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人胎盘来源间充质干细胞和大鼠骨髓间充质干细胞的生物学特征比较 被引量:4
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作者 费倩怡 刘春丽 +5 位作者 朱振威 刘志辉 刘书会 王占义 金巨楼 王敬龙 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期467-471,F0002,共6页
目的:从人足月的胎盘羊膜中和Wistar大鼠股骨及胫骨骨髓中分离、培养间充质干细胞(MSCs),研究人胎盘来源MSCs(HPMSCs)和大鼠骨髓来源MSCs(BMSCs)的分离培养方法和生物学特征、表面标志及其多分化潜能。方法:将人足月胎盘组织通过胶原酶... 目的:从人足月的胎盘羊膜中和Wistar大鼠股骨及胫骨骨髓中分离、培养间充质干细胞(MSCs),研究人胎盘来源MSCs(HPMSCs)和大鼠骨髓来源MSCs(BMSCs)的分离培养方法和生物学特征、表面标志及其多分化潜能。方法:将人足月胎盘组织通过胶原酶Ⅱ消化培养获取HPMSCs,采用全骨髓贴壁法从4周龄Wistar大鼠双侧股骨及胫骨中分离、纯化大鼠BMSCs,运用活细胞计数法检测其增殖能力,采用流式细胞术检测2种细胞表面标志物的表达阳性率;用地塞米松、维生素C和β磷酸甘油诱导其向成骨细胞分化,用茜素红染色鉴定;用胰岛素、地塞米松、IBMX和吲哚美辛诱导其向脂肪细胞分化,以油红O染色鉴定。结果:HPMSCs为梭形贴壁细胞,增殖能力较强,CD44和CD34表达阳性率分别为94.45%和1.67%;BMSCs为圆形、梭形和多角形,增殖能力强,CD44和CD34表达阳性率分别为93.11%和2.68%。2种细胞经过成脂诱导液和成骨诱导液诱导后,茜素红和油红O染色结果均为阳性,表明2种细胞均可向脂肪细胞和成骨细胞分化。结论:HPMSCs与大鼠BMSCs的生物学特征相似,同样具有多分化潜能,HPMSCs具有更强的增殖能力。 展开更多
关键词 人胎盘来源间充质干细胞 骨髓间充质干细胞 表面标志 多分化潜能
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人胎盘间充质干细胞及诱导的胰岛样细胞移植治疗妊娠期糖尿病大鼠效果比较 被引量:4
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作者 高珊 黄东静 +2 位作者 洪海漫 贾京桥 孟斐 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第25期3981-3987,共7页
背景:妊娠期糖尿病易对孕产妇和胎儿的健康造成严重损害,探索安全有效的妊娠期糖尿病预防和治疗手段成为妇产科学的重要研究方向之一。目的:对比人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果,为其用于临床研究治疗妊娠... 背景:妊娠期糖尿病易对孕产妇和胎儿的健康造成严重损害,探索安全有效的妊娠期糖尿病预防和治疗手段成为妇产科学的重要研究方向之一。目的:对比人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞对妊娠期糖尿病大鼠的治疗效果,为其用于临床研究治疗妊娠期糖尿病提供理论依据。方法:在无菌条件下提取人胎盘组织中的人胎盘间充质干细胞,将其诱导分化为胰岛样细胞,采用流式细胞术检测分化过程中巢蛋白和胰岛素的表达,采用双硫腙染色法检测胰岛样细胞团中锌离子表达。将雌性SD大鼠随机分为5组:正常孕鼠组、妊娠期糖尿病鼠未干预组、妊娠期糖尿病鼠生理盐水干预组、妊娠期糖尿病鼠人胎盘间充质干细胞干预组、妊娠期糖尿病鼠胰岛样细胞干预组,每组10只。采用妊娠前喂食高糖高脂饮食和妊娠后腹腔注射链脲佐菌素的方法建立妊娠期糖尿病模型,建模成功后,尾静脉注射1 mL含6×106个人胎盘间充质干细胞或胰岛样细胞的生理盐水悬液,分别于妊娠第6,12,18天检测各组孕鼠体质量和空腹血糖,妊娠第18天检测孕鼠血清脂联素水平。结果与结论:①在人胎盘间充质干细胞诱导分化为胰岛样细胞过程中,胰岛素水平逐渐增高;巢蛋白表达水平先上升后逐渐下降;在诱导分化的第28天形成胰岛样细胞团;②人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞均能使妊娠期糖尿病鼠血糖降低,体质量升高,脂联素水平升高;妊娠第18天,与人胎盘间充质干细胞干预组相比,胰岛样细胞干预组大鼠体质量上升、血糖降低、脂联素水平升高效果更明显;③结果表明,人胎盘间充质干细胞和胰岛样细胞均能有效治疗妊娠期糖尿病鼠,由人胎盘间充质干细胞诱导分化的胰岛样细胞治疗效果更优。 展开更多
关键词 干细胞 胎盘间充质干细胞 胰岛样细胞 诱导分化 妊娠期糖尿病 血糖 脂联素
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Neural differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells following neural cell co-culture 被引量:2
3
作者 Nailong Yang Hongyan Zhang Xiaojuan Sun Lili Xu 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期23-28,共6页
We induced human placenta-derived mesenchymal stem cells (hPMSCs) to differentiate into neural cells by adding chemical reagents, despite the fact that toxic chemicals induce cell shrinkage or cytoskeletal formation... We induced human placenta-derived mesenchymal stem cells (hPMSCs) to differentiate into neural cells by adding chemical reagents, despite the fact that toxic chemicals induce cell shrinkage or cytoskeletal formation, which does not represent a proper cell differentiation process. The present study established a co-culture system with hPMSCs and neural cells and analyzed the influence of neural cells on hPMSC differentiation in a co-culture system, hPMSCs were isolated and purified from human full-term placenta using collagenase digestion. Fetal neural cells were co-cultured with hPMSCs for 48 hours using the Transwell co-culture system, hPMSCs co-cultured with neural cells exhibited a slender morphology with a filament. After 96 hours, hPMSCs expressed neuron-specific enolase, which suggested that co-culture of hPMSCs and neural cells induced neural differentiation of hPMSCs. 展开更多
关键词 human placenta-derived mesenchymal stem cells TRANSWELL CO-CULTURE DIFFERENTIATION neural cells
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丹参酮ⅡA对人胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化的诱导作用及其机制 被引量:3
4
作者 王秀艳 樊晨星 +3 位作者 赵千 王博 袁松 李昆 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期33-38,218,共7页
目的:探讨丹参酮ⅡA (TanⅡA)对人胎盘间充质干细胞(hPDMSCs)向心肌细胞分化的诱导作用及其机制,为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据。方法:采用不同浓度TanⅡA (0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg&#... 目的:探讨丹参酮ⅡA (TanⅡA)对人胎盘间充质干细胞(hPDMSCs)向心肌细胞分化的诱导作用及其机制,为TanⅡA作为心肌细胞分化诱导剂提供实验依据。方法:采用不同浓度TanⅡA (0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0和10.0 mg·L^(-1))处理hPDMSCs,MTT法筛选出无毒剂量的TanⅡA (0.1mg·L^(-1))用于实验。hPDMSCs培养体系分为对照组、5-氮胞苷(5-aza,10μmol·L^(-1))诱导组和TanⅡA (0.1mg·L^(-1))诱导组。培养20d后,免疫组织化学法检测各组细胞中α-横纹肌肌动蛋白(α-SCA)的表达;免疫荧光法检测各组细胞中心肌肌钙蛋白I (cTnI)的阳性表达率,计算心肌细胞分化率;Westernblotting法检测各组细胞中心肌转录调节因子4 (GATA4)、心钠素(ANF)、cTnI、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白表达水平。结果:hPDMSCs的生物学特性符合间充质干细胞。MTT法,当TanⅡA浓度大于0.1mg·L^(-1)时,细胞存活率随浓度的增加而降低。对照组细胞在培养12d以前呈快速增长趋势,培养12d后细胞增殖活性降低;与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。免疫组织化学染色,对照组细胞不表达α-SCA,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞均表达α-SCA,且TanⅡA诱导组更明显。与对照组比较,5-aza诱导组和TanⅡA诱导组细胞中GATA4 (t5-aza=2.937,P5-aza<0.05;t_(TanⅡA)=4.769,P_(TanⅡA)<0.05)、ANF (t5-aza=3.728,P5-aza<0.05;t_(TanⅡA)=5.912,P_(TanⅡA)<0.05)、cTnI (t5-aza=3.623,P5-aza<0.05;t_(TanⅡA)=7.153,P_(TanⅡA)<0.05)和GSK-3β(t5-aza=2.995,P5-aza<0.05;t_(TanⅡA)=5.420,P_(TanⅡA)<0.05)蛋白表达水平明显升高,β-catenin(t5-aza=2.985,P5-aza<0.05;t_(TanⅡA)=6.951,P_(TanⅡA)<0.05)蛋白表达水平明显降低;与5-aza诱导组比较,TanⅡA诱导组GATA4、ANF和GSK-3β蛋白表达水平进一步升高(P<0.05)。结论:TanⅡA能诱导hPDMSCs分化为心肌细胞,且效果优于5-aza,其机制可能与TanⅡA能抑� 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 人胎盘间充质干细胞 细胞分化 心肌细胞
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转染leptin的胎盘间充质干细胞对放射损伤复合创伤愈合的促进作用 被引量:2
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作者 费倩怡 刘书会 +4 位作者 朱振威 邹永巍 郑明 刘春丽 刘志辉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期1066-1070,I0011,共6页
目的:探讨瘦素(leptin)和人胎盘间充质干细胞(HPMSCs)对大鼠背部放射损伤复合创伤(放创复合伤)皮瓣愈合的促进作用,阐明其在放创复合伤愈合过程中的协同作用。方法:将30只雄性Wistar大鼠随机分为转染leptin的HPMSCs组(n=10)、转染空载体... 目的:探讨瘦素(leptin)和人胎盘间充质干细胞(HPMSCs)对大鼠背部放射损伤复合创伤(放创复合伤)皮瓣愈合的促进作用,阐明其在放创复合伤愈合过程中的协同作用。方法:将30只雄性Wistar大鼠随机分为转染leptin的HPMSCs组(n=10)、转染空载体的HPMSCs组(n=10)和空白对照组(n=10)。建立放创复合伤大鼠模型,放疗后24h各组大鼠局部皮下注射转染leptin的HPMSCs、转染空载体的HPMSCs以及生理盐水,观察各组大鼠皮瓣颜色、皮纹、质地、温度、毛发生长、渗出、坏死范围及针刺出血情况;检测各组大鼠皮瓣成活率;HE染色观察各组大鼠皮瓣组织形态表现;免疫组织化学法检测大鼠皮瓣中leptin和血管性血友病因子(vWF)的表达情况。结果:给药后第7天,各组大鼠皮瓣成活与坏死界限基本清楚,坏死区域皮瓣质地坚硬,成活区域皮瓣颜色红润,皮纹模糊,质地中等,转染leptin的HPMSCs组和转染空载体的HPMSCs组大鼠皮瓣坏死面积均小于空白对照组。给药后第7天,转染leptin的HPMSCs组大鼠皮瓣成活率高于转染空载体的HPMSCs组和空白对照组(P<0.05),转染空载体的HPMSCs组大鼠皮瓣成活率高于空白对照组(P<0.05)。给药后第14天,HE染色检测,转染leptin的HPMSCs组大鼠皮瓣肉芽组织最为丰富,新生毛细血管和成纤维细胞最多。给药后第14天,免疫组织化学染色,转染leptin的HPMSCs组和转染空载体HPMSCs组大鼠皮瓣真皮下方可见大量的黄染颗粒(阳性表达),转染leptin的HPMSCs组胞浆中阳性表达的leptin细胞最多。结论:在局部微环境作用下,HPMSCs可以分化为血管内皮细胞,促进新生血管的形成,HPMSCs与leptin可协同促进放创复合伤皮瓣的愈合,HPMSCs携带目的基因或单独应用均可明显提高放创复合伤皮瓣的成活率,但转染leptin的HPMSCs作用力更强。 展开更多
关键词 放创复合伤 人胎盘间充质干细胞 瘦素 伤口愈合
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Uric acid promotes neuronal differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells in a time- and concentration-dependent manner
6
作者 Nailong Yang Lili Xu +1 位作者 Peng Lin Jing Cui 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第10期756-760,共5页
Uric acid is an important, naturally occurring serum antioxidant. The present study investigates the use of uric acid for promoting proliferation and neuronal differentiation of mesenchymal stem cells derived from hum... Uric acid is an important, naturally occurring serum antioxidant. The present study investigates the use of uric acid for promoting proliferation and neuronal differentiation of mesenchymal stem cells derived from human placenta tissue. Human placenta-derived mesenchymal stem cells were pre-induced in the presence of either 0, 0.2, 0.4 or 0.8 mM uric acid in combination with 1 mM β-mercaptoethanol for 24 hours, followed by exposure to identical uric acid concentrations and 5 mM β-mercaptoethanol for 6 and 10 hours. Cells developed a neuronal-like morphology, with formation of interconnected process extensions, typical of neural cells. Immunocytochemistry and immunofluorescence staining showed neuron specific enolase positive cells were present in each group except the control group. A greater number of neuron specific enolase positive cells were observed in 0.8 mM uric acid in combination with 5 mM β-mercaptoethanol at 10 hours. After 24 hours of induction, Nissl bodies were detected in the cytoplasm of all differentiated cell groups except the control group and Nissl body numbers were greatest in human placenta-derived mesenchymal stem cells grown in the presence of 0.8 mM uric acid and 5 mM β-mercaptoethanol. These results suggest uric acid accelerates differentiation of human placenta-derived mesenchymal stem cells into neuronal-like cells in a time-and concentration-dependent manner. 展开更多
关键词 uric acid human placenta-derived mesenchymal stem cells DIFFERENTIATION neural cells
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人胎盘源间充质干细胞条件培养液可上调缺氧状态下BeWo细胞活力和紧密连接因子的表达 被引量:1
7
作者 林清凡 解一新 +2 位作者 陈婉清 叶振忠 陈幼芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第31期4970-4975,共6页
背景:近年来间充质干细胞已是新药开发领域的研究热点,其旁分泌效应也已应用于多种组织损伤性细胞模型修复评估实验,但目前尚无研究探索其条件培养液是否对缺氧状态下人胎盘滋养层系细胞的紧密连接功能具有修复作用。目的:探讨人胎盘源... 背景:近年来间充质干细胞已是新药开发领域的研究热点,其旁分泌效应也已应用于多种组织损伤性细胞模型修复评估实验,但目前尚无研究探索其条件培养液是否对缺氧状态下人胎盘滋养层系细胞的紧密连接功能具有修复作用。目的:探讨人胎盘源间充质干细胞条件培养液对缺氧条件下人胎盘绒毛膜癌滋养层系BeWo细胞活力和紧密连接因子表达的影响。方法:采用1000μmol/L氯化钴处理12 h诱导BeWo细胞以构建胎盘屏障缺氧模型,检测细胞活力以及缺氧诱导因子1α和紧密连接因子闭合小环蛋白1、封闭蛋白4、封闭蛋白8的表达量变化;在缺氧模型中添加人胎盘源间充质干细胞条件培养液建立缺氧干预组、复氧修复组,检测细胞活力和上述4个基因的表达量改变;为探讨人胎盘源间充质干细胞条件培养液改变闭合小环蛋白1表达量的潜在机制,建立胰岛素样生长因子1缺氧干预组、胰岛素样生长因子1处理组,检测BeWo细胞活力以及闭合小环蛋白1表达量。结果与结论:①氯化钴诱导缺氧显著下调BeWo细胞活力,上调缺氧诱导因子1αmRNA和蛋白表达,下调闭合小环蛋白1和封闭蛋白4 mRNA和蛋白表达,上调封闭蛋白8 mRNA表达,但其蛋白表达下降;②人胎盘源间充质干细胞条件培养液明显提升缺氧条件下BeWo细胞活力和闭合小环蛋白1的表达,下调缺氧诱导因子1α的表达,但对封闭蛋白4无作用;③胰岛素样生长因子1干预缓解了缺氧对BeWo细胞活力的抑制作用,并上调闭合小环蛋白1的表达。 展开更多
关键词 干细胞 人胎盘源间充质干细胞 条件培养液 氯化钴 缺氧 BEWO细胞 闭合小环蛋白1
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人胎盘源间充质干细胞通过CD73/Nrf2途径抑制Th1细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病小鼠肝损伤机制研究
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作者 吴沄桦 张恒超 +2 位作者 韩凯悦 赵雅萱 栾希英 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期663-670,共8页
目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)途径抑制CD4^(+)IFN-γ+T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物... 目的:探究人胎盘源间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)通过CD73/核因子E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2,Nrf2)途径抑制CD4^(+)IFN-γ+T(Th1)细胞分泌TNF-α减轻急性移植物抗宿主病(graft versus-host disease,GVHD)小鼠肝损伤的作用机制。方法:流式细胞术分析GVHD小鼠外周血和肝组织中Th1细胞对TNF-α的表达以及CD4^(+)IFN-γ+TNF-α+T(TNF-α+Th1)细胞上PD-1的表达水平。采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色、马松(Masson)染色和免疫荧光染色观察各组GVHD小鼠肝组织病理变化,并进一步用HE染色观察各组GVHD小鼠皮肤和肺组织病理变化。体外建立非条件性外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)向Th1细胞诱导方案,检测TNF-α+Th1细胞比例以及其Nrf2和磷酸化细胞核内核因子-κB(phosphorylated nuclear factor-kappa B,p-NF-κB)的平均荧光强度(mean fluorescence intensity,MFI)。结果:与正常对照组相比,GVHD发病高峰组小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例和TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达明显升高(P<0.01);hPMSCs干预可降低小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞比例(P<0.001),促进小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.01,P<0.001),然而shCD73对小鼠外周血和肝组织中TNF-α+Th1细胞的干预效果明显减弱(P<0.05,P<0.01)。肝组织病理学分析结果显示,肝脏中TNF-α+Th1细胞比例分别与Suzuki′s评分、胶原面积和α-SMA的MFI呈正相关(P<0.001)。同样,皮肤和肺组织病理学分析结果也显示,外周血中TNF-α+Th1细胞比例分别与皮肤的Cetkovic-Cvrlje评分和肺的Qiao Shukai评分呈正相关(P<0.001)。PBMCs活化实验也显示hPMSCs能下调TNF-α+Th1细胞比例(P<0.01),上调TNF-α+Th1细胞对PD-1的表达(P<0.05);进一步分析发现hPMSCs可增强TNF-α+Th1细胞中Nrf2的MFI(P<0.05),减弱p-NF-κB的MFI(P<0.01)。结论:hPMSCs可能通过CD73/Nrf2途径上调PD1的表达,� 展开更多
关键词 人胎盘源间充质干细胞 TH1细胞 PD-1 CD73 NRF2 NF-κB
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不同浓度重组人骨形成蛋白2对人胎盘间充质干细胞增殖和碱性磷酸酶表达的影响 被引量:1
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作者 廖晓妤 彭军 +1 位作者 宋扬 李彦 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2012年第4期14-18,共5页
目的初步探讨重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)作用于人胎盘间充质干细胞(HPDMSCs)的适宜浓度范围。方法取健康产妇自愿捐赠的胎盘,采用胶原酶消化法分离HPDMSCs,体外培养扩增并鉴定。取第3代HPDMSCs,根据培养液中加入rhBMP-2浓度的不同分为... 目的初步探讨重组人骨形成蛋白2(rhBMP-2)作用于人胎盘间充质干细胞(HPDMSCs)的适宜浓度范围。方法取健康产妇自愿捐赠的胎盘,采用胶原酶消化法分离HPDMSCs,体外培养扩增并鉴定。取第3代HPDMSCs,根据培养液中加入rhBMP-2浓度的不同分为对照组(rhBMP-2浓度为0)和实验A、B、C、D组(rhBMP-2浓度分别为50、100、150、200ng/ml)。在加药后4、8、12、16d采用CCK-8法检测各组细胞增殖的吸光度值A450,碱性磷酸酶(ALP)定量检测法检测酶表达的吸光度值A520。结果获得的HPDMSCs呈长梭形。CD29、CD44、CD105表达阳性,CD34、CD45、CD106、HLA-DR表达阴性。经鉴定,分离培养的细胞具有成骨和成脂的多向分化能力。CCK-8实验结果显示:A、B、C组A450与对照组相比,在所有时间点下差异均无统计学意义(P>0.05);D组A450低于其它组,差异在大部分时间点有统计学意义(P<0.05)。ALP检测结果显示:A、B、C、D组A520在所有时间点均高于对照组(P<0.01);B、C组在8、12、16d高于其它组(P<0.05);B、C组在所有时间点差异无统计学意义(P>0.05)。结论 rhBMP-2浓度在100~150ng/ml范围可有效诱导HPDMSCs成骨向分化,且对HPDMSCs增殖不产生明显影响。 展开更多
关键词 重组人骨形成蛋白2 人胎盘问充质干细胞 增殖 碱性磷酸酶
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人胎盘来源间充质干细胞对T淋巴细胞分泌白细胞介素-4和γ干扰素影响的实验研究 被引量:1
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作者 张莉 吴素琴 孙晓 《中国中西医结合儿科学》 2019年第1期12-14,共3页
目的观察人胎盘来源间充质干细胞对活化的T淋巴细胞分泌白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)能力的影响,推测人胎盘来源间充质干细胞应用于临床治疗多种疾病的可能性。方法分离两个健康人来源的T淋巴细胞,制备混合淋巴细胞培养(MLC)... 目的观察人胎盘来源间充质干细胞对活化的T淋巴细胞分泌白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)能力的影响,推测人胎盘来源间充质干细胞应用于临床治疗多种疾病的可能性。方法分离两个健康人来源的T淋巴细胞,制备混合淋巴细胞培养(MLC)体系。再获取人胎盘来源间充质干细胞,将人胎盘来源间充质干细胞与MLC体系混合共培养。共分为4组,分别是同源T细胞Ⅰ组、同源T细胞Ⅱ组、共培养组、阳性对照组,每组接种10孔。培养72 h。采用ELISA法检测各组细胞培养上清液中IL-4、IFN-γ的含量。结果同源T细胞Ⅰ、Ⅱ组组间细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ比较差异无统计学意义(P>0.05);与同源T细胞Ⅰ、Ⅱ组比较,共培养组和阳性对照组细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ浓度显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与共培养组比较,阳性对照组细胞培养上清液中IL-4浓度显著升高,IFN-γ浓度显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论人胎盘来源间充质干细胞可抑制活化的T淋巴细胞分泌IL-4的能力、促进IFN-γ的能力,胎盘间充质干细胞可能具有促进Th0向Th1细胞分化的作用。 展开更多
关键词 人胎盘来源间充质干细胞 MLC体系 共培养 白细胞介素-4 Γ干扰素
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心肌微环境对胎盘间充质干细胞向心肌细胞分化的影响 被引量:1
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作者 李昆 李世正 张蕴莉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第29期16-20,共5页
目的观察心肌微环境对胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法用心肌细胞培养上清液模拟心肌微环境诱导hPDMSCs向心肌细胞分化,同时设置20%DMEM培养的对照组。每天于显微... 目的观察心肌微环境对胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)向心肌细胞分化的影响。方法用心肌细胞培养上清液模拟心肌微环境诱导hPDMSCs向心肌细胞分化,同时设置20%DMEM培养的对照组。每天于显微镜下观察细胞形态学变化,每两天台盼蓝拒染法计数细胞,免疫组织化学法检测ɑ-横纹肌肌动蛋白的表达,免疫荧光法检测心肌肌钙蛋白(Icardiac troponin I,cTnI)的表达,RT-PCR法检测心钠素(atrial natriuretic factor,ANF)、β-肌球蛋白重链(beta-myocin heavy chain,β-MHC)mRNA的表达。结果对照组细胞保持较快的增殖速度,不表达ɑ-横纹肌肌动蛋白、cTnⅠ、ANF、β-MHC;心肌细胞培养上清液模拟的心肌微环境组细胞增殖速度较慢,表达ɑ-横纹肌肌动蛋白、cTnⅠ、ANF、β-MHC。结论心肌微环境能够诱导hPDMSCs向心肌细胞分化。 展开更多
关键词 胎盘间充质干细胞 心肌细胞 心肌微环境
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同一供者及不同供者的人胎盘MSCs与脐静脉内皮细胞复合培养的比较研究 被引量:1
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作者 杨婧 项舟 +6 位作者 魏代清 黄潇 高宇 高博 舒涛 段鑫 张兴栋 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期916-922,共7页
目的比较同一供者及不同供者的人胎盘MSCs(human placenta-derived MSCs,HPMSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)三维复合培养效果,为体外构建三维血管化组织工程骨提供实验依据。方法取健康足月产... 目的比较同一供者及不同供者的人胎盘MSCs(human placenta-derived MSCs,HPMSCs)与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)三维复合培养效果,为体外构建三维血管化组织工程骨提供实验依据。方法取健康足月产妇自愿捐赠的胎盘及脐带组织,采用Ⅳ型胶原酶消化和人淋巴细胞分层液密度梯度离心法分离培养HPMSCs,通过流式细胞学检测细胞表型,取第2代细胞向成骨细胞诱导培养鉴定;以Ⅰ型胶原酶消化分离培养HUVECs,通过Ⅷ因子相关抗原因子免疫组织化学染色进行鉴定。实验分为两组,A组取不同供者的第3代HUVECs和成骨诱导培养3周的第3代HPMSCs以1∶1比例复合种植于胶原水凝胶,制备细胞-胶原水凝胶复合物;B组将同一供者的以上两种细胞同法复合制备复合物。复合培养第1、3、5、7天取材,行CD31免疫荧光染色,于激光共聚焦显微镜下观察其成血管倾向,测量复合物中的索道长度和节点数,并进行统计学分析。结果经鉴定,成功分离培养HPMSCs及HUVECs。CD31免疫荧光染色示,与A组相比,B组细胞-胶原水凝胶复合物中的HUVECs可在三维空间上较早、较好地伸展,在水凝胶内部相互交织能力较强,形成的索道更长,节点更多,网络更密集。第7天时B组索道长度和节点数分别为(8.11±0.62)mm/mm2及(21.30±1.41)个/mm2,显著优于A组的(6.68±0.35)mm/mm2及(17.10±1.10)个/mm2,差异均有统计学意义(t=0.894,P=0.000;t=0.732,P=0.000)。结论将同一供者的HPMSCs与HUVECs体外复合种植于胶原水凝胶支架上,比不同供者来源的细胞形成的网络成血管倾向更明显,交织连续性好,层次丰富。 展开更多
关键词 组织工程骨 血管化 人胎盘MSCs 人脐静脉内皮细胞 复合培养
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人胎盘间充质干细胞凝胶促进SD大鼠放射性皮肤损伤的愈合 被引量:4
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作者 徐晓明 陈艳 +5 位作者 宋倩 袁露 顾加明 张丽娟 耿洁 董坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2021年第25期3976-3980,共5页
背景:放射性皮肤损伤一直是困扰肿瘤临床放射治疗的难题。大量实验研究显示,人胎盘间充质干细胞具有表皮细胞分化潜能,可促进受损皮肤的愈合。目的:评价局部外用人胎盘间充质干细胞凝胶对大鼠放射性皮肤损伤愈合的影响。方法:取23只SD大... 背景:放射性皮肤损伤一直是困扰肿瘤临床放射治疗的难题。大量实验研究显示,人胎盘间充质干细胞具有表皮细胞分化潜能,可促进受损皮肤的愈合。目的:评价局部外用人胎盘间充质干细胞凝胶对大鼠放射性皮肤损伤愈合的影响。方法:取23只SD大鼠,随机分为阴性对照组、空白凝胶组、间充质干细胞凝胶组,其中阴性对照组3只,其余每组10只。各组接受臀背部皮肤照射(采用6 meV电子线,总剂量50 Gy,照射野3 cm×3 cm,单次剂量率500 cGy/min),照射后第23天开始,间充质干细胞治疗组创面均匀涂抹人胎盘间充质干细胞凝胶,空白凝胶对照组创面均匀涂抹空白凝胶,1次/d,连用6次,阴性对照组不进行任何治疗。从第1次用开始每4 d观察1次创面愈合情况,治疗第28天取材,观察人胎盘间充质干细胞凝胶对炎性细胞、创面微血管密度和创面胶原纤维的影响。结果与结论:①阴性对照组照射区皮肤红肿、溃烂;空白凝胶组照射区皮肤僵硬皱缩,观察期内创面均未愈合;间充质干细胞凝胶组照射区长出新生上皮组织,观察期内创面愈合完全;②与阴性对照组和空白凝胶组比较,在治疗后第16,20,24,28天间充质干细胞凝胶组创面愈合速度明显加快(P <0.05),创面面积明显缩小(P <0.05),炎性细胞计数明显减少(P <0.05),微血管计数CD31细胞阳性率明显增多(P <0.05),胶原纤维排列较整齐;③结果表明,局部外用人胎盘间充质干细胞凝胶可促进大鼠放射性皮肤损伤愈合。 展开更多
关键词 干细胞 人胎盘间充质干细胞凝胶 放射性皮肤损伤 血管化 愈合 炎症 胶原纤维 大鼠
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人胎盘间充质干细胞对呼吸道合胞病毒致毛细支气管炎大鼠肺组织视黄酸受体相关孤核受体γt基因的调控及意义 被引量:4
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作者 李得志 吴福玲 +4 位作者 高萌 李营营 石涛 韩亭亭 王海英 《中国医药》 2017年第2期216-220,共5页
目的研究人胎盘间充质干细胞(hpMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt(RORγt)的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组(RSV组)和hpMSCs组,每组1... 目的研究人胎盘间充质干细胞(hpMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)致毛细支气管炎大鼠肺组织中视黄酸受体相关孤核受体γt(RORγt)的调控及其意义。方法将36只sD幼鼠随机分为正常对照组、RSV致毛细支气管炎组(RSV组)和hpMSCs组,每组12只。RSV组和hpMSCs组均采用RSV滴鼻法建立毛细支气管炎动物模型,hpMSCs组接种病毒后向大鼠尾静脉内注射hpMSCs进行干细胞移植治疗,正常对照组不制作模型。观察3组肺组织病理学变化;应用酶联免疫吸附试验检测血浆白细胞介素17(IL-17)、IL-23的含量;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组外周血单个核细胞(PBMC)及肺组织中RORγtmRNA的水平;采用蛋白质印迹法检测3组肺组织中RORγt蛋白的表达。结果RSV组大鼠肺组织肺间质炎症明显,肺泡间隔增宽,肺泡腔变小,有大量嗜酸粒细胞、淋巴细胞浸润;与RSV组相比,hpMSCs组肺间质炎症明显减轻,肺泡腔相对增大,炎性细胞浸润减少;正常对照组大鼠肺组织无炎性改变。RSV组血浆IL-17、IL-23含量高于正常对照组[(56±6)ng/L比(27±4)ng/L、(61±5)ng/L比(19±3)ng/L](P〈0.05);hpMSCs组IL-17、IL-23含量[(30±4)ng/L、(40±6)ng/L]低于RSV组(P〈0.05)。RSV组大鼠PBMC及肺组织中RORTγt mRNA表达水平均高于正常对照组(PBMC:11.4±1.1比1.0±0.0,肺组织:8.1±0.7比1.0±0.0)(P〈0.05);hpMSCs组PBMC及肺组织中RORγtmRNA表达水平(PBMC:4.4±0.7.肺组织:3.4±0.5)均低于RSV组(均P〈0.05)。RSV组肺组织中RORγt蛋白的表达水平高于正常对照组(1.26±0.12比0.72±0.12)(P〈0.05);hpMSCs组肺组织中RORγt蛋白表达水平(0.88±0.14)低于RSV组(P〈0.05)。结论hpMSCs可以下调RSV致毛细支气管炎大鼠肺组织中特异性转录因子RORγt及相关细胞因子的表达水平,� 展开更多
关键词 毛细支气管炎 人胎盘间充质干细胞 呼吸道合胞病毒 视黄酸受体相关孤核受体γt
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Leptin转染人胎盘间充质干细胞对辐照后口腔黏膜修复细胞的作用及机制分析 被引量:1
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作者 杨雨 刘定坤 +3 位作者 李凌峰 隋欣 王碧舟 刘志辉 《中国实验诊断学》 2021年第12期1825-1830,共6页
目的探讨瘦素(leptin)转染的人胎盘间充质干细胞(HPMSCs)对被X射线辐照后的口腔黏膜修复细胞的作用影响,为进一步的临床治疗提供新思路。方法实验分为转染leptin的HPMSCs组(HPMSCs/Leptin)和转染空载体的HPMSCs组(HPMSCs/NC),将人牙龈... 目的探讨瘦素(leptin)转染的人胎盘间充质干细胞(HPMSCs)对被X射线辐照后的口腔黏膜修复细胞的作用影响,为进一步的临床治疗提供新思路。方法实验分为转染leptin的HPMSCs组(HPMSCs/Leptin)和转染空载体的HPMSCs组(HPMSCs/NC),将人牙龈成纤维细胞(HGnF)、人口腔角质细胞(HOK)和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行单剂量20Gy的X射线照射,Transwell检测3种被X射线辐照后细胞的迁移能力。构建HPMSCs/Leptin或HPMSCs/NC与辐照后HGnF、HOK和HUVEC的共培养体系,通过CCK-8检测被X射线辐照后3种细胞在24h、48h、72h、96h的增殖活性,ELISA检测被X射线辐照后3种细胞在24h、48h、72h表达炎症因子(人IL-1α、IL-1β、IL-6、IL-8、GM-CSF和TNF-α)的水平。结果 HPMSCs/Leptin可促进HUVEC的迁移,抑制HGnF和HOK的迁移。HPMSCs/Leptin能增强辐照损伤后的HOK和HUVEC的增殖能力,但对HGnF的增殖影响不明显。HPMSCs/Leptin能促进HGnF、HOK和HUVEC分泌炎症因子人IL-1α、IL-6、GM-CSF和TNF-α,但对人IL-1β和IL-8的分泌无明显影响。结论瘦素转染的人胎盘源间充质干细胞HPMSCs/Leptin可通过补充口腔黏膜修复细胞数量、调节炎症反应、促进血管新生等途径,对促进放创复合伤伤口愈合过程发挥一定的积极作用。 展开更多
关键词 瘦素 人胎盘源间充质干细胞 口腔颌面部创伤 放创复合伤
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