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流感疫苗血凝素含量测定替代方法的建立及验证 被引量：5
1
作者 邵铭 李娟 +6 位作者 宋颖丽 崔晓雨 袁力勇 方捍华 李长贵 李凤祥 王军志 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第7期770-773,共4页
目的建立测定流感疫苗血凝素（Haemagglutinin,HA）含量的替代方法 ,并进行验证,以解决大流行流感发生初期疫苗原液中HA定量的难题。方法优化糖苷酶处理条件,将流感疫苗原液经糖苷酶处理后,以还原SDS-PAGE方法分离样品,以灰度扫描法确... 目的建立测定流感疫苗血凝素（Haemagglutinin,HA）含量的替代方法 ,并进行验证,以解决大流行流感发生初期疫苗原液中HA定量的难题。方法优化糖苷酶处理条件,将流感疫苗原液经糖苷酶处理后,以还原SDS-PAGE方法分离样品,以灰度扫描法确定HA蛋白百分比,结合样品总蛋白数值,计算样品中HA含量。以该方法和传统的单向免疫扩散（SRID）法分别测定7批流感疫苗原液中HA含量,并进行比较。结果优化的糖苷酶处理条件为：总蛋白400μg/ml,PNGaseF加入比例为1：50。样品经糖苷酶处理后,以还原SDS-PAGE法可以清晰区分各蛋白条带,经测序后确定HA两个亚基,与预期相对分子质量一致。该方法测定7批流感疫苗原液中HA含量的结果与SRID法测定结果的符合率在87.90%~122.20%之间。结论初步建立了测定流感疫苗中HA含量的替代方法 ,在WHO参考品供应不到位时,可用于大流感发生时疫苗原液中HA之定量。 展开更多
关键词 流感疫苗 血凝素 糖蛋白类 流感病毒 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫扩散
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多价流感疫苗及通用型流感疫苗的研究进展 被引量：4
2
作者 谢青昕 刘艳红(综述) 鲁卫东(审校) 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期475-480,共6页
目前,接种流感疫苗是预防和控制流感的重要手段,常用的流感疫苗按组分可分为三价和四价流感疫苗,随着对流感疫苗研究的深入,从疫苗病毒株的选择、疫苗佐剂的添加和改变生产手段等方面对现有多价流感疫苗进行了优化。由于流感疫苗在不同... 目前,接种流感疫苗是预防和控制流感的重要手段,常用的流感疫苗按组分可分为三价和四价流感疫苗,随着对流感疫苗研究的深入,从疫苗病毒株的选择、疫苗佐剂的添加和改变生产手段等方面对现有多价流感疫苗进行了优化。由于流感疫苗在不同亚型之间的交叉保护力较差,开发可诱导具有广谱和长期免疫效应的通用型流感疫苗是当前流感疫苗研发的主要趋势。近年,可引起病毒广泛反应抗原的发现、对病毒保守区域的改造及细胞免疫机制的研究等为通用型流感疫苗研发提供了新思路。本文就现有多价流感疫苗的研究现状和正在研发的通用型流感疫苗相关研究进展作一综述。 展开更多
关键词 多价流感疫苗 通用流感疫苗 血凝素
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甲_1型流感病毒新分离株HA基因的序列分析 被引量：2
3
作者 王希良 严冰 +2 位作者 段佩若 张励力 韩洪彦 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期91-93,共3页
目的研究新分离的 H1 N1 亚型流感病毒株的 HA1基因序列。方法甲型流感病毒通过鸡胚增殖后提取 RNA、逆转录合成 c DNA,经 PCR扩增和产物纯化构建重组质粒 ,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定并进行基因特性分析。结果新分离到的 3株... 目的研究新分离的 H1 N1 亚型流感病毒株的 HA1基因序列。方法甲型流感病毒通过鸡胚增殖后提取 RNA、逆转录合成 c DNA,经 PCR扩增和产物纯化构建重组质粒 ,用双脱氧链终止法进行核苷酸序列测定并进行基因特性分析。结果新分离到的 3株流感病毒株 (H1 N1 ) HA 1区基因长度为 981bp,编码 32 7个氨基酸 ;与 A/桂防 / 10 / 94和 A/ Bayern/ 0 7/ 95(H1 N1 )标准株比较其同源性分别为 92 .8%和 91.3% ,丢失了第 130位氨基酸和 30 4位糖基化位点 ;新分离的 3株甲型流感病毒株 (H1 N1 ) HA1区氨基酸同源性高达 98% ;A/桂防 / 10 / 94和 A/ Bayern/ 0 7/ 95 (H1 N1 )毒株 HN1氨基酸的同源性高达 96 %。结论新分离到的 3株 H1 N1 毒株 HA编码氨基酸不同于 A/ Bayern/ 0 7/ 95 (H1 N1 )和 A /桂防 / 10 / 94(H1 N1 )标准株 。 展开更多
关键词 甲1型流感病毒 血凝素 基因分析 ha基因 序列分析
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去垢剂对单向免疫扩散法测定流感病毒疫苗血凝素含量的影响
4
作者 田文莉 祁骥 +3 位作者 高燕燕 陈群 杨旭 李小强 《中国当代医药》 2012年第6期49-51,共3页
目的研究单向免疫扩散法测定流感病毒亚单位疫苗不同生产阶段中间产品的血凝素含量实验中,去垢剂对检测结果的影响,寻找最佳裂解条件。方法以不同的去垢剂浓度和不同裂解时间分别对完整病毒和亚单位疫苗样本进行处理后,利用单向免疫扩... 目的研究单向免疫扩散法测定流感病毒亚单位疫苗不同生产阶段中间产品的血凝素含量实验中,去垢剂对检测结果的影响,寻找最佳裂解条件。方法以不同的去垢剂浓度和不同裂解时间分别对完整病毒和亚单位疫苗样本进行处理后,利用单向免疫扩散实验测定样本的血凝素含量,并对测定结果进行比较和分析。结果亚单位疫苗的单向免疫扩散沉淀圈在去垢剂Zwittergent浓度小于0.125%时随去垢剂浓度的增加而增大,当去垢剂浓度达到0.125%后不再继续增大;而完整病毒的沉淀圈在去垢剂浓度达到1%后才不再增大。以终浓度1%的去垢剂对完整病毒和亚单位疫苗分别处理30、60、120min后进行单向免疫扩散,测定结果比较差异无统计学意义。结论以终浓度1%的去垢剂Zwittergent对完整病毒或亚单位疫苗样本裂解30min后进行单向免疫扩散测定血凝素含量,均可得到稳定准确的结果,有利于提高工作效率、缩小实验间误差、节约实验成本。 展开更多
关键词 单向免疫扩散 流感病毒疫苗 血凝素 亚单位 去垢剂
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