黄芪多糖对HSC-T6细胞增殖及胶原产生的影响 被引量：10

1

作者 张霄翔 杨雁 陈敏珠 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2003年第6期645-647,共3页

目的 :研究黄芪多糖 (APS)对体外HSC T6细胞增殖和胶原合成的影响。方法 :采用血清刺激大鼠肝星状细胞 (HSC T6 ) ,用 [3 H] TdR和 [3 H] Proline掺入法分别检测其增殖和胶原合成的活性。结果 :低浓度APS可明显降低由血清刺激的HSC T6... 目的 :研究黄芪多糖 (APS)对体外HSC T6细胞增殖和胶原合成的影响。方法 :采用血清刺激大鼠肝星状细胞 (HSC T6 ) ,用 [3 H] TdR和 [3 H] Proline掺入法分别检测其增殖和胶原合成的活性。结果 :低浓度APS可明显降低由血清刺激的HSC T6细胞的增殖和胶原合成的活性。高浓度APS (≥80mg·L-1)可明显促进HSC T6细胞增殖。结论 :低浓度APS对HSC T6细胞的增殖和胶原合成的活性有抑制作用 ,且APS对HSC T6细胞增殖有双向调节作用。 展开更多

关键词 药理学 黄芪多糖 hsc—T6细胞系 增殖 胶原 肝纤维化

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复方861对HSC-T6细胞基质分解素1mRNA表达水平影响的研究 被引量：14

2

作者 阴赪宏 马红 +3 位作者 王爱民 马雪梅 贾继东 王宝恩 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2002年第3期168-170,共3页

为观察复方 86 1对HSC -T6细胞基质分解素 1(MMP3 )mRNA表达水平的影响 ,复方 86 1以 0 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等浓度作用于HSC -T6细胞 48小时 ,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平的影响。结果表明 ,... 为观察复方 86 1对HSC -T6细胞基质分解素 1(MMP3 )mRNA表达水平的影响 ,复方 86 1以 0 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等浓度作用于HSC -T6细胞 48小时 ,以逆转录定量PCR方法测定其对HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平的影响。结果表明 ,复方 86 10 2 5mg/ml、0 5mg/ml、1 0mg/ml等不同浓度的HSC -T6细胞mRNA表达水平依次为 2 75± 0 35、3 0 0± 0 0 1、3 5 0± 0 71,与空白对照组比较 ,可明显提高MMP3 mRNA表达水平 (P <0 0 5或P <0 0 1)。因此 ,复方 86 1提高HSC -T6细胞MMP3 mRNA表达水平 ,可能是其促进胶原降解 ,抗肝纤维化的作用机理之一。 展开更多

关键词 表达水平 基质分解素 复方861 hsc-T6细胞 MMP3 MRNA 逆转录PCR 肝纤维化

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柴竭抑肝纤对大鼠肝星状细胞增殖和TGF-β1/Smad信号通路的影响 被引量：8

3

作者 郭会君 张志毕 +4 位作者 余晓玲 蔡悦青 魏炜 张荣平 姜莉云 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期100-104,共5页

目的：研究保肝护肝中药复方柴竭抑肝纤（CJYGX）通过肝星状细胞治疗肝纤维化的作用机制。方法：培养肝星状细胞T6（hepatic stellate cell T6,HSC-T6）,设空白组、秋水仙碱1.0 mg·L（-1）组和200,100,50,25,12.5,6.25 mg·L... 目的：研究保肝护肝中药复方柴竭抑肝纤（CJYGX）通过肝星状细胞治疗肝纤维化的作用机制。方法：培养肝星状细胞T6（hepatic stellate cell T6,HSC-T6）,设空白组、秋水仙碱1.0 mg·L（-1）组和200,100,50,25,12.5,6.25 mg·L（-1）质量CJYGX组,作用24 h后通过细胞计数试剂（cell counting kit-8,CCK-8）检测HSC-T6细胞的增殖情况,筛选合适的CJYGX药物浓度;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测CJYGX（200,100,50 mg·L（-1））作用HSC-T6细胞24 h后转化生长因子-β1（TGF-β1）,信号转导蛋白Smad2,Smad3,Smad4,Smad7 mRNA表达变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测CJYGX（200,100,50 mg·L（-1））作用HSC-T6细胞24 h后TGF-β1,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达变化。结果：（1）与空白组比较,200,100,50 mg·L（-1）CJYGX对HSC-T6细胞具有显著的抑制增殖作用（P〈0.05）。（2）200,100,50 mg·L（-1）CJYGX显著下调TGF-β1,Smad2,Smad3 mRNA的表达（P〈0.05）;200,100 mg·L（-1）CJYGX显著下调Smad4 mRNA表达,并显著上调Smad7 mRNA表达（P〈0.05）。（3）200,100 mg·L（-1）CJYGX显著下调HSC-T6细胞TGF-β1和α-SMA蛋白表达（P〈0.05）。结论：CJYGX能抑制HSC-T6细胞的增殖,其作用机制与TGF-β1/Smad通路有关。 展开更多

关键词 柴竭抑肝纤 hsc-T6细胞 转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad通路 增殖 活化

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大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

4

作者 王联 谢娜 +3 位作者 赵珮伶 陈浩 李芏酉 王豫萍 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第23期4965-4974,共10页

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路... 背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细� 展开更多

关键词 大麻二酚 肝星状细胞 肝纤维化 信号转导通路 转化生长因子Β1/SMAD hsc-T6细胞

三七总皂甙对传代肝星状细胞增殖的影响 被引量：7

5

作者 王怡 薛绍礼 +5 位作者 张菁 薛青 汪亚松 夏觅真 孔云明 候勇 《淮海医药》 CAS 2008年第1期1-3,共3页

目的用体外培养的传代细胞研究三七总皂甙对大鼠肝星状细胞增殖的影响。方法分别将0 mg/ml、0.01 mg/ml、0.05 mg/ml、0.25 mg/ml、1.00 mg/ml和1.25 mg/ml浓度的三七总皂甙作用于HSC-T6细胞,用MTT比色法研究三七总皂甙对细胞增殖的影... 目的用体外培养的传代细胞研究三七总皂甙对大鼠肝星状细胞增殖的影响。方法分别将0 mg/ml、0.01 mg/ml、0.05 mg/ml、0.25 mg/ml、1.00 mg/ml和1.25 mg/ml浓度的三七总皂甙作用于HSC-T6细胞,用MTT比色法研究三七总皂甙对细胞增殖的影响。结果培养24 h和48 h后,0.25 mg/ml,1.00 mg/ml和1.25 mg/mI浓度的三七总皂甙对HSC-T6细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05);0 mg/mI、0.01 mg/ml、0.05 mg/ml、0.25 mg/ml,1.00 mg/ml和1.25 mg/ml浓度的三七总皂甙对HSC-T6细胞增殖抑制率呈线性关系,并有明显剂量效应关系,经相关回归分析,培养24 h后,Y=0.486402X+0.037362,r=0.982181,P<0.002;培养48 h后,Y=0.526087X+0.071327,r=0.992046,P<0.001。结论三七总皂甙对HSC-T6细胞增殖有明显抑制作用。 展开更多

关键词 肝星状细胞 细胞增殖 三七总皂甙

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4-羟基苯并恶唑-2-酮对HSC-T6细胞增殖的影响 被引量：5

6

作者 林军 樊惠 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2371-2372,共2页

目的研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC-T6细胞增殖的影响。方法 HSC-T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h。应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置... 目的研究4-羟基苯并恶唑-2-酮(HBOA)对HSC-T6细胞增殖的影响。方法 HSC-T6细胞分别在药物处理组(HBOA浓度分别为0.008,0.04,0.2,1,5 mg/ml)及对照组(单纯培养液)中体外培养32 h。应用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)检测细胞增殖情况;荧光倒置显微镜下观察对照组和药物处理组HSC-T6细胞的形态学变化。结果药物处理组HSC-T6细胞的增殖率均低于对照组,浓度为0.008 mg/ml的药物处理组与对照组相比无显著性差别(P>0.05);其他药物处理组分别与对照组比较能显著地抑制细胞增值(P<0.05或P<0.01)。HBOA对HSC细胞的增殖抑制率均随着药物作用浓度的升高而逐渐升高;经吖啶橙染色后,在荧光倒置显微镜下观察,均可见细胞数量减少、体积缩小、核破裂、核浓缩等变化,且随着作用浓度的增加变化更加明显。结论 HBOA对HSC-T6细胞具有抑制增殖的功效。 展开更多

关键词 4-羟基苯并恶唑-2-酮 hsc-T6细胞 吖啶橙

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泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞增殖的影响 被引量：5

7

作者 任利 王志鑫 +6 位作者 刘志胜 候立朝 阳丹才让 王海久 周瀛 温浩 樊海宁 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2016年第5期517-520,共4页

目的探讨泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞（HSC-T6）增殖的影响及机制。方法采用不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预HSC-T6细胞24 h后,在倒置显微镜观察HSC-T6细胞形态变化,利用CCK-8法检测并绘制HSC-T6细胞的生长曲线,采用流式... 目的探讨泡球蚴囊液对大鼠肝脏星状细胞（HSC-T6）增殖的影响及机制。方法采用不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预HSC-T6细胞24 h后,在倒置显微镜观察HSC-T6细胞形态变化,利用CCK-8法检测并绘制HSC-T6细胞的生长曲线,采用流式细胞仪检测并分析HSC-T6细胞在不同浓度的泡球蚴囊液培养条件下细胞周期的改变。结果 1 HSC-T6细胞在不同浓度（0.00-0.90 mg/m L）泡球蚴囊液干预24 h后,部分HSC-T6细胞收缩成长梭形,细胞生出许多细长的伪足。2当泡球蚴囊液浓度〈0.05 mg/m L时,囊液干预对细胞增殖活性无明显影响（P〉0.05）,而当泡球蚴囊液浓度〉0.05 mg/m L时,随着作用浓度的增加,细胞增殖活性显著增强（P〈0.05）。3流式细胞仪检测结果显示,在上述浓度的泡球蚴囊液干预下,处于静止期/DNA合成前期（G0/G1期）的HSC-T6细胞减少（P〈0.05）,处于DNA合成期（S期）的HSC-T6细胞数量增加（P〈0.05）,而处于DNA合成后期、细胞分裂期（G2/M期）的细胞数量显著增多（P〈0.05）。结论泡球蚴囊液对体外培养大鼠肝脏星状细胞增殖具有浓度依赖的促进作用,其具体机制可能涉及细胞周期调控。 展开更多

关键词 泡球蚴囊液 大鼠肝星状细胞 细胞增殖 细胞周期

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美洲大蠊抗肝纤维化活性部位的筛选 被引量：4

8

作者 郝芳芳 杨永寿 肖培云 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期241-244,共4页

目的结合体外活性筛选,对美洲大蠊提取物进行分离、纯化与活性追踪,以便获得抗肝纤维化活性较强部位。方法用5倍量95%,90%,80%,70%,60%,50%的乙醇溶液和水制备美洲大蠊冻干粉,分别命名为美蠊-A(ML-A)、美蠊-B(ML-B)、美蠊-C(ML-C)、美蠊... 目的结合体外活性筛选,对美洲大蠊提取物进行分离、纯化与活性追踪,以便获得抗肝纤维化活性较强部位。方法用5倍量95%,90%,80%,70%,60%,50%的乙醇溶液和水制备美洲大蠊冻干粉,分别命名为美蠊-A(ML-A)、美蠊-B(ML-B)、美蠊-C(ML-C)、美蠊-D(ML-D)、美蠊-E(ML-E)、美蠊-F(ML-F)、美蠊-G(ML-G)。将细胞分为3组:正常组、空白组(不含细胞)和给药组(美洲大蠊冻干粉溶液:1000,250,62.5,15.63,3.91,0.98μg·mL-1)。用MTT法对美洲大蠊不同溶剂提取物进行抗肝纤维化活性筛选,用HP20大孔树脂对筛选得到的活性部位进行分离与纯化,进行体外活性追踪。结果美洲大蠊提取物ML-D对HSC-T6细胞有一定的抑制作用,其48h的IC_50值为389μg·mL^(-1)。分离ML-D得ML-D_1、ML-D_2、ML-D_3、ML-D_4、ML-D_5、ML-D_6和ML-D_7洗脱部位,其中ML-D_5、ML-D_6、ML-D_7及其合并物ML-HB对HSC-T6细胞细胞的生长有良好的抑制作用,48h的IC_50值分别为115.6,116.5,121.8和110.0μg·mL-1。结论从美洲大蠊中提取分离得到活性部位ML-HB对HSC-T6细胞的增殖有较好的抑制作用。 展开更多

关键词 美洲大蠊 肝纤维化 活性部位 筛选 hsc-T6细胞

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大黄素甲醚对大鼠肝星状细胞HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响 被引量：3

9

作者 潘亭 刘媛 吕志平 《广东医学》 CAS 2018年第12期1772-1775,共4页

目的初步探讨大黄素甲醚对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法采用溶剂系统分离法从虎杖中制备出单体大黄素甲醚(Physcion);Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测大黄素甲醚对HSC-T6细胞存活率的影响;通过Ed U染色法进一步观察不同浓... 目的初步探讨大黄素甲醚对HSC-T6细胞增殖及凋亡的影响。方法采用溶剂系统分离法从虎杖中制备出单体大黄素甲醚(Physcion);Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)法检测大黄素甲醚对HSC-T6细胞存活率的影响;通过Ed U染色法进一步观察不同浓度(5、10、20μmol/L)大黄素甲醚作用后,HSC-T6细胞的增殖状况;免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2、Bax蛋白的表达变化。结果与对照组(加入等量的不含药物的培养基)相比,大黄素甲醚可抑制HSC-T6细胞增殖,且呈浓度依赖性;Ed U染色可观察到大黄素甲醚组阳性细胞数目及所占比例均显著小于对照组(P<0.001);Western blot结果显示大黄素甲醚在10μmol/L和20μmol/L时可降低Bcl-2表达水平(P<0.001),同时升高Bax水平(P<0.001)。结论大黄素甲醚可抑制HSC-T6细胞增殖,可能是通过调节Bax/Bcl-2水平来发挥其作用。 展开更多

关键词 虎杖 肝纤维化 大黄素甲醚 hsc-T6细胞 细胞凋亡

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携带rIL-10基因的大鼠肝细胞及肝星状细胞对TGF-β1表达的影响 被引量：2

10

作者 黄月红 陈运新 +2 位作者 张莉娟 陈治新 王小众 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期918-922,共5页

目的:观察携带大鼠白介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞(BRL)及大鼠肝星状细胞(HSC-T6)是否可通过旁分泌作用或自分泌作用减少肝星状细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1),进一步探讨rIL-10抗纤维化的作用机制。方法:IL-10基因通过尾静... 目的:观察携带大鼠白介素10(rIL-10)基因的正常大鼠肝细胞(BRL)及大鼠肝星状细胞(HSC-T6)是否可通过旁分泌作用或自分泌作用减少肝星状细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1),进一步探讨rIL-10抗纤维化的作用机制。方法:IL-10基因通过尾静脉高压注射干预猪血清诱导肝纤维化大鼠,造模结束时收集各实验组大鼠血浆;通过半乳糖受体介导的脂质体转染试剂及阳离子脂质体转染试剂将携带rIL-10基因的pCDNA3-rIL-10质粒与pCDNA3空质粒转染大鼠BRL细胞及HSC-T6细胞,收集转染后24及48小时细胞培养上清;另将携带pCDNA3-rIL-10质粒与pCDNA3空质粒的大鼠BRL细胞与HSC-T6细胞共培养,收集共培养24及48小时后细胞培养上清液;ELISA法检测各实验组细胞培养上清液中TGF-β1的表达。结果:rIL-10基因干预后的肝纤维化大鼠血浆中TGF-β1表达下降,携带rIL-10基因的BRL细胞及HSC-T6细胞可表达高浓度细胞因子rIL-10,HSC-T6分泌的rIL-10能减少自身表达TGF-β1水平,BRL细胞表达rIL-10通过旁分泌作用可抑制与之共培养HSC-T6上清中TGF-β1的表达。结论:rIL-10基因可通过旁分泌或自分泌作用抑制肝星状细胞分泌转化生长因子β1,进一步阐明rIL-10基因的抗纤维化作用机理。 展开更多

关键词 白细胞介素10 基因转染 基因表达 共培养 BRL细胞 hsc-T6细胞

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复方861对肝星状细胞间质胶原酶及I型胶原基因表达的影响 被引量：1

11

作者 王爱民 阴桢宏 +3 位作者 马志杰 马红 李洵 王宝恩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1964-1965,共2页

目的观察复方861对HSC．T6细胞间质胶原酶（MMP13）及I型胶原基因表达的影响。方法以不同浓度的复方861（1．00、0．50、0．25g/L）作用于培养的肝星状细胞株HSC—T6细胞48h，收集细胞，提取总RNA；用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）... 目的观察复方861对HSC．T6细胞间质胶原酶（MMP13）及I型胶原基因表达的影响。方法以不同浓度的复方861（1．00、0．50、0．25g/L）作用于培养的肝星状细胞株HSC—T6细胞48h，收集细胞，提取总RNA；用逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定MMP13及I型胶原的基因表达水平。结果MMP13基因表达水平在复方8611．00、0．50、0．25g／L3组分别为1．03±0．16、0．60±0．08、0．33±0．04，而空白对照组为0．26±0．04。I型胶原基因表达水平在复方8611．00、0．50、0．25g／L3组分别为0．12±0．01、0．34±0．04、0．67±0．10，而空白对照组为3．12±0．46。结论复方861可明显促进HSC—T6细胞间质胶原酶的基因表达，并明显抑制I型胶原的基因表达；且该作用与剂量有关。 展开更多

关键词 复方861 hsc—T6细胞 间质胶原酶 I型胶原 基因表达

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三七总苷对体外培养细胞胶原合成模型的影响 被引量：1

12

作者 薛青 薛绍礼 +3 位作者 汪亚松 张菁 王怡 夏觅真 《医药导报》 CAS 2008年第5期517-519,共3页

目的建立体外培养细胞胶原合成模型并研究三七总苷对胶原合成的影响。方法用不同浓度和比例的新生牛血清和大鼠血清混合,筛选刺激HSC-T6细胞胶原合成的最佳条件,继而用3H-Proline掺入法研究三七总苷对其胶原合成的影响。结果10%新生牛... 目的建立体外培养细胞胶原合成模型并研究三七总苷对胶原合成的影响。方法用不同浓度和比例的新生牛血清和大鼠血清混合,筛选刺激HSC-T6细胞胶原合成的最佳条件,继而用3H-Proline掺入法研究三七总苷对其胶原合成的影响。结果10%新生牛血清加3%大鼠血清为刺激HSC-T6细胞胶原合成最佳培养条件。培养48和72h后,0.01,0.05,0.25,1.00和1.25mg·mL-1浓度的三七总苷对HSC-T6细胞胶原合成有明显的抑制作用(P<0.05);并呈剂量效应关系和时间效应关系,方差分析,F分别为4.517和5.832(均P<0.05)。结论成功建立了体外培养细胞胶原合成模型,三七总苷对细胞胶原合成有明显抑制作用。 展开更多

关键词 三七总苷 肝星状细胞 胶原合成

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慢病毒载体介导的Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响

13

作者 蔡陈效 鉏莉 +2 位作者 王晓晗 韩丰 陈一鹏 《中国现代医生》 2020年第13期15-18,26,I0002,共6页

目的观察重组慢病毒载体介导Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法利用重组DNA技术将特异性shRNA序列插入慢病毒表达载体pGLV3.GFP中,形成pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA,将其转染至293T细胞中,随后进行病... 目的观察重组慢病毒载体介导Nrf2表达下调对肝星状细胞生物学行为的影响,同时探讨其可能的作用机制。方法利用重组DNA技术将特异性shRNA序列插入慢病毒表达载体pGLV3.GFP中,形成pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA,将其转染至293T细胞中,随后进行病毒包装、滴度测定、转染率计算。采用实时荧光定量、Western blot测定转染肝星状细胞株(HSC-T6细胞)Nrt2 mRNA及蛋白的表达情况,利用Tunel染色法检测HSC-T6细胞的凋亡情况,同时对HSC-T6细胞中PI3K、Akt、p-Akt、p-Bad、Bcl-2、Bax蛋白水平进行测定。结果构建的重组病毒载体LV3-H1-GFP-shRNA可有效感染293T细胞。激光共聚焦显示空白组细胞凋亡率低于A组和B组,与A组比较,B组的细胞凋亡率降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR法结果显示空白组Nrf2 mRNA水平高于A组和B组(P<0.05),与A组比较,B组mRNA水平升高(P<0.05)。Western blot法显示空白组Nrf2蛋白水平高于A组和B组(P<0.05),与A组比较,B组蛋白水平升高(P<0.05)。与空白组相比,A组和B组PI3K、p-Akt、p-bad、Bcl-2的蛋白表达量增加(P<0.05),Bax蛋白减少(P<0.05),其中A组PI3K、p-Akt、p-Bad、Bcl-2的蛋白水平较B组增加(P<0.05),Bax蛋白水平低于B组(P<0.05)。结论Nrf2基因的shRNA慢病毒载体pGLV3.GFP.Nrf2.shRNA在体外可抑制肝星状细胞活化,其作用机制可能与通过抑制PI3K-Akt通路促肝星状细胞凋亡有关。 展开更多

关键词 慢病毒载体 hsc-T6细胞 NRF2 PI3K-Akt通路 凋亡

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丹参对肝星状细胞间质胶原酶及I型胶原基因表达的调节

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作者 王爱民 阴赪宏 +3 位作者 朱志坚 马雪梅 付晓霞 王宝恩 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1938-1939,共2页

目的观察丹参对HSC-T6细胞间质胶原酶及I型胶原基因表达的影响。方法以不同浓度的丹参（0．8、0．4g／L）作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48h 收集细胞，提取总RNA；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法测定间质胶原酶（MMP13）及... 目的观察丹参对HSC-T6细胞间质胶原酶及I型胶原基因表达的影响。方法以不同浓度的丹参（0．8、0．4g／L）作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48h 收集细胞，提取总RNA；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法测定间质胶原酶（MMP13）及I型胶原的基因表达水平。结果MMP13基因表达水平在丹参0．8、0．4g／L两组分别为0．25±0．05、0．27±0．06，而空白对照组为0．26±0．04。I型胶原基因表达水平在丹参0．8、0．4g／L两组分别为0．76±0．10、1．55±0．23，而空白对照组为3．12±0．46。结论丹参可明显抑制HSC-T6细胞I型胶原的基因表达，且与剂量有关；但对间质胶原酶的基因表达无明显影响。 展开更多

关键词 丹参 hsc-T6细胞 间质胶原酶 I型胶原 基因表达

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氯沙坦对肝星状细胞增殖和凋亡的作用

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作者 李万平 任美萍 +2 位作者 李晓冰 刘明华 章卓 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期1057-1059,共3页

目的:观察氯沙坦对肝星状细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用CCK8试剂盒检测氯沙坦对肝星状细胞增殖的抑制情况;重复实验可计算IC50;采用AnnexinV-FITC/PI双染法经流式细胞仪检测肝星状细胞的凋亡情况。结果:氯沙坦可抑制肝星状细胞的增殖... 目的:观察氯沙坦对肝星状细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用CCK8试剂盒检测氯沙坦对肝星状细胞增殖的抑制情况;重复实验可计算IC50;采用AnnexinV-FITC/PI双染法经流式细胞仪检测肝星状细胞的凋亡情况。结果:氯沙坦可抑制肝星状细胞的增殖,并呈明显的剂量依赖性,1000μmol·L-1时肝细胞的抑制率可达(95.22±3.54)%,IC50值为(326.21±30.27)μmol·L-1;AnnexinV-FITC/PI双染法检测显示,各浓度的氯沙坦均能促进细胞凋亡,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:氯沙坦有抑制肝星状细胞细胞增殖及促进其凋亡的作用。 展开更多

关键词 氯沙坦 肝星状细胞 增殖 凋亡

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Smad7质粒转染对肝星形细胞α1(Ⅰ)和α1(Ⅲ)前胶原基因表达的影响 被引量：3

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作者 阮艺华 刘海林 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第24期2593-2596,共4页

目的:研究上调Smad7表达对肝星形细胞(HSC)α1(Ⅰ)和α1(Ⅲ)前胶原基因转录的作用.方法:应用Fugene6介导Smad7质粒转染体外培养的HSC-T6细胞.继续培养48 h.同时使用实时定量聚合酶链式反应(Real time-PCR),逆转录酶链式反应(RT-PCR)方... 目的:研究上调Smad7表达对肝星形细胞(HSC)α1(Ⅰ)和α1(Ⅲ)前胶原基因转录的作用.方法:应用Fugene6介导Smad7质粒转染体外培养的HSC-T6细胞.继续培养48 h.同时使用实时定量聚合酶链式反应(Real time-PCR),逆转录酶链式反应(RT-PCR)方法检测Smad7质粒组和正常对照组、空载质粒对照组α(Ⅰ)和α1(Ⅲ)前胶原mRNA水平.结果:与正常对照组和空载质粒对照组相比,Smad7质粒转染HSC-T6细胞48h后,Smad7 mRNA水平显著增高(1.29±0.18 vs 0.11±0.02,0.13±0.02,均P<0.01),α1(Ⅰ)前胶原mRNA表达明显下降(0.10±0.01 vs 1.18±0.15.1.07±0.12,均P<0.01),但α1(Ⅲ)前胶原基因表达无明显改变(0.72±0.00 vs 0.70±0.01,0.75±0.0l,均P>0.05).结论:Smad7能明显抑制HSC细胞α1(Ⅰ)前胶原mRNA转录. 展开更多

关键词 SMAD7 肝星状细胞系 细胞外基质 α1(Ⅰ)前胶原 α1(Ⅲ)前胶原 实时定量聚合酶链式反应

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卡维地洛抗肝纤维化的试验研究 被引量：2

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作者 梁春丽 樊晓明 《中华全科医学》 2010年第10期1211-1212,共2页

目的研究β受体阻滞剂卡维地洛(CVD)对肝星状细胞TGF-β1、α-SMA表达的影响,从而探讨其抗肝纤维化的作用和部分作用机理。方法将传代培养的HSC-T6细胞分为6组,分别为空白对照组、血小板衍生生长因子(PDGF)组、模拟对照组、药物处理组3... 目的研究β受体阻滞剂卡维地洛(CVD)对肝星状细胞TGF-β1、α-SMA表达的影响,从而探讨其抗肝纤维化的作用和部分作用机理。方法将传代培养的HSC-T6细胞分为6组,分别为空白对照组、血小板衍生生长因子(PDGF)组、模拟对照组、药物处理组3组,RT-PCR及Western-blot分别检测转移生长因子β1(TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的水平。结果 CVD处理后,HSC-T6的TGF-β1、α-SMA的水平下降。结论 CVD具有一定抗肝纤维化的作用。 展开更多

关键词 肝纤维化 Β受体阻滞剂 hsc-T6 卡维地洛 TGF-Β1 Α-SMA

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川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖的抑制作用 被引量：5

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作者 谈博 张奉学 +1 位作者 刘妮 郭兴伯 《热带医学杂志》 CAS 2004年第6期678-681,共4页

目的观察活血化瘀中药的有效成份川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖的作用。方法经传代培养,绘制肝星状细胞HSC-T6的细胞生长曲线,并计算其细胞群体倍增时间和克隆形成率等基本的细胞生物学参数;应用MTT比色法测定HSC-T6细胞增殖及评价药... 目的观察活血化瘀中药的有效成份川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖的作用。方法经传代培养,绘制肝星状细胞HSC-T6的细胞生长曲线,并计算其细胞群体倍增时间和克隆形成率等基本的细胞生物学参数;应用MTT比色法测定HSC-T6细胞增殖及评价药物对细胞增殖的作用。结果HSC-T6细胞成活率较高,细胞在指数增殖期的细胞群体倍增时间为10.57h,克隆形成率为82.4%。川芎嗪在10-9～10-4mol/L浓度范围之内,抑制HSC细胞增殖作用呈剂量依赖性,与对照组相比均具有显著性差异(P<0.05)。苦参碱在10-8～10-4mol/L浓度范围之内,抑制HSC细胞增殖作用呈剂量依赖性,与对照组相比均具有显著性差异(P<0.05)。结论川芎嗪和苦参碱对HSC-T6细胞增殖具有抑制作用,呈剂量依赖性。 展开更多

关键词 川芎嗪 苦参碱 hsc—T6细胞 细胞增殖

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