六味地黄丸对老年小鼠造血干细胞影响的实验研究 被引量：21

1

作者 高冬 郑良朴 +4 位作者 林久茂 林薇 陈旭征 宋军 陈可冀 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期251-254,共4页

目的:观察六味地黄丸对老年小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响。方法:老年昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组及六味地黄丸高、中、低剂量组,灌胃给药7 d后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数;流式细胞仪检... 目的:观察六味地黄丸对老年小鼠骨髓造血干细胞的数量、表型、细胞周期和集落形成能力的影响。方法:老年昆明种小鼠随机分为生理盐水对照组及六味地黄丸高、中、低剂量组,灌胃给药7 d后,分离骨髓造血干细胞,进行细胞计数;流式细胞仪检测细胞表型和细胞周期;并采用甲基半固体培养基检测集落的形成。结果:各组小鼠骨髓单核细胞和悬浮细胞数量以及集落产率无显著差异,但低、中剂量组Sca-1和CD34的表达提高,说明较低剂量的药物能提高骨髓中造血干细胞的数量,而且药物还具有提高细胞增殖能力的作用。结论:六味地黄丸激活造血干细胞,通过升高骨髓中造血干细胞的数量和增殖能力提高造血机能,以达到提高免疫功能的作用。 展开更多

关键词 六味地黄丸 造血干细胞 骨髓

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多能干细胞向造血细胞定向诱导分化的研究进展

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作者 李艳伟 单威 +2 位作者 刘丽 黄琼 方三华 《中国生物医学工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期502-512,共11页

造血干细胞(HSC)移植是血液系统疾病最有效的治疗手段。现阶段,同种异体HSC移植和同种自体HSC移植已在临床被广泛采用,但仍存在不少难题,如:异基因移植物抗宿主发病(GVHD)难题,以及自体HSC移植数量限制等。多能干细胞(PSC)具备在体外自... 造血干细胞(HSC)移植是血液系统疾病最有效的治疗手段。现阶段,同种异体HSC移植和同种自体HSC移植已在临床被广泛采用,但仍存在不少难题,如:异基因移植物抗宿主发病(GVHD)难题,以及自体HSC移植数量限制等。多能干细胞(PSC)具备在体外自主更新的潜力,多向分化和形成人体所必需的HSC,PSC包含诱导多能干细胞(iPSC)和胚胎干细胞(ESC)。由于不清楚PSC向HSC分化的内在调节机制和外在调节机制,导致PSC向HSC诱导分化的效率低下,且难以获得机体自身造血功能的HSC等。为此,综述PSC造血分化过程的研究进展。以小鼠体内胚胎造血发生为切入点,利用体外PSC造血分化研究平台,阐述PSC向HSC的内源性分子调控事件,包括转录因子和信号通路介导的造血调控;外源性分子调控事件,包括基质细胞、细胞因子以及新型生物材料等参与的造血调控。同时指出PSC向HSC/HSPC功能移植应用存在问题,为PSC向HSC体外分化研究,为实现PSC来源的HSC以及下游血液细胞的临床转化应用提供依据。 展开更多

关键词 造血干细胞 多能干细胞 造血分化

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人突变DHFR基因高效逆转录病毒载体及其在小鼠造血细胞的表达 被引量：5

3

作者 张文卿 许佐良 +4 位作者 于杰 张桂国 徐光炜 王桂林 赵实诚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1997年第2期85-89,共5页

本文用转染了人突变DHFR基因逆转录病毒载体的新一代产病毒细胞AM12-S31,研究了其耐药特性、产生的病毒滴度及DHFR基因在小鼠造血细胞的表达.MTT法显示AM12-S31细胞对G418和氨甲喋呤耐受,对照细胞AM12对G418和MTX敏感.产生的病毒滴度为7... 本文用转染了人突变DHFR基因逆转录病毒载体的新一代产病毒细胞AM12-S31,研究了其耐药特性、产生的病毒滴度及DHFR基因在小鼠造血细胞的表达.MTT法显示AM12-S31细胞对G418和氨甲喋呤耐受,对照细胞AM12对G418和MTX敏感.产生的病毒滴度为7.8×10~4～4.2×10~5CFU/ml,且为无复制活性病毒.将AM12-S31上清转染小鼠骨髓造血细胞后进行体内、外研究.CFU-GM分析显示:于不同C418浓度均有阳性克隆,而AM12上清转染组则无耐G418克隆.将转染后骨髓细胞从尾静脉回输给经致死剂量(900 rad)照射小鼠,MTX筛选(第一周为4mg/kg,每周二次;以后各周10mg/kg,每周二次),结果:实验组小鼠白细胞计数和红细胞压积逐渐恢复正常;对照组小鼠 30天内全部死亡.PCR分析耐G418 CFU-GM克隆和实验组小鼠骨髓细胞,均检测到标志基因Neo^R的存在.因此,初步研究表明该产病毒细胞能够产生高滴度、安全有效的非复制型逆转录病毒,并能成功转染小鼠造血细胞、表达目的基因,使在MTX筛选条件下重建小鼠造血功能.该研究为进一步开展耐药基因治疗打下了基础. 展开更多

关键词 耐药 骨髓移植 造血细胞 基因转染 肿瘤

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成人骨髓间充质干细胞对造血干细胞体外增殖的影响 被引量：4

4

作者 姜尔烈 杨栋林 +6 位作者 黄勇 刘庆国 王玫 周征 翟文静 冯四洲 韩明哲 《生物医学工程与临床》 CAS 2008年第3期193-197,共5页

目的研究骨髓间充质干细胞(MSC)对脐带血(CB)CD34+细胞体外增殖和造血重建能力的影响。方法取人骨髓单个核细胞贴壁培养,梭形细胞完全融合后传代,用流式细胞仪检测免疫表型;将CBCD34+细胞接种到MSC或其他培养液中,比较不同培养条件对造... 目的研究骨髓间充质干细胞(MSC)对脐带血(CB)CD34+细胞体外增殖和造血重建能力的影响。方法取人骨髓单个核细胞贴壁培养,梭形细胞完全融合后传代,用流式细胞仪检测免疫表型;将CBCD34+细胞接种到MSC或其他培养液中,比较不同培养条件对造血干细胞扩增能力、集落形成能力及黏附分子表达的影响。结果在加入IL-3的培养体系中,在MSC和细胞因子作用下,CD34+细胞扩增7d和14d后,有核细胞(NC)、CD34+细胞和CD133+细胞数,实验组均显著多于对照组。CD34+细胞在未加入IL-3的培养体系中培养8d后,实验组NC、CD34+细胞、CD34+CD38-细胞和造血祖细胞集落扩增倍数均显著高于对照组。扩增后CD34+细胞的ALCAM、VLA-α4、VLA-α5、VLA-β1、HCAM、PECAM和LFA-1表达较扩增前无显著变化。结论MSC可为造血干细胞(HSC)体外扩增提供适宜的微环境,有助于CD34+细胞体外增殖并抑制HSC分化,保持其造血重建潜能和归巢能力。 展开更多

关键词 骨髓间充质干细胞 造血干细胞 体外扩增

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急性脑梗死后内源性G-CSF和CD34^+细胞动员关系的研究 被引量：4

5

作者 陈小江 许志恩 陈倍楚 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期966-969,共4页

目的研究急性脑梗死患者发病后自身干细胞(外周血CD34+细胞)及其相关的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平变化。方法采用对照研究,用流式细胞仪检测健康对照组和急性脑梗死组发病后第1天和第7天中造血干细胞(外周血CD34+细胞),同时用ELISA... 目的研究急性脑梗死患者发病后自身干细胞(外周血CD34+细胞)及其相关的粒细胞集落刺激因子(G-CSF)水平变化。方法采用对照研究,用流式细胞仪检测健康对照组和急性脑梗死组发病后第1天和第7天中造血干细胞(外周血CD34+细胞),同时用ELISA法检测内源性G-CSF的水平变化。结果急性脑梗死后的第1天和第7天,患者体内外周血CD34+细胞和内源性G-CSF的水平有不同程度的升高,并且患者中外周血CD34+细胞与血清内源性G-CSF水平升高存在正相关(r=0.320)。结论急性脑梗死早期,患者体内外周血CD34+细胞水平和内源性G-CSF水平均升高,并且存在正相关。 展开更多

关键词 急性脑梗死 造血干细胞 CD34^+细胞 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)

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小鼠胎肝单个核细胞行骨髓腔内注射重建造血系统的效果 被引量：2

6

作者 伊庆福 迟亚男 +4 位作者 刘光辉 杨冠恒 龚秀丽 范书玥 曾凡一 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1110-1114,共5页

目的·观察用小鼠胎肝单个核细胞悬液行骨髓腔内注射以重建小鼠造血系统的效果。方法·用Ficoll分离技术获取胎龄13.5 d的小鼠胎肝单个核细胞悬液,采用磁珠分选的方法获得造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)并计数。以骨... 目的·观察用小鼠胎肝单个核细胞悬液行骨髓腔内注射以重建小鼠造血系统的效果。方法·用Ficoll分离技术获取胎龄13.5 d的小鼠胎肝单个核细胞悬液,采用磁珠分选的方法获得造血干细胞(hematopoietic stem cell,HSC)并计数。以骨髓腔内注射的方法对137Cs辐射清髓后的小鼠胫骨进行小鼠胎肝单个核细胞移植。对移植后的受体小鼠通过血常规检测、血涂片及骨髓涂片镜检的方法观察造血系统的重建情况。对受体小鼠移植后1年骨髓中的供体HSC进行流式细胞检测。结果·胎龄13.5 d的小鼠胎肝单个核细胞中HSC占0.171%。小鼠胎肝单个核细胞移植后1周,外周血即能探测到供体细胞来源的血细胞;移植后第3周受体小鼠外周血白细胞、红细胞、血红蛋白基本恢复至辐照前水平;第5周外周血中供体细胞来源的血细胞比例趋于稳定;移植后1年受体小鼠骨髓中的HSC基本来自供体细胞。结论·小鼠胎肝单个核细胞通过骨髓腔内注射的移植方法能高效重建小鼠造血系统。 展开更多

关键词 造血干细胞 骨髓腔内注射 胎肝 小鼠

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急性脑梗死患者自体外周血造血干细胞水平及其与神经损伤的关系 被引量：2

7

作者 尹小健 赵斌 邢永前 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第11期1296-1298,共3页

目的动态观察急性脑梗死患者自体造血干细胞水平的变化及其与神经损伤等因素间的关系。方法选择急性脑梗死患者和年龄、性别组成具有均衡性的正常人各40例,分别在发病后或入组后第3、7、10、14天取肝素抗凝血,采用F icoll密度梯度离心... 目的动态观察急性脑梗死患者自体造血干细胞水平的变化及其与神经损伤等因素间的关系。方法选择急性脑梗死患者和年龄、性别组成具有均衡性的正常人各40例,分别在发病后或入组后第3、7、10、14天取肝素抗凝血,采用F icoll密度梯度离心法提取单个核细胞,流式细胞术检测CD34+CD38-细胞百分率;同时用适用于脑梗死急性期的Fugl-M eyer量表对患者的神经功能进行评定。结果脑梗死发病后2 w内随着病程的增加,CD34+CD38-细胞水平;神经功能损伤越严重,CD34+CD38-细胞水平越高,反之亦然;两性间及不同年龄患者CD34+CD38-细胞水平均无差别。结论急性脑梗死患者外周血造血干细胞水平在病程2 w内呈现逐渐升高的趋势;神经功能损害严重者的外周血造血干细胞水平较高;外周血造血干细胞很可能参与了脑梗死的病理生理过程。 展开更多

关键词 造血干细胞 可塑性 脑梗死 流式细胞仪

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2类小鼠胎肝基质细胞的生物学特征及表达谱分析 被引量：1

8

作者 王沄汉 迟亚男 +4 位作者 杨冠恒 范书玥 马姬 薛燕 曾凡一 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1226-1232,共7页

目的·探究不同类型小鼠胎肝基质细胞在细胞形态、分子特征和生物学功能上的差异。方法·通过体外贴壁培养的方式获取13.5 d小鼠胎肝基质细胞,根据细胞形态及其表面标志物CD44、CD29、CD106、CD45及Sca-1的表达差异,区分不同的... 目的·探究不同类型小鼠胎肝基质细胞在细胞形态、分子特征和生物学功能上的差异。方法·通过体外贴壁培养的方式获取13.5 d小鼠胎肝基质细胞,根据细胞形态及其表面标志物CD44、CD29、CD106、CD45及Sca-1的表达差异,区分不同的细胞类型。使用小鼠基因组阵列4302.0基因芯片在P<0.05、差异倍数>3或<-2的标准下筛选差异基因,并使用IPA(ingenuity pathway analysis)软件对典型信号通路和生物学功能进行分析。结果·依据细胞形态的不同,分离出2类胎肝基质细胞,即短梭形细胞(CD45^+CD106^-CD29^+CD44^+Sca-1-)和成纤维样细胞(CD45^-CD106^+CD29^+CD44^+Sca-1^-)。前者共筛选出1485个高表达基因,主要参与免疫炎症相关的信号通路;后者共筛选出3374个高表达基因,主要参与细胞外基质形成及细胞间黏附。结论·小鼠胎肝基质细胞在生物学特征及功能上具有较强的异质性,在促进造血干细胞的增殖方面可能存在差异。 展开更多

关键词 胎肝 基质细胞 造血干细胞 流式细胞术 基因芯片 IPA软件

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灌胃刺激对小鼠骨髓造血干细胞的影响 被引量：1

9

作者 郑良朴 高冬 +3 位作者 林久茂 林薇 陈旭征 宋军 《中国比较医学杂志》 2008年第2期52-54,共3页

目的观察灌胃刺激对小鼠骨髓造血干细胞数量和功能的影响。方法小鼠随机分成灌胃刺激组和空白组,灌胃刺激组小鼠进行饮用水灌胃,空白组小鼠不做任何处理,处理8 d后分离骨髓单核细胞并计数,对非贴壁的悬浮细胞进行细胞计数、细胞周期及... 目的观察灌胃刺激对小鼠骨髓造血干细胞数量和功能的影响。方法小鼠随机分成灌胃刺激组和空白组,灌胃刺激组小鼠进行饮用水灌胃,空白组小鼠不做任何处理,处理8 d后分离骨髓单核细胞并计数,对非贴壁的悬浮细胞进行细胞计数、细胞周期及造血干细胞表型Sca和CD34的检测,并进行爆式红系集落形成单位(BFU-E)和粒-巨噬细胞混合集落形成单位(CFU-Mix)集落形成实验。结果灌胃刺激组与空白组相比,单核细胞和非贴壁细胞数量有上升趋势,在非贴壁细胞中S期有所增多,CD34+细胞比率没有明显差别,Sca+细胞比率为30.49%高于空白组19.75%;在集落数量上,灌胃刺激组BFU-E为84.83±12.19高于空白组46.00±9.94(P>0.05),而CFU-Mix为29.17±4.31明显高于空白组13.33±2.73(P<0.05)。结论灌胃行为对小鼠刺激进而影响其骨髓造血干细胞的数量和功能等,所以在相关研究中要设立空白组。 展开更多

关键词 刺激 灌胃 单核细胞 造血干细胞

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FOXO3A对全身照射小鼠造血系统辐射损伤的影响

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作者 王玉全 李程程 +7 位作者 苏路路 管博文 卢延华 关菲菲 荣利 王小春 孟爱民 樊飞跃 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第9期10-16,共7页

目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^... 目的利用FOXO3A基因敲除小鼠探讨FOXO3A在造血系统电离辐射(ionizing radiation,IR)损伤中的影响。方法FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠(FVB/N)分为野生型小鼠对照组(WT组),FOXO3A^-/-小鼠对照组(FOXO3A^-/-组),野生型小鼠照射组(WT+IR),FOXO3A^-/-小鼠照射组(FOXO3A^-/-+IR)四组,分别接受假照射和4 Gy X射线全身照射(total body irradiation,TBI),剂量率为0.9 Gy/min。接受TBI后14 d检测FOXO3A^-/-小鼠和WT小鼠脏器指数、外周血和骨髓细胞计数,骨髓细胞分型,造血祖细胞(HPCs)粒细胞巨噬细胞集落形成单位(colony forming unit-granulocyte and macrophage,CFU-GM)形成能力,观察FOXO3A基因敲除对造血系统辐射损伤的影响。结果生理情况下,FOXO3A^-/-小鼠骨髓有核细胞计数下降,HPCs比例升高(P<0.05);小鼠接受4 Gy X射线TBI后14 d,FOXO3A基因敲除会加重电离辐射诱导的HPCs和造血干细胞(HSCs)比例下降,但也会抑制辐射诱导的骨髓有核细胞数下降和造血祖细胞CFU-GM形成能力减退。结论FOXO3A基因敲除破坏造血系统稳态维持,加重TBI小鼠HPCs和HSCs的辐射损伤,对造血细胞辐射敏感性产生一定的影响。FOXO3A在造血系统电离辐射损伤中的调节作用以及能否作为防治损伤的靶点还有待进一步研究。 展开更多

关键词 电离辐射 FOXO3A 造血干细胞 造血祖细胞 活性氧 DNA损伤应答 小鼠

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造血干细胞重编程的探索与进展

11

作者 程小岩 许艾宁 +2 位作者 刘丹 黄秋花 陈赛娟 《中国基础科学》 2017年第3期20-26,共7页

随着临床血液需求不断增长,血制品供不应求的现象愈发严重,特别是可供临床治疗性移植的造血干细胞(HSC)尤为缺乏。然而,供者来源的缺乏一直是制约其应用发展的主要瓶颈。随着体细胞重编程与转分化研究的兴起和稳步发展,体外造血干细胞... 随着临床血液需求不断增长,血制品供不应求的现象愈发严重,特别是可供临床治疗性移植的造血干细胞(HSC)尤为缺乏。然而,供者来源的缺乏一直是制约其应用发展的主要瓶颈。随着体细胞重编程与转分化研究的兴起和稳步发展,体外造血干细胞的获得成为可能,为临床治疗带来新的希望。然而,体外获得临床治疗级的造血干细胞尚面临严峻挑战,虽然诱导多能干细胞体外定向分化及体细胞转分化获得的造血干细胞已获得了可喜的进步,但其尚未在体内获得造血重建。因此,对造血干细胞的研究任重而道远,加深对造血干细胞的认识,积极创新体外获得造血干细胞的途径和方法,有可能为患者提供新的治疗手段。 展开更多

关键词 造血干细胞 诱导多能干细胞 转分化

原文传递

单细胞测序和基因编辑技术在造血干细胞研究中的应用

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作者 李博 马元武 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1024-1032,共9页

造血干细胞对血液系统稳态维持发挥着至关重要的作用,它通过自我更新以维持自身不被耗竭,同时通过定向分化,补充各类功能血液细胞。当造血干细胞自我更新和定向分化出现问题,就会产生一系列造血系统疾病,例如髓系白血病、淋系白血病和... 造血干细胞对血液系统稳态维持发挥着至关重要的作用,它通过自我更新以维持自身不被耗竭,同时通过定向分化,补充各类功能血液细胞。当造血干细胞自我更新和定向分化出现问题,就会产生一系列造血系统疾病,例如髓系白血病、淋系白血病和骨髓增生性疾病等。关于造血干细胞的衰老和疾病变迁的调控机制一直是研究的热点。作为异质性细胞群,造血干细胞命运受到细胞内调控因子、细胞外生长因子、细胞外基质蛋白等多种因素调控,这是一个高度复杂且精确的调控过程。单细胞测序技术的发展,可以在单细胞水平从基因组、转录组、表观遗传组和蛋白质组等方面了解造血干细胞的命运调控网络。利用基因编辑技术可以建立多种基因修饰动物模型,不仅可以用于基因功能研究,也可以用于评价造血干细胞的安全性。此外,基因修饰动物模型结合单细胞测序技术,还能对造血干细胞实现命运示踪和调控分析。单细胞测序和基因编辑等新技术的应用,极大地推动了造血干细胞相关研究的进展。本文将从这些新技术在造血干细胞研究领域中的应用和存在的问题进行阐述,方便大家了解这些技术的优缺点,以便在以后的应用中提供帮助。 展开更多

关键词 造血干细胞 单细胞测序 基因编辑

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转染人突变dhfr基因的小鼠骨髓细胞对小鼠造血功能的长期保护作用

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作者 张文卿 许佐良 +2 位作者 徐光炜 于杰 赵实诚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第2期121-124,共4页

目的:将转染了人突变dhfr基因的第二代小鼠骨髓,移植给经致死剂量照射的第三代小鼠,观察该基因对小鼠造血功能的长期保护作用.方法:分离存活的第二代小鼠骨髓有核细胞,直接移植给经致死剂量照射的同系小鼠,以MTX筛选,观察小鼠血象和生... 目的:将转染了人突变dhfr基因的第二代小鼠骨髓,移植给经致死剂量照射的第三代小鼠,观察该基因对小鼠造血功能的长期保护作用.方法:分离存活的第二代小鼠骨髓有核细胞,直接移植给经致死剂量照射的同系小鼠,以MTX筛选,观察小鼠血象和生存率变化,PCR和Southem印迹杂交分析目的基因在小鼠染色体DNA中的整合与表达情况.结果:在大剂量MTX筛选下,实验组小鼠造血功能逐渐恢复,对照组3周内全部死亡.实验组生存率和生存期明显高于对照组,但较前两代生存率低.PCR和Southern印迹分析结果提示,实验组脾脏和肝脏组织中均检测到前病毒标志基因neo^R和dhfr基因的特异务带.结论:转染了人突变dhfr基因的第二代小鼠骨髓,能有效地重建经致死剂量照射的第三代小鼠造血功能.保护骨髓免遭大剂量MTX所致的严重骨髓抑制,dhfr基因在小鼠基因组DNA中的稳定整合是这种长期保护作用的物质基础. 展开更多

关键词 骨髓移植 基因转染 基因疗法 耐药基因

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造血干细胞临床研究热点分析

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作者 李玲琍 张雪 +1 位作者 胡正银 覃筱楚 《医学信息学杂志》 CAS 2019年第6期66-72,共7页

基于论文、专利、药物研发及临床实验等多源数据,利用计量分析、文本挖掘与可视化等方法分析2009-2018年造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)领域发展趋势、研究主题、重点药物及重大病症,总结临床研究与应用热点,以期为临床决策... 基于论文、专利、药物研发及临床实验等多源数据,利用计量分析、文本挖掘与可视化等方法分析2009-2018年造血干细胞(Hematopoietic Stem Cell,HSC)领域发展趋势、研究主题、重点药物及重大病症,总结临床研究与应用热点,以期为临床决策与科技管理提供参考。 展开更多

关键词 造血干细胞 计量分析 文本挖掘 共现分析 可视化

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VIP对人脐血CD34^+细胞向肝系分化的影响初探 被引量：2

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作者 王利 唐承薇 +3 位作者 王春晖 李献 强欧 黄明慧 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期578-582,共5页

目的探讨血管活性肠肽(V IP)对人脐血造血干细胞(HSC)向肝系分化的影响。方法采用免疫磁分选技术纯化人脐血CD 34+细胞,流式细胞术鉴定纯度;V IP和混合因子(包括V IP、EGF、HGF)作用CD 34+细胞后,酶联免疫化学法测定CD 34+细胞及上清AF... 目的探讨血管活性肠肽(V IP)对人脐血造血干细胞(HSC)向肝系分化的影响。方法采用免疫磁分选技术纯化人脐血CD 34+细胞,流式细胞术鉴定纯度;V IP和混合因子(包括V IP、EGF、HGF)作用CD 34+细胞后,酶联免疫化学法测定CD 34+细胞及上清AFP水平,免疫细胞化学法检测CD 34+细胞上肝系标志AFP、白蛋白(ALB)、细胞角质素19(CK-19)的表达,W estern b lot方法检测CD 34+细胞上ALB表达;巢式RT-PCR方法检测CD 34+细胞上AFP、ALB的mRNA表达,随机选送ALB产物测序。结果免疫组化结果显示CD 34+细胞上不表达CK-19蛋白,但有AFP和ALB蛋白表达;V IP作用CD 34+细胞14 d后,细胞内的AFP质量浓度(165.00±8.51 pg/mL)较对照组(270.00±11.37 pg/mL)显著下降(P<0.05)。W estern b lot显示V IP作用后CD 34+细胞内ALB蛋白表达有减弱趋势。人脐血CD 34+细胞表达了AFP mRNA和ALB mRNA,随机选取ALB产物测序与G eneB ank中ALB基因序列完全相同。结论人脐血CD 34+细胞表达肝系标志AFP、ALB,虽未见CK-19表达,但仍提示造血干细胞有向肝细胞横向分化的可能。V IP降低了人脐血CD 34+细胞AFP及ALB表达。这种对造血干细胞内胚层细胞标志物表达的抑制,提示V IP对HSC向肝细胞横向分化具有抑制作用。 展开更多

关键词 血管活性肠肽(VIP) 造血干细胞(hsc) 肝系细胞 分化

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