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Radixin shRNA对高氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用
被引量:
1
1
作者
王龙梅
杨侠
+3 位作者
闫琳
刘廷
董晓光
徐海峰
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1089-1094,共6页
背景视网膜新生血管性疾病是多种眼科疾病的病理基础,迄今为止新生血管形成的发病机制尚不完全清楚。研究显示,视网膜新生血管形成过程中radixin表达量明显增加,因此推测在视网膜新生血管相关疾病中抑制或沉默radixin基因有望成为治...
背景视网膜新生血管性疾病是多种眼科疾病的病理基础,迄今为止新生血管形成的发病机制尚不完全清楚。研究显示,视网膜新生血管形成过程中radixin表达量明显增加,因此推测在视网膜新生血管相关疾病中抑制或沉默radixin基因有望成为治疗的新方法。目的研究radixin小发卡(shRNA)干扰质粒对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型视网膜中radixin基因表达的抑制作用,观察其对小鼠视网膜新生管形成的影响。方法将64只出生后7d的SPF级C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组,其中模型对照组、radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组小鼠在体积分数(75±2)%的氧环境中饲养5d,建立OIR动物模型,正常对照组小鼠饲养于正常氧环境下。radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组小鼠于出生后第12天分别于玻璃体腔注射1μg radixin shRNA质粒和对照shRNA质粒,小鼠出生后第17天,对各组小鼠行FD-2000S血管造影术,制备视网膜铺片,观察视网膜血管形态和分布;摘取各组小鼠眼球制备视网膜切片,采用视网膜苏木精-伊红染色法观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核和新生血管;应用免疫组织化学染色法检测radixin在视网膜中的表达分布;分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测radixin mRNA及其蛋白在视网膜组织中的表达情况。结果正常对照组小鼠视网膜铺片显示视网膜血管走行正常,模型对照组小鼠视网膜后极部大片状无灌注区,可见大血管迂曲和血管壁荧光素渗漏和新生血管,shRNA质粒组小鼠视网膜可见无灌注区和微血管瘤,而radixin shRNA质粒组小鼠视网膜后极部无灌注区面积较小,血管迂曲和渗漏现象较模型对照组和shRNA质粒组明显减轻。视网膜组织病理学检查显示,模型对照组和shRNA质粒组小鼠视网膜内界�
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关键词
小干扰RNA/应用
视网膜新生血管
高氧/生理病理
细胞骨架蛋白
膜蛋白
动物模型
近交系C57BL/6J小鼠
根蛋白
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职称材料
题名
Radixin shRNA对高氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用
被引量:
1
1
作者
王龙梅
杨侠
闫琳
刘廷
董晓光
徐海峰
机构
山东省眼科研究所
出处
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第12期1089-1094,共6页
基金
山东省自然科学基金项目(ZR2011HM012)
文摘
背景视网膜新生血管性疾病是多种眼科疾病的病理基础,迄今为止新生血管形成的发病机制尚不完全清楚。研究显示,视网膜新生血管形成过程中radixin表达量明显增加,因此推测在视网膜新生血管相关疾病中抑制或沉默radixin基因有望成为治疗的新方法。目的研究radixin小发卡(shRNA)干扰质粒对氧诱导视网膜病变(OIR)小鼠模型视网膜中radixin基因表达的抑制作用,观察其对小鼠视网膜新生管形成的影响。方法将64只出生后7d的SPF级C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型对照组、radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组,其中模型对照组、radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组小鼠在体积分数(75±2)%的氧环境中饲养5d,建立OIR动物模型,正常对照组小鼠饲养于正常氧环境下。radixin shRNA质粒组和shRNA质粒组小鼠于出生后第12天分别于玻璃体腔注射1μg radixin shRNA质粒和对照shRNA质粒,小鼠出生后第17天,对各组小鼠行FD-2000S血管造影术,制备视网膜铺片,观察视网膜血管形态和分布;摘取各组小鼠眼球制备视网膜切片,采用视网膜苏木精-伊红染色法观察突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核和新生血管;应用免疫组织化学染色法检测radixin在视网膜中的表达分布;分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot法检测radixin mRNA及其蛋白在视网膜组织中的表达情况。结果正常对照组小鼠视网膜铺片显示视网膜血管走行正常,模型对照组小鼠视网膜后极部大片状无灌注区,可见大血管迂曲和血管壁荧光素渗漏和新生血管,shRNA质粒组小鼠视网膜可见无灌注区和微血管瘤,而radixin shRNA质粒组小鼠视网膜后极部无灌注区面积较小,血管迂曲和渗漏现象较模型对照组和shRNA质粒组明显减轻。视网膜组织病理学检查显示,模型对照组和shRNA质粒组小鼠视网膜内界�
关键词
小干扰RNA/应用
视网膜新生血管
高氧/生理病理
细胞骨架蛋白
膜蛋白
动物模型
近交系C57BL/6J小鼠
根蛋白
Keywords
RNA,
small
interfering/administration
Retinal
neovascularization
hyperoxia
/
physiopathology
Cytoskeletal
proteins
Membrane
proteins
Disease
model
Mouse,
inbred
C57BL/6J
Radixin
分类号
R774.1 [医药卫生—眼科]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Radixin shRNA对高氧诱导的小鼠视网膜新生血管形成的抑制作用
王龙梅
杨侠
闫琳
刘廷
董晓光
徐海峰
《中华实验眼科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
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职称材料
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