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基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路的羟基红花黄色素A抑制血管紧张素II诱导的血管外膜成纤维细胞迁移研究 被引量：6
1
作者 李伟慷 崔清卓 +4 位作者 郑玉光 张一昕 郭炳颜 赵京山 刘琳 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1478-1486,共9页
目的基于通过Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路探讨羟基红花黄色素A(hydro... 目的基于通过Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)通路探讨羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)抑制血管紧张素II(angiotensin II,ANG II)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移作用。方法组织贴块法培养大鼠胸主动脉VAFs,免疫荧光实验检测细胞中Vimentin和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达,鉴定VAFs。设置对照组、ANG II组、HSYA组、脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)组和LPS+HSYA组,对照组VAFs给予培养基正常培养,其余各组给予1×10^(-7)mol/L ANG II处理24 h,然后更换为含100 nmol/L LPS或40μmol/L HSYA的培养基,继续培养24 h,划痕实验检测VAFs的迁移能力;CCK-8法检测细胞活力;Western blotting检测TLR4、NF-κB和p-NF-κB蛋白表达;免疫荧光实验检测NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(cystein-asparate protease-1,Caspase-1)及凋亡斑点样蛋白(apoptotic spot-like protein,ASC)共表达情况。结果免疫荧光结果证实VAFs培养成功。划痕实验结果显示,ANG II能够显著增加细胞的迁移率(P<0.01),LPS刺激进一步提高VAFs的迁移率(P<0.01),HSYA能够抑制ANG II及LPS对VAFs迁移的促进作用(P<0.01)。Western blotting结果显示,ANG II显著提高细胞内TLR4和p-NF-κB的表达(P<0.05、0.001),并促进NF-κB入核(P<0.001);HSYA显著抑制ANG II诱导的细胞内TLR4和p-NF-κB的表达(P<0.05、0.01、0.001),并抑制NF-κB入核(P<0.05、0.01、0.001)。免疫荧光实验结果表明,ANG II及LPS促进NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3、Caspase-1及ASC共表达,HSYA可减少ANG II及LPS诱导NLRP3、Caspase-1及ASC蛋白共表达,抑制NLRP3炎症小体的组装。结论HSYA通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3通路减少ANG II诱导的VAFs迁移。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 血管外膜成纤维细胞 血管紧张素II 脂多糖 TLR4/NF-κB/NLRP3通路
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羟基红花黄色素A通过抑制LPS刺激的NLRP3炎性小体的激活抑制ANG Ⅱ诱导的VAFs的迁移
2
作者 沈全 崔清卓 +6 位作者 凌恺恩 尹蕴婕 孙佳欢 杨阳 刘亚磊 刘琳 赵京山 《生命的化学》 CAS 2024年第5期918-927,共10页
本文探讨了羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)通过抑制NLRP3炎性小体的激活抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANGⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的影响。采用组织贴块法培养原代V... 本文探讨了羟基红花黄色素A(hydroxysafflor yellow A,HSYA)通过抑制NLRP3炎性小体的激活抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANGⅡ)诱导的血管外膜成纤维细胞(vascular adventitial fibroblasts,VAFs)迁移的影响。采用组织贴块法培养原代VAFs,激光共聚焦技术鉴定VAFs;划痕实验测定HSYA对ANGⅡ诱导的VAFs迁移能力的影响;CCK-8实验测定HSYA对细胞活力的影响;Western blot实验检测各组细胞中NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3,NLRP3)炎性小体相关蛋白的表达。激光共聚焦结果显示,VAFs的Vimentin表达为阳性,证实组织贴块培养的细胞为VAFs;划痕实验结果显示,脂多糖(lipolyaccharide,LPS)显著增强了ANGⅡ诱导的VAFs迁移;HSYA显著抑制ANGⅡ及LPS诱导的VAFs的迁移。Western blot结果显示,HSYA显著抑制ANGⅡ及LPS激活的NLRP3炎性小体相关蛋白NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1,Caspase-1)及凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated specklike protein containing CARD,ASC)蛋白表达。综上所述,HSYA通过抑制LPS刺激的NLRP3炎性小体激活,降低了ANGⅡ诱导的VAFs迁移。 展开更多
关键词 羟基红花黄色素A 血管外膜成纤维细胞 血管紧张素Ⅱ NLRP3炎性小体 脂多糖
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RP-HPLC测定红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量 被引量：1
3
作者 唐刚 金坚 杨子毅 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期161-167,共7页
建立红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A含量测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。色谱柱为Zorbax Eclipse C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-乙腈-0.02%磷酸水溶液(26∶2∶72),流速:1.0 mL/min,柱温:55℃,检测波长:403 n... 建立红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A含量测定的反相高效液相色谱法(RP-HPLC)。色谱柱为Zorbax Eclipse C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,流动相:甲醇-乙腈-0.02%磷酸水溶液(26∶2∶72),流速:1.0 mL/min,柱温:55℃,检测波长:403 nm。乳膏剂依次经甲醇高温破乳、纯水高温萃取后,采用RP-HPLC检测。结果显示,乳膏剂中辅料对羟基红花黄色素A色谱峰不产生干扰。羟基红花黄色素A在1.236~12.36μg/mL范围内呈良好的线性关系(y=156.17x+1.1983,r=0.9995),检测限为23.6 ng/mL,定量限为118 ng/mL,回收率在99.7%~103.3%范围内,精密度RSD为0.12%(n=6),室温放置24 h稳定性良好。本方法简便快捷,结果准确、重复性好,可用于红花W/O型乳膏剂中羟基红花黄色素A的含量测定。 展开更多
关键词 红花 W/O型乳膏剂 羟基红花黄色素 RP-HPLC 含量测定
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灌肠Ⅰ号的制备和质量控制
4
作者 朱明恒 《药学与临床研究》 2008年第2期152-154,共3页
目的：制备灌肠Ⅰ号并建立质量控制方法。方法：采用水煎煮法制备灌肠Ⅰ号。通过TLC鉴别红花和蒲公英，以HPLC方法测定红花中羟基红花黄色素A的含量。结果：TLC法可明显鉴别红花、蒲公英。羟基红花黄色素A在29．71～297．1μg·mL^-... 目的：制备灌肠Ⅰ号并建立质量控制方法。方法：采用水煎煮法制备灌肠Ⅰ号。通过TLC鉴别红花和蒲公英，以HPLC方法测定红花中羟基红花黄色素A的含量。结果：TLC法可明显鉴别红花、蒲公英。羟基红花黄色素A在29．71～297．1μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0．9998），平均回收率为97．5％（RSD=1．22％，n=5）。结论：灌肠Ⅰ号制备工艺简单，质量控制方法简便、准确、稳定、重现性好。 展开更多
关键词 灌肠Ⅰ号 羟基红花黄色素A TLC HPLC 质量控制
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