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地塞米松对人骨髓间充质干细胞成脂分化的基因调控 被引量：29
1
作者 李月白 曹亚伟 +1 位作者 吴学建 王义生 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1522-1523,共2页
目的观察地塞米松对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)内成脂转录因子PPARγmR- NA和成骨基因Osteocalcin mRNA表达的影响。方法取健康自愿者骨髓,通过梯度离心、贴壁分离培养获得hBMSCs。传代培养第2代hBMSCs 8 d,随机分为两组,实验组给予10-... 目的观察地塞米松对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)内成脂转录因子PPARγmR- NA和成骨基因Osteocalcin mRNA表达的影响。方法取健康自愿者骨髓,通过梯度离心、贴壁分离培养获得hBMSCs。传代培养第2代hBMSCs 8 d,随机分为两组,实验组给予10-7 mol／L地塞米松,对照组不给予地塞米松,5 d后收集细胞,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测两组细胞中PPARγmRNA和Osteocalcin mRNA的表达。结果用地塞米松处理细胞5 d,RT-PCR检测结果显示,实验组hBMSCs内PPARγmRNA呈高表达,对照组hBMSCs内PPARγmRNA呈低表达,两组差异有统计学意义(P<0．01)。实验组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈低表达,对照组hBMSCs内Osteocalcin mRNA呈高表达,两组间差异有统计学意义(P<0．01)。结论地塞米松能够调控hBMSCs内成脂转录因子高表达,而抑制其成骨表达,这可能与激素性骨坏死的发生机制有关。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 过氧化物酶体增殖子活化受体-γ 骨钙素 地塞米松
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肝损伤血清体外诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞 被引量：6
2
作者 骆莉莉 慕晓玲 +1 位作者 冯丽娜 卢兴浩 《中国实用医药》 2008年第9期3-4,共2页
目的探讨肝损伤血清诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞的可行性。方法分离、纯化hMSCs后用含10%肝损伤血清的培养基诱导培养,倒置显微镜连续观察细胞形态变化,并分别于诱导后7、14、21d行免疫细胞化学、糖原染色检测诱导后细胞的功... 目的探讨肝损伤血清诱导人骨髓间充质干细胞分化为类肝细胞的可行性。方法分离、纯化hMSCs后用含10%肝损伤血清的培养基诱导培养,倒置显微镜连续观察细胞形态变化,并分别于诱导后7、14、21d行免疫细胞化学、糖原染色检测诱导后细胞的功能。结果①MSCs形态均一,呈长梭形;②实验组MSCs在诱导5～7d后细胞形态开始变为不规则圆形、三角形或多角形;③免疫细胞化学:实验组细胞第7天AFP表达呈阳性,第14天AFP表达消失;Alb第14天开始表达,表达量逐渐增强,可持续至第21天;④PAS染色:实验组在诱导21d时细胞有合成糖原的能力,可见胞浆呈红色。结论肝损伤血清可诱导MSCs向类肝细胞分化,为细胞移植治疗肝衰竭提供新的探索思路。 展开更多
关键词 人骨髓间充质干细胞 肝损伤血清 诱导分化 类肝细胞
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SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体的构建 被引量：4
3
作者 梁雪 粟永萍 +5 位作者 孔佩艳 陈幸华 彭贤贵 徐辉 曾东风 艾国平 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期152-154,共3页
目的从ATCC提供的、携带有基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)cDNA的质粒pCMV-SPORT6中获取SDF-1的cDNA全长,并构建SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体。方法采用双酶切、回收SDF-1cDNA片段,克隆至pIRES2-EGFP真核表... 目的从ATCC提供的、携带有基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)cDNA的质粒pCMV-SPORT6中获取SDF-1的cDNA全长,并构建SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体。方法采用双酶切、回收SDF-1cDNA片段,克隆至pIRES2-EGFP真核表达载体,得到SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体。结果酶切及测序结果表明SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体构建成功。结论获得SDF-1基因,构建SDF-1-pIRES2-EGFP真核表达载体,为探索SDF-1修饰人骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)促进人CD34+细胞归巢及增殖方面的作用奠定基础。 展开更多
关键词 基质细胞衍生因子-1 真核表达载体 人骨髓间充质干细胞
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羊膜衍生膜负载骨髓间充质干细胞修复软骨缺损的可行性研究 被引量：9
4
作者 陈浩 张治金 +1 位作者 赵德伟 郭林 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2014年第3期254-257,共4页
目的研究人羊膜衍生膜负载骨髓间充质干细胞修复兔膝关节非负重区软骨缺损的可行性。方法自2012年7月至2013年3月，体外分离、扩增兔BMSCs，以1．63×10^5／cm^2的密度接种于HAAM上，共培养7～8d后，行电镜、光镜检查及苏木精-伊红... 目的研究人羊膜衍生膜负载骨髓间充质干细胞修复兔膝关节非负重区软骨缺损的可行性。方法自2012年7月至2013年3月，体外分离、扩增兔BMSCs，以1．63×10^5／cm^2的密度接种于HAAM上，共培养7～8d后，行电镜、光镜检查及苏木精-伊红（HE）染色。24只兔股骨髁间窝制备直径4mm、深3mm的软骨缺损模型，随机分为A、B两组，每组12只，建立膝关节髁间窝非负重区关节软骨缺损模型，右膝为空白对照侧，不植入任何材料，左膝为实验侧。A组左膝植入BMSCs与HAAM复合体，B组左膝植入单纯HAAM。移植4、12周后取新生组织，以行大体观察、组织学检查。结果大体观察及组织学观察，术后4、12周A组BMSCs—HAAM侧再生组织色白、质软、表面光滑，可见透明软骨细胞。12周时修复组织与正常软骨平齐，修复部位表面较平整，界限模糊，接近正常软骨；修复组织全层可见透明软骨细胞。B组HAAM侧修复组织表面不平并有明显凹陷，主要由成纤维细胞组成。两组空白对照侧未见明显修复。结论人羊膜衍生膜负载BMSCs可以修复兔膝关节髁间窝非负重区关节软骨缺损。 展开更多
关键词 人羊膜衍生膜 骨髓间充质干细胞 软骨缺损
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