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全反式维A酸、阿维A和他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及意义 被引量:8
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作者 冉立伟 谭升顺 +3 位作者 王万卷 邱实 雷小兵 曾惟惠 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期972-974,978,共4页
目的探讨全反式维A酸(ATRA)、阿维A及他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及其意义。方法采用体外培养和流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-PI法),SABC免疫细胞化学方法检测细胞Bax/Bcl-2蛋白表达情况。结果浓度... 目的探讨全反式维A酸(ATRA)、阿维A及他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及其意义。方法采用体外培养和流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-PI法),SABC免疫细胞化学方法检测细胞Bax/Bcl-2蛋白表达情况。结果浓度均为10-5mol/L的ATRA、阿维A及他扎罗汀能不同程度地诱导了人黑色素瘤细胞A375凋亡,其中阿维A作用最为显著,凋亡率13.42%,明显高于对照组、ATRA及他扎罗汀组(均P<0.05);其次为ATRA(5.03%,明显高于对照组及他扎罗汀组,P<0.05)和他扎罗汀组(凋亡率2.88%)。3种维A酸亦使A375细胞Bax蛋白阳性表达增强而Bcl-2蛋白阳性表达减弱(P<0.05),其中阿维A作用最强,其次为ATRA和他扎罗汀。结论维A酸促进A375细胞凋亡可能部分通过以线粒体为核心的凋亡途径。阿维A可能是防治黑色素瘤的有效药物。 展开更多
关键词 维A酸 人黑色素瘤细胞 A375 凋亡 Bax/Bcl-2蛋白
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MEK/ERK通路阻断剂对黑素瘤细胞增殖的影响 被引量:5
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作者 刘宁 肖君刚 潘敏 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2012年第11期961-965,共5页
目的研究MEK/ERK通路阻断剂U0126对黑素瘤细胞A375增殖的影响,并探讨其作用机制。方法噻唑蓝法(MTT)测定U0126和传统抗癌药物达卡巴嗪(DTIC)分别及联合作用时对黑素瘤细胞A375的增殖抑制作用;流式细胞术检测不同药物处理组的细胞周期及... 目的研究MEK/ERK通路阻断剂U0126对黑素瘤细胞A375增殖的影响,并探讨其作用机制。方法噻唑蓝法(MTT)测定U0126和传统抗癌药物达卡巴嗪(DTIC)分别及联合作用时对黑素瘤细胞A375的增殖抑制作用;流式细胞术检测不同药物处理组的细胞周期及凋亡情况;Western blot检测U0126处理后细胞p-ERK1/2的表达。结果药物作用24h时U0126单一用药组对细胞的增殖抑制率高于DTIC单一用药组(P<0.01);联合应用U0126和DTIC对细胞的增殖抑制率明显高于DTIC用药组(P<0.01);U0126组与对照组相比,G1期细胞比例数提高了21.83%(P<0.01),凋亡率提高了13.96%(P<0.01),联合用药组与对照组相比G1期比例增加了26.64%(P<0.01),凋亡率亦明显提高了25.20%(P<0.01);不同浓度U0126处理细胞后,细胞的p-ERK1/2均明显降低(P<0.01)。结论 MEK/ERK通路阻断剂U0126可显著抑制黑素瘤细胞的增殖,其机制可能与降低p-ERK1/2的表达从而参与细胞周期调控有关;联合U0126用药有望成为治疗黑素瘤新的有效途径。 展开更多
关键词 MEK/ERK U0126 达卡巴嗪 黑素瘤细胞A375
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miR-146a对人黑色素瘤A375细胞增殖和侵袭的影响及作用机制 被引量:1
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作者 王丽纳 王红兰 +2 位作者 庄永灿 王凯波 陈文标 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第10期907-910,共4页
目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)对人黑色素瘤A375细胞增殖与侵袭能力的影响及可能机制。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-146a模拟物或抑制剂转染入黑色素瘤A375细胞,使miR-146a过表达或低表达,采用MTT检测细胞活力变化... 目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)对人黑色素瘤A375细胞增殖与侵袭能力的影响及可能机制。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将miR-146a模拟物或抑制剂转染入黑色素瘤A375细胞,使miR-146a过表达或低表达,采用MTT检测细胞活力变化,应用Transwell小室法检测A375细胞侵袭能力的变化。根据生物信息学软件预测FBXL10为miR-146a的下游靶基因,双荧光素酶报告分析进行验证。分别采用实时qPCR与Western blotting检测转染后各组A375细胞FBXL10 mRNA与蛋白的表达水平。结果与对照组比较,miR-146a模拟物能够显著抑制A375细胞增殖和侵袭能力(均P<0.05)。双荧光素酶报告分析结果显示,FBXL10为miR-146a的下游靶基因,miR-146a过表达可显著降低FBXL10蛋白与mRNA的表达水平;miR-146a抑制剂的作用则与之相反。结论miR-146a过表达能够抑制A375细胞增殖和侵袭能力,其作用机制可能与降低FBXL10表达相关。 展开更多
关键词 MIR-146A 人黑色素瘤 A375细胞 增殖 侵袭 FBXL10
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靶向敲除CDK2对人黑素瘤移植瘤中miRNA表达谱的影响
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作者 刘厚广 李铮 +5 位作者 霍珊珊 魏琼玲 葛铃 李丹 苏萌 谢广成 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1354-1360,共7页
目的研究靶向敲除CDK2对人黑素瘤移植瘤中miRNA表达谱的影响。方法设计CDK2的sgRNA靶向序列,构建含有sgCDK2-108的重组CRISP/Cas9慢病毒质粒并转染至HEK293T细胞进行重组慢病毒的包装和纯化。在SPF级的BALB/c-nude小鼠右前肢腋下皮下注... 目的研究靶向敲除CDK2对人黑素瘤移植瘤中miRNA表达谱的影响。方法设计CDK2的sgRNA靶向序列,构建含有sgCDK2-108的重组CRISP/Cas9慢病毒质粒并转染至HEK293T细胞进行重组慢病毒的包装和纯化。在SPF级的BALB/c-nude小鼠右前肢腋下皮下注射1×10^7个人黑素瘤细胞A375进行体外移植瘤小鼠模型构建。移植瘤成瘤第35天时,瘤内注射1×10^7 TU的重组sgCDK2-108和sgCDK2-NC慢病毒并继续培养30 d后收集样本。miRNA高通量测序检测靶向敲除CDK2后移植瘤内miRNA表达谱的改变、进行miRNA靶基因、GO富集分析、KEGG通路分析、新型miRNA鉴定及二级结构预测。结果sgCDK2-108慢病毒感染组与sgCDK2-NC阴性慢病毒感染组相比,共鉴定出762个miRNA,其中上调表达35个miRNA、下调表达13个miRNA;与移植瘤组相比,共鉴定出754个miRNA,其中上调表达28个miRNA、下调表达4个miRNA。miR-1a-3p、miR-133a-3p、miR-133b-3p和miR-375-3p为共同差异表达miRNA且具有多个潜在靶分子。GO分析显示miRNA靶基因功能主要为细胞代谢调控等,KEGG通路分析显示主要涉及RNA降解和自噬等。共鉴定出290个新型miRNA且具有“V”型或“直线”型两种结构。结论靶向敲除CDK2能够改变人黑素瘤移植瘤内的miRNA表达谱。 展开更多
关键词 人黑素瘤 CDK2 A375 移植瘤
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冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的影响及机制研究 被引量:15
5
作者 李春雨 王琪 +1 位作者 申珅 李国霞 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期658-662,共5页
目的研究冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的抑制作用及其作用机制。方法采用细胞培养技术体外培养A375细胞,用不同浓度冬凌草甲素处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖率;划痕实验分析细胞的迁移能力;Transwell小室实验研究细胞... 目的研究冬凌草甲素对人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的抑制作用及其作用机制。方法采用细胞培养技术体外培养A375细胞,用不同浓度冬凌草甲素处理细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖率;划痕实验分析细胞的迁移能力;Transwell小室实验研究细胞的侵袭能力;黏附实验评价细胞的黏附能力;Western blotting法检测转录因子Snail、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达。结果冬凌草甲素对A375细胞48 h半数抑制浓度(IC50)为47.94μmol/L;与对照组比较,5、10、20μmol/L冬凌草甲素可明显降低A375细胞的体外迁移、侵袭及黏附能力(P<0.05),且具有量效关系。冬凌草甲素作用于细胞后,E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P<0.05),Snail、N-cadherin、vimentin、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显下调(P<0.05)。结论冬凌草甲素具有体外抑制A375细胞侵袭和转移的作用,其机制可能与调控上皮-间质转化(EMT)及MMPs有关。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 人黑色素瘤细胞A375 迁移 侵袭 上皮-间质转化 基质金属蛋白酶
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银杏叶多糖对人恶性黑色素瘤细胞增殖的影响 被引量:15
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作者 张丽娇 佟巨慧 +2 位作者 高立宏 费瑞 杨阳 《长春师范学院学报(自然科学版)》 2008年第6期57-58,共2页
研究了银杏叶多糖(PGBL)对人恶性黑色素瘤(A375)细胞增殖的影响。采用50μg.ml-1、100μg.ml-1和200μg.ml-1浓度的PGBL作用于A375细胞,MTT法检测细胞生长和增殖情况。结果表明,不同浓度的PGBL都可抑制A375细胞的增殖,且呈浓度、时间依... 研究了银杏叶多糖(PGBL)对人恶性黑色素瘤(A375)细胞增殖的影响。采用50μg.ml-1、100μg.ml-1和200μg.ml-1浓度的PGBL作用于A375细胞,MTT法检测细胞生长和增殖情况。结果表明,不同浓度的PGBL都可抑制A375细胞的增殖,且呈浓度、时间依赖性。证明PGBL对恶性黑色素瘤有一定的防治作用。 展开更多
关键词 银杏叶多糖 人恶性黑色素瘤细胞 抗肿瘤
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黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响 被引量:7
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作者 匡菊香 雷沛鸿 石江 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第11期2510-2512,共3页
目的:探讨黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞株体外增殖的抑制作用。方法:选用人黑色素瘤A375细胞进行体外培养,以不同浓度的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞,连续6天使用倒置显微镜进行观察,计数,绘制生长曲线;以不同浓度(0.1~50μmol/L)的... 目的:探讨黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞株体外增殖的抑制作用。方法:选用人黑色素瘤A375细胞进行体外培养,以不同浓度的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞,连续6天使用倒置显微镜进行观察,计数,绘制生长曲线;以不同浓度(0.1~50μmol/L)的黄芩苷分别处理黑色素瘤A375细胞细胞24、48、72h后,用MTT法检测细胞生长抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:生长曲线及MTT法显示黄芩苷对黑色素瘤A375细胞有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性;流式细胞仪检测到细胞在黄芩苷作用后,细胞凋亡率增加。结论:黄芩苷对人黑色素瘤A375细胞具有明显抑制作用,细胞凋亡可能是其机制之一。 展开更多
关键词 黄芩苷 黑色素瘤A375细胞 MTT
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甘草素通过调控miRNA抑制人黑色素瘤A375细胞的侵袭转移 被引量:7
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作者 严淑 谷大为 +5 位作者 陈志敏 周明 石惠 王旸 吴雨晨 蔡云清 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期263-269,共7页
目的 :探讨甘草素对人黑色素瘤A375细胞侵袭转移的抑制作用及与miRNA相关调控机制。方法 :不同浓度甘草素处理24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活情况,确定甘草素对细胞无毒作用剂量;通过划痕试验和Transwell小室迁移、侵袭试验分别... 目的 :探讨甘草素对人黑色素瘤A375细胞侵袭转移的抑制作用及与miRNA相关调控机制。方法 :不同浓度甘草素处理24 h后,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活情况,确定甘草素对细胞无毒作用剂量;通过划痕试验和Transwell小室迁移、侵袭试验分别观察细胞的非定向迁移力和定向迁移侵袭力;miRNA芯片筛选差异表达的miRNA,q PCR方法验证hsa-miR-4534和hsa-miR-4487的下调表达;Western blot检测PTEN、p-AKT、AKT、MMP2和TIMP2蛋白表达。结果:10~100μmol/L剂量甘草素处理A375细胞24 h对细胞无明显损伤作用,划痕试验、Transwell小室迁移试验、侵袭试验显示甘草素能抑制A375细胞侵袭转移;甘草素可下调hsa-miR-4534和hsa-miR-4487的表达,上调PTEN、TIMP2表达水平,降低p-AKT、MMP2的表达水平。结论:甘草素通过下调hsa-miR-4534和hsa-miR-4487表达,进而上调PTEN和TIMP2靶基因的表达水平,阻碍p-AKT信号通路并降低MMP2蛋白表达,从而发挥抑制人黑色素瘤A375细胞侵袭和转移的作用。 展开更多
关键词 甘草素 A375细胞 hsa-miR-4534 hsa-miR-4487 侵袭转移
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黄芪注射液影响人恶性黑色素瘤细胞凋亡的实验研究 被引量:7
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作者 王俭 胡溪恬 +3 位作者 刘巧 杨颖 杨恺瑞 胡秀华 《吉林中医药》 2015年第4期407-409,414,共4页
目的探讨黄芪注射液在体外对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响。方法应用DAPI荧光染色观察黄芪注射液作用后A375细胞凋亡情况,设对照组;流式细胞仪检测黄芪注射液对A375细胞凋亡率的影响;分光光度法检测黄芪注射液作用后A375细胞中casp... 目的探讨黄芪注射液在体外对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响。方法应用DAPI荧光染色观察黄芪注射液作用后A375细胞凋亡情况,设对照组;流式细胞仪检测黄芪注射液对A375细胞凋亡率的影响;分光光度法检测黄芪注射液作用后A375细胞中caspase-3蛋白活性情况。结果与对照组相比,黄芪注射液处理组荧光显微镜下可以见到明显的凋亡小体,且呈时间和质量浓度依赖;同时发现黄芪注射液可使A375细胞凋亡率明显升高,并呈浓度依赖性;caspase-3蛋白活性检测发现,100,200 mg/m L的黄芪注射液不影响Caspase-3的活性,300,400 mg/m L的黄芪注射液降低Caspase-3的活性。结论黄芪注射液有诱导人恶性黑色素瘤细胞A375细胞凋亡的作用,其诱导黑色素瘤凋亡是通过影响Caspase-3蛋白非依赖性途径实现的。 展开更多
关键词 黄芪注射液 恶性黑色素瘤细胞 细胞凋亡 CASPASE-3
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紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响
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作者 高莉 谭雪 +1 位作者 罗静莺 闫明 《中国药业》 CAS 2024年第6期36-39,共4页
目的探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5... 目的探讨紫铆花素对人黑色素瘤细胞A375与人永生化角质形成细胞HaCaT共培养细胞生物学活性的影响。方法建立A375细胞与HaCaT细胞的共培养细胞体系,实验分为对照组(等体积培养液),紫铆花素低、中、高剂量组(以下简称低、中、高剂量组,0.5,1.0,5.0μg/L)。采用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性;采用流式细胞仪检测细胞的周期分布和线粒体膜电位;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)法检测干细胞因子(SCF)和其受体c-Kit,以及小眼畸形相关转录因子(MITF)的mRNA表达水平;采用Western blot法检测细胞酪氨酸酶相关蛋白1,2(TRP-1,TRP-2)及SCF,c-Kit,MITF的蛋白表达水平。结果与对照组比较,中、高剂量组细胞的增殖率均显著升高(P<0.01);与对照组比较,各剂量组G0/G1期细胞比例均显著降低,S期和G_(2)/M期细胞比例均显著升高(P<0.01),高线粒体膜电位细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01),SCF,c-Kit,MITF的mRNA表达水平及SCF,c-Kit,MITF,TRP-1,TRP-2的蛋白表达水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论紫铆花素可能通过调节SCF,cKit,MITF的表达而影响A375细胞与HaCaT细胞共培养细胞的增殖、细胞周期和线粒体膜电位等细胞生物学活性。 展开更多
关键词 紫铆花素 人黑色素瘤细胞A375 人永生化角质形成细胞HaCaT 细胞周期 线粒体膜电位 干细胞因子 干细胞因子受体 小眼畸形相关转录因子
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补骨脂注射液联合NB-UVB对人黑素瘤A375细胞增殖及黑素合成的影响 被引量:4
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作者 武松江 刘志军 向亚萍 《中国皮肤性病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期5-8,共4页
目的通过观察补骨脂注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人黑素瘤A375细胞的增殖、黑素的合成以及酪氨酸酶活性的影响,探讨两者协同治疗白癜风的可能机制。方法选择一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J... 目的通过观察补骨脂注射液联合窄谱中波紫外线(NB-UVB)对人黑素瘤A375细胞的增殖、黑素的合成以及酪氨酸酶活性的影响,探讨两者协同治疗白癜风的可能机制。方法选择一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)共同作用于人黑素瘤A375细胞后,通过MTT法观察其对人黑素瘤A375细胞细胞增殖的影响,Na OH裂解法测定黑素的含量,多巴氧化法测定酪氨酸酶活性的变化。结果补骨脂注射液+NB-UVB组中A375细胞培养至48h,72h后检测到的细胞增殖情况与单一补骨脂注射液组、NB-UVB组及空白组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补骨脂注射液+NB-UVB组均显示可上调细胞内酪氨酸酶的活性及黑素的生成量,且与各实验干预组及空白组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论一定浓度的补骨脂注射液(稀释后浓度为0.5%)联合一定剂量的NB-UVB(22m J/cm2)可以协同促进人黑素瘤A375细胞的增殖,上调细胞酪氨酸酶活性,从而达到促进黑素合成的效果。 展开更多
关键词 人黑素瘤A375细胞 补骨脂注射液 NB—UVB 酪氨酸酶活性 黑素含量
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蛋白激酶C在吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡中的作用 被引量:3
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作者 王澈 王敏伟 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1033-1036,共4页
目的研究蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)在吴茱萸碱(evodiamine)诱导的A375-S2细胞死亡过程中的作用。方法TUNEL法检测吴茱萸碱诱导细胞凋亡的比例。MTT法测定药物对A375-S2细胞的细胞毒作用。Westernblotting法分析药物作用后对ERK及... 目的研究蛋白激酶C(proteinkinaseC,PKC)在吴茱萸碱(evodiamine)诱导的A375-S2细胞死亡过程中的作用。方法TUNEL法检测吴茱萸碱诱导细胞凋亡的比例。MTT法测定药物对A375-S2细胞的细胞毒作用。Westernblotting法分析药物作用后对ERK及其磷酸化蛋白和Bcl-2家族蛋白的影响。结果吴茱萸碱诱导A375-S2细胞的死亡在24h以前以凋亡为主。PKC抑制剂staurosporine和ERK抑制剂PD98059均能促进吴茱萸碱诱导的A375-S2细胞死亡。吴茱萸碱能够抑制PKC的活力,下调ERK及其磷酸化蛋白的表达水平,并使Bax/Bcl-2表达比例上升。而staurosporine对吴茱萸碱抑制PKC活力,降低ERK及其磷酸化蛋白和Bcl-2的表达有进一步增强的作用。结论在吴茱萸碱诱导的A375-S2细胞死亡中,PKC位于ERK和Bcl-2的上游发挥其调节作用。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 人黑色素瘤A375-S2细胞 蛋白激酶C
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新狼毒素A诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡的机制研究 被引量:3
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作者 丁杨芳 李德芳 +3 位作者 陈小宇 任博雪 赵微 郑秋生 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2019年第7期1240-1245,共6页
为探讨新狼毒素A抑制人黑色素瘤A375细胞增殖及诱导凋亡的作用。本实验采用噻唑蓝(MTT)法检测新狼毒素A对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响,Hoechst33258法观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位,Westernblot检测凋亡相关... 为探讨新狼毒素A抑制人黑色素瘤A375细胞增殖及诱导凋亡的作用。本实验采用噻唑蓝(MTT)法检测新狼毒素A对人黑色素瘤A375细胞增殖的影响,Hoechst33258法观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞凋亡率和线粒体膜电位,Westernblot检测凋亡相关蛋白表达。结果显示新狼毒素A以时间剂量依赖性的方式显著抑制A375细胞的增殖;不同浓度新狼毒素A(0、15、30、45μmol/L)作用于A375细胞48h后细胞出现显著凋亡特征,新狼毒素A增加A375细胞的凋亡率且降低了线粒体膜电位,上调Bax、caspase-3和细胞色素C(CytochromeC)蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。以上结果说明新狼毒素A抑制A375细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与诱导线粒体途径的凋亡有关。 展开更多
关键词 新狼毒素A 人黑色素瘤A375 抗肿瘤 凋亡
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ns脉冲电场诱导裸小鼠皮下人黑色素移植瘤凋亡 被引量:3
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作者 米彦 姚陈果 +3 位作者 李成祥 孙才新 唐均英 杨方黎 《高电压技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第9期2207-2212,共6页
为研究ns脉冲电场对在体肿瘤的诱导凋亡效应,以接种人黑色素瘤细胞A375的BALB/c裸小鼠为对象,采用电场强度20kV/cm、脉冲宽度300ns的脉冲电场处理后,抑瘤效应宏观观察到肿瘤组织的生长受到显著抑制(P<0.01),透射电子显微镜观察到典... 为研究ns脉冲电场对在体肿瘤的诱导凋亡效应,以接种人黑色素瘤细胞A375的BALB/c裸小鼠为对象,采用电场强度20kV/cm、脉冲宽度300ns的脉冲电场处理后,抑瘤效应宏观观察到肿瘤组织的生长受到显著抑制(P<0.01),透射电子显微镜观察到典型的凋亡细胞超微结构形态,免疫荧光染色法定性检测到caspase-3蛋白表达明显增强,用RT-PCR方法定量检测到caspase-3 mRNA表达明显增强(P<0.01)。实验结果证实了ns脉冲电场能有效抑制在体肿瘤组织生长,机制在于其通过活化肿瘤细胞caspase-3蛋白酶而诱导肿瘤细胞调亡,为ns脉冲电场治疗肿瘤提供了依据。 展开更多
关键词 ns脉冲电场 BALB/C裸小鼠 人黑色素瘤细胞A375 凋亡 caspase-3 肿瘤治疗
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2-丁亚砜-1,4-萘醌诱导人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡及其机制 被引量:2
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作者 徐宛婷 李雨 +2 位作者 罗英花 刘畅 金成浩 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页
目的:探究2-丁亚砜-1,4-萘醌(BSNQ)对人恶性黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用,阐明其诱导凋亡的机制.方法:MTT比色法检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的杀伤作用.Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的诱导凋... 目的:探究2-丁亚砜-1,4-萘醌(BSNQ)对人恶性黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用,阐明其诱导凋亡的机制.方法:MTT比色法检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的杀伤作用.Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用.Western blotting法检测Akt信号通路相关蛋白的表达情况.流式细胞术检测BSNQ对A375细胞内ROS的调控作用.结果:BSNQ处理A375细胞其存活率逐渐降低.BSNQ能够显著诱导A375细胞发生凋亡.抗凋亡蛋白p-Akt和Bcl-2表达量逐渐降低,pro-caspase-3表达量逐渐降低,促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3表达量逐渐升高(P<0.05).BSNQ能够显著增加细胞内ROS水平.同时,BSNQ与NAC共同处理后,能够显著降低BSNQ诱导的细胞凋亡程度.结论:BSNQ通过上调细胞内ROS水平,下调Akt信号通路的活性,诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡. 展开更多
关键词 2-丁亚砜-1 4-萘醌 人黑色素瘤A375细胞 细胞凋亡 AKT信号通路 活性氧
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多酚氧化酶抑制剂高良姜素抗黑色素瘤机制研究 被引量:2
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作者 杨镓宁 邓菲 潘宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期1000-1004,共5页
目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法... 目的:研究高良姜素对多酚氧化酶(PPO)的抑制作用机制,并探讨了高良姜素与多酚氧化酶的结合机制,以期获得高良姜素抗人恶性黑色素瘤细胞株A375机理。方法:分光光度法检测高良姜素对PPO的抑制作用和抑制作用类型;荧光光谱法和分子对接法检测高良姜素与PPO酶的结合方式;MTT法测定高良姜素人恶性黑色素瘤细胞株A375增殖的抑制作用,Transwell法检测高良姜素对A375细胞侵袭的抑制作用。结果:高良姜素是一种竞争型的PPO抑制剂,对PPO氧化酶的半抑制率IC_(50)为(47.86±3.33)μmol/L,抑制常数Ki为(24.83±1.45)μmol/L;高良姜素能够有效猝灭PPO的荧光,高良姜素与PPO的结合常数Ka为(4.67±0.43)×10~4L/mol;高良姜素能够与PPO的活性中心铜离子发生结合作用,并与催化基团His259形成氢键;高良姜素能够明显的抑制A375细胞的增殖和转移,且细胞中的PPO活性和黑色素的合成量降低。结论:高良姜素是一个竞争性的PPO酶抑制剂,对调节黑色素水平起到重要作用,为临床抗皮肤癌提供了理论基础。 展开更多
关键词 高良姜素 多酚氧化酶 抑制作用 荧光光谱 螯合金属铜离子 人恶性黑色素瘤细胞株A375 凋亡
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芍药苷对人黑素瘤细胞株A375增殖凋亡的影响 被引量:2
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作者 张建青 李建军 +3 位作者 彭友华 徐观辉 张明爽 郑锦芬 《中国麻风皮肤病杂志》 2012年第4期242-245,共4页
目的:研究不同浓度芍药苷(PF)对人黑素瘤细胞A375增殖抑制及早期凋亡的影响。方法:将体外培养的人黑素瘤细胞株A375分为6组,5个实验组分别加入不同浓度PF(2、1、0.5、0.1、0.01 mg/mL),对照组不加PF。光镜下观察细胞密度及形态、MTT法... 目的:研究不同浓度芍药苷(PF)对人黑素瘤细胞A375增殖抑制及早期凋亡的影响。方法:将体外培养的人黑素瘤细胞株A375分为6组,5个实验组分别加入不同浓度PF(2、1、0.5、0.1、0.01 mg/mL),对照组不加PF。光镜下观察细胞密度及形态、MTT法测定细胞增殖抑制率,Annexin V/PI染色法检测细胞早期凋亡率。结果:镜下观察可见随着PF浓度的增加,黑素瘤细胞株A375数量降低,贴壁能力渐差,细胞形态渐圆钝,甚至出现皱缩。与对照组相比,不同浓度PF处理A375细胞24 h、48 h和72 h后,PF对细胞有浓度依赖性的增殖抑制作用(P<0.05),但未见明显的时间依赖性(P>0.05)。不同浓度PF干预24 h时A375细胞的早期凋亡率,对照组和各实验组差异无统计学意义(P<0.05)。结论:PF能抑制人黑素瘤细胞株A375的增殖,这种抑制作用呈浓度依赖性而非时间依赖性,但对A375细胞早期凋亡率无明显影响。 展开更多
关键词 芍药苷 人黑素瘤细胞A375 增殖抑制率 早期凋亡率
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杨梅枝条醇提物对A375细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制 被引量:2
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作者 郑园园 俞浙萍 +4 位作者 张淑文 李有贵 孙鹂 郑锡良 戚行江 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2022年第5期974-983,共10页
杨梅(Myrica rubra)具有较高的药用价值,利用杨梅枝条醇提物(Myrica rubra branch extract,MRBE)开展其对人恶性黑色素瘤A375细胞的作用研究。采用MTT法、PI流式细胞术、Annexin V-PI双染流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法,解... 杨梅(Myrica rubra)具有较高的药用价值,利用杨梅枝条醇提物(Myrica rubra branch extract,MRBE)开展其对人恶性黑色素瘤A375细胞的作用研究。采用MTT法、PI流式细胞术、Annexin V-PI双染流式细胞术、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)等方法,解析MRBE诱导A375细胞阻滞与凋亡的潜在作用机制。结果表明:MRBE对A375细胞的抑制率呈剂量依赖效应关系,抑制率最高达49.46%;流式细胞术结果表明,MRBE作用48 h可使A375细胞阻滞于S期并发生凋亡;qRT-PCR结果进一步表明,MRBE可能通过上调P21和下调CyclinA、CyclinD、CDK2、CDK4、CDK6、E2F1等基因的表达,诱导A375细胞阻滞于S期,同时下调Bcl-w和Raf基因的表达促使A375细胞凋亡。初步解析了MRBE对人恶性黑色素瘤A375细胞增殖和凋亡的作用机制,为利用MRBE研发抗黑色素瘤潜在药物提供科学依据,同时有助于提高杨梅枝条的药用附加值,拓宽杨梅产业链多元化发展。 展开更多
关键词 杨梅 枝条醇提物 人黑色素瘤A375细胞 细胞周期 细胞凋亡
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NF-κB抑制剂PDTC对人黑素瘤A375细胞增殖的影响 被引量:2
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作者 江从军 周艳梅 +1 位作者 张汝芝 柴继侠 《齐齐哈尔医学院学报》 2012年第18期2445-2446,共2页
目的研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)对人黑素瘤A375细胞的生长抑制作用。方法不同浓度的PDTC作用于A375细胞不同时间后,MTT法测定其对A375细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学方法检测PDTC作用下A375... 目的研究核转录因子-κB(NF-κB)特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲盐酸(PDTC)对人黑素瘤A375细胞的生长抑制作用。方法不同浓度的PDTC作用于A375细胞不同时间后,MTT法测定其对A375细胞增殖的抑制率,免疫细胞化学方法检测PDTC作用下A375细胞增生细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果经PDTC处理的实验组,肿瘤细胞增殖活性明显受到抑制(P<0.05,P<0.01),呈时间和剂量依赖性;与对照组相比,PDTC作用后A375细胞PCNA表达降低(P<0.01),且呈明显的剂量依赖关系。结论 PDTC具有显著抑制人黑素瘤A375细胞生长及PCNA表达的作用,是一种有潜力的抑制黑素瘤增殖的药物。 展开更多
关键词 黑素瘤细胞A375 吡咯烷二硫代氨基甲盐酸 核转录因子-ΚB 增殖 增生细胞核抗原
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Apoptotic Effect of Cryptotanshinone on Human Melanoma A375 Cells
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作者 Jinqian LI Jiaru WANG +9 位作者 Lingqi MENG Yi ZHANG Hao WANG Wanting XU Yang LIU Yu ZHANG Shinong WANG Yuqing ZHAI Yinghua LUO Chenghao JIN 《Medicinal Plant》 CAS 2018年第6期39-42,共4页
[Objectives] The aim was to investigate the effect of cryptotanshinone on apoptosis of human melanoma A375 cells and its related mechanism of mitochondrial pathway.[Methods]The cytotoxic effect of cryptotanshinone on ... [Objectives] The aim was to investigate the effect of cryptotanshinone on apoptosis of human melanoma A375 cells and its related mechanism of mitochondrial pathway.[Methods]The cytotoxic effect of cryptotanshinone on apoptosis of human melanoma A375 cells was detected by MTT colorimetry.The apoptosis of melanoma A375 cells was detected with Annexin V-FITC/PI and observed by fluorescence inverted microscope.The expression of apoptosis-related proteins was detected by Western blotting.[Results]The viability of the A375 cells decreased with the increase of drug concentration.The fluorescence intensity of the cells increased with the treatment time.The expression of pro-apoptotic protein caspase-3 gradually increased,while the expression of apoptosis-inhibiting proteins p-AKT and Bcl-2 gradually reduced.[Conclusions]Cryptotanshinone induces apoptosis of human melanoma A375 cells via AKT signaling pathway,thus exerting a good cytotoxic effect on A375 cells. 展开更多
关键词 CRYPTOTANSHINONE human melanoma A375 cells CYTOTOXIC EFFECT Apoptosis AKT signaling pathway
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