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吡格列酮对人脂肪细胞中脂联素及其受体mRNA表达的影响 被引量:8
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作者 丁亚琴 马向华 +1 位作者 沈捷 周建英 《医学研究生学报》 CAS 2008年第4期360-363,450,共5页
目的:探讨噻唑烷二酮类药物吡格列酮对人脂肪细胞中脂联素及其受体mRNA表达的影响。方法:取外科手术患者腹网膜脂肪组织,进行人前体脂肪细胞的原代培养并诱导其分化。适时用不同浓度的吡格列酮进行药物干预,取分化第10d的脂肪细胞用于实... 目的:探讨噻唑烷二酮类药物吡格列酮对人脂肪细胞中脂联素及其受体mRNA表达的影响。方法:取外科手术患者腹网膜脂肪组织,进行人前体脂肪细胞的原代培养并诱导其分化。适时用不同浓度的吡格列酮进行药物干预,取分化第10d的脂肪细胞用于实验,分设对照组和药物干预组,提取RNA后以RT-PCR方法检测脂联素及其受体的mRNA的表达,比较其差异。结果:吡格列酮药物干预组人脂肪细胞中脂联素及其受体的mRNA的表达量高于不加药物的对照组。结论:噻唑烷二酮类药物吡格列酮能增加人脂肪细胞中脂联素及其受体的mRNA的表达。 展开更多
关键词 人前体脂肪细胞 脂联素 脂联素受体 吡格列酮
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STEAP4基因在人前体脂肪细胞诱导分化过程中的表达 被引量:3
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作者 陈小慧 赵亚萍 +4 位作者 高春林 张春梅 朱春 朱金改 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期473-475,共3页
目的观察人肥胖相关全长新基因STEAP4在人前体脂肪细胞诱导分化过程中不同时段表达水平的变化,探讨STEAP4基因与脂肪细胞分化、脂质积聚的关系。方法体外培养人前体脂肪细胞,待细胞生长融合后以1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松、胰岛... 目的观察人肥胖相关全长新基因STEAP4在人前体脂肪细胞诱导分化过程中不同时段表达水平的变化,探讨STEAP4基因与脂肪细胞分化、脂质积聚的关系。方法体外培养人前体脂肪细胞,待细胞生长融合后以1-甲基-3-异丁基黄嘌呤、地塞米松、胰岛素及罗格列酮联合诱导方案,在体外诱导其分化为成熟脂肪细胞。在前体脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化过程中观察细胞形态及脂质积聚变化;采用实时荧光定量RT-PCR技术检测诱导分化不同时段(前体,第0、4、6、8、11、14、17天)脂肪细胞中STEAP4基因mRNA的表达水平。结果STEAP4基因高表达于人前体脂肪细胞;加入脂肪细胞分化诱导剂后(第4天)表达略有上调,其后随脂肪细胞分化成熟该基因表达量呈逐渐下降趋势;至脂肪细胞完全分化成熟(第14-17天)表达量最低。STEAP4基因表达水平除在诱导分化前至第4天、第14-17天差异无统计学意义外,余各时间点的表达水平差异均有统计学意义(Pa<0.05)。结论STEAP4基因随脂肪细胞分化成熟表达逐渐下调,可促进脂肪细胞的分化成熟和脂质积聚,与肥胖的发生有关。 展开更多
关键词 STEAP4基因 人前体脂肪细胞 分化
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Leptin对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达的调控 被引量:2
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作者 朱金改 赵亚萍 +4 位作者 张春梅 陈小慧 高春林 朱春 郭锡熔 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1477-1480,共4页
目的:观察leptin对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达的调节作用。方法:体外培养人前体脂肪细胞,在诱导人前体脂肪细胞分化成熟的基础上,应用100ng/ml人重组leptin分别干预成熟脂肪细胞6、24h,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测成熟脂肪细胞... 目的:观察leptin对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达的调节作用。方法:体外培养人前体脂肪细胞,在诱导人前体脂肪细胞分化成熟的基础上,应用100ng/ml人重组leptin分别干预成熟脂肪细胞6、24h,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测成熟脂肪细胞中NYGGF4基因mRNA的表达水平。结果:100ng/ml leptin干预人成熟脂肪细胞6h后,NYGGF4基因mRNA的相对表达量为0.000476±0.000178,显著低于对照组0.00114±0.000275,P<0.05;干预24h NYGGF4基因mRNA的相对表达量为0.000835±0.000211,也显著低于对照组0.001419±0.000193,P<0.05。结论:leptin能显著下调成熟脂肪细胞中NYGGF4基因的表达。 展开更多
关键词 人前体脂肪细胞 诱导分化 NYGGF4基因 LEPTIN
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LncRNA KCNQ1OT1在人脂肪细胞分化过程及肥胖人群脂肪组织中的表达 被引量:2
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作者 陈辰 王琰 +4 位作者 张卓 张晓笑 季晨博 池霞 尤梁惠 《中华内分泌代谢杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期469-473,共5页
目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)KCNQ1OT1在脂肪前体细胞分化过程及肥胖者、脂肪组织中的表达变化,阐明KCNQ1OT1与肥胖的相关性,为进一步解读lncRNA参与肥胖发生发展的作用提供线索。方法用PPIA为内参基因,通过定量P... 目的探讨长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)KCNQ1OT1在脂肪前体细胞分化过程及肥胖者、脂肪组织中的表达变化,阐明KCNQ1OT1与肥胖的相关性,为进一步解读lncRNA参与肥胖发生发展的作用提供线索。方法用PPIA为内参基因,通过定量PCR,检测KCNQ1OT1于人脂肪前体细胞分化第0、1、3、5、9、12天的表达水平;应用定量PCR检测KCNQ1OT1在肥胖和正常人群白色脂肪组织中的表达变化;采用Pearson相关分析探讨KCNQ1OT1与人群体重指数、血清三酰甘油及总胆固醇的相关性。结果KCNQ1OT1在脂肪前体细胞分化第1、3、5、9和12天的相对表达量分别为(25.89±3.10)、(24.78±5.58)、(15.53±2.11)、(6.75±0.71)、(4.81±0.84),与第0天相比,均呈上升趋势,差异有统计学意义(P<0.01),在分化初始增长尤为明显(第1、3天)。KCNQ1OT1在肥胖人群内脏脂肪组织中的相对表达量为0.79±0.05,较正常人显著增加(P<0.01)。KCNQ1OT1与体重指数呈正相关(r=0.569,P<0.01),与三酰甘油含量呈正相关(r=0.489,P<0.05),与总胆固醇含量呈正相关(r=0.591,P<0.01)。结论KCNQ1OT1在人脂肪前体细胞分化过程中呈增高趋势;在肥胖人群脂肪组织中的表达增高,其表达与体重指数、血清三酰甘油等肥胖相关指标呈正相关,提示KCNQ1OT1可能是影响人脂肪细胞分化的重要调控因子及肥胖防治的潜在靶标。 展开更多
关键词 KCNQ1OT1 LncRNA 人脂肪前体细胞 诱导分化 肥胖
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罗格列酮对肥胖患者脂肪细胞中脂联素表达的影响 被引量:1
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作者 靳温 孙璐 +4 位作者 廉坤 贺媛 夏炜 陶凌 王海昌 《心脏杂志》 CAS 2011年第5期570-574,共5页
目的:探讨噻唑烷二酮类药物(thiazolidinediones,TZDs)罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对肥胖患者脂肪细胞中脂联素表达的影响。方法:依据检查者的体质量指数(BMI)分为正常体重者和肥胖者,各3例。脂肪组织采用整形外科吸脂手术(供者知情并... 目的:探讨噻唑烷二酮类药物(thiazolidinediones,TZDs)罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对肥胖患者脂肪细胞中脂联素表达的影响。方法:依据检查者的体质量指数(BMI)分为正常体重者和肥胖者,各3例。脂肪组织采用整形外科吸脂手术(供者知情并同意)获得。分离培养6例检查者的前脂肪细胞,用胰岛素、地塞米松、三碘甲状腺原氨酸(T3)及3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导其分化为成熟的脂肪细胞。实验分为对照组和RSG处理组,前者培养的脂肪细胞不进行处理;后者的脂肪细胞用10 mol/L的RSG分别处理12 h、24 h、48 h和72 h。收集细胞的培养上清液,用ELISA法检测脂联素蛋白分泌的水平。提取细胞的总RNA,用RT-PCR法检测脂联素mRNA表达的水平。结果:肥胖患者成熟脂肪细胞脂联素mRNA及其蛋白表达的水平较正常体重者明显降低(P<0.05)。与对照组相比较,RSG组成熟脂肪细胞脂联素mRNA和其蛋白表达的水平在处理不同时间(12 h、24 h、48 h和72 h)后均明显增高(P<0.05或P<0.01),且呈时间依赖性;但肥胖患者脂联素mRNA和其蛋白表达水平增高持续的时间较正常体重者短(P<0.05或P<0.01)。结论:RSG在一定程度上能增加肥胖患者成熟脂肪细胞中脂联素表达的水平。 展开更多
关键词 前脂肪细胞 脂联素 肥胖 罗格列酮
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TNFα对人脂肪细胞STEAP4基因表达的调控
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作者 陈小慧 赵亚萍 +5 位作者 朱春 季晨博 张春梅 朱金改 高春林 郭锡熔 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1008-1011,共4页
目的人STEAP4基因是一个参与胰岛素敏感性调节的肥胖相关差异表达基因,本研究旨在探讨胰岛素抵抗相关脂源性细胞因子TNFα对人成熟脂肪细胞中STEAP4基因的调节作用。方法体外培养人前体脂肪细胞,在诱导人前体脂肪细胞分化成熟的基础上,... 目的人STEAP4基因是一个参与胰岛素敏感性调节的肥胖相关差异表达基因,本研究旨在探讨胰岛素抵抗相关脂源性细胞因子TNFα对人成熟脂肪细胞中STEAP4基因的调节作用。方法体外培养人前体脂肪细胞,在诱导人前体脂肪细胞分化成熟的基础上,应用不同浓度(0、5、10、25、50ng/mL)人重组TNFα干预成熟脂肪细胞24h,采用实时荧光定量RT-PCR技术、Western blot技术检测干预后人成熟脂肪细胞STEAP4基因在核酸和蛋白表达水平的变化。结果不同浓度TNFα(5、10、25、50ng/mL)干预24h能显著上调人成熟脂肪细胞中STEAP4基因的mRNA表达,与未干预对照组差异有显著性(P<0.05);50ng/mLTNFα干预时STEAP4基因在人成熟脂肪细胞中的mRNA表达水平最高。与基因表达结果相一致,不同浓度TNFα(5、10、25、50ng/mL)干预24h能显著上调人成熟脂肪细胞中STEAP4蛋白的表达,与未干预对照组差异有显著性(P<0.05);干预浓度提高到25ng/mL时干预效果最为明显。结论TNFα能显著上调人成熟脂肪细胞中STEAP4基因核酸和蛋白的表达。 展开更多
关键词 STEAP4基因 细胞分化 肿瘤坏死因子 人前体脂肪细胞
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NYGGF4基因在人前体脂肪细胞分化过程中的表达及肿瘤坏死因子α对其调控的研究 被引量:4
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作者 赵亚萍 王加林 +3 位作者 蔡友群 陈小慧 张春梅 郭锡熔 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期69-72,共4页
目的观察人前体脂肪细胞诱导分化过程中NYGGF4基因mRNA表达水平的变化,探讨重组肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)对成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达水平的调节作用。方法体外培养人内脏来源的原代前体脂肪细胞(human p... 目的观察人前体脂肪细胞诱导分化过程中NYGGF4基因mRNA表达水平的变化,探讨重组肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNFα)对成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达水平的调节作用。方法体外培养人内脏来源的原代前体脂肪细胞(human preadipocytes—visceral,HPA—v),在诱导HPA-v分化成熟的基础上,应用不同浓度重组TNFα干预成熟脂肪细胞16h,或以10ng/mL TNFα分别干预不同时间,采用实时荧光定量逆转录PCR技术检测的NYGGF4 mRNA表达水平。结果(1)HPA—v诱导分化至第17d,具备成熟脂肪细胞特征;(2)NYGGF4基因低表达于人前体脂肪细胞中,随脂肪细胞分化成熟其表达水平逐渐升高;(3)随TNFα干预浓度增高及干预时间延长,人成熟脂肪细胞中NYGGF4 mRNA水平呈现逐渐升高的趋势。结论NYGGF4基因具随脂肪细胞分化成熟表达逐渐上调的特征,TNFα能显著上调成熟脂肪细胞中NYGGF4基因的表达,其效应具有剂量依赖和时间反应性。 展开更多
关键词 NyGGF4基因 人前体脂肪细胞 细胞分化 肿瘤坏死因子Α
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游离脂肪酸、白细胞介素-6对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达的调控 被引量:1
8
作者 赵亚萍 陈小慧 +4 位作者 季晨博 高春林 张春梅 陈荣华 郭锡熔 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期1477-1479,共3页
目的观察游离脂肪酸(FFA)、IL-6对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达水平的调节作用。方法体外培养人前体脂肪细胞,采用1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(MIX)、胰岛素、地塞米松、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,以1mmol/L混合F... 目的观察游离脂肪酸(FFA)、IL-6对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达水平的调节作用。方法体外培养人前体脂肪细胞,采用1-甲基-3-异丁基黄嘌呤(MIX)、胰岛素、地塞米松、罗格列酮方案诱导人前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,以1mmol/L混合FFA(油酸、亚油酸、月桂酸、肉豆蔻酸和花生四烯酸)、30μg/L人重组IL-6干预成熟脂肪细胞6、24h,均设未干预细胞为对照,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测干预后成熟脂肪细胞中的NYGGF4基因mRNA表达水平。结果1mmol/L混合FFA干预人成熟脂肪细胞6h,NYGGF4基因mRNA相对表达量为0.00151±0.00024,与对照组(0.00114±0.00028)比较无显著性差异,干预时间延长至24h,NYGGF4基因mRNA相对表达量为0.00191±0.00019,显著高于对照组(0.00142±0.00019)(P<0.01);30μg/LIL-6干预人成熟脂肪细胞6hNYGGF4基因mRNA相对表达量为0.00058±0.00031,显著低于对照组(0.00114±0.00028)(P<0.05),干预24h,NYGGF4基因mRNA相对表达量为0.00123±0.00019,与对照组(0.00142±0.00019)比较无显著性差异。结论FFA可显著上调人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因的表达,IL-6对人成熟脂肪细胞中NYGGF4基因表达具有一过性下调作用。 展开更多
关键词 NYGGF4基因 游离脂肪酸 白细胞介素-6 人成熟脂肪细胞
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大黄酸对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响 被引量:10
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作者 袁小青 马向华 +2 位作者 丁亚琴 王芳 沈捷 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期161-165,共5页
目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内... 目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;应用RT-PCR检测RH干预后分化抑制基因CHOP mRNA的表达。结果:各浓度组RH(0.1、1、2.5、5、10ug/ml)抑制人前体脂肪细胞增殖,作用呈剂量依赖性;RH对脂肪细胞分化的抑制作用亦呈剂量依赖性;1ug/ml的RH使CHOP mRNA表达增加。结论:RH可抑制人前体脂肪细胞增殖与分化,该作用可能与CHOP表达上调有关。 展开更多
关键词 大黄酸 人前体脂肪细胞 增殖与分化 CHOP
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Effects of pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes 被引量:2
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作者 Jianying Zhou Minjuan Ge +3 位作者 Yamei Wang Haiwei Wu Jie Shen Xianghua Ma 《Journal of Nanjing Medical University》 2007年第2期99-103,共5页
Objective: To explore the effects of thiazolidinediones (TZDs) pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes. Methods:Omental adipose tissue biopsies were obtained from 15 patients who w... Objective: To explore the effects of thiazolidinediones (TZDs) pioglitazone on proliferation and differentiation of human preadipocytes. Methods:Omental adipose tissue biopsies were obtained from 15 patients who were undergoing elective open-abdominal surgery. The primary culture and differentiated induction of human preadipocytes were performed, and the human preadipo-cytes were treated with pioglitazone at different concentrations at proper moments. Dynamic morphological changes of the human preadipocytes were observed, and their proliferation and differentiation were assessed with Colorimetric MTT Assay and Oil Red O Staining. Results:After 24 hours and 72 hours with pioglitazone, 0.1 μmol/L (μmol/ml) pioglitazone increased the MTT values of the human preadipocytes by 25.3% and 34.8%,respectively(P 〈 0.05), while 1 μmol/L pioglitazone by 27.4% and 26.6%(P 〈 0.05), compared with the control group without pioglitazone. The human preadipocytes with pioglitazone cumulated more adipose in the endochylema than those without pioglitazone obviously. 0.1 μmol/L pioglitazone increased the differentiation degree of the human preadipocytes differentiated for 8-10 days by 44.81% and 1 μmol/L pioglitazone by 53.76%(P 〈 0.05). Conclusion:Thi- azolidinediones pioglitazone may significantly promote the proliferation and differentiation of the human omental preadipocytes. 展开更多
关键词 PIOGLITAZONE human preadipocytes proliferation and differentiation insulin sensitivity
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hsa-miR-1908靶基因预测及生物信息学分析 被引量:1
11
作者 杨蕾 季晨博 +5 位作者 史春梅 陈玲 庞玲霞 夏黎 郭锡熔 倪毓辉 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期820-824,共5页
目的对hsa-miR-1908进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程及信号通路,为深入研究其在人脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法应用miRBase获取hsa-miR-1908的序列,并分析其特征;应用miRanda预测hsa... 目的对hsa-miR-1908进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程及信号通路,为深入研究其在人脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法应用miRBase获取hsa-miR-1908的序列,并分析其特征;应用miRanda预测hsa-miR-1908的靶基因,并取预测结果及基因芯片结果的交集,进一步进行基因功能注释(Gene ontology)和生物通路富集分析(Pathway enrichment)。结果 hsa-miR-1908在各物种之间有一定保守性,其靶基因功能富集于Wnt受体信号的调控、细胞周期、细胞凋亡等生物学过程;其靶基因信号通路富集于促性腺激素释放激素信号通路、MAPK信号通路、胰岛素信号通路、细胞周期等信号转导通路及胰腺癌等疾病通路中。结论 hsa-miR-1908预测的靶基因集合富集于多个信号通路及生物学过程,与肥胖密切相关,为后续has-miR-1908在人脂肪细胞中生物学功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 miR-1908 MIRNA 生物信息学 人脂肪细胞 肥胖
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人前脂肪细胞的体外培养 被引量:1
12
作者 李卫华 孙志成 王文 《武警医学》 CAS 2010年第8期681-684,共4页
目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导。对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,... 目的建立人前脂肪细胞培养及其在药物诱导下向脂肪细胞分化的细胞模型。方法取成人的腹部纯脂肪颗粒,采用消化法进行人前脂肪细胞的原代培养,并在培养液中加入胰岛素和地塞米松对细胞进行诱导。对培养细胞进行形态学研究,测定生长曲线,并用油红O染色法对前脂肪细胞向脂肪细胞的分化进行定性、定量研究。结果培养出的人前脂肪细胞呈梭形,成分均一,增殖旺盛。经胰岛素和地塞米松诱导后,通过油红O脂肪染色法测定,证明前脂肪细胞已向脂肪细胞分化。结论在成熟的脂肪组织中存在着可以增殖,并可以分化成脂肪细胞的前脂肪细胞,经诱导后可以分化成成熟的脂肪细胞。 展开更多
关键词 人前脂肪细胞 脂肪细胞 生物学特征 细胞培养
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hsa-miR-17-92 cluster及其同源体靶基因的生物信息学分析 被引量:1
13
作者 史春梅 徐广峰 +5 位作者 陈玲 赵亚萍 倪毓辉 杨蕾 季晨博 郭锡熔 《中华实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期496-500,共5页
目的对hsa-miR-17-92duster及其同源体进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法1.应用PubMed、Google等信息搜索工具查找hsa-miR-17-92cluste... 目的对hsa-miR-17-92duster及其同源体进行系统的生物信息学分析,预测其可能参与的生物学过程,为深入研究其在脂肪细胞分化、肥胖发生等过程中的功能与机制奠定基础。方法1.应用PubMed、Google等信息搜索工具查找hsa-miR-17-92cluster及其同源体的所有研究,综述已有研究进展;2.应用miRBase获取hsa-miR-17-92cluster及其同源体的各成员序列,并分析其序列特征及保守性;3.应用美国国家生物技术信息中心(NCBI)blast、NCBImapviewer、基因组生物信息学(UCSC)Browser工具分析hsa-miR-17-92 cluster及其同源体所在基因组的序列特征;4.应用TargetScan5.1,PicTar及miRanda预测hsa-miR-17-92cluster及其同源体靶基因,取三者预测结果的交集,进一步进行功能注释和Pathway富集分析。结果1.现有研究提示hsa-miR-17-92 cluster及其同源体在脂肪细胞分化、肿瘤疾病、心脏及肺发育、免疫系统与血管形成等生物学过程中有重要作用;2.hsa-miR-17-92 cluster及其同源体进化上高度保守,根据种子序列同源性可分为4类,且在多物种问非常保守;3.hsa.miR-17-92 cluster及其同源体预测靶基因的功能与细胞周期、细胞黏附、Wnt、TGF-β信号、p53、丝裂原活化蛋白激酶等信号通路有较大的相关性,可能参与了前列腺癌、胰腺癌、结肠癌等多种疾病通路。结论通过对hsa-miR-17-92 cluster及其同源体系统的生物信息学分析,初步阐明了hsa-miR一17-92 cluster及其同源体的基本生物学特征,并为hsa-miR-17-92 cluster后续研究提供了功能与机制的线索。 展开更多
关键词 hsa-miR-17-92 CLUSTER 生物信息学 脂肪细胞 肥胖
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人miR-1908慢病毒载体构建及在人脂肪前体细胞中的表达验证 被引量:1
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作者 杨蕾 季晨博 +5 位作者 史春梅 陈玲 庞玲霞 夏黎 郭锡熔 倪毓辉 《中国儿童保健杂志》 CAS 北大核心 2014年第10期1018-1021,共4页
目的构建人miR-1908慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪前体细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-1908区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T... 目的构建人miR-1908慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪前体细胞中过表达效果。方法以人脂肪细胞基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-1908区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-1908的相应表达量。结果成功构建人miR-1908慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪前体细胞的效率可达到70%以上,miR-1908过表达水平可接近2倍。结论本研究成功构建了人miR-1908慢病毒过表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪前体细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-1908 慢病毒 人脂肪前体细胞
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人miR-146b慢病毒载体构建及人脂肪细胞中表达验证
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作者 陈玲 史春梅 +5 位作者 杨蕾 朱璐 徐广峰 季晨博 郭锡熔 张春梅 《中国儿童保健杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1155-1157,1160,共4页
目的构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒... 目的构建人miR-146b慢病毒表达载体,包被病毒并检测其在人脂肪细胞中过表达效果。方法以人基因组DNA为模板,PCR高保真扩增包含miR-146b区域上下游各100bp左右的基因组DNA,亚克隆入慢病毒表达载体,与包装质粒共转染HEK-293T细胞,包装病毒,收取病毒上清,纯化后感染人脂肪前体细胞,36h开始观察荧光标记,72h收取细胞,抽提RNA,Realtime PCR检测慢病毒感染下miR-146b的相应表达量。结果成功构建人miR-146b慢病毒表达载体,包装获得的病毒感染人脂肪细胞的效率可达到85%以上,miR-146b过表达水平可接近4倍。结论本研究成功构建了人miR-146b慢病毒表达载体,包被的慢病毒可以在人脂肪细胞中实现过表达效果,为后续功能研究奠定了基础。 展开更多
关键词 miR-146b 慢病毒 人脂肪前体细胞
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