基于细胞焦亡理论研究白细胞介素-1β与白细胞介素-18在抗结核药物性肝损伤中的临床意义 被引量：8

1

作者 李玉红 郝明媛 +3 位作者 焦连丽 王爱欣 任琦 冯福民 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期396-399,404,共5页

目的基于细胞焦亡(pyroptosis)理论研究白细胞介素(IL)-1β与IL-18在抗结核药物性肝损伤(ADLI)中的表达及临床意义。方法选取2016年1月至2017年1月于唐山市第四医院接受住院治疗的肺结核初治患者,收集符合ADLI的41患者为病例组,按照年... 目的基于细胞焦亡(pyroptosis)理论研究白细胞介素(IL)-1β与IL-18在抗结核药物性肝损伤(ADLI)中的表达及临床意义。方法选取2016年1月至2017年1月于唐山市第四医院接受住院治疗的肺结核初治患者,收集符合ADLI的41患者为病例组,按照年龄、性别、用药方案匹配的原则选取用药后非ADLI(non-ADLI)患者41例为对照组。酶联免疫法(ELISA)检测ADLI组和非ADLI组患者血清IL-1β及IL-18水平,用受试者工作特征曲线下面积(ROC-AUC)评估IL-1β预测ADLI的价值。结果2组患者血清IL-1β水平差异有统计学意义(P<0.05),IL-18水平无统计学差异(P>0.05);IL-1β与天冬氨酸转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及碱性磷酸酶(ALP)存在正相关(均P<0.05),IL-1β水平预测ADLI的AUC为0.889。结论IL-1β可能是与ADLI发生发展相关的分子标记物,可以成为ADLI诊断的一个新作用靶点。 展开更多

关键词 抗结核药物性肝损伤 细胞焦亡 白细胞介素-1Β 白细胞介素-18

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人白细胞介素-18真核表达载体的构建及测序分析 被引量：7

2

作者 王福祥 孙永涛 李光玉 《医学研究生学报》 CAS 2004年第2期111-113,共3页

目的 :构建含有人白细胞介素 18(IL 18)基因的真核表达载体 ,并对其进行测序分析。　方法 :通过分子克隆技术 ,将IL 18基因插入真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达载体pVAX1 IL 18,并经BamHⅠ /EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。利用Blast程... 目的 :构建含有人白细胞介素 18(IL 18)基因的真核表达载体 ,并对其进行测序分析。　方法 :通过分子克隆技术 ,将IL 18基因插入真核表达载体 pVAX1中 ,构建真核表达载体pVAX1 IL 18,并经BamHⅠ /EcoRⅠ双酶切及测序鉴定。利用Blast程序 ,搜索NCBIGenBank中与重组质粒 (pVAX1 IL 18)中编码IL 18基因同源的序列。结果 :人IL 18基因成功地克隆至真核表达载体pVAX1中 ,pVAX1 IL 18中编码IL 18的序列与GenBank中所报道的IL 18编码序列完全一致。　结论 :成功地构建人IL 18基因真核表达载体 。 展开更多

关键词 人白细胞介素—18 真核表达载体 DNA测序分析

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鸡贫血病毒VP3基因与人IL-18基因的共表达对人肝癌细胞BEL-7402的作用 被引量：5

3

作者 连海 金宁一 +6 位作者 李霄 陈立刚 张静敏 管国芳 孙丽丽 李雪梅 郑洪玲 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期229-232,共4页

目的利用凋亡素和IL18基因的抗肿瘤优势,设计构建共表达凋亡素和hIL-18基因的真核重组子,检测其在体外对人肝癌细胞BEL7402的作用效果,旨在探索新的肿瘤基因治疗方法。方法将凋亡素VP3基因与hIL-18基因一同克隆到真核表达载体pVAX1上,... 目的利用凋亡素和IL18基因的抗肿瘤优势,设计构建共表达凋亡素和hIL-18基因的真核重组子,检测其在体外对人肝癌细胞BEL7402的作用效果,旨在探索新的肿瘤基因治疗方法。方法将凋亡素VP3基因与hIL-18基因一同克隆到真核表达载体pVAX1上,构建重组质粒pVVP3IL-18,经脂质体介导,转染人肝癌细胞BEL7402,AO/EB染色,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化,透射电镜分析凋亡细胞超微结构变化。结果随着转染时间的延长,重组质粒pVVP3IL18所表达的目的蛋白对BEL7402细胞的杀伤作用逐渐增强,作用48h,形态学观察表明BEL7402细胞发生明显的凋亡,凋亡率可达(56.5±11.9)%,并且大部分细胞为TUNEL阳性着色,流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰,透射电镜观察可见细胞核固缩、染色质聚集等典型的凋亡超微结构变化。结论联合应用凋亡素与hIL18基因,在体外对人肝癌细胞BEL7402具有明显的凋亡诱导作用。 展开更多

关键词 鸡贫血病毒 凋亡素 人白细胞介素18 肝癌细胞 凋亡

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人白细胞介素-18的基因克隆及原核表达 被引量：3

4

作者 缪海珍 杨吉成 +2 位作者 盛伟华 阳小卫 李丽娥 《苏州医学院学报》 2000年第9期799-801,共3页

目的　为进一步研究人白细胞介素 (hIL - 18)的生物学特性打下基础 ,进行hIL - 18的基因克隆及原核表达。方法　采用反转录PCR(RT -PCR)法从正常人外周血白细胞中克隆hIL - 18基因 ,并重组于PBV2 2 0表达载体上 ,经酶切初步鉴定后进行DN... 目的　为进一步研究人白细胞介素 (hIL - 18)的生物学特性打下基础 ,进行hIL - 18的基因克隆及原核表达。方法　采用反转录PCR(RT -PCR)法从正常人外周血白细胞中克隆hIL - 18基因 ,并重组于PBV2 2 0表达载体上 ,经酶切初步鉴定后进行DNA序列分析 ,继而观察重组hIL - 18基因在大肠杆菌中不同诱导时间表达量的差异。结果　所克隆的基因与预期结果一致 ,并在 42℃诱导 5h时表达量最高。结论　成功地克隆了hIL - 18基因 。 展开更多

关键词 人白细胞介素-18 RT-PCR 表达 基因克隆

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HCV、HBV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1的含量变化 被引量：4

5

作者 付汉东 张爱华 +1 位作者 余小燕 魏威 《中国感染控制杂志》 CAS 2011年第4期256-259,共4页

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人免疫缺陷病毒(HIV)间合并感染患者血清白细胞介素(IL)-18、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBV、HCV、... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、人免疫缺陷病毒(HIV)间合并感染患者血清白细胞介素(IL)-18、血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)的表达及临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测HBV、HCV、HIV间合并感染以及单纯HBV或HCV感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量,同时检测合并感染患者肝功能生化指标血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)含量,并分析它们与IL-18、VEGF、TGF-β_1的相关性;另从健康体检人群中随机抽取30例作对照组进行IL-18、VEGF、TGF-β_1检测,并进行统计学分析。结果 HBV、HCV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量变化与性别无相关性(P>0.05);比单纯HBV和HCV感染以及正常对照组均显著升高(P<0.01),其中IL-18、VEGF、TGF-β_1值以HBV+HCV+HIV感染模式最高[分别为(312.44±45.24)pg/L、(326.43±51.24)pg/mL、(283.51±49,27)μg/L],其次为HCV+HIV感染模式[分别为(224.32±34.37)pg/L、(257.72±47.72)pg/mL、(204.11±43.28)μg/L],HBV+HCV感染模式最低[分别为(129.44±27.62)pg/L、(147.67±41.22)pg/mL、(120.47±30.23)μg/L],三者间比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。HBV、HCV、HIV间合并感染患者血清IL-18、VEGF、TGF-β_1水平与相应患者肝功能生化指标ALT、AST、GGT均呈正相关(r值分别为:0.667、0.652、0.672;0.643、0.618、0.623;0.712、0.673、0.705)。结论检测血清IL-18、VEGF、TGF-β_1含量,对HBV、HCV、HIV间合并感染患者病情的合理评价有重要意义。 展开更多

关键词 肝炎病毒 乙型 肝炎病毒 丙型 人免疫缺陷病毒 合并感染 白细胞介素18 血管内皮生长因子 转化生长因子β1 血传病原体

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白细胞介素-1β和白细胞介素-18检测在人巨细胞病毒感染儿童中的临床价值 被引量：3

6

作者 王慧燕 金方方 +1 位作者 余玲玲 余坚 《中国卫生检验杂志》 CAS 2020年第12期1435-1436,1440,共3页

目的本研究通过检测人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染儿童血清中细胞因子IL-1β、IL-18的表达,协助阐明HCMV感染后特殊的细胞因子在介导炎症反应中的作用,以探讨细胞因子水平在HCMV感染儿童中的临床应用价值。方法选取本院... 目的本研究通过检测人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染儿童血清中细胞因子IL-1β、IL-18的表达,协助阐明HCMV感染后特殊的细胞因子在介导炎症反应中的作用,以探讨细胞因子水平在HCMV感染儿童中的临床应用价值。方法选取本院2018年7月-2019年2月确诊为HCMV感染儿童68例为HCMV感染组,健康体检儿童40例为对照组进行研究。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2组标本血清检测IL-1β和IL-18。结果HCMV感染组和对照组血清IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05)。HCMV感染组血清IL-18水平明显高于对照组(P<0.01)。结论HCMV感染患儿血清IL-18水平明显升高,血清IL-18水平的变化,对儿童HCMV感染具有一定的临床应用价值。 展开更多

关键词 人巨细胞病毒 白细胞介素-1Β 白细胞介素-18

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白介素18和干扰素γ在生殖器疱疹感染中的意义 被引量：2

7

作者 曾三武 纪黎明 +1 位作者 奚丹 金京姬 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期270-272,共3页

目的探讨白介素18(IL-18)和干扰素γ(IFN-γ)在单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染的生殖器疱疹患者发病机制中的意义。方法采用双夹心ELISA方法对43例确诊为HSV-2感染的生殖器疱疹患者外周血单一核细胞(PBMC)及血清IL-18和IFN-γ进行检测,设... 目的探讨白介素18(IL-18)和干扰素γ(IFN-γ)在单纯疱疹病毒2型(HSV-2)感染的生殖器疱疹患者发病机制中的意义。方法采用双夹心ELISA方法对43例确诊为HSV-2感染的生殖器疱疹患者外周血单一核细胞(PBMC)及血清IL-18和IFN-γ进行检测,设立健康对照组。结果HSV-2感染的生殖器疱疹患者的血清及PBMC中IL-18水平分别为(424.32±51.60)ng/L和(417.54±47.23)ng/L,均明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);HSV-2感染者血清IFN-γ水平为(384.84±72.45)ng/L,明显高于对照组,两组差异有显著性(P<0.01);PBMCIFN-γ水平(381.62±70.45)ng/L,亦明显高于对照组,差异有显著性(P<0.01);HSV-2感染生殖器疱疹患者血清IL-18和IFN-γ呈正相关(r=0.515,P<0.05);rhIL-18可诱导PBMC产生IFN-γ。结论HSV-2感染的生殖器疱疹患者体内IL-18水平升高,并与IFN-γ呈正相关,rhIL-18可刺激HSV-2感染者PBMC产生IFN-γ,IL-18具有明显的抗HSV-2感染作用,其机制可能与诱导IFN-γ产生有关。 展开更多

关键词 白介素18 干扰素Γ 生殖器疱疹感染 单纯疱疹病毒2型 血清 检测

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rhGH对脓毒症急性肾损伤小鼠炎性因子及免疫与肾功能影响 被引量：2

8

作者 杜珊珊 陈慧 +2 位作者 陶慧 刘亚菲 刘军 《齐鲁医学杂志》 2017年第5期556-560,共5页

目的观察重组人生长激素(rhGH)对脓毒症急性肾损伤(AKI)小鼠肾功能、免疫功能及炎性因子的影响。方法 SPF级C57BL/6小鼠75只,按随机数字表法分为A、B和C组。A组小鼠打开腹腔后不予处理后关闭伤口,B组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型,... 目的观察重组人生长激素(rhGH)对脓毒症急性肾损伤(AKI)小鼠肾功能、免疫功能及炎性因子的影响。方法 SPF级C57BL/6小鼠75只,按随机数字表法分为A、B和C组。A组小鼠打开腹腔后不予处理后关闭伤口,B组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症模型,C组在B组基础上给予rhGH腹腔注射。48h时脱颈法处死3组小鼠取材,采用ELISA法观察3组小鼠血清中免疫球蛋白A(IgA)、IgM、IgG的变化,同时分别检测3组小鼠血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及尿肾损伤分子(KIM-1)的水平,采用蛋白印迹法检测3组小鼠肾脏组织中白细胞介素-18(IL-18)、巨噬细胞标记物CD68及金属蛋白酶基质-2(MMP-2)蛋白的表达,采用苏木精-伊红染色观察3组小鼠肾脏的病理变化。结果与A组相比较,术后B组小鼠血清中IgA、IgM、IgG水平明显降低(t=22.8~240.0,P<0.05);肾脏组织原代细胞中IL-18、CD68及MMP-2水平均明显升高(t=20.5~26.6,P<0.05);血清中SCr、BUN、KIM-1水平均显著下降(t=18.6~32.8,P<0.05)。与B组相比较,术后C组小鼠血清中免疫球蛋白IgA、IgM及IgG的水平明显提高(t=19.3~261.2,P<0.05);肾脏组织原代细胞中IL-18、CD68、MMP-2水平明显下降(t=30.0~40.0,P<0.05),同时血清中SCr、BUN、KIM-1的水平显著升高(t=29.6~59.1,P<0.05)。与A组比较,B组小鼠肾脏组织呈不同程度损伤;与B组比较,C组小鼠肾脏组织损伤及肾间质血管充血程度均明显降低。结论 rhGH可增强AKI小鼠的免疫功能,减轻炎症反应,降低炎性因子的表达,维持肾脏的正常代谢功能,对脓毒症所致急性肾损伤具有保护作用。 展开更多

关键词 重组人生长激素 脓毒症 急性肾损伤 白细胞介素18 免疫球蛋白类

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人疱疹病毒6型感染及IL-18基因多态性与类风湿性关节炎易感性的关联 被引量：1

9

作者 熊俊慧 陈坚 +2 位作者 陈洁倩 丁振华 刘坚 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第22期3402-3407,共6页

目的探讨人疱疹病毒6型(HHV 6)感染及白细胞介素-18(IL-18)基因多态性与类风湿性关节炎(RA)易感性的关联。方法选取2019年12月-2021年12月丽水市人民医院收治的80例RA患者为研究对象,为RA组,另选取同期80名健康体检者为对照组,采用巢式... 目的探讨人疱疹病毒6型(HHV 6)感染及白细胞介素-18(IL-18)基因多态性与类风湿性关节炎(RA)易感性的关联。方法选取2019年12月-2021年12月丽水市人民医院收治的80例RA患者为研究对象,为RA组,另选取同期80名健康体检者为对照组,采用巢式聚合酶链式反应(Nested-PCR)法检测外周血单个核细胞(PBMCs)、血浆中HHV 6 DNA,采用PCR定量扩增技术检测IL-18基因启动子区-607C/A位点、-137G/C位点基因多态性,采用多因素Logistic回归分析探究HHV 6感染、IL-18基因多态性与RA易感性的关联。结果两组PBMCs中HHV6 DNA阳性检出率比较,无统计学差异,但RA组血浆HHV6 DNA阳性检出率高于对照组(P<0.05);血清类风湿因子(RF)浓度≥60 IU/ml患者血浆HHV6 DNA阳性率较<60 IU/ml高(P<0.05),疾病高活动度患者血浆HHV6 DNA阳性率较病情缓解、中低活动度高(P<0.05);两组IL-18-607C/A基因型分布及等位基因频率比较,无统计学差异,但RA组IL-18-137G/C的GC基因型、C等位基因频率均高于对照组(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,血浆HHV6 DNA阳性者较阴性者RA发病风险升高倍3.089倍(95%CI:1.289~7.405),携带IL-18基因-137G/C位点(GC+CC)基因型者较GG型者RA发病风险增加2.524倍(95%CI:1.338~4.764)。结论HHV6活动性感染、IL-18-137G/C基因多态性可能与RA易感性有关。 展开更多

关键词 类风湿性关节炎 人疱疹病毒6型 白细胞介素-18 单核苷酸多态性 易感性 关联

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转入IL-18 cDNA的鼻咽癌细胞在hu-PBL-SCID鼠中致瘤性的影响 被引量：1

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作者 陶剑平 李满枝 +2 位作者 汪慧民 郭翔 洪明晃 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第6期408-410,共3页

为了探讨人白细胞介素 18(hIL 18)的表达对鼻咽癌细胞体内致瘤性的影响 ,我们构建了hIL 18的真核表达载体pcD NA3/hIL 18,转染人鼻咽癌细胞株SUNE细胞 ;然后以转染阳性的SUNE细胞和未转染的SUNE细胞接种到用健康人外周血白细胞免疫重建... 为了探讨人白细胞介素 18(hIL 18)的表达对鼻咽癌细胞体内致瘤性的影响 ,我们构建了hIL 18的真核表达载体pcD NA3/hIL 18,转染人鼻咽癌细胞株SUNE细胞 ;然后以转染阳性的SUNE细胞和未转染的SUNE细胞接种到用健康人外周血白细胞免疫重建的SCID鼠 (hu PBL SCID鼠 ) ,观察成瘤情况。结果发现 ,所构建的真核表达载体在鼻咽癌细胞中能高效表达hIL 18;ELISA法测得转染阳性细胞培养上清液中hIL 18的含量为 (85± 10 )pg/ml,而未转染的SUNE细胞的培养上清液中hIL 18的含量低于 5pg/ml。将转染阳性的细胞克隆和未转染的SUNE细胞接种hu PBL SCID小鼠后连续观察 5 0d ,发现前者形成的肿瘤其生长速度明显慢于后者 ,其平均瘤重也有显著性差异 (P <0 0 0 1)。说明在体内hIL 18的表达能有效地抑制鼻咽癌细胞的成瘤作用。 展开更多

关键词 鼻咽癌 人白细胞介素18 真核表达载体 致瘤性 hu-PBL-SCID鼠

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人白细胞介素-18突变体的虚拟筛选及其活性

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作者 杨京生 喻刚 +1 位作者 胡勇 全家妩 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2008年第8期641-646,共6页

目的筛选合适的人白细胞介素-18(hIL-18)突变体,并检测其活性。方法运用分子模建工具,模建出IL-18受体及IL-18/IL-18R复合物的分子结构,分别虚拟突变IL-18的4个半胱氨酸为另外19种氨基酸,以野生型IL-18为模板进行同源模建,建立其三维结... 目的筛选合适的人白细胞介素-18(hIL-18)突变体,并检测其活性。方法运用分子模建工具,模建出IL-18受体及IL-18/IL-18R复合物的分子结构,分别虚拟突变IL-18的4个半胱氨酸为另外19种氨基酸,以野生型IL-18为模板进行同源模建,建立其三维结构模型,计算其IL-18/IL-18R复合物三维结构及分子间作用能变化情况,筛选几种突变方案。运用分子生物学技术构建突变体,表达纯化后进行活性检测。结果根据理论预测情况,筛选了12株突变体。突变的质粒经双酶切及测序鉴定,证明构建正确。突变体蛋白以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%,纯化后纯度大于90%。纯化的C38Glu、C127Ser等几株突变体在低浓度时,活性轻微上升,与理论预测结果基本相同。结论已成功构建了多株IL-18的突变体,运用生物信息学方法进行先期筛选有助于加快IL-18的突变研究。 展开更多

关键词 人白细胞介素-18 突变体 筛选 活性

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阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白诱导的人脐静脉内皮细胞增殖及白细胞介素-18分泌的影响 被引量：8

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作者 周爱琴 王云开 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期129-132,共4页

目的:观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及白细胞介素-18(IL-18)分泌的影响。方法:体外培养的HUVEC株,第3～9代用于实验。实验分3组:①空白对照组;②ox-LDL组(100mg/L);③阿托伐他汀组:先... 目的:观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及白细胞介素-18(IL-18)分泌的影响。方法:体外培养的HUVEC株,第3～9代用于实验。实验分3组:①空白对照组;②ox-LDL组(100mg/L);③阿托伐他汀组:先将阿托伐他汀0.01、0.05、0.1、0.5、1.0μmol/L分别作用于内皮细胞4h,然后加ox-LDL(100mg/L)作用细胞24h。采用细胞酶联免疫吸附分析检测细胞培养上清液IL-18含量;采用四唑盐比色法检测各孔的吸收度(OD),以评价增殖效果。结果:与空白对照组比较,100mg/Lox-LDL抑制内皮细胞增殖(P<0.01),阿托伐他汀呈剂量依赖性地促进ox-LDL诱导的内皮细胞增殖(P<0.05,P<0.01)。正常内皮细胞不分泌IL-18,而100mg/Lox-LDL促进IL-18分泌。0.01μmol/L阿托伐他汀对ox-LDL诱导的HUVEC分泌IL-18无影响(P>0.05),0.05,0.1,0.5,1.0μmol/L阿托伐他汀能明显抑制ox-LDL诱导的HUVEC分泌IL-18(P<0.05,P<0.01),抑制效应呈浓度依赖性。结论:阿托伐他汀呈剂量依赖性地抑制ox-LDL诱导的人HUVECs分泌IL-18,促进内皮细胞增殖,保护内皮功能,从而发挥他汀类药物调脂外抗动脉粥样硬化作用。 展开更多

关键词 人脐静脉内皮细胞 氧化型低密度脂蛋白 白细胞介素-18 阿托伐他汀 动脉粥样硬化

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IL-18DNA免疫对HIV-1核酸疫苗诱导的免疫应答的影响 被引量：3

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作者 王福祥 孙永涛 +4 位作者 孙永年 徐哲 王临旭 刘娟 康文臻 《中国病毒学》 CSCD 2004年第2期97-100,共4页

为了研究白细胞介素-18(IL-18)基因对人免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸疫苗诱导免疫应答的影响,将人IL-18基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建了真核表达载体pVAX1-IL-18;将pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18或者pCI-neoGAG单独免疫Balb/c小鼠,检测... 为了研究白细胞介素-18(IL-18)基因对人免疫缺陷病毒(HIV-1)核酸疫苗诱导免疫应答的影响,将人IL-18基因插入到真核表达载体pVAX1中,构建了真核表达载体pVAX1-IL-18;将pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18或者pCI-neoGAG单独免疫Balb/c小鼠,检测免疫小鼠的特异性抗体和IFN-γ,同时观察免疫小鼠脾淋巴细胞增殖和小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)反应。酶切及测序结果表明成功地构建了人IL-18基因真核表达载体;与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的抗HIV-1p24抗体滴度降低(P<0.01);而与pCI-neoGAG免疫组比较,pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠血清的IFN-γ升高(P<0.01);pCI-neoGAG联合pVAX1-IL-18免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖实验刺激指数(SI)以及特异性CTL活性均高于pCI-neoGAG免疫组(P<0.01)。IL-18基因联合HIV-1核酸疫苗免疫小鼠,可能增强特异性Th1细胞和CTL反应,白细胞介素-18基因对体液免疫有抑制作用。 展开更多

关键词 白细胞介素-18 IL-18 基因 人免疫缺陷病毒 HIV-1 核酸疫苗 免疫

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重组人白细胞介素-18的高浓度复性、纯化和活性检测 被引量：3

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作者 金腾川 张瑞军 +2 位作者 魏海明 何海辉 田志刚 《中国生化药物杂志》 CAS CSCD 2004年第2期67-71,共5页

目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再... 目的摸索大规模生产重组人白细胞介素 18(rhIL 18)高效简便、成本低廉的生产工艺。优化rhIL 18高浓度下最优复性、纯化方案 ,建立快速准确的活性检测方法。方法采用液相色谱和光谱学方法检测复性效率 ,筛选确定rhIL 18最优复性条件 ,再用SepheroseFFANX阴离子交换柱结合分子筛HiPrepSephacrylS 10 0进行纯化。采用3 H 掺入法检测rhIL 18产品对人外周血单个核细胞的促增殖作用 ,用流式细胞术检测其促γ 干扰素生成能力。结果建立了一套rhIL 18复性、纯化、活性检测方案。结论液相色谱和光谱学方法相结合 ,可用于检测rhIL 18的复性效率 ,流式细胞术也可用于检测rhIL 18的生物活性。 展开更多

关键词 重组人白细胞介素-18 包涵体 复性 纯化 液相色谱

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高糖和MBL对体外培养的人肾小球内皮细胞表达IL-18的影响 被引量：2

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作者 武晓慧 宁晓霞 杨慧宇 《西部医学》 2012年第8期1452-1454,1459,共4页

目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D-葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-... 目的观察高糖和甘露聚糖结合凝集素(MBL)对体外培养的人肾小球内皮细胞(HRGEC)表达白细胞介素-18(IL-18)的影响。方法体外培养正常HRGEC,按干预条件随机分为对照组(5mmol/L D-葡萄糖)、高糖组(30mmol/L D-葡萄糖)和甘露醇组(5mmol/L D-葡萄糖+25mmol/L甘露醇),培养72小时后分别采用实时荧光定量RCR法(Real-time PCR)和ELISA法检测各组细胞IL-18的mRNA及细胞培养上清液中的蛋白表达。另取细胞随机分为单纯高糖组和高糖+MBL组,均用高糖培养72h后,分别加入等量的30%MBL缺乏人血清,高糖+MBL组另加10μg/ml MBL,继续培养4h。采用免疫荧光法检测各组细胞表面凝集素补体途径(LCP)激活终产物膜攻击复合物(MAC)的沉积,并检测各组细胞IL-18的mRNA和蛋白表达。结果与其他各组相比,高糖组细胞的IL-18mRNA以及蛋白表达均明显增加(P<0.05);高糖+MBL组细胞表面有明显MAC沉积,IL-18mRNA及蛋白表达与单纯高糖组相比明显增加(P<0.05)。结论高糖可以诱导人肾小球内皮细胞炎症因子过表达;高糖和MBL共存时可促成LCP激活,并对DN的炎症状态具有促进作用。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 高糖 糖尿病肾病 人肾小球内皮细胞 白细胞介素-18

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HIV/AIDS患者血清IL-18浓度变化与辅助受体CCR5/CXCR4表达的关系研究 被引量：2

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作者 王清波 赵伟 吴引伟 《中国艾滋病性病》 CAS 2007年第3期204-206,245,共4页

目的研究人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者血清白细胞介质(IL)-18浓度的变化,及其与病毒载量、CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对42例HIV/AIDS患者及12例正常对照... 目的研究人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者血清白细胞介质(IL)-18浓度的变化,及其与病毒载量、CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4表达的相关性。方法应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对42例HIV/AIDS患者及12例正常对照者的血清IL-18浓度进行定量检测,分析其变化,并对其变化与病毒载量的相关性进行分析。应用流式细胞仪检测全部HIV/AIDS患者CD4+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4的表达情况,并分析其与病毒载量及血清IL-18浓度变化之间的相关性。结果42例HIV/AIDS患者血清平均IL-18浓度显著高于正常对照组(P<0.01),且按美国疾病控制与预防中心(CDC)1993年标准,CDC C期显著高于A期(P<0.01)。所有患者血清IL-18浓度变化与HIV病毒载量之间呈正相关(P<0.05),与辅助受体CX-CR4的表达也呈正相关(P<0.01)。HIV病毒载量与辅助受体CXCR4的表达具有正相关性(P<0.05)。结论HIV/AIDS患者体内持续增长的IL-18加剧了其免疫功能的紊乱和低下,IL-18可能与疾病本身的致病机制有关。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) 获得性免疫缺陷综合征(AIDS) 白细胞介素(IL)-18 病毒载量 辅助受体CCR5/CXCR4

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氧化型低密度脂蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖及IL18分泌的影响 被引量：1

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作者 周爱琴 王云开 《江西医学院学报》 CAS 2006年第5期19-22,共4页

目的探讨氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖及白介素18（IL18）分泌的影响，以阐明其在动脉粥样硬化发生中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株，3～6代用于实验。实验分空白对照组和不同浓度ox-LDL组... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）增殖及白介素18（IL18）分泌的影响，以阐明其在动脉粥样硬化发生中的作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞株，3～6代用于实验。实验分空白对照组和不同浓度ox-LDL组。将不同浓度的ox-LDL（10、20、50、100、200mg／L）与内皮细胞共同孵育12、24、36、48h。采用细胞酶联免疫吸附分析（ELISA）检测培养上清液中IL18含量；采用四唑盐比色法检测各孔的吸光值（0D），以评价增殖效果。结果10mg／L ox-LDL促进内皮细胞增殖，20～200mg／Lox-LDL呈剂量依赖性抑制内皮细胞增殖（P〈0．05，P〈0.01）。正常内皮细胞不分泌IL18。ox-LDL诱导HUVECs分泌IL18，呈浓度依赖性，100mg／L浓度时IL18分泌达高峰。ox-LDL诱导HUVECs分泌IL18亦呈时间依赖性，与12h比较，24、36、48h均有统计学意义（P〈0.05，P〈0.01）。结论ox-LDL诱导HUVECs分泌IL18，抑制HUVECs增殖，这可能与ox-LDL致动脉粥样硬化作用机制有关。 展开更多

关键词 氧化型低密度脂蛋白 人脐静脉内皮细胞 白介素18 动脉粥样硬化

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重组人白细胞介素18基因的克隆及序列测定 被引量：1

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作者 纪丽丽 杨玉英 +1 位作者 李士泽 闫邦样 《黑龙江八一农垦大学学报》 2005年第5期61-64,共4页

从正常人外周血液中提取RNA,然后反转录cDNA,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,自行设计并合成一对特异性引物,成功地扩增出hIL-18cDNA基因,并定向插入PGEM-T载体中,对其进行酶切分析及序列测定。酶切分析表明一约481bp的基因片断... 从正常人外周血液中提取RNA,然后反转录cDNA,应用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)技术,自行设计并合成一对特异性引物,成功地扩增出hIL-18cDNA基因,并定向插入PGEM-T载体中,对其进行酶切分析及序列测定。酶切分析表明一约481bp的基因片断克隆至PGEM-T载体中,与理论设计的一致。测序结果表明克隆至PGEM-T中的IL-18cDNA包含成熟IL-18的全部编码序列,本研究结果将为今后hIL-18基因的表达及进一步在基因水平上探讨hIL-18的生物学功能提供物质基础。 展开更多

关键词 人白细胞介素18(hIL-18) CDNA 分子克隆 序列测定

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pIRApoptinHNIL18对结肠癌细胞HCT-116的抑制效应

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作者 郑洪玲 金宁一 +6 位作者 李霄 米志强 连海 李昌 田明尧 李雪梅 孙丽丽 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2007年第1期42-46,共5页

目的:探讨联合应用凋亡素(apoptin)基因、新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(he-magglutinin-neuramidinase,HN)基因及人白介素18(hIL-18)基因体外对人结肠癌细胞HCT-116的抑制效应。方法:重组质粒pIRApoptinHN... 目的:探讨联合应用凋亡素(apoptin)基因、新城疫病毒(newcastle disease virus,NDV)血凝素-神经氨酸酶(he-magglutinin-neuramidinase,HN)基因及人白介素18(hIL-18)基因体外对人结肠癌细胞HCT-116的抑制效应。方法:重组质粒pIRApoptinHNIL18通过脂质体介导法体外转染人结肠癌细胞HCT-116,通过Western blotting和RT-PCR检测外源基因表达;采用AO/EB染色法检测pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT-116抑制作用;利用流式细胞术分析pIRApoptinHNIL18对人结肠癌细胞HCT-116线粒体膜电位(mitochondrial transmembrane potential,△Ψ)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;采用3,5-二羟基甲苯法测定唾液酸含量。结果:pIRApoptinHNIL18转染人结肠癌细胞HCT-116后,外源基因能够有效表达;肿瘤细胞生长受到抑制;线粒体△Ψ由(94.41±8.17)%下降到(30.70±8.01)%(P<0.05);唾液酸含量由(0.33±0.06)mmol/L下降到(0.09±0.03)mmol/L(P<0.01);ROS水平由(52.48±6.09)%升高到(68.98±7.26)%(P<0.05)。结论:pIRApoptinHNIL18可通过线粒体途径诱导细胞凋亡,从而抑制人结肠癌细胞HCT-116的生长。 展开更多

关键词 凋亡素基因 血凝素-神经氨酸酶基因 人白介素18基因 结肠癌细胞 线粒体 凋亡

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趋化因子分形素Fractalkine介导的单核细胞黏附

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作者 田轶伦 姜德谦 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期454-458,共5页

背景分形素Fractalkine(FKN)是新近发现的唯一兼具黏附功能的趋化因子,不仅能够诱导单核细胞的定向迁移,还能介导单核细胞与血管内皮细胞的紧密黏附,参与动脉粥样硬化(AS)的形成。目的观察白细胞介素18(IL-18)诱导人脐静脉内皮细胞(HUV... 背景分形素Fractalkine(FKN)是新近发现的唯一兼具黏附功能的趋化因子,不仅能够诱导单核细胞的定向迁移,还能介导单核细胞与血管内皮细胞的紧密黏附,参与动脉粥样硬化(AS)的形成。目的观察白细胞介素18(IL-18)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上调表达FKN后,FKN介导的HUVEC与人单核细胞细胞株1(THP-1)的黏附。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC FKN mRNA的表达,应用FlowChamber装置观察HUVEC与人单核细胞THP-1的黏附,以及FKN中和抗体对黏附效应的影响。结果IL-18可剂量相关地诱导FKN mRNA表达,与0μg/L组(0.10±0.01)相比,25、50、100μg/L组分别增加为:(0.49±0.04),(0.63±0.09),(0.85±0.07)(均P<0.01)。FKN表达上调相应地明显增加HUVEC与单核细胞的黏附,单核细胞黏附数在0、25、50、100μg/L IL-18组,分别为:(7.4±2.6),(26.8±5.2)、(43.0±5.4)、(70.8±10.7)/HP(均P<0.01)。FKN中和抗体可明显抑制此种黏附效应。结论FKN在介导HUVEC与单核细胞的黏附过程中发挥作用。 展开更多

关键词 趋化因子 FRACTALKINE 人脐静脉内皮细胞 单核细胞THP-1 黏附 白细胞介素18 动 脉粥样硬化

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