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缺氧诱导因子1α对缺氧条件下大鼠心肌细胞糖酵解的影响 被引量：11
1
作者 党永明 黄跃生 +3 位作者 周军利 张家平 颜洪 张铭 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期339-342,共4页
目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对缺氧状态下大鼠心肌细胞糖酵解的影响。方法常规分离、培养大鼠心肌细胞,分为单纯缺氧组:使用无糖培养基在低氧混合气体(体积分数94%N2、5%CO2、1%O2)中培养;HIF-1α抑制组:先利用RNA干扰技术构建HI... 目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对缺氧状态下大鼠心肌细胞糖酵解的影响。方法常规分离、培养大鼠心肌细胞,分为单纯缺氧组:使用无糖培养基在低氧混合气体(体积分数94%N2、5%CO2、1%O2)中培养;HIF-1α抑制组:先利用RNA干扰技术构建HIF-1α蛋白低表达的细胞模型,再作上述缺氧培养。两组细胞均设缺氧前(常规培养)及缺氧1、3、6、12、24h6个时相点,采用生物化学方法检测细胞中糖酵解关键酶己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶(PFK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及培养上清液中乳酸(LA)的含量。结果(1)HK、PFK活性:与缺氧前比较,两组心肌细胞两酶活性均呈先升高后下降的变化趋势。单纯缺氧组两酶活性峰值分别为(159±13)、(298±44)U/g.HIF-1α抑制组两酶活性在缺氧1、3、6h时均明显低于单纯缺氧组(P<0.05或0.01),其峰值分别为(133±55)、(188±55)U/g.(2)LDH活性、LA含量:与缺氧前(92±12)U/g比较,单纯缺氧组细胞LDH活性缺氧后显著升高,6h时达高峰(2568±125)U/g(P<0.01),随后逐渐下降;各时相点培养上清液中LA含量也成倍增加。HIF-1α抑制组细胞的LDH活性于缺氧3h时达峰值(2125±126)U/g,明显高于缺氧前(P<0.01);培养上清液中LA含量亦较缺氧前增高(P<0.01),但增幅较小。结论缺氧条件下大鼠心肌细胞中HIF-1α高表达是细胞糖酵解持续增强的直接原因,此为心肌细胞应对缺氧环境的重要内源性保护机制。 展开更多
关键词 缺氧 心肌 糖酵解 RNA干扰 缺氧诱导因子1α
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大鼠重度烫伤后早期心肌组织内缺氧诱导因子-1α表达的变化 被引量：5
2
作者 党永明 黄跃生 陈丽峰 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2003年第5期263-266,共4页
目的　观察烫伤大鼠伤后早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨其意义。　方法　制作 4 0 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,设正常对照组及伤后不同时相组。取心脏解剖左、右心室 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT P... 目的　观察烫伤大鼠伤后早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)mRNA和蛋白的表达变化 ,探讨其意义。　方法　制作 4 0 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,设正常对照组及伤后不同时相组。取心脏解剖左、右心室 ,采用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达 ,采用蛋白免疫印迹法测定其蛋白水平的变化。　结果　正常大鼠左、右心室肌HIF 1αmRNA、蛋白表达结果有所不同。大鼠烫伤后 ,心肌组织内HIF 1αmRNA水平、蛋白表达量明显升高 (P <0.0 1)。结论　正常状态下 ,大鼠左心室肌对缺血缺氧耐受能力较右心室肌强。严重烫伤可以诱导大鼠心肌细胞HIF 1α表达增加 。 展开更多
关键词 大鼠 重度烫伤 早期 心肌组织 缺氧诱导因子-1α MRNA表达 蛋白表达
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人参皂苷Rg3对常氧和缺氧条件下Eca-109和786-0细胞VEGF、HIF-1α和COX-2表达的影响 被引量：6
3
作者 陈清江 张明智 张军辉 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2011年第1期63-67,共5页
目的:探讨人参皂苷Rg3对常氧和缺氧条件下Eca-109和786-0细胞血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法:Eca-109和786-0细胞分别于常氧和缺氧条件下培养,并分别给予不同浓度的Rg3处理。采... 目的:探讨人参皂苷Rg3对常氧和缺氧条件下Eca-109和786-0细胞血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和环氧合酶-2(COX-2)表达的影响。方法:Eca-109和786-0细胞分别于常氧和缺氧条件下培养,并分别给予不同浓度的Rg3处理。采用MTT法检测Rg3对2种细胞增殖的影响,Real-timePCR检测2种细胞VEGF和HIF-1αmRNA的表达,ELISA法检测2种细胞VEGF蛋白的表达,Westernblot检测2种细胞HIF-1α和COX-2蛋白的表达。结果:在常氧或缺氧环境中,Rg3均能抑制Eca-109和786-0细胞增殖;抑制2种细胞VEGFmRNA和蛋白的表达及COX-2蛋白的表达,同时抑制HIF-1αmRNA的表达,其作用呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:Rg3抑制常氧和缺氧状态下Eca-109和786-0细胞的增殖,其机制可能与其抑制HIF-1α和COX-2的表达,从而抑制VEGF的表达有关。 展开更多
关键词 人参皂苷RG3 血管内皮生长因子 缺氧诱导因子-1α 环氧合酶-2 ECA-109细胞 786-0细胞
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益阴降糖1号方治疗气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病临床研究 被引量：5
4
作者 李玉平 刘佰洁 陈洪学 《中医学报》 CAS 2017年第9期1625-1629,共5页
目的:观察自拟益阴降糖1号方辨治气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病的临床疗效。方法:106例气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病患者按照随机数字表法分为对照组和观察组各53例。对照组患者给予厄贝沙坦片口服,观察组患者给予自拟益阴降糖1号... 目的:观察自拟益阴降糖1号方辨治气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病的临床疗效。方法:106例气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病患者按照随机数字表法分为对照组和观察组各53例。对照组患者给予厄贝沙坦片口服,观察组患者给予自拟益阴降糖1号方,15 d为1个疗程,两组均连续治疗4个疗程。比较两组患者临床疗效,检测治疗前后糖脂代谢、血液流变、肾功能指标,监测治疗前后患者血清γ-谷氨酰转肽酶(gamma glutamyl transpeptidase,GGT)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induced factor-1α,HIF-1α)水平。结果:观察组有效率为94.3%,对照组有效率为79.2%,两组比较,差异有统计学意义(χ2=5.267,P<0.05)。治疗后,观察组患者糖脂代谢、血液流变、肾功能指标与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组患者GGT、VEGF、HIF-1α水平分别为(24.60±17.42)IU·L^(-1)、(126.45±23.74)ng·L^(-1)、(135.35±13.17)pg·L^(-1),对照组分别为(31.26±19.33)IU·L^(-1)、(182.34±25.15)ng·L^(-1)、(187.62±16.32)pg·L^(-1),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组肾功能各指标均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组血液流变学各指标均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:自拟益阴降糖1号方辨治气阴两虚、瘀血内阻型糖尿病肾病疗效满意,可显著降低患者血糖水平,调节脂质代谢,改善肾功能,其机制可能为调节血液流变学指标及GGT、VEGF、HIF-1α水平以改善肾脏微循环、调节内皮功能、减轻氧化应激损伤、降低炎性反应。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 气阴两虚、瘀血内阻证 益阴降糖1号方 肾功能 血液流变学 Γ-谷氨酰转肽酶 血管内皮生长因子 缺氧诱导因子-1α 中医疗法
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体外培养大鼠视网膜神经节细胞缺氧条件下HIF-1α动态表达及意义 被引量：4
5
作者 陈鹏 贺翔鸽 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第15期1381-1383,共3页
目的探讨体外培养Long Evans大鼠视网膜神经节细胞缺氧条件下缺氧诱导因子1α(hypoxia induction factor 1α,HIF-1α)表达变化及损伤机制。方法正常对照组视网膜神经节细胞在常规条件下、缺氧组在1%氧浓度下分别培养1、3、12、24h。采... 目的探讨体外培养Long Evans大鼠视网膜神经节细胞缺氧条件下缺氧诱导因子1α(hypoxia induction factor 1α,HIF-1α)表达变化及损伤机制。方法正常对照组视网膜神经节细胞在常规条件下、缺氧组在1%氧浓度下分别培养1、3、12、24h。采用RT-PCR法检测神经节细胞HIF-1αmRNA水平,蛋白质免疫印迹法测定HIF-1α蛋白水平表达,免疫荧光法进行HIF-1α细胞内定位检测,分别采用黄嘌呤氧化酶法、硫代戊巴比妥酸法、酶标双抗夹心免疫吸附法ELISA方法测定培养液SOD活性、MDA含量及TNF-α水平检测。结果正常对照组神经节细胞未见HIF-1αmRNA及蛋白表达,缺氧组HIF-1αmRNA水平、蛋白表达随缺氧时间延长显著升高(P<0.01),其峰值分别在缺氧后3h和12h。免疫荧光法见缺氧组HIF-1α表达于神经节细胞胞浆。缺氧组细胞培养液SOD活性随缺氧时间时间延长显著降低,MDA含量及TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05、P<0.01)。结论体外培养视网膜神经节细胞在缺氧条件下其HIF-1αmRNA水平及蛋白表达呈上升后降低趋势,其表达变化与缺氧时培养液中脂质过氧化反应逐渐增强、抗氧化能力降低及炎性因子水平上升有关。 展开更多
关键词 神经节细胞 缺氧诱导因子-1α 超氧化物歧化酶 丙二醛 TNF-α
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超声引导椎旁神经阻滞联合全身麻醉对肾肿瘤患者围术期疼痛及血清NGF、HIF-1α水平的影响 被引量：3
6
作者 张慧玲 朱爱 +2 位作者 郭岩松 王明丽 徐倩 《临床和实验医学杂志》 2023年第16期1787-1791,共5页
目的研究超声引导椎旁神经阻滞联合全身麻醉对肾肿瘤患者围术期疼痛及血清神经生长因子(NGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平的影响。方法前瞻性选取2020年12月至2023年2月在沧州市人民医院行肾肿瘤手术患者100例,根据随机数字表法将患... 目的研究超声引导椎旁神经阻滞联合全身麻醉对肾肿瘤患者围术期疼痛及血清神经生长因子(NGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)水平的影响。方法前瞻性选取2020年12月至2023年2月在沧州市人民医院行肾肿瘤手术患者100例,根据随机数字表法将患者分为观察组(n=52)和对照组(n=48)。对照组采用全身麻醉,观察组采用超声引导胸椎旁神经阻滞联合全身麻醉。比较两组患者术后安静时、咳嗽时视觉模拟评分法(VAS)评分、麻醉恢复情况(自主呼吸恢复时间、拔管时间、睁眼时间、定向力恢复时间)、NGF、HIF-1α、炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]及不良反应发生情况的差异。结果术后4、12、24、72 h咳嗽时、安静时,观察组患者VAS评分低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者自主呼吸恢复时间、拔管时间、定向力恢复时间以及睁眼时间短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后12 h,两组患者NGF、HIF-1α水平均较术前下降,观察组NGF水平均高于对照组,HIF-1α水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。术后3 d,两组患者IL-6、IL-10、TNF-α水平均较术前升高,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组嗜睡、皮肤瘙痒等不良反应总发生率(5.77%)低于对照组(18.75%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论超声引导椎旁神经阻滞联合全身麻醉患者能有效减轻肾肿瘤患者围术期疼痛,NGF水平更高,HIF-1α水平更低,不良反应更少。 展开更多
关键词 肾肿瘤 超声引导椎旁神经阻滞 全身麻醉 视觉模拟评分 神经生长因子 缺氧诱导因子1α
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烫伤诱导大鼠心肌细胞缺氧诱导因子-1α定位表达的研究 被引量：2
7
作者 党永明 黄跃生 陈丽峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第18期1602-1605,共4页
目的　探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法　采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HI... 目的　探讨 40 %Ⅲ度烫伤大鼠早期心肌组织中缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)的蛋白表达的变化规律及其定位分布意义。方法　采用 40 %TBSAⅢ度烫伤大鼠模型 ,蛋白免疫印迹法 (Western blot)测定HIF 1α蛋白水平表达 ,免疫组化法定位显示HIF 1α表达。结果　烫伤后大鼠心肌组织内HIF 1α蛋白表达量明显升高。左、右心室HIF 1α蛋白表达不同 ,HIF 1α蛋白表达增加主要定位于细胞核。结论　严重烧伤可以诱导心肌组织HIF 1α蛋白表达增加。左心室对照组HIF 1蛋白含量明显高于右心室。HIF 1α蛋白表达增加主要分布于心肌细胞核内 ,诱导下游因子表达。 展开更多
关键词 烧伤 心肌缺血 缺氧诱导因子—1α 免疫印迹 免疫组化
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双链小片段干扰RNA抑制缺氧条件下乳鼠心肌细胞缺氧诱导因子1α表达 被引量：2
8
作者 党永明 黄跃生 +4 位作者 杨宗城 张东霞 李晓东 张铭 陈丽峰 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2004年第5期278-280,共3页
目的　构建含缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构 ,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF 1α表达的影响。　方法　分离培养乳鼠心肌细胞 ,分为常规培养液对照组、RNA干扰 (RNAi)组 (转染无效干扰... 目的　构建含缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)小片段干扰RNA(siRNA)靶序列的U6启动子表达框结构 ,观察其对缺氧条件下乳鼠心肌细胞HIF 1α表达的影响。　方法　分离培养乳鼠心肌细胞 ,分为常规培养液对照组、RNA干扰 (RNAi)组 (转染无效干扰序列Ⅳ )、RNAi抑制组 (转染有效干扰序列并按下游引物不同分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组 )。设计、合成 3对 (Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ )含HIF 1α编码基因片段(正、反义 )和 1对 (Ⅳ )随机序列 (正、反义 )的PCR下游引物。PCR法构建U6启动子表达框及相应正、反序列表达框 ,同时转染心肌细胞。每组每时相点 5皿细胞。于缺氧 1h后 ,用蛋白免疫印迹法(Western blot)测定其蛋白水平表达 ,免疫组织化学法检验干扰效果。缺氧 6h后采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)法检测HIF 1αmRNA的表达。　 结果　筛选出的最佳抑制片段为Ⅱ组序列。缺氧 1h,对照组、RNAi组心肌细胞HIF 1α蛋白水平显著增高 ,Ⅰ、Ⅱ、ⅢRNAi抑制组HIF 1α蛋白水平较对照组明显降低 ,其中Ⅱ组降低最为显著 (P <0.0 1);缺氧 6h,RNAi组心肌细胞HIF 1αmRNA水平较常氧条件下明显增高 (P <0.0 1);RNAi抑制Ⅱ组未见明显增高 (P >0.0 5 )。　 结论　构建的HIF 1αⅡ组表达框能有效地抑制缺氧乳鼠心肌细胞HIF 展开更多
关键词 细胞低氧 缺氧诱导因子lα RNA干扰 心肌细胞 蛋白免疫印迹法
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