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石榴皮多酚对脂变L-02肝细胞胆固醇合成的影响及机制探究 被引量:11
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作者 梁俊 李建科 +2 位作者 刘永峰 马倩倩 赵伟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期487-493,共7页
研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治... 研究了石榴皮多酚纯化物、安石榴苷和石榴鞣花酸对脂变肝细胞胆固醇合成的影响及机制;采用MTT法筛选石榴皮多酚适宜浓度,体积分数50%胎牛血清的RPMI-1640培养基与L-02肝细胞孵育48 h建立脂肪变性肝细胞模型;实验分为正常组、模型组和治疗组,治疗组加入不同浓度的受试物,继续培养48 h,油红O染色定性观察细胞形态和脂滴堆积,高效液相色谱法定量检测细胞内胆固醇含量;紫外分光-速率法检测HMG-CoA还原酶活性变化;结果显示石榴皮多酚均能成剂量依赖性地减少细胞内脂滴的积累、减少细胞内总胆固醇的含量,同时抑制HMG-CoA还原酶的活性,其中以100μg/mL的安石榴苷标品效果最佳。表明石榴皮多酚具有降低肝细胞内总胆固醇的作用,可能是通过抑制HMG-CoA还原酶活性实现的,安石榴苷是石榴皮多酚中降血脂的主要活性形式。 展开更多
关键词 石榴皮多酚 安石榴苷 石榴鞣花酸 l-02肝细胞 胆固醇 HMG-COA还原酶
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姜黄素对脂变肝细胞胆固醇流出及ABCA1表达的影响 被引量:5
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作者 余其林 阳学风 《南华大学学报(医学版)》 2009年第6期693-695,752,共4页
目的研究姜黄素对脂变肝细胞胆固醇的转运机制。方法取正常人肝L-02细胞作为研究对象。用10%(V/V)医用脂肪乳注射液和10%(V/V)胎牛血清的RPM I-1640完全培养基孵育24 h建立的脂肪变性肝细胞模型。实验分为为6个组,即正常肝细胞组、人肝L... 目的研究姜黄素对脂变肝细胞胆固醇的转运机制。方法取正常人肝L-02细胞作为研究对象。用10%(V/V)医用脂肪乳注射液和10%(V/V)胎牛血清的RPM I-1640完全培养基孵育24 h建立的脂肪变性肝细胞模型。实验分为为6个组,即正常肝细胞组、人肝L-02细胞脂肪变性模型组、姜黄素处理组(脂变细胞模型建立后,分别加入不等量姜黄素,使其终浓度分别为12.5、25、50、100μmol/L)。RT-PCR检测细胞ABCA1表达;高效液相色谱法定量检测细胞内外胆固醇含量。结果姜黄素呈浓度依赖性地减少细胞内脂变肝细胞内总胆固醇(TC)、胆固醇酯(CE)含量,增加培养基中游离胆固醇(FC)含量,同时增加ABCA1的表达。结论姜黄素能降低脂变人肝L-02细胞TC及CE含量,增加FC的外流;姜黄素增加脂变肝细胞胆固醇转运可能与AB-CA1的上调有关。 展开更多
关键词 姜黄素 人肝l-02细胞 胆固醇 ABCA1
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姜黄素对人肝L-02细胞胆固醇合成及转运蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 程静屏 阳学风 《湖北中医学院学报》 2011年第3期6-11,共6页
目的以正常人肝L-02细胞建立的脂肪变性肝细胞模型为研究对象,观察姜黄素对肝细胞胆固醇合成及转运的影响。方法用MTT法观察姜黄素对脂肪变性人肝L-02细胞模型增殖的影响,用油红O染色定性观察细胞内脂滴形成情况;逆转录-多聚酶链反应(RT... 目的以正常人肝L-02细胞建立的脂肪变性肝细胞模型为研究对象,观察姜黄素对肝细胞胆固醇合成及转运的影响。方法用MTT法观察姜黄素对脂肪变性人肝L-02细胞模型增殖的影响,用油红O染色定性观察细胞内脂滴形成情况;逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量检测胆固醇合成限速酶HMG-CoA还原酶及转运蛋白Caveolin-1在mRNA水平的表达;Western-blotting法检测细胞caveolin-1的表达;高效液相色谱法(HPLC)定量检测细胞内外胆固醇各组分含量。结果姜黄素呈浓度和时间依赖性减少细胞内脂滴数量,降低脂变肝细胞内总胆固醇(TC)、胆固醇酯(CE)含量,增加培养基中游离胆固醇(FC)含量,同时减少HMG-CoA还原酶的表达,增加Caveolin-1 mRNA的表达,并且呈浓度时间依赖性增加caveolin-1的蛋白表达。结论姜黄素降低胆固醇作用可能与Caveolin-1的上调、HMG-CoA还原酶的下调有关。 展开更多
关键词 姜黄素 人肝l-02细胞 胆固醇合成 转运蛋白 HMG-COA还原酶 CAVEOlIN-1
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Photosan脂质立方液晶纳米光敏剂的制备及光动力杀伤效应研究 被引量:3
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作者 付怀秀 于翔 +6 位作者 康宏向 梁洁 陈鹏 沈本剑 金义光 熊力 毛建平 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期35-41,共7页
目的:制备Photosan脂质立方液晶纳米光敏剂,通过体外实验探讨其介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)特异性杀伤肿瘤细胞效果。方法:以单油酸甘油酯(glyceryl monooleate,GMO)和泊洛沙姆407(poloxamer 407,P407)为液晶材料,以光... 目的:制备Photosan脂质立方液晶纳米光敏剂,通过体外实验探讨其介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)特异性杀伤肿瘤细胞效果。方法:以单油酸甘油酯(glyceryl monooleate,GMO)和泊洛沙姆407(poloxamer 407,P407)为液晶材料,以光敏剂Photosan为模型药物,制备Photosan立方液晶纳米粒,通过Malvern粒径仪和扫描电子显微镜等考察其理化性质;通过MTS法考察Photosan立方液晶纳米粒对正常肝细胞株和肝癌细胞株的暗毒性及光动力杀伤效果。结果:成功制备Photosan脂质立方液晶纳米粒,该纳米粒对人肝L-02细胞和人肝癌Hep G2细胞均没有暗毒性,其介导的PDT对人肝L-02细胞增殖有一定抑制作用[细胞抑制率为(32.9±1.19)%],而对肝癌Hep G2细胞增殖具有更显著的抑制作用[细胞抑制率为(77.9±2.06)%];Photosan立方液晶介导的光动力作用对人正常肝细胞的增殖抑制作用低于Photosan,但对肝癌细胞的增殖抑制作用高于Photosan。结论:Photosan脂质立方液晶纳米粒对人正常肝细胞安全性较好,对肝癌细胞的光动力杀伤效应明显优于Photosan,为光动力治疗癌症提供了创新性方法。 展开更多
关键词 Photosan 立方液晶 人肝l-02细胞 人肝癌HEPG2细胞 光动力疗法
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瘦素对脂变人肝细胞TG的含量及PPARα、CPT-I表达的影响 被引量:2
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作者 谭英征 陈双华 +3 位作者 阳学风 胡剑峰 傅京力 胡杨 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第25期2809-2814,共6页
目的:探讨瘦素对肝细胞脂质变性的作用及其机制.方法:以离体人肝L-02细胞株制备肝细胞脂肪变性模型.实验分为正常肝细胞组、人肝L-02细胞脂肪变性模型组、瘦素不同浓度处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)和阳性对照组.... 目的:探讨瘦素对肝细胞脂质变性的作用及其机制.方法:以离体人肝L-02细胞株制备肝细胞脂肪变性模型.实验分为正常肝细胞组、人肝L-02细胞脂肪变性模型组、瘦素不同浓度处理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(浓度分别为10-8、10-7、10-6mol/L)和阳性对照组.孵育24h后,油红O染色观察细胞形态和细胞内脂滴的形成,高效液相色谱法(HPLC)检测细胞内甘油三酯(TG)的含量,RT-PCR检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)及其目标基因肉碱转移酶-I(CPT-I)mRNA水平的表达.结果:模型组和瘦素Ⅰ组细胞质中有较多的脂滴形成,而瘦素Ⅱ、Ⅲ组、正常组、阳性对照组胞质中脂滴较少.瘦素浓度为10-8、10-7、10-6mol/L时,肝细胞中TG的含量为1.063±0.146、0.648±0.023、0.553±0.045mmoL/g蛋白,呈细胞依赖性减少.瘦素Ⅱ、Ⅲ组与阳性对照组比较,PPARα的mRNA表达上升更为明显,差别有统计学意义(P<0.01);但瘦素Ⅰ组与阳性对照组之间无显著性差异.模型组与正常组比较,CPT-ImRNA表达无明显改变,经瘦素处理后,较模型组相比,CPT-ImRNA表达明显上升(P<0.01).结论:瘦素能降低人肝L-02脂变细胞内TG的含量,呈剂量依赖关系,其降低细胞内TG作用可能与PPARα及其目标基因表达上调有关. 展开更多
关键词 瘦素 人肝l-02细胞 过氧化物酶体增殖物激活受体%肉碱转移酶-I 高效液相色谱法 逆转录-聚合酶链反应
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苦参碱对于人肝细胞冻存保护效应的实验性研究 被引量:6
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作者 郭跃虎 高毅 陈建锋 《实用医学杂志》 CAS 2006年第12期1347-1349,共3页
目的:了解苦参碱对人肝细胞液氮冻存复苏后功能的影响,探索一种改善人肝细胞冻存的新方法。方法:将胎肝细胞及常规培养的L-02人肝细胞系分别以5种不同冻存保护体系犤10%二甲亚砜(DMSO)、5%DMSO+0.2mg/L苦参碱、5%DMSO+2mg/L苦参碱、5%DM... 目的:了解苦参碱对人肝细胞液氮冻存复苏后功能的影响,探索一种改善人肝细胞冻存的新方法。方法:将胎肝细胞及常规培养的L-02人肝细胞系分别以5种不同冻存保护体系犤10%二甲亚砜(DMSO)、5%DMSO+0.2mg/L苦参碱、5%DMSO+2mg/L苦参碱、5%DMSO+6mg/L苦参碱、5%DMSO+10mg/L苦参碱犦在液氮中冷冻保存1个月。1个月后快速复苏,进行存活率、形态学及功能检测。结果:不同冻存保护体系保存的人肝细胞存活率、形态学及功能表现均有所不同。其中5%DMSO+6mg/L苦参碱组效果最好,复苏后细胞存活率、24h贴壁率及细胞功能检测优于其他冻存液组。结论:⑴苦参碱对人肝细胞液氮冻存有保护作用,6mg/L苦参碱是最好的浓度;⑵苦参碱与DMSO联合使用降低了冻存保护剂DMSO的浓度,表明两者有协同作用。 展开更多
关键词 肝细胞 低温保存 苦参碱 人胎肝细胞 l-02人肝细胞系
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酮康唑致人L02肝细胞毒性差异蛋白鉴定
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作者 苗玉发 康慧君 +2 位作者 王晓姝 李路路 张河战 《医学研究杂志》 2019年第9期37-40,44,共5页
目的观察酮康唑(ketoconazole,KTZ)对人L02肝细胞的毒性效应,鉴定细胞毒性差异蛋白。方法KTZ浓度为30、50、80和100mg/L,与人L02肝细胞共培养2、4、6和8h,采用CCK-8法和流式细胞术检测KTZ对细胞增殖和胞内活性氧的影响;提取产生明显毒... 目的观察酮康唑(ketoconazole,KTZ)对人L02肝细胞的毒性效应,鉴定细胞毒性差异蛋白。方法KTZ浓度为30、50、80和100mg/L,与人L02肝细胞共培养2、4、6和8h,采用CCK-8法和流式细胞术检测KTZ对细胞增殖和胞内活性氧的影响;提取产生明显毒性的实验组细胞和对照组细胞的胞内蛋白质,进行双向电泳,并用质谱鉴定差异性蛋白。结果细胞增殖抑制率呈剂量依赖性显著性升高,胞内活性氧呈剂量依赖性显著性升高。共鉴定出7种有功能的细胞内差异性蛋白。结论鉴定出的差异性蛋白为KTZ毒性机制研究提供新的参考。 展开更多
关键词 酮康唑 l02肝细胞 肝细胞毒性 蛋白质组学
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