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精氨酸对早期断奶仔猪肠道生长、组织形态及IL-2基因表达水平的影响 被引量：38
1
作者 谭碧娥 李新国 +2 位作者 孔祥峰 姚康 印遇龙 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期2783-2788,共6页
【目的】研究精氨酸对超早期断奶仔猪肠道发育和肠道免疫的影响。【方法】试验选用70头7日龄断奶的二元杂交仔猪,随机分成5个处理,每个处理14头,分别饲喂添加0.0%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%精氨酸的日粮。试验开始后第7天和第14天,每个... 【目的】研究精氨酸对超早期断奶仔猪肠道发育和肠道免疫的影响。【方法】试验选用70头7日龄断奶的二元杂交仔猪,随机分成5个处理,每个处理14头,分别饲喂添加0.0%、0.2%、0.4%、0.6%和0.8%精氨酸的日粮。试验开始后第7天和第14天,每个处理分别选取6头猪屠宰取样,检测胃肠指数、小肠组织形态以及小肠IL-2基因表达水平。【结果】试验第7天,添加精氨酸一定程度上促进了胃和小肠以及小肠绒毛的生长(P>0.05),显著提高了空肠和回肠IL-2基因表达水平(P<0.05);试验第14天,添加0.6%和0.8%精氨酸显著提高仔猪小肠重量和长度(P<0.05),空肠和回肠绒毛高度以及绒毛高度与隐窝深度比值也均有提高的趋势(P>0.05)。【结论】精氨酸能促进超早期断奶仔猪的肠道发育,阻止肠绒毛萎缩,提高肠道IL-2基因表达水平,增强肠道免疫功能。 展开更多
关键词 精氨酸 超早期断奶仔猪 肠道发育 组织形态 il-2基因表达
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民猪母猪饲粮中添加精氨酸对初生仔猪小肠形态及IL-2基因表达量的影响 被引量：7
2
作者 韩昱 王军军 +11 位作者 单安山 刘娣 李纯锦 颜桥 袁桃林 吴国超 周勇锋 房恒通 金永成 赵云 于浩 张晶 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期859-863,共5页
选取妊娠第45天民猪母猪12头,随机分成2组,每组6个重复,每个重复1头母猪。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ组(试验组)饲喂基础饲粮+1%L-精氨酸。采取初生仔猪小肠,制作切片,进行小肠形态学观察,并测定小肠IL-2基因的表达量。结果显示,试验... 选取妊娠第45天民猪母猪12头,随机分成2组,每组6个重复,每个重复1头母猪。Ⅰ组(对照组)饲喂基础饲粮,Ⅱ组(试验组)饲喂基础饲粮+1%L-精氨酸。采取初生仔猪小肠,制作切片,进行小肠形态学观察,并测定小肠IL-2基因的表达量。结果显示,试验组初生仔猪十二指肠绒毛高度、绒毛宽度和微绒毛长度均有升高的趋势,而绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高,隐窝深度较对照组显著降低。空肠绒毛宽度以及微绒毛长度均有升高趋势,而绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度的比值和隐窝深度较对照组分别显著升高22.89%、64.15%和降低37.12%(P<0.05)。回肠绒毛宽度以及微绒毛长度均有不同程度的提高,而绒毛高度、绒毛高度与隐窝深度的比值及隐窝深度较对照组分别极显著增加34.38%、86.75%及降低40.63%(P<0.01);试验组初生仔猪十二指肠IL-2基因表达量显著升高(P<0.05),空肠IL-2基因表达量极显著升高(P<0.01),而回肠该基因表达量呈现升高趋势,但无显著差异(P>0.05)。结果表明,妊娠母猪饲粮中添加精氨酸能够有效提高初生仔猪的肠道免疫力及促进肠道发育。 展开更多
关键词 精氨酸 民猪 小肠形态学 il-2基因表达
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RU486逆转糖皮质激素对白细胞介素-2生成和基因表达的抑制作用 被引量：3
3
作者 梁发权 吕宝璋 唐佩弦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期264-269,共6页
本文应用细胞培养、＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入、ＩＬ－２依赖细胞株ＣＴＬＬ－２、斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析等方法，观察到糖皮质激素受体拮抗剂ＲＵ４８６能逆转糖皮质激素（地塞米松）对大鼠脾淋巴细胞增殖、ＩＬ－２产生和Ｉ... 本文应用细胞培养、＾３Ｈ－胸腺嘧啶核苷掺入、ＩＬ－２依赖细胞株ＣＴＬＬ－２、斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ分析等方法，观察到糖皮质激素受体拮抗剂ＲＵ４８６能逆转糖皮质激素（地塞米松）对大鼠脾淋巴细胞增殖、ＩＬ－２产生和ＩＬ－２基因表达的抑制作用。本文证实，糖皮质激素对淋巴细胞增殖、ＩＬ－２生成和ＩＬ－２基因表达的抑制作用是通过淋巴细胞内的糖皮质激素受体来实现的。 展开更多
关键词 RU486 糖皮质激素 白细胞介素2
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牛IL-2cDNA缺失突变的矫正及表达产物生物学活性测定 被引量：2
4
作者 李春华 李祥瑞 +3 位作者 魏晓锋 徐立新 李震 陈芳 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期86-89,共4页
根据GenBank中的牛IL 2基因序列 ,设计一对引物Pa和Pd ,以牛外周血淋巴细胞为材料 ,用RT PCR方法扩增得到牛IL 2cDNA ,测序发现在扩增产物的第 2 4 0位缺失了一个A碱基。采用重叠延伸剪接术 (SOE法 )向突变体定点插入该碱基 ,然后与表... 根据GenBank中的牛IL 2基因序列 ,设计一对引物Pa和Pd ,以牛外周血淋巴细胞为材料 ,用RT PCR方法扩增得到牛IL 2cDNA ,测序发现在扩增产物的第 2 4 0位缺失了一个A碱基。采用重叠延伸剪接术 (SOE法 )向突变体定点插入该碱基 ,然后与表达载体连接 ,获得了正确的表达产物。经RT PCR检测证明 ,重组的牛IL 2蛋白具有较好的生物学活性 ,能诱导肿瘤坏死因子TNF α和干扰素IFN γ的产生。 展开更多
关键词 牛 il-2 cDNA缺失突变体 矫正 基因表达 定点突变 生物学活性 重叠延伸剪接术 白细胞介素2
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番鸭细小病毒VP3基因和鸭IL-2基因真核融合表达载体的构建 被引量：1
5
作者 董嘉文 李林林 +3 位作者 孙敏华 袁建丰 邝瑞欢 胡奇林 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第8期17-19,共3页
将番鸭细小病毒(MDPV)主要结构蛋白VP3基因和免疫刺激基序(CpG)依次克隆至质粒pIRES-dIL2上,构建了重组质粒pIRES-dIL2-VP3-CpG。核酸疫苗重组质粒转染BHK-21细胞进行间接免疫荧光试验,可在细胞浆中检测到绿色荧光,表明重组质粒可以成... 将番鸭细小病毒(MDPV)主要结构蛋白VP3基因和免疫刺激基序(CpG)依次克隆至质粒pIRES-dIL2上,构建了重组质粒pIRES-dIL2-VP3-CpG。核酸疫苗重组质粒转染BHK-21细胞进行间接免疫荧光试验,可在细胞浆中检测到绿色荧光,表明重组质粒可以成功地在真核细胞内表达。 展开更多
关键词 番鸭细小病毒 VP3基因 鸭il-2基因 CPG基序 真核表达
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猪IL-2的原核表达及其促淋巴细胞增殖活性研究 被引量：1
6
作者 范俊娟 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第7期23-26,共4页
为研究猪IL-2作为免疫佐剂的可行性,用IPTG诱导含有猪IL-2基因的BL21(DE3)LysS工程菌。目的蛋白经超声波破碎、洗涤、变性溶解后,用固化金属亲和层析法纯化后复性。MTT法对复性的重组蛋白的生物学活性进行分析。结果显示,相同浓度复性的... 为研究猪IL-2作为免疫佐剂的可行性,用IPTG诱导含有猪IL-2基因的BL21(DE3)LysS工程菌。目的蛋白经超声波破碎、洗涤、变性溶解后,用固化金属亲和层析法纯化后复性。MTT法对复性的重组蛋白的生物学活性进行分析。结果显示,相同浓度复性的IL-2与未复性的IL-2比较,刺激淋巴细胞体外增殖的能力差异极显著(P<0.01)。说明复性的重组猪IL-2具有良好的刺激淋巴细胞体外增殖的活性,在作为免疫佐剂方面具有潜在的应用价值。 展开更多
关键词 猪 il-2基因 表达 纯化 复性 淋巴细胞增殖活性
原文传递
猪白细胞介素-2基因的克隆与表达 被引量：1
7
作者 李春华 何锡忠 +3 位作者 张春玲 邹勇 蒋凤英 倪建平 《上海农业学报》 CSCD 北大核心 2010年第1期5-8,共4页
根据GenBank上发表的猪白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)基因序列,设计1对引物。采用RT-PCR技术,以ConA刺激的猪外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出484 bp的特异性片段,将其克隆入pGEM-T easy载体。序列测定表明;扩增片段为猪IL-2基... 根据GenBank上发表的猪白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)基因序列,设计1对引物。采用RT-PCR技术,以ConA刺激的猪外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出484 bp的特异性片段,将其克隆入pGEM-T easy载体。序列测定表明;扩增片段为猪IL-2基因,该基因与GenBank上发表的猪IL-2基因的核苷酸序列同源性达99.8%。将其定向克隆至原核表达载体pET32a,构建了表达重组猪IL-2的基因工程菌株,经IPTG诱导表达和层析纯化,获得了纯化的重组猪IL-2蛋白。 展开更多
关键词 猪 il-2基因 克隆 表达
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牦牛白细胞介素2(IL2)基因cDNA的分子克隆和表达研究(英文) 被引量：3
8
作者 付满良 李惠 +4 位作者 武梅 王丽焕 吴凯源 宁健可 高荣 《四川动物》 CSCD 北大核心 2005年第4期507-512,共6页
目的克隆牦牛免疫基因并研究其免疫特性。方法以伴刀豆球蛋白A(Con A)激活的体外培养的牦牛血液淋巴细胞,提取激活淋巴细胞的总RNA,用RT-PCR方法,从中克隆出白细胞介素2 cDNA,连接到T载体上测序,并亚克隆到pGEX4T-1表达质粒,在大肠杆菌... 目的克隆牦牛免疫基因并研究其免疫特性。方法以伴刀豆球蛋白A(Con A)激活的体外培养的牦牛血液淋巴细胞,提取激活淋巴细胞的总RNA,用RT-PCR方法,从中克隆出白细胞介素2 cDNA,连接到T载体上测序,并亚克隆到pGEX4T-1表达质粒,在大肠杆菌进行了重组表达,纯化融合表达YIL2产物,MTT比色法测定其体外刺激牦牛血液淋巴母细胞增殖的免疫活性。结果YIL2 cDNA序列分析显示:在其编码区442位点的一个碱基发生突变(由C突变为T),从而导致终止密码子(TAA)出现,使YIL2蛋白表达提前终止,与其它牛IL2蛋白相比少了8个氨基酸。MTT比色法测定结果表明重组牦牛IL2蛋白体外能显著促进牦牛淋巴母细胞的增殖。结论本实验成功克隆了牦牛IL2基因,其原核表达产物具有显著的免疫活性,这为研制新型免疫增强剂来提高牦牛对各种疾病的抵抗力,增强牦牛疫苗的免疫保护率奠定了基础。 展开更多
关键词 牦牛 白细胞介素2基因 克隆 原核表达 生物活性
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