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缺氧及沉默缺氧诱导因子-1α对BxPC-3细胞中RUNX3基因表达的影响 被引量:7
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作者 潘定宇 刘志苏 +3 位作者 刘立 李震 孔雕雕 郭德良 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1723-1725,共3页
目的观察缺氧及应用小干扰RNA(siRNA)沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对胰腺癌细胞株BxPC-3中RUNX3基因表达的影响。方法构建人RUNX3基因真核表达载体质粒pEGFP—RUNX3,CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境,检测缺氧以及siRNA沉默HIF-1... 目的观察缺氧及应用小干扰RNA(siRNA)沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)基因对胰腺癌细胞株BxPC-3中RUNX3基因表达的影响。方法构建人RUNX3基因真核表达载体质粒pEGFP—RUNX3,CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境,检测缺氧以及siRNA沉默HIF-1α对BxPC-3细胞中RUNX3基因在mRNA和蛋白水平的影响。结果缺氧能使BxPC-3细胞中RUNX3基因的表达较常氧时显著升高[表达为(9.13±1.55),P〈0.05],siRNA转染BxPC-3细胞后能显著下调HIF-1α蛋白表达(抑制率90%),并导致RUNX3基因的表达也受到明显抑制。结论缺氧促使BxPC-3细胞中HIF-1α在蛋白水平表达升高,缺氧时HIF-1α能上调RUNX3基因的表达水平。 展开更多
关键词 RUNX3 缺氧诱导因子-1α SIRNA 胰腺癌 缺氧
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低氧诱导因子-1α沉默对膀胱癌细胞血管内皮生长因子和葡萄糖转运蛋白-1表达的影响 被引量:6
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作者 刘廷江 孙福振 +1 位作者 杨涛 刘学军 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期108-111,共4页
目的采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对膀胱癌细胞株B1U-87血管内皮生长因子(VEGF)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)表达的影响。方法体外培养人膀胱癌BIU-87细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western b... 目的采用RNA干扰技术(RNAi)技术观察低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对膀胱癌细胞株B1U-87血管内皮生长因子(VEGF)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)表达的影响。方法体外培养人膀胱癌BIU-87细胞,荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测低氧(90%氮气+5%氢气+5%二氧化碳)和常氧下HIF-1α、VEGF、GLUT-1的表达;Western blot检测HIF-1α-siRNA的转染效果及转染前后细胞VEGF、GLUT-1的表达;采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测HIF-1α-siRNA转染后的细胞增殖。结果低氧8、24h条件下,BIU-87中HIF.1仪蛋白(0.56±0.08、1.33±0.21)、VEGFmRNA(2.12±0.29、3.27±0.46)、VEGF蛋白(0.29±0.04、0.59±0.10)、GLUT-1mRNA(1.99±0.22、3.95±0.48)、GLUT-1蛋白(0.384-0.05、0.65±0.11)表达均较正常氧条件下HIF-1α蛋白(O.33±O.05)、VEGF mRNA(0.97±0.11)、VEGF蛋白(0.98±0.16)、GLUT-1 mRNA(1.05±0.12)、GLUT-1蛋白(1.46±0.24)表达显著升高(P〈0.05),而HIF-1α mRNA在低氧8、24h(1.05±0.09、0.96±O.11)与正常氧(1.16±O.13)条件下差异无统计学意义(P〉0.05);HIF-1α-siRNA转染能有效沉默HIF-1α,转染后BIU-87增殖水平(0.63±0.08)与转染前(1.12±0.17)比较明显降低(P〈0.05),转染后VEGFmr^NA(O.43±O.05)和蛋白(0.58±0.07)表达比转染前(1.08±0.12、1.19±0.17)降低(P〈0.05),GLUT-1mltNA和蛋白(0.56±0.06、0.51±0.07)表达比转染前(1.07±0.18、1.16±0.16)降低。结论低氧条件下,HIF-1α-siRNA能通过沉默HIF-1α,抑制BIU-87细胞VEGF、GLUT-l表达,从而抑制膀胱癌细胞增殖。 展开更多
关键词 低氧诱导因子-1α 膀胱肿瘤 RNA干扰 血管内皮生长因子 葡萄糖转运体-1
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缺氧应激对HepG2细胞中甲硫氨酸腺苷转移酶2A基因表达的影响 被引量:3
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作者 刘立 刘志苏 +2 位作者 刘权焰 王栋锋 张进 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期553-556,共4页
目的观察体外缺氧条件下肝癌细胞株HepG2中缺氧诱导因子-α(HIF-α)和甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)的表达,探讨HIF-α在低氧条件下对MAT2A基因表达的调控作用。方法构建人MAT2A启动子真核表达载体质粒,CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境... 目的观察体外缺氧条件下肝癌细胞株HepG2中缺氧诱导因子-α(HIF-α)和甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)的表达,探讨HIF-α在低氧条件下对MAT2A基因表达的调控作用。方法构建人MAT2A启动子真核表达载体质粒,CoCl2化学模拟肿瘤缺氧环境,检测缺氧条件下MAT2A启动子活性,HIF-α和MAT2A在HepG细胞中的共定位、mRNA和蛋白水平的表达。以及小干扰RNA(siRNA)沉默HIF-α后对MAT2A基因表达的影响。结果缺氧24h能使HepG2细胞活性增加到高峰(41.26±2.34),同时MAT2A基因的表达也较常氧时显著升高(P〈0.01),siRNA转染HepG2细胞后能显著下调HIF-α蛋白表达(抑制率90%),并导致MAT2A基因的表达也受到明显抑制。结论缺氧促使HepG2细胞中HIF-α在蛋白水平表达升高,缺氧时HIF-α能上调MAT2A基因的表达水平。 展开更多
关键词 肝细胞 缺氧诱导因子-α SIRNA
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膀胱癌组织HIF-1α与Survivin、Bcl-2表达的关系和意义
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作者 刘廷江 谷守义 王刚 《河北医药》 CAS 2013年第4期493-495,共3页
目的探讨膀胱癌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、生存素(Survivin)、Bcl-2的表达关系和临床意义。方法对68例膀胱移行细胞癌组织和20例正常膀胱组织石蜡标本进行免疫组化(SP)染色,检测HIF-1α与Survivin、Bcl-2的表达情况。结果膀胱... 目的探讨膀胱癌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、生存素(Survivin)、Bcl-2的表达关系和临床意义。方法对68例膀胱移行细胞癌组织和20例正常膀胱组织石蜡标本进行免疫组化(SP)染色,检测HIF-1α与Survivin、Bcl-2的表达情况。结果膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin、Bcl-2与正常膀胱组织相比均明显增强(P<0.05);3种蛋白质表达随病理分级、分期的升高而升高(P<0.05);复发膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin表达较初发膀胱癌组织增强(P<0.05);相关分析显示,HIF-1α与Survivin、HIF-1α与Bcl-2表达均存在正相关关系(r=0.4486,0.3428,0.2016,P<0.05)。结论 HIF-1α在膀胱癌组织中表达增强,且随肿瘤进展表达进一步升高;其机制在于HIF-1α可能通过调节Survivin、Bcl-2表达而增强膀胱癌细胞的抗凋亡能力促进膀胱癌进展。 展开更多
关键词 膀胱癌 低氧诱导因子-1α 生存素 Bcl-2 凋亡
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