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砷对人永生化角质形成细胞核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1基因表达的影响 被引量:1
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作者 陈柔锦 吴军 +4 位作者 李煜 刘媛 葛龙 郎曼 郑玉建 《环境与健康杂志》 CAS 北大核心 2015年第10期855-858,共4页
目的探讨不同剂量亚砷酸钠对人永生化角质形成细胞(human keratinocytes cell,Ha Ca T)Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)和核转录因了红细胞系-2 p45相关因子-2(Nrf2)基因表达的影响。方法将Ha Ca T细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、1... 目的探讨不同剂量亚砷酸钠对人永生化角质形成细胞(human keratinocytes cell,Ha Ca T)Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)和核转录因了红细胞系-2 p45相关因子-2(Nrf2)基因表达的影响。方法将Ha Ca T细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、1.30、3.25、6.50μmol/L的亚砷酸钠培养基中培养24、48、72 h。采用流式细胞仪检测Ha Ca T细胞凋亡率,采用实时荧光定量(real-time quantitative PCR)检测Ha Ca T细胞中Nrf2、Keap1 m RNA的表达水平。结果与对照组相比,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒24 h后Ha Ca T细胞的凋亡率降低,而3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒48、72 h后Ha Ca T细胞的凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着亚砷酸钠染毒时间的延长和染毒剂量的升高,Ha Ca T细胞的凋亡率均呈上升趋势。与对照组相比,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒24、48、72 h和3.25μmol/L亚砷酸钠染毒24 h后Ha Ca T细胞中Nrf2 m RNA的表达水平均增高,而3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒72 h后Ha Ca T细胞中Nrf2 m RNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着亚砷酸钠染毒时间的延长和染毒剂量的升高,Ha Ca T细胞Nrf2 m RNA的表达水平均呈下降趋势。与对照组相比,1.30、3.25μmol/L亚砷酸钠染毒72 h和3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒48 h后Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着亚砷酸钠染毒时间的延长,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈波动性上升,3.25μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈逐渐上升趋势,6.50μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈先上升后下降;随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,24、72 h时Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈下降趋势,而48 h时Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈上升趋势。结论亚砷酸钠可抑制Ha Ca T细胞的生长,诱导凋亡和角化的发生,其机制可� 展开更多
关键词 亚砷酸钠 人永生化角质形成细胞 核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2 Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1 基因
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UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT的DNA损伤及其机制 被引量:9
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作者 李辰 齐雪松 +3 位作者 李宁 苟巧 刘建香 田梅 《中国工业医学杂志》 CAS 2015年第6期403-405,424,F0003,共5页
目的研究不同剂量UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT DNA损伤的影响及机制。方法采用紫外辐照装置照射人角质形成细胞Ha Ca T建立急性紫外辐射细胞模型;MTT法检测不同剂量紫外辐射对细胞存活的影响;免疫荧光和流式细胞术分别检测细胞核内磷... 目的研究不同剂量UVB辐射对人角质形成细胞HaCaT DNA损伤的影响及机制。方法采用紫外辐照装置照射人角质形成细胞Ha Ca T建立急性紫外辐射细胞模型;MTT法检测不同剂量紫外辐射对细胞存活的影响;免疫荧光和流式细胞术分别检测细胞核内磷酸化γH2AX焦点形成及蛋白表达水平;Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测不同剂量不同时间照射后早期细胞凋亡百分数;免疫印迹法分别检测Caspase-3活化水平。结果 UVB辐射可抑制HaCaT细胞的存活,有一定的量效关系;相对较大剂量的UVB辐射可观察到明显的焦点形成;UVB照射后各剂量点磷酸化γH2AX的表达均明显高于未照射的对照组;UVB辐射可通过Caspase-3活化诱导细胞发生早期凋亡,照射后20 h,早期凋亡细胞百分数明显增加,特别是在UVB相对较大剂量范围内更明显,并有随照射剂量增高而增加的趋势。结论 UVB辐射可通过诱导DNA双链断裂抑制人HaCaT细胞存活,并通过激活Caspase-3而诱导细胞凋亡,细胞凋亡延迟,可能导致细胞更易于发生突变进而形成皮肤肿瘤。 展开更多
关键词 UVB辐射 DNA损伤 γH2AX 人角质形成细胞HaCaT 皮肤癌
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纤维连接蛋白调理的人表皮角质细胞粘附、迁移功能 被引量:1
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作者 曹启栋 许伟石 +1 位作者 金曙雯 徐丽菊 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2001年第4期225-227,共3页
目的 观察纤维连接蛋白(FN)对人表皮角质细胞(EKC)在体外培养过程中有无粘附、迁移作用。方法 利用不同剂量的 FN,对新鲜 EKC及体外培养7-10 d的 EKC进行粘附、迁移功能测定。应用间接免疫荧光染色法,检测α5... 目的 观察纤维连接蛋白(FN)对人表皮角质细胞(EKC)在体外培养过程中有无粘附、迁移作用。方法 利用不同剂量的 FN,对新鲜 EKC及体外培养7-10 d的 EKC进行粘附、迁移功能测定。应用间接免疫荧光染色法,检测α5β1受体在细胞培养前后的表达。结果(1)新鲜EKC在 FN调理下的粘附、迁移值明显低于体外培养 7-10 d的 EKC,粘附值分别为(0. 9±0. 5)%、(37.26±8.34)%(P<0.01),迁移指数分别为17 5±2 .5、48.7±3.2(P<0.01)。(2)培养1d的EKC及组织块体外培养后增生的表皮细胞,α5β1;受体的表达染色阳性;培养 7 d的 EKC及组织块增生表皮外周边缘染色呈强阳性;新鲜EKC染色阴性或弱阳性。结论 (1)新鲜EKC与培养7-10d的EKC生物学功能间差异有显著性意义。(2)EKC生物学功能活跃的阶段(培养7d)和部位(组织块边缘增生的表皮细胞)α5β1民受体表达最强。(3)体外培养能有效地诱导和激活 EKC的粘附、迁移功能,使生物学功能相对静止的EKC变成了功能活跃的EKC细胞。 展开更多
关键词 人表皮角质细胞 细胞粘附 细胞运动迁移 代谢激活 创面修复术
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