Th3、Th17及相关细胞因子在自身免疫性甲状腺疾病发病中的作用 被引量：20

1

作者 郑莉 陈紫君 刘纯 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期43-47,共5页

目的:研究Th17、Th3细胞及相关细胞因子IL-17、TGF-β1在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病机制中的作用及意义。方法:收集49例初诊的自身免疫性甲状腺疾病患者,分为Graves'病(GD)(n=30)组和桥本甲状腺炎(HT)(n=19)组,另选年龄、性别... 目的:研究Th17、Th3细胞及相关细胞因子IL-17、TGF-β1在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发病机制中的作用及意义。方法:收集49例初诊的自身免疫性甲状腺疾病患者,分为Graves'病(GD)(n=30)组和桥本甲状腺炎(HT)(n=19)组,另选年龄、性别匹配的18个正常人作为健康对照。Graves'病组采用甲巯咪唑治疗,桥本甲状腺炎组采用甲状腺素钠治疗,均随访至甲状腺功能正常。采用流式细胞仪技术检测外周血中Th17和Th3细胞比例。采用ELISA方法检测血浆IL-17、TGF-β1水平。结果:GD和HT初诊组患者外周血Th17细胞较正常对照组明显升高(P<0.05)。Th3细胞在HT初诊组中明显升高,而其在GD初诊组中明显下降(P<0.05)。血浆IL-17水平在GD和HT初诊组、缓解组均较正常对照组明显升高(P<0.05)。血浆TGF-β1水平在HT初诊组和缓解组均明显升高(P<0.05)。结论:Th17、Th3细胞和相关细胞因子IL-17、TGF-β1可能参与了自身免疫性甲状腺疾病的发病,TGF-β1可能在HT的发病中起了一个促炎因子的作用。 展开更多

关键词 桥本甲状腺炎 Graves’病 转化生长因子-β1 il-17 Th3细胞 TH17细胞

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嘌呤配体P2X门控离子通道型受体7及其下游分子在痛风性关节炎中作用机制的研究进展 被引量：10

2

作者 姜德友 李文昊 +2 位作者 解颖 任鹏鹏 韩洁茹 《世界中医药》 CAS 2020年第8期1221-1224,共4页

目前随着痛风性关节炎的发病率逐年上升,对该病炎性反应及疼痛机制的研究越来越多,该病主要由尿酸盐沉积及ATP刺激P2X7R、Nod样受体蛋白3、NEK7表达诱导炎性反应递质成熟与分泌所致,但具体机制尚不明确。现对P2X7R、NLRP3、NEK7的国内... 目前随着痛风性关节炎的发病率逐年上升,对该病炎性反应及疼痛机制的研究越来越多,该病主要由尿酸盐沉积及ATP刺激P2X7R、Nod样受体蛋白3、NEK7表达诱导炎性反应递质成熟与分泌所致,但具体机制尚不明确。现对P2X7R、NLRP3、NEK7的国内外研究进展进行综述,以探讨GA炎性反应及疼痛的发病机制,为防治GA提供新思路与治疗靶点。 展开更多

关键词 痛风性关节炎 P2X7R Nod样受体蛋白3 NEK7 il-1Β 疼痛 尿酸钠 信号通路

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原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中IL-37表达增高及临床意义 被引量：5

3

作者 李腾达 陈燕 +7 位作者 龙曙萍 谷明莉 刘鹏 吴林洪 邓顺江 张薇薇 钱铮 邓安梅 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第1期12-15,共4页

目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-37的表达水平,进一步探究其在PBC致病过程中的临床意义。方法收集2013年6月~2015年8月于长海医院确诊的42例PBC患者和38例同期体检的健康对照者外周血,采用蔗糖密度梯... 目的检测原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中IL-37的表达水平,进一步探究其在PBC致病过程中的临床意义。方法收集2013年6月~2015年8月于长海医院确诊的42例PBC患者和38例同期体检的健康对照者外周血,采用蔗糖密度梯度离心法分离PBMCs,以实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测PBMCs中IL-37的mRNA表达水平,以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中IL-37,IL-6,IL-17,TNF-α,TGF-β,IL-18和IL-23的蛋白水平,同时记录PBC患者的病理性分期。对IL-37与IL-6,TNF-α,IL-17,TGF-β,IL-18,IL-23进行Pearson相关性分析,对IL-37与PBC疾病分期进行Spearman秩相关性分析。结果实验组与对照组IL-37的mRNA水平和蛋白水平分别为2.81±0.94 vs 1.09±0.56,356.14±169.36 pg/ml vs 86.68±48.23 pg/ml,差异具有统计学意义(t=9.811,9.462,P均<0.000 1)。相关性分析表明:IL-37与IL-17,TNF-α,IL-6,TGF-β呈正相关(r=0.561 2,0.661 9,0.672 1,0.765 3;P值均<0.001),与疾病分期(Ⅰ~Ⅳ)呈正相关(r_s=0.348 9,P<0.05)。结论 IL-37可能参与了PBC的致病过程,对疾病预测与诊断有重要意义。 展开更多

关键词 原发性胆汁性肝硬化 白细胞介素-37 白细胞介素-17 白细胞介素-6 表皮生长因子-β

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银屑病患者骨髓基质细胞分泌IL-3与IL-7水平的检测

4

作者 刘瑞风 尹国华 张开明 《中国麻风皮肤病杂志》 2009年第7期490-492,共3页

目的:检测银屑病患者与对照组骨髓基质细胞分泌IL-3与IL-7的水平。方法:采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,传代后流式细胞仪检测细胞表面标志并用ELISA法检测上清液中IL-3和IL-7的水平。结... 目的:检测银屑病患者与对照组骨髓基质细胞分泌IL-3与IL-7的水平。方法:采用密度梯度离心法分离患者与对照组骨髓单一核细胞,通过贴壁法培养骨髓基质细胞,传代后流式细胞仪检测细胞表面标志并用ELISA法检测上清液中IL-3和IL-7的水平。结果:患者组骨髓基质细胞分泌IL-3显著低于对照组(P<0.05),而IL-7的分泌水平两组间无统计学差异(P>0.05)。结论:银屑病骨髓造血微环境可能存在异常。 展开更多

关键词 银屑病 骨髓基质细胞 il-3 il-7

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TLR7激动剂Gardiquimod上调BxPC-3细胞中IL-15 mRNA表达

5

作者 王芳 金锐 +3 位作者 李磊 程丰伟 罗欣 张胜权 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2015年第1期1-4,共4页

目的研究TLR7在胰腺癌Bx PC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15(IL-15)的表达。方法通过Western blot和Real-time PCR分析TLR7在细胞内的表达水平;Bx PC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处理后,Real-t... 目的研究TLR7在胰腺癌Bx PC-3细胞中表达,并探讨TLR7激动剂激活TLR7后细胞因子白介素15(IL-15)的表达。方法通过Western blot和Real-time PCR分析TLR7在细胞内的表达水平;Bx PC-3细胞经过不同时间点Gardiquimod(3μg/ml)的处理后,Real-time PCR分析TLR7激活后IL-15 mRNA水平表达变化;Western blot分析Gardiquimod刺激细胞后,磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K-AKT)信号通路的变化。结果 Western blot和Real-time PCR结果显示:与外周血单核细胞(PBMC)相比,TLR7在Bx PC-3中弱表达;Real-time PCR分析显示:Gardiquimod处理细胞后能刺激细胞中IL-15的表达;TLR7激动剂能够激活PI3K-AKT信号通路。结论 Gardiquimod激活TLR7后能够上调IL-15的表达,并且其激活与PI3KAKT信号途径相关。 展开更多

关键词 TLR7 Gardiquimod il-15 PI3K-AKT BXPC-3

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白细胞介素-7诱发皮肤T细胞淋巴瘤细胞JAK-3的磷酸化和活化

6

作者 董子明 杨洪艳 +2 位作者 张义国 赵明耀 郑智敏 《河南医科大学学报》 1999年第1期14-18,共5页

目的：ＩＬ７可刺激一些良性和恶性淋巴细胞增生，其中包括来自皮肤样Ｔ细胞瘤（ＣＴＣＬ）病人的肿瘤细胞。Ｊａｎｕｓ激酶家族（ＪＡＫｓ）与许多细胞因子受体的信号传导系统有关。ＪＡＫ３是ＪＡＫｓ激酶家族的新成员，其在自然... 目的：ＩＬ７可刺激一些良性和恶性淋巴细胞增生，其中包括来自皮肤样Ｔ细胞瘤（ＣＴＣＬ）病人的肿瘤细胞。Ｊａｎｕｓ激酶家族（ＪＡＫｓ）与许多细胞因子受体的信号传导系统有关。ＪＡＫ３是ＪＡＫｓ激酶家族的新成员，其在自然杀伤细胞（ＮＫ）和活化的Ｔ细胞上表达，并在这些细胞中从功能上和物理上与白细胞介素２受体（ＩＬ２Ｒ）结合起来。为此，本研究进一步探讨白细胞介素７（ＩＬ７）引起皮肤样Ｔ细胞瘤肿瘤细胞ＪＡＫ３的磷酸化和活化。方法：ＣＴＣＬ外周血中分离的肿瘤细胞，用ＩＬ７分别处理１、５、１０、２０ｍｉｎ，蛋白裂解物用抗ＪＡＫ３抗体，抗ｐ５９ｆｙｎ抗体进行免疫沉淀，用抗ＪＡＫ３和抗磷酸化酪氨酸作Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹检测。结果：ＩＬ７能引起ＣＴＣＬ肿瘤细胞的ＪＡＫ３酪氨酸磷酸化，抗ｐ５９ｆｙｎ抗体能结合ＪＡＫ３，未发现ＩＬ１２能诱导ＣＴＣＬ细胞的ＪＡＫ３磷酸化。结论：提示ＩＬ７可能在ＣＴＣＬ的病理生理学上起一定的作用，且证实在ＣＴＣＬ细胞中ＩＬ７受体介导了酪氨酸磷酸化的信号传导途径。 展开更多

关键词 信号传导 皮肤肿瘤 CTCL il-7 JAK-3 磷酸化

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TCDD诱导的腭裂小鼠腭突Wnt5a与IL-10的表达变化研究

7

作者 张伟 王卓 张治鑫 《国际免疫学杂志》 CAS 2022年第4期357-362,共6页

目的研究Wnt5a与白细胞介素(interleukin,IL)-10的表达在2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致胎鼠腭裂中的作用。方法24只C57BL/6J怀孕小鼠随机分为TCDD实验组和玉米油对照组,每组12只。在胚胎形成的... 目的研究Wnt5a与白细胞介素(interleukin,IL)-10的表达在2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)致胎鼠腭裂中的作用。方法24只C57BL/6J怀孕小鼠随机分为TCDD实验组和玉米油对照组,每组12只。在胚胎形成的10.5天(E10.5),TCDD组通过口饲灌胃方式一次性给予孕鼠64μg/kg的TCDD(溶于总量为0.2 mL的玉米油中),对照组通过口饲灌胃方式给予等量玉米油。分别获取E13.5,E14.5和E15.5的胎鼠腭突组织,石蜡切片,HE染色,光镜观察腭突组织融合情况;Western-blot检测腭突组织中Wnt5a和IL-10的蛋白表达。结果HE染色观察到腭突组织未融合则证明腭裂小鼠建模成功。在E13.5天,E14.5天和E15.5天,与对照组相比TCDD组胎鼠出现腭突发育迟缓,腭裂形成。在各时间点,TCDD组Wnt5a相对表达量较对照组显著减少[(0.37±0.05)比(0.47±0.07),(0.32±0.07)比(0.39±0.05),(0.27±0.06)比(0.33±0.04),P值分别为0.005,0.042,0.046];IL-10相对表达量较对照组显著增加[(0.24±0.02)比(0.15±0.01);(0.29±0.03)比(0.25±0.04);(0.90±0.20)比(0.54±0.12),P值分别为0.000,0.043,0.011],且随着时间推移Wnt5a和IL-10呈现出明显的时序性减少(F=4.65,P=0.025)和增加(F=53.01,P=0.000)。结论Wnt5a和IL-10在TCDD诱导胎鼠腭裂的形成过程中具有重要作用。 展开更多

关键词 WNT5A 白细胞介素-10 2 3 7 8-四氯二苯并二噁英 腭裂

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痛风性关节炎发病的炎性机制研究进展 被引量：39

8

作者 潘显阳(综述) 陶金辉 李向培(审校) 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第7期1167-1171,共5页

该文综述了导致痛风性关节炎发病的多种炎症细胞与细胞因子之间的关联、toll样受体介导的信号通路、ATP-P2X7R通路、NALP3炎性小体等在急性痛风性关节炎发病过程中的重要作用,急性炎症缓解的分子机制及秋水仙碱抑制炎症信号通路的新机制... 该文综述了导致痛风性关节炎发病的多种炎症细胞与细胞因子之间的关联、toll样受体介导的信号通路、ATP-P2X7R通路、NALP3炎性小体等在急性痛风性关节炎发病过程中的重要作用,急性炎症缓解的分子机制及秋水仙碱抑制炎症信号通路的新机制,为未来治疗急性痛风性关节炎提供了新依据。 展开更多

关键词 痛风 MSU il-1β 炎症细胞 NALP3炎性小体 ATP-P2X7R通路

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微生物来源白细胞介素1受体拮抗剂的研究 Ⅱ.链霉菌660代谢产物的化学研究 被引量：6

9

作者 杜康平 姜蓉 +2 位作者 李宝义 吴剑波 李元 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期410-413,共4页

从活性链霉菌 6 6 0的发酵液中 ,经溶媒萃取 ,硅胶制备薄层层析及 ODS等分离得到化合物 4和化合物 6 ,通过理化性质研究和 UV、IR、MS、1 H- NMR、1 3 C- NMR、DEPT、1 H- 1 H COSY、1 H- 1 3 C COSY、HMBC等光谱分析确定化合物 4为 N-... 从活性链霉菌 6 6 0的发酵液中 ,经溶媒萃取 ,硅胶制备薄层层析及 ODS等分离得到化合物 4和化合物 6 ,通过理化性质研究和 UV、IR、MS、1 H- NMR、1 3 C- NMR、DEPT、1 H- 1 H COSY、1 H- 1 3 C COSY、HMBC等光谱分析确定化合物 4为 N-乙酰基酪胺 (N- acetyltyramine) ,化合物 6为 3-丙基 - 7-甲基 -六氢吡咯 [1,2 - a]并吡嗪 - 1,4-二酮 (3- propyl- 7- methyl- hexahydropyrrolo[1,2 - a]pyrazine- 1,4- dione)。 展开更多

关键词 白细胞介素1受体拮抗剂 链霉菌660 N-乙酰基酪胺 3-丙基-7-甲基-六氢吡咯[1 2-a]并吡嗪-1 4-二酮 微生物来源抗菌素

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基于PKCθ/STAT3信号通路探讨虎杖苷抑制溃疡性结肠炎小鼠Th17细胞的效应 被引量：7

10

作者 刘佳静 李秋逸 +4 位作者 马沛广 洪雁飞 葛东宇 彭桂英 李军祥 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第17期40-45,共6页

目的:探讨虎杖苷对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用,并通过其调控蛋白激酶Cθ(PKCθ)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路信号对辅助性T细胞17(Th17)细胞效应的抑制作用探讨其治疗UC的作用机制。方法:32只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常... 目的:探讨虎杖苷对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用,并通过其调控蛋白激酶Cθ(PKCθ)/信号转导与转录激活因子3(STAT3)通路信号对辅助性T细胞17(Th17)细胞效应的抑制作用探讨其治疗UC的作用机制。方法:32只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、虎杖苷组(0.045 g·kg^(-1))及柳氮磺吡啶组(0.5 g·kg^(-1))。采用3%葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液给与小鼠自由饮水构建UC模型,虎杖苷和柳氮磺吡啶组于造模前0.5 h灌胃给药,连续7 d,正常组及模型组给予等体积生理盐水灌胃。末次给药后取结肠组织,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理变化,流式细胞术检测结肠黏膜固有层中Th17比例,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-17A(IL^(-1)7A)的表达。磁珠分选提取C57BL/6小鼠脾脏CD4+T细胞进行体外培养,加入细胞刺激合剂刺激并随机分为正常组、模型组、虎杖苷低、高剂量组。流式细胞术检测虎杖苷对Th17效应的影响及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测磷酸化PKCθ和STAT3的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠体质量明显下降、疾病活动指数(DAI)评分显著升高(P<0.01),结肠黏膜上皮破损并可见黏膜及黏膜下层炎细胞浸润明显,结肠黏膜固有层中Th17的比例显著升高(P<0.01),血清IL^(-1)7A的含量显著增加(P<0.01);与模型组比较,虎杖苷和柳氮磺吡啶组体质量及DAI评分均有显著的改善(P<0.01),结肠组织损伤程度明显改善,结肠黏膜固有层中Th17的比例显著下降(P<0.01),血清中IL^(-1)7A的含量显著下降(P<0.01)。体外实验显示,与正常组比较,模型组Th17细胞比例显著增加(P<0.01),PKCθ和STAT3的磷酸化水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,虎杖苷组Th17细胞比例显著下降(P<0.01),PKCθ和STAT3的磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结论:虎杖苷能够抑制PKCθ以及STAT3的磷酸化表达,进而抑制Th17细胞分泌IL^(-1)7A,改善肠黏膜炎性 展开更多

关键词 虎杖苷 溃疡性结肠炎 蛋白激酶Cθ(PKCθ) 信号传导与转录激活因子3(STAT3) 辅助性T细胞17(Th17) 白细胞介素-17A(il^(-1)7A)

原文传递

HBV相关原发性肝癌患者血清B7-H3与IL-21的表达及其临床意义 被引量：7

11

作者 李成德 全毅 +5 位作者 蔡健梅 吴小文 申学基 阮德斌 张琳 李海珠 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期569-575,共7页

目的:探讨血清B7-H3与IL-21在HBV相关原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法:收集HBV相关肝病121例,其中原发性肝癌50例作为肝癌组,良性组71例包括急性肝炎12例、慢性中至重度肝炎21例,肝硬化代偿期20例,肝硬化失代偿期18例;同期20例... 目的:探讨血清B7-H3与IL-21在HBV相关原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法:收集HBV相关肝病121例,其中原发性肝癌50例作为肝癌组,良性组71例包括急性肝炎12例、慢性中至重度肝炎21例,肝硬化代偿期20例,肝硬化失代偿期18例;同期20例体检健康人员作为正常组。B7-H3和IL-21采用ELISA法检测,HBV-DNA定量运用实时荧光PCR检测。结果:肝癌患者血清B7-H3和IL-21含量分别为(207.60±57.16)ng/ml和(2 357.28±805.01)pg/ml,均高于正常组(P<0.001)。相对正常对照而言,良性组中不同临床类型患者二者含量均升高明显(P<0.001)。在HBV相关肝病患者血清中,B7-H3与IL-21呈正相关;B7-H3与HBV DNA无相关性,而IL-21与HBV DNA是否复制有关,但与其复制水平高低无关。结论:B7-H3、IL-21在HBV相关肝癌患者血清中表达水平高。机体B7-H3、IL-21持续地高表达可能与患者疾病的发展、预后有关。 展开更多

关键词 原发性肝癌 肝炎 乙型 可溶型B7-H3 il-21

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IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的增殖及体外抗肿瘤活性

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作者 龚福生 陈珊珊 +1 位作者 郑秋红 刘沁颖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期951-956,共6页

目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体... 目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,以293T细胞包装相应的慢病毒载体后,感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞(NT)组、GPC3-BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平,qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 m RNA的表达水平,细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力,ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析(RTCA)技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果:成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA(P<0.01),其表现出更强的增殖能力(P<0.05)。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后,分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。RTCA结果显示,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞(P<0.05)。结论:成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞,IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性,在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。 展开更多

关键词 肝细胞癌 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 CAR-T细胞 il-7 诱导表达

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miR-153-3p靶向KLF7基因调控IL-6/STAT3通路抑制食管癌细胞的增殖和转移的机制研究 被引量：2

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作者 赵亚培 张向苗 王秋冬 《实用癌症杂志》 2023年第5期708-712,共5页

目的探讨miR-153-3p对食管癌细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-153-3p和Kruppel样因子7(KLF7)mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测KLF7、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、信... 目的探讨miR-153-3p对食管癌细胞增殖和转移的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-153-3p和Kruppel样因子7(KLF7)mRNA表达水平;蛋白质印迹(Western Blot)法检测KLF7、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)、信号转导与转录激活因子3(STAT3)的表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;ELISA检测白细胞介素(IL-6)的表达;双荧光素酶报告基因检测KLF7和miR-153-3p的靶向。结果与正常食管上皮细胞HEEC相比,食管癌细胞EC9706、Eca-109、EC-1、TE-1中KLF7表达水平升高,miR-153-3p表达水平下降。过表达miR-153-3p和沉默KLF7可降低细胞活性和迁移、侵袭数量,降低p-STAT3表达水平,抑制IL-6的分泌。miR-153-3p靶向KLF7,上调KLF7能部分恢复miR-153-3p对EC9706细胞增殖、迁移、侵袭的作用。结论上调miR-153-3p可以靶向KLF7参与调节IL-6/STAT3通路抑制食管癌细胞增殖和转移。 展开更多

关键词 miR-153-3p KLF7 il-6/STAT3通路 食管癌 增殖 迁移 侵袭

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胆固醇敏感器SCAP功能失调通过上调P2X7受体表达促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化 被引量：3

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作者 伍莎莎 欧阳南 +1 位作者 何泉 周超 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第13期1327-1332,共6页

目的探讨胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化及IL-1β成熟的分子机制。方法采用基因转染方法在THP-1源性... 目的探讨胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白(sterol regulatory element binding proteins cleavage-activating protein,SCAP)功能失调促进THP-1源性巨噬细胞炎症小体活化及IL-1β成熟的分子机制。方法采用基因转染方法在THP-1源性巨噬细胞中过表达SCAP,结合使用P2X7受体(P2X7 receptor,P2X7R)激动剂ATP(5 mmol/L)或抑制剂A438079(100μmol/L)处理THP-1源性巨噬细胞,将细胞分为:(1)对照组、(2)ATP处理组、(3)A438079处理组、(4)ATP+A438079组、(5)过表达SCAP组、(6)过表达SCAP+ATP组、(7)过表达SCAP+A438079组、(8)过表达SCAP+ATP+A438079组。RTPCR检测过表达SCAP以及激动或抑制P2X7R对P2X7R、pro-IL-1β、NLRP3、pro-caspase-1基因表达水平的影响。流式细胞术检测细胞表面P2X7R的表达。Western blot检测SCAP、pro-IL-1β、NLRP3、caspase-1(p20)以及培养上清中IL-1β的蛋白水平。同一实验在细胞水平重复4次。结果 (1)过表达SCAP组与对照组比较,其pro-IL-1β、P2X7R基因表达水平显著升高(P<0.01),细胞表面P2X7R表达明显上调。(2)P2X7R激动剂ATP与抑制剂A438079对THP-1源性巨噬细胞SCAP及P2X7R m RNA表达无影响(P>0.05)。P2X7R激动剂ATP能够显著促进THP-1源性巨噬细胞pro-IL-1βm RNA表达(P<0.05),在过表达SCAP基础上激动P2X7R能够进一步激活pro-IL-1β基因转录(P<0.01),同时显著促进细胞内pro-IL-1β剪切成熟并向细胞外分泌(P<0.01),抑制P2X7R活性并不影响过表达SCAP致pro-IL-1β表达上调的作用,但将减少上清中成熟IL-1β的含量。过表达SCAP并不影响NLRP3及caspase-1表达(P>0.05),但在过表达SCAP基础上充分激动P2X7R将显著上调NLRP3及caspase-1基因及蛋白水平(P<0.01),上述变化能够被P2X7R抑制剂A438079抵消。结论胆固醇敏感器SCAP功能失调能够促进THP-1源性巨噬细胞内pro-IL-1β表达,同时通过上调细胞表面P2X7R表达激活NLRP3炎症小体,促进pro-IL-1β成熟及其向细胞外分泌。 展开更多

关键词 胆固醇调节原件结合蛋白裂解激活蛋白 il-1Β 炎症 P2X7R NLRP3炎症小体

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8-溴-7-甲氧基白杨素抑制小细胞肺癌细胞上皮-间充质转化作用及其机制探讨 被引量：3

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作者 唐甜 安东建 +1 位作者 曹建国 胡锦跃 《中南药学》 CAS 2017年第3期272-276,共5页

目的探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(Br MCh R)抑制人小细胞肺癌细胞(NCI-H446细胞)中上皮-间充质转化(EMT)的作用机制,为寻找特异性阻断人小细胞肺癌的新型靶向治疗药物提供实验依据。方法 (1)体外培养NCI-H446细胞,倒置相差显微镜观察NCI-H... 目的探讨8-溴-7-甲氧基白杨素(Br MCh R)抑制人小细胞肺癌细胞(NCI-H446细胞)中上皮-间充质转化(EMT)的作用机制,为寻找特异性阻断人小细胞肺癌的新型靶向治疗药物提供实验依据。方法 (1)体外培养NCI-H446细胞,倒置相差显微镜观察NCI-H446细胞形态;(2)细胞因子IL-6(0、0.5、1.0、5.0、10、20 ng·m L^(-1))诱导NCI-H446细胞发生EMT改变;(3)Western blot检测不同浓度Br MCh R(0、0.5、1.0、5.0μmol·m L^(-1))对STAT3、p-STAT3、E-cadherin、N-cadherin蛋白表达。结果(1)IL-6诱导NCI-H446细胞发生EMT,形成伪足,从椭圆形或圆形上皮细胞形态转变成梭形、多边形。p-STAT3蛋白表达升高、E-cadherin蛋白表达降低、N-cadherin蛋白表达增高。(2)Br MCh R降低STAT3、p-STAT3、N-cadherin蛋白表达,升高E-cadherin蛋白表达。结论 Br MCh R能通过抑制IL-6/STAT3信号通路阻断EMT发生,其作用机制可能与降低STAT3、p-STAT3、N-cadherin蛋白表达、升高E-cadherin蛋白表达有关。 展开更多

关键词 8-溴-7-甲氧基白杨素 il-6/STAT3信号通路 上皮-间充质转化 小细胞肺癌

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一种新型多环螺环氧化吲哚类化合物对肺癌细胞系的生长抑制作用及其机制 被引量：1

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作者 周巧巧 张彬 +2 位作者 匡政坤 周诗毅 谭芬 《中国现代应用药学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1720-1727,共8页

目的探究一种新型多环螺环氧化吲哚化合物对肺细胞系生长抑制的作用与机制。方法首先通过MTT试验、流式细胞技术与细胞划痕试验检测化合物对肺癌细胞系的增殖、细胞凋亡以及细胞迁移的影响。接着通过PharmMapper平台预测其靶标蛋白,通过... 目的探究一种新型多环螺环氧化吲哚化合物对肺细胞系生长抑制的作用与机制。方法首先通过MTT试验、流式细胞技术与细胞划痕试验检测化合物对肺癌细胞系的增殖、细胞凋亡以及细胞迁移的影响。接着通过PharmMapper平台预测其靶标蛋白,通过GEPIA平台预测与该靶蛋白具有较强相关性的蛋白,最后分别通过双荧光素酶报告基因试验,qPCR试验以及免疫印迹试验,在启动子水平、转录水平和表达水平检测化合物对目的基因的影响。结果实验结果表明化合物能够显著抑制SKLU1细胞系的增殖,IC_(50)值为11.38μmol·L^(–1),化合物浓度>2.85μmol·L^(–1)即能够抑制SKLU1的细胞迁移,浓度>5.69μmol·L^(–1)能够诱导细胞凋亡。其分子机理可能是通过靶向RhoGEF7蛋白,下调下游的Rac1蛋白表达量,从而下调E-cadherin蛋白表达量,抑制细胞迁移;并且,下调的Rac1蛋白还能抑制NF-κB的激活,下调下游基因IL-6和IL-8的转录;下调的Rac1蛋白还能抑制IL-6/JAK/STAT3通路。结论本研究为这种新型多环螺环氧化吲哚化合物靶向肺癌细胞的分子机制提供理论依据。 展开更多

关键词 多环螺环氧化吲哚 SKLU1 RhoGEF7 il-6/JAK/STAT3 NF-ΚB激活

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羊种布鲁杆菌介导的mmu-miR-149-3p靶基因的初步鉴定 被引量：1

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作者 焦寒伟 周志雄 +11 位作者 李文杰 顾国婧 李博文 赵宇 刘煜萱 王怡丹 王兴龙 陈吉轩 帅学宏 黄庆洲 罗艺晨 伍莉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2164-2168,2175,共6页

布鲁杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke... 布鲁杆菌病是由布氏杆菌(Brucella)引起的一种急性或慢性人兽共患传染病,在我国,羊种布鲁杆菌(Brucella melitensis,B.melitensis)最为流行。前期研究发现,mmu-miR-149-3p的潜在靶基因有10个,分别为:Bcl6b、Nos2、Slc7a11、Olr1、Ikbke、Slc31a2、IL1rl1、Dusp16、Ifit1和Rhoc。本试验通过X-treme Gene高效转染试剂,分别将5,50和100 nmol/L,Cy3标记的mimics转染至RAW264.7细胞24 h后,流式细胞仪分析,筛选出最佳转染mimics的浓度;并将mmu-miR-149-3p mimics与mmu-miR-NC mimics,按照最佳转染浓度,转染至RAW264.7细胞24 h后,加入TRIzol裂解细胞,提取总RNA,转录组获得cDNA;利用NCBI primer设计mmu-miR-149-3p的10个潜在靶基因的特异性引物,运用qRT-PCR方法,进行验证试验。结果发现,转染Cy3标记的mimics最佳浓度为100 nmol/L,其阳性率为49.94%,平均荧光强度为18.74;与mmu-miR-NC mimics转染组相比,在mmu-miR-149-3p mimics转染组中,Olr1、Slc7a11和IL1rl1的相对表达量显著降低。结果初步表明,mmu-miR-149-3p的靶基因为Olr1、Slc7a11和IL1rl1。这为揭示mmu-miR-149-3p在B.melitensis侵染巨噬细胞过程中的功能奠定了基础,还为进一步阐释B.melitensis的感染机制以及防控布病提供了参考。 展开更多

关键词 羊种布鲁杆菌 mmu-miR-149-3p Olr1 Slc7a11 il1rl1

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沉默SMAD 家族成员3( SMAD3) 促进类风湿性关节炎巨噬细胞M2 极化和SMAD7 表达

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作者 费陈晨 谌曦 +8 位作者 万磊 范海霞 刘天阳 李明 刘磊 葛瑶 王晴晴 范文杰 周倩 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期904-909,共6页

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默SMAD家族成员3(SMAD3)对类风湿性关节炎(RA)巨噬细胞极化及转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD家族信号通路的影响。方法以巨噬细胞与类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)共培养为细胞模型,TGF-β1刺激... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默SMAD家族成员3(SMAD3)对类风湿性关节炎(RA)巨噬细胞极化及转化生长因子β1(TGF-β1)/SMAD家族信号通路的影响。方法以巨噬细胞与类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞(RA-FLS)共培养为细胞模型,TGF-β1刺激巨噬细胞后,将SMAD3特异性siRNA(si-SMAD3)和阴性对照siRNA(si-NC)转染TranswellTM小室共培养的人RA巨噬细胞,实时荧光定量PCR检测SMAD3 mRNA表达,Western blot法分别检测TGF-β1、SMAD3和SMAD7蛋白的表达;ELISA测定细胞培养上清液中TGF-β1、白细胞介素23(IL-23)的含量;CCK-8法检测细胞增殖情况;TranswellTM小室测定细胞的迁移。结果与模型组和si-NC组相比,沉默SMAD3后,RA巨噬细胞中TGF-β1、SMAD3 mRNA和蛋白表达显著下降,IL-23的分泌明显减少,细胞增殖活性及细胞迁移受到抑制,SMAD7高表达。结论敲低SMAD3促进RA巨噬细胞M2极化及SMAD7表达。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎(RA) SMAD家族成员3(SMAD3) SMAD7 巨噬细胞极化 白细胞介素23(il-23) 转化生长因子β1(TGF-β1)

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异烟肼对大鼠免疫功能影响的研究

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作者 曹汴川 黄喆 +5 位作者 黎秋菊 黄秀芳 朱义红 肖科 黄富礼 钟利 《药物评价研究》 CAS 2017年第8期1094-1097,共4页

目的研究异烟肼对大鼠淋巴细胞因子表达和巨噬细胞功能的影响。方法健康雄性SD大鼠,随机分为喂药1个月组、喂药3个月组、停药1个月(喂药3个月后)组,每组再随机等分为异烟肼组和对照组。异烟肼组给以120 mg/kg异烟肼,隔日1次ig给药,对照... 目的研究异烟肼对大鼠淋巴细胞因子表达和巨噬细胞功能的影响。方法健康雄性SD大鼠,随机分为喂药1个月组、喂药3个月组、停药1个月(喂药3个月后)组,每组再随机等分为异烟肼组和对照组。异烟肼组给以120 mg/kg异烟肼,隔日1次ig给药,对照组给予生理盐水。于相应时间点,ELISA法检测血清白细胞介素-12(IL-12)、干扰素-γ(IFN-γ)水平;琼脂平板法检测大鼠血清溶菌酶含量;硝酸铅(Comori)法检测腹腔液酸性磷酸酶水平。结果在各时间点,异烟肼组IL-12、IFN-γ、溶菌酶水平与对照组比较,差异均不显著;喂药1个月,与对照组比较,异烟肼组酸性磷酸酶水平显著升高(P<0.05);喂药3个月、停药1个月,两组酸性磷酸酶水平差异不显著。结论 120 mg/kg异烟肼对大鼠免疫功能无明显影响,长期应用不会导致免疫功能的损伤。 展开更多

关键词 异烟肼 结核病 淋巴细胞因子 白细胞介素-12(il-12) 干扰素-γ(IFN-γ) 巨噬细胞 溶菌酶 酸性磷酸酶

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共刺激因子B_7和LFA_3对人外周T细胞增殖和IL-2产生的效应

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作者 余海 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期76-79,共4页

目的观察不同的共刺激因子在抗原提呈细胞存在的情况下，对人外周Ｔ细胞的增殖反应及ＩＬ┐２产生的作用。方法用选择性淘洗法纯化人外周Ｔ细胞，以葡萄球菌肠毒素Ａ（ＳＥＡ）为抗原，在体外培养的纯化Ｔ细胞中（１０６／ｍｌ）加入１... 目的观察不同的共刺激因子在抗原提呈细胞存在的情况下，对人外周Ｔ细胞的增殖反应及ＩＬ┐２产生的作用。方法用选择性淘洗法纯化人外周Ｔ细胞，以葡萄球菌肠毒素Ａ（ＳＥＡ）为抗原，在体外培养的纯化Ｔ细胞中（１０６／ｍｌ）加入１０５／ｍｌ用ＨＬＡ┐ＤＲ４，Ｂ７，和ＬＦＡ３单独、双重或三重转染的人仓鼠卵巢细胞（ＣＨＯ）作为抗原提呈细胞（分别用ＣＨＯ┐ＤＲ４，ＣＨＯ┐ＤＲ４／ＬＦＡ３，ＣＨＯ┐ＤＲ４／Ｂ７，ＣＨＯ┐ＤＲ４／ＬＦＡ３／Ｂ７表示）。在体外培养后，用３Ｈ┐ＴｄＲ掺入法观察Ｔ细胞的增殖，用ＥＬＩＳＡ法测定培养上清液中的ＩＬ┐２含量。结果在无共刺激因子存在的情况下（Ｔ细胞＋ＣＨＯ┐ＤＲ４＋ＳＥＡ）Ｔ细胞增殖率低，上清液中几乎测不到ＩＬ┐２；在有ＬＦＡ３存在时（ＣＨＯ┐ＤＲ４／ＬＦＡ３）Ｔ细胞增殖率增加，但产生的ＩＬ┐２很少；Ｂ７（ＣＨＯ┐ＤＲ４／Ｂ７）明显提高Ｔ细胞的增殖率，并刺激产生大量ＩＬ┐２；ＬＦＡ３和Ｂ７同时存在的情况下（ＣＨＯ┐ＤＲ４／ＬＦＡ３／Ｂ７）Ｔ细胞增殖速率最高，并能协同增加ＩＬ┐２的产生。结论Ｔ细胞的活化除第一信号外还需有共刺激因子（第二信号）的存在，共刺激因子ＬＦＡ３和Ｂ７对Ｔ细胞活化的效应不同? 展开更多

关键词 外周 T细胞 增殖 il-2 共刺激因子

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