin 1)基因启动子在各种组织中DNA甲基化的状态及在转化分化过程中甲基化的变化情况,为从表观遗传学方面研究Ins1基因表达调控的机制奠定基础。方法:通过RT-PCR检测大鼠胰岛、大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)及大鼠肝干细胞(WB)中Ins1基因的表达情况。采用重亚硫酸盐测序法分析这三种细胞位于转录起始位点上游400 bp的Ins1基因启动子区域DNA甲基化的状态,并用焦磷酸测序法分析大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪和肝脏组织的甲基化状态及WB细胞转入PDX1慢病毒后甲基化的变化情况。结果:大鼠胰岛和INS-1细胞中Ins1基因高表达,启动子区域的甲基化程度非常低,而在大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪、肝脏组织和WB细胞中Ins1基因不表达,启动子区域的甲基化程度很高,当WB细胞转入PDX1慢病毒后可使Ins1基因启动子区域的甲基化程度降低。结论:Ins1基因的表达受甲基化调控,PDX1单个转录因子虽可降低Ins1基因甲基化程度但并不能使其完全去甲基化并表达Ins1基因。 展开更多

关键词 ins1基因 重亚硫酸盐测序法 焦磷酸测序法 DNA甲基化

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NF-κB1基因启动子-94ins/del ATTG的基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系 被引量：3

10

作者 王锐 张俊和 +1 位作者 陈立杰 蒋殿飞 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第3期231-233,237,共4页

目的探讨核因子κB1(NF-κB1)基因启动子-94ins/del ATTG基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)的关系。方法采用PCR限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测191例ACI患者(其中中国东北地区ACI患者101例,湖北省ACI患者90例)和171名... 目的探讨核因子κB1(NF-κB1)基因启动子-94ins/del ATTG基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)的关系。方法采用PCR限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测191例ACI患者(其中中国东北地区ACI患者101例,湖北省ACI患者90例)和171名健康对照(其中东北地区90名,湖北省81名)的NF-κB 1基因启动子-94ins/del ATTG基因型,分析该基因多态性与ACI的关系。结果 ACI组患者的NF-κB1-94ins/del ATTG 2种基因型频率(WW和DD型)和2种等位基因频率(W和D型)与健康对照者间比较有统计学差异(P<0.01);东北地区健康对照组与东北ACI组DD基因型频率和等位基因频率(W和D型)存在统计学差异(P<0.05),湖北地区健康对照组与ACI组WW、DD基因型频率和等位基因频率(W和D型)存在统计学差异(P<0.05),两地区健康对照组之间比较以及ACI组间比较均无统计学差异(P>0.05)。结论 NF-κB1基因启动子-94ins/del ATTG基因多态性与ACI发病有一定相关性,但其相关性不存在地区差异。 展开更多

关键词 NF-κB1基因启动子-94ins/del ATTG 动脉粥样硬化性脑梗死 基因多态性

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核因子-κB1-94ins/delATTG基因多态性与中国青岛地区汉族人群急性进展性脑梗死相关性的研究 被引量：3

11

作者 毛德军 唐咏春 +2 位作者 郭瑞友 战淑彩 臧云华 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期487-491,共5页

目的 探讨核因子-κB1（NF-κBl）-94ins/delATrG基因多态性与中国青岛地区汉族人群急性进展性脑梗死（APCI）的相关性. 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法 检测100例急性脑梗死患者（ACI组）和99例APCI... 目的 探讨核因子-κB1（NF-κBl）-94ins/delATrG基因多态性与中国青岛地区汉族人群急性进展性脑梗死（APCI）的相关性. 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法 检测100例急性脑梗死患者（ACI组）和99例APCI患者（APCI组）NF-κB1-94ins/如1ATTG基因多态性;采用细胞免疫组化法检测两组患者外周血单个核细胞（PBMC）胞核NF-κBp65表达率的变化. 结果 APCI组TT基因型和T等位基因频率均明显高于ACI组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;等位基因频率的相对风险分析发现T等位基因携带者发生APCI的风险是C等位基因的1.622倍;Logistic回归分析显示.TT基因型与APCI的发病独立相关（OR=2.14,95%CI：2.654～8.296,P〈0.05）.APCI组TT基因型个体PBMC胞核NF-κBp65表达率明显高于ACI组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;Logistic回归分析显示,TT基因型个体PBMC胞核NF-κBp65表达率与APCI的发病独立相关（OR=1.96,95%CI：2.267～7.691,P〈0.05）. 结论 NF-κB1-94ins/delA TTG基因多态性参与了APCI发生.T等位基因可能是中国青岛地区汉族人群APCI发病的遗传易感基因.携带T等位基因的个体可能通过上调NF-κB1的表达而增加APCI的发病风险. 展开更多

关键词 急性进展性脑梗死: 核因子-κB1-94ins/delATTG基因 基因多态性

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CDK11p58基因过表达抑制INS-1细胞的增殖 被引量：1

12

作者 刘洋 杨红旺 孟雁 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期873-876,共4页

目的:研究CDK11p58基因对大鼠胰岛瘤细胞INS-1增殖及周期的影响.方法:INS-1细胞分为3组:实验组转染pcDNA3.0-CDK11p58质粒;空载体组转染pcDNA3.0空载体;空白对照组不加任何干扰48h后,Westernblot检测细胞中CDK11p58基因表达水平;MTT法... 目的:研究CDK11p58基因对大鼠胰岛瘤细胞INS-1增殖及周期的影响.方法:INS-1细胞分为3组:实验组转染pcDNA3.0-CDK11p58质粒;空载体组转染pcDNA3.0空载体;空白对照组不加任何干扰48h后,Westernblot检测细胞中CDK11p58基因表达水平;MTT法检测转染CDK11p58基因对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测转染CDK11p58基因后细胞周期的变化.结果:转染48h后,与空载体组相比,实验组CDK11p58基因的表达水平显著升高(P<0.01)INS-1细胞存活率下降(P<0.05),G1期细胞比例显著上升(69.87%±1.77%vs63.03%±2.66%P<0.01),细胞出现G1期阻滞.结论:CDK11p58基因与INS-1细胞增殖相关其高表达引起的细胞增殖速度放缓的作用机制可能与其所致的细胞G1期延长有关. 展开更多

关键词 CbK11p58基因 ins-1细胞 细胞增殖 细胞周期

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胰岛淀粉样多肽对高糖刺激下INS-1细胞凋亡及其相关基因表达的影响 被引量：2

13

作者 刘阳 王占友 +2 位作者 李士红 池志宏 王涛 《解剖科学进展》 CAS 2015年第3期324-326,330,共4页

目的探讨高糖刺激下转染过表达人胰岛淀粉样多肽基因的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)细胞凋亡的影响及其相关基因表达。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测高糖刺激后INS-1及转染人胰岛淀粉样多肽的INS-1细胞(h IAPP/INS-1)上清液的胰岛素水... 目的探讨高糖刺激下转染过表达人胰岛淀粉样多肽基因的大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)细胞凋亡的影响及其相关基因表达。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测高糖刺激后INS-1及转染人胰岛淀粉样多肽的INS-1细胞(h IAPP/INS-1)上清液的胰岛素水平;利用Hoechst33258染色检测细胞凋亡百分率;采用RTPCR方法检测高糖刺激培养后的Bcl2、Bax m RNA的水平。结果高糖刺激下,与未转染人胰岛淀粉样多肽INS-1细胞相比较,h IAPP/INS-1细胞胰岛素分泌功能显著下降,凋亡细胞比例明显增加,抗凋亡基因Bcl2 m RNA表达水平下调,促凋亡基因Bax m RNA表达水平上调,Bcl2/Bax比例明显降低。结论人胰岛淀粉样多肽上调促凋亡基因表达和抑制抗凋亡基因表达可能与糖尿病的发生发展相关。 展开更多

关键词 人胰岛淀粉样多肽 h IAPP/ins-1细胞 高糖 细胞凋亡 基因表达

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壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外表达的研究 被引量：1

14

作者 沈亚非 郭青云 +3 位作者 徐焱成 郭敏 孙家忠 谢海鹰 《医学新知》 CAS 2005年第2期42-44,共3页

目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达。方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达。27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通... 目的研究壳聚糖介导人胰岛素基因在糖尿病鼠体内外转染及表达。方法采用壳聚糖体外转染鼠成纤维细胞,对转染后72h的细胞应用免疫组织化学方法检测胰岛素的表达。27只糖尿病大鼠随机分为3组(pCMV.INS组、pCMV组、生理盐水组),体内转染通过尾静脉注射糖尿病大鼠,检测空腹血糖和胰岛素。结果pCMV转染细胞无胰岛素表达,pCMV.INS转染大约10%的细胞有胰岛素表达;pCMV.INS转染大鼠血浆胰岛素显著高于生理盐水对照组(P<0.01)和pCMV对照组(P<0.01)。结论人胰岛素基因可通过壳聚糖直接转染至糖尿病大鼠体内发挥治疗作用及壳聚糖可能是一种很有前途的基因载体。 展开更多

关键词 人胰岛素基因 糖尿病鼠 壳聚糖 体内外 表达的研究 介导 免疫组织化学方法 糖尿病大鼠 鼠成纤维细胞 转染及表达 生理盐水组 尾静脉注射 血浆胰岛素 ins 体外转染 体内转染 空腹血糖 转染细胞 基因载体 治疗作用 直接转染

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citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症的SLC25A13基因IVS16ins3kb突变类型分析 被引量：1

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作者 王大燕 李小兵 赖盼建 《中华妇幼临床医学杂志（电子版）》 CAS 2022年第3期315-322,共8页

目的探讨citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿SLC25A13基因IVS16ins3kb突变类型的第二代测序技术(NGS)数据分析特点。方法选择2017年7月与2020年4月,浙江大学医学院附属金华医院儿科收治的符合NICCD临床诊断标准,采用染色体... 目的探讨citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿SLC25A13基因IVS16ins3kb突变类型的第二代测序技术(NGS)数据分析特点。方法选择2017年7月与2020年4月,浙江大学医学院附属金华医院儿科收治的符合NICCD临床诊断标准,采用染色体组分析工具箱(GATK)、XHMM、CNVkit软件,对患儿NGS靶向外显子捕获测序数据进行单核苷酸变异(SNV)、插入与缺失突变、拷贝数变异(CNV)分析,仅提示SLC25A13基因单个位点杂合突变的2例患儿(患儿1、2)为研究对象。采用回顾性分析方法,收集患儿1、2的临床病例资料,包括病史、实验室检查结果、基因检测结果、治疗与预后等。利用福君基因动态实验室信息管理系统3.0(FLIMS系统),采用split read方法,对患儿1、2的NGS靶向外显子捕获测序原始数据(fastq格式)进行IVS16ins3kb突变类型分析,并采用长链、高保真PCR(LA-PCR)方法进行验证。本研究遵循的程序符合浙江大学医学院附属金华医院医学伦理委员会规定,并获得该委员会批准(审批文号:2018-119)。结果①病史采集:患儿1(女性)与患儿2(男性),分别因皮肤黄染2个月余与4个月余,于本院就诊,就诊时年龄分别为2个月+19 d、4个月+16 d,均为足月儿、均无家族遗传性疾病史。②实验室检查、治疗:入院时,对患儿1、2干血片采取串联质谱仪进行遗传代谢病检测结果显示,血液中瓜氨酸、甲硫氨酸等多种氨基酸含量显著增高;肘静脉血生化检查结果显示,血清氨、乳酸浓度及血清总胆红素(STB)、血清直接胆红素(SDB)、血清间接胆红素(SIB)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶均异常增高。对患儿1、2均采取无乳糖配方奶喂养3个月后,血液生化指标均明显好转。③NGS靶向外显子捕获及Sanger测序法验证结果:采用GATK、XHMM、CNVki软件对患儿1、2的NGS靶向外显子捕获测序数据进行SNV、插入与缺失突变、CNV� 展开更多

关键词 希特林蛋白缺乏症 胆汁淤积 肝内 高通量核苷酸序列分析 SLC25A13基因 IVS16ins3kb突变 串联质谱法 分裂读片段法 儿童

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NF-κB1基因启动子-94del/ins ATTG基因多态性与特发性血小板减少性紫癜的关系 被引量：1

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作者 杨占甲 李丽娟 《交通医学》 2021年第2期120-124,共5页

目的:探究NF-κB1-94del/ins ATTG基因多态性与特发性血小板减少性紫癜(ITP)的关系。方法:ITP患者127例,其中急性ITP组66例,慢性ITP组61例,同期本院体检的健康者130例为正常对照组。提取血液DNA,进行PCR扩增,限制性内切酶酶切PCR扩增产... 目的:探究NF-κB1-94del/ins ATTG基因多态性与特发性血小板减少性紫癜(ITP)的关系。方法:ITP患者127例,其中急性ITP组66例,慢性ITP组61例,同期本院体检的健康者130例为正常对照组。提取血液DNA,进行PCR扩增,限制性内切酶酶切PCR扩增产物,紫外分析仪观察酶切情况。结果:正常对照组、急性ITP组、慢性ITP组患者NF-κB1-94del/ins ATTG等位基因频率的期望值与观察值的差异均无统计学意义(P>0.05),符合Hardy-Weinberg平衡定律。与对照组比较,急性、慢性ITP组DD基因型分布显著升高,WW基因型显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05),WD基因型的差异均无统计学意义(P>0.05)。急性ITP组与慢性ITP组基因型比较,各基因型的差异均无统计学意义(P>0.05)。急性ITP组D等位基因频率显著高于慢性ITP和对照组,慢性ITP组D等位基因的分布显著高于对照组,急、慢性ITP组W等位基因频率显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);不同基因型ITP患者年龄、性别、Hb、RBC水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。WW基因型患者PLT高于DD型和WD型,CRP、RF水平低于DD型和WD型,差异均有统计学意义(P<0.05);DD型与WD型差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示NF-κB1-94del/ins ATTG基因多态性是影响ITP的独立危险因素。结论:NF-κB1-94del/ins ATTG基因多态性与特发性血小板减少性紫癜密切相关,是影响ITP的独立危险因素。 展开更多

关键词 特发性血小板减少性紫癜 NF-κB1-94del/ins ATTG 基因多态性 相关性

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间歇性高糖对大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1的损伤作用及对第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶表达的影响 被引量：1

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作者 邵晨 王晓黎 +3 位作者 王涤非 李国姣 郭妍 董玉梅 《中华糖尿病杂志》 CAS CSCD 2015年第11期689-693,共5页

目的探讨间歇性高糖对大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1的损伤作用及对第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶（PTEN）表达的影响。方法将Ins．1细胞分为正常组（CG组，11．1mmol／L葡萄糖培养）、持续高糖组（SHG组，33．3mmol／L葡萄糖培养）... 目的探讨间歇性高糖对大鼠胰岛细胞瘤细胞系Ins-1的损伤作用及对第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶（PTEN）表达的影响。方法将Ins．1细胞分为正常组（CG组，11．1mmol／L葡萄糖培养）、持续高糖组（SHG组，33．3mmol／L葡萄糖培养）、间歇性高糖组（IHG组，11．1mmol／L及33-3mmol／L葡萄糖交替培养12h），3组细胞均培养3d。欧文比色法（MTS）~定细胞增殖活性，膜联蛋白v-异硫氰酸荧光素／碘化丙啶（AnnexinV／PI）双染细胞后，以流式细胞仪测定各组细胞的凋亡率，放免法测各组细胞胰岛素分泌，2’，7’．二氯荧光黄双乙酸盐（DCFH—DA）荧光探针测定各组细胞内活性氧簇（ROS）水平，倒置相差显微镜下观察各组细胞形态，钙离子荧光探针法（Fluo3-AM）测定细胞内钙离子浓度，Westernblotting法测定各组细胞PTEN蛋白表达。各组内均数比较采用单因素方差分析。结果SHG组细胞凋亡率、细胞内ROS水平、细胞内钙离子浓度及PTEN表达均较CG组显著增加（t=8．310、10．261、17．890、5．123，均P〈0．05），细胞增殖活性、胰岛素分泌均较CG组显著降低（t=-19．630、-2．053，均P〈0．05）。IHG组细胞凋亡率、细胞内ROS水平以及钙离子浓度及PTEN表达均较CG组及SHG显著增加（t=6．200～18．227，均P〈0．05），细胞增殖活性、胰岛素分泌均较CG组及SHG组均显著降低（t=-27．800、-2．790、-8．167、-1．503，均P〈0．05）。IHG组较SHG组及CG组Ins-1细胞异型性明显、细胞数量显著减少且排列紊乱。结论氧化应激参与高糖对Ins．1细胞的损伤作用，可能与PTEN表达增高有关，间歇性高糖对INS．1细胞的损伤作用较持续性高糖严重。 展开更多

关键词 间歇性高糖 大鼠胰岛细胞瘤细胞系ins-1 第10号染色体缺失的张力同源性磷酸酶

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胱硫醚β-合成酶基因844ins68多态性与新疆汉族乳腺癌的相关性研究 被引量：1

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作者 莫少华 刘新权 +4 位作者 徐春玲 张伟 程江 曹玉文 张蕾 《石河子大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2018年第4期498-502,共5页

目的探索胱硫醚β-合成酶(cystathioneβsynthase,CBS)844ins68基因多态性与新疆汉族乳腺癌的关系。方法收集新疆汉族150例乳腺癌患者(乳腺癌组)和150例健康体检者(对照组)外周静脉血,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)... 目的探索胱硫醚β-合成酶(cystathioneβsynthase,CBS)844ins68基因多态性与新疆汉族乳腺癌的关系。方法收集新疆汉族150例乳腺癌患者(乳腺癌组)和150例健康体检者(对照组)外周静脉血,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法检测CBS844ins68基因型和基因频率,同时用电化学发光免疫分析仪检测肿瘤标志物。结果 1.两组年龄分布差异无统计学意义,但是否绝经、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、糖类抗原15-3(carcinoembryonic antigen15-3,CA15-3)的分布差异有统计学意义(P﹤0.05);2.乳腺癌组CBS844ins68位点基因型DD、DI、II分别为94.0%、6%、0;对照组CBS844ins68位点基因型DD、DI、II分别为96.7%、3.3%、0;乳腺癌等位基因频率D、I分别为97.0%、3.0%;对照组等位基因频率D、I分别为98.3%、1.7%,两组基因型和等位基因频率分布差异无统计学意义(P>0.05);3.Logistic回归分析显示年龄﹤50岁、已绝经、甲胎蛋白(alpha fetoprotein,AFP)AFP≥7.0、CEA≥3.4、CA15-3≥25可增加新疆汉族乳腺癌发病风险3-9倍。结论年龄小于50岁及已绝经、AFP、CEA、CA15-3水平增高是乳腺癌发病的危险因素,CBS844ins68基因多态性与新疆汉族乳腺癌发病无相关性。 展开更多

关键词 乳腺癌 CBS844ins68 基因多态性 新疆汉族

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在INS-1细胞中构建胰腺组织硫氧还蛋白相互作用蛋白过表达模型:两种腺病毒感染方法的差异 被引量：1

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作者 曹竹杰 冯艳金 +2 位作者 李丹 王瑾 焦向英 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第28期4487-4492,共6页

背景:目前,通过腺病毒感染方法在细胞中构建蛋白质过表达模型的方法主要有2种,一是在腺病毒感染细胞4 h后补充1640完全培养基,24 h后换为完全培养基,再继续培养到48 h(方法Ⅰ);另一种是在腺病毒感染细胞4 h后用PBS洗去含有腺病毒的1640... 背景:目前,通过腺病毒感染方法在细胞中构建蛋白质过表达模型的方法主要有2种,一是在腺病毒感染细胞4 h后补充1640完全培养基,24 h后换为完全培养基,再继续培养到48 h(方法Ⅰ);另一种是在腺病毒感染细胞4 h后用PBS洗去含有腺病毒的1640培养基,更换4 mL完全培养基培养到48 h,中间不做任何处理(方法Ⅱ)。前者病毒的作用时间较长,感染效果较好,但病毒本身对细胞的损害程度较大,对实验模型的稳定性产生干扰。而后者病毒的作用时间短,对细胞的毒性低,但有时病毒感染效率较低,目的蛋白的表达效果欠佳。目的:在大鼠INS-1胰岛β细胞中,通过比较相同腺病毒载体介导的不同感染细胞的方法而寻找一种更加稳定而高效的硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting protein,TXNIP)过表达模型。方法:构建含有绿色荧光蛋白的腺病毒载体(Ad-GFP)和TXNIP过表达腺病毒载体(Ad-TXNIP-GFP)。分别设立正常组、空病毒组和TXNIP过表达组,按照上述2种不同的方法进行病毒转染。结果与结论:(1)方法Ⅱ中的绿色荧光蛋白荧光强度和阳性效率高于方法Ⅰ;(2)方法Ⅱ中的细胞形态更好且细胞存活率更高;(3)方法Ⅱ中,目的基因TXNIP在mR NA水平和蛋白质水平的表达情况明显高于方法Ⅰ。由以上结果得出结论,腺病毒感染INS-1细胞4 h后,使用PBS将旧培养基洗去并更换新培养基,继续培养到48 h的方法更有利于在INS-1细胞中构建TXNIP过表达模型。 展开更多

关键词 腺病毒科感染 基因表达调控 基因 调节 胰岛素分泌细胞 组织工程 腺病毒载体 绿色荧光蛋白 ins-1细胞 硫氧还蛋白相互作用蛋白 TXNIP 组织构建 糖尿病 存活率 感染效率 流式细胞术 实时PCR Western BLOT

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INS VNTR基因对出生大小及婴儿生长发育的影响研究

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作者 蒋泓 钱序 +5 位作者 林燧恒 张一鸣 范燕燕 蒋红懿 贺凤玲 何更生 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第17期2737-2740,共4页

目的:探讨胰岛素基因的串联重复可变序列(INS-VNTR)与出生大小和婴儿生长发育的相关性。方法:采用队列研究的方法,在孕妇分娩后留取脐带组织或脐血,并随访活产新生儿至12月。使用rs689(-23HphI)的A/T基因分别作为INS-VNTR Ⅰ/Ⅲ基因的标... 目的:探讨胰岛素基因的串联重复可变序列(INS-VNTR)与出生大小和婴儿生长发育的相关性。方法:采用队列研究的方法,在孕妇分娩后留取脐带组织或脐血,并随访活产新生儿至12月。使用rs689(-23HphI)的A/T基因分别作为INS-VNTR Ⅰ/Ⅲ基因的标志,应用多元两分类Logistic回归和混合线性模型分别分析INS-VNTR对出生大小及婴儿生长发育的影响。结果:575例胎儿中,Ⅰ/Ⅰ型为524例,占91.13%;Ⅰ/Ⅲ型50例,占8.70%;Ⅲ/Ⅲ型仅1例,占0.17%。含有Ⅲ等位基因的携带者与Ⅰ/Ⅰ基因型相比,出生体重、身长、BMI及巨大儿发生率差异无统计学意义(P>0.05)。在随访到的474名1岁婴儿生长发育资料中,Ⅰ/Ⅰ基因型与Ⅰ/Ⅲ基因型携带者相比,婴儿期的体重、身长、头围、BMI值之Z值差异无统计学意义(P>0.05)。结论:INS-VNTR基因与出生大小及婴儿生长发育之间无相关性(P>0.05),但由于Ⅲ/Ⅲ基因型频率在中国大陆汉人中的低发生率,因而INS-VNTR对中国大陆汉人出生大小及婴儿生长发育的影响还有待将来进一步的研究来充实。 展开更多

关键词 ins VNTR 基因 出生体重 巨大儿发生率 婴儿生长发育

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