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MiR-204降调Caveolin-1表达降低HRGECs对大分子蛋白的通透性 被引量：2
1
作者 杜菲 徐钦洋 蒋荣珍 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2017年第4期246-250,共5页
目的:探讨miR-204对肾小球内皮细胞(HRGECs)通透性及Caveolin-1(CAV1)表达的影响。方法:利用生物信息学方法预测以CAV1为靶基因的miRNA,miR-204为CAV1表达的调节miRNA。分别用子痫前期(PE)患者血清和正常血清处理HRGECs,q PCR法检测miR-... 目的:探讨miR-204对肾小球内皮细胞(HRGECs)通透性及Caveolin-1(CAV1)表达的影响。方法:利用生物信息学方法预测以CAV1为靶基因的miRNA,miR-204为CAV1表达的调节miRNA。分别用子痫前期(PE)患者血清和正常血清处理HRGECs,q PCR法检测miR-204表达水平。将体外培养肾小球内皮细胞(HRGECs)分为4组:过表达组(转染miR-204 mimic),降表达组(转染miR-204 inhibitor),转染miR-204mimic NC(mimic阴性对照组)和转染miR-204 inhibitor NC(inhibitor阴性对照组)。转染48h后,荧光定量PCR及Western blot法检测miR-204及CAV1 mRNA和蛋白表达水平,Evans-blue检测HRGECs单层细胞对大分子蛋白的通透性改变。结果:PE血清可抑制HRGEC中miR-204表达(P<0.05)。荧光定量PCR和Western blot结果显示,与阴性对照组比较,miR-204过表达组中CAV1 mRNA表达量无明显差异,CAV1蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);miR-204降表达组中CAV1 mRNA表达量无明显差异,CAV1蛋白表达量明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,miR-204过表达组中HRGECs对大分子蛋白的通透性降低,miR-204降表达组中HRGECs对大分子蛋白的通透性提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-204可能通过抑制CAV1转录后翻译从而调节其靶基因CAV1表达,进而影响肾小球内皮细胞通透性,miR-204可能参与PE患者肾小球内皮细胞尿蛋白形成的调节。 展开更多
关键词 miR-204 CAVEOLIN-1 肾小球内皮细胞 屏障障碍 蛋白尿
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子痫前期血清通过Caveolin-1增加肾小球内皮细胞通透性 被引量：2
2
作者 徐钦洋 杜菲 蒋荣珍 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2016年第1期10-13,18,共5页
目的:探讨子痫前期血清对肾小球内皮细胞(HRGEC)通透性的影响以及caveolin-1表达在子痫前期血清影响HRGEC通透性过程中的作用。方法:采用原代培养的肾小球内皮细胞,实验分组:正常妊娠血清培养组(A组),子痫前期血清培养组(B组),子痫前期... 目的:探讨子痫前期血清对肾小球内皮细胞(HRGEC)通透性的影响以及caveolin-1表达在子痫前期血清影响HRGEC通透性过程中的作用。方法:采用原代培养的肾小球内皮细胞,实验分组:正常妊娠血清培养组(A组),子痫前期血清培养组(B组),子痫前期血清+caveolae蛋白的抑制剂甲基-β-环糊精(MBCD)处理组(C组)。免疫荧光及免疫印迹监测HRGEC caveolin-1蛋白表达;细胞接种transwell小室,Evens-blue检测HRGEC单层细胞对大分子蛋白通透性改变;Western blot法检测caveolin-1表达。结果:子痫前期血清明显促进单层HRGEC对大分子蛋白的通透性与caveolin-1表达(P<0.05),MBCD能拮抗子痫前期血清促单层HRGEC对大分子蛋白的通透性与caveolin-1表达的作用。结论:子痫前期患者血清通过增加caveolin-1蛋白表达促进HRGEC单层细胞对大分子蛋白的通透性,caveolin-1表达异常可能在子痫前期患者蛋白尿形成过程中起重要作用。 展开更多
关键词 子痫前期 肾小球内皮细胞 CAVEOLIN-1 屏障障碍 蛋白尿
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参芪地黄汤含药血清对脂多糖诱导人肾小球内皮细胞损伤的保护作用及机制研究 被引量：2
3
作者 徐晨希 严浩军 +1 位作者 刘芙蓉 张树明 《中国中医药科技》 CAS 2023年第3期430-433,共4页
目的:观察参芪地黄汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导的人肾小球内皮细胞(HRGEC)的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:LPS诱导体外肾小球内皮细胞损伤模型。实验分为5组:①正常组:完全培养基培养;②模型组:终浓度为10 mg/L LPS的完全培... 目的:观察参芪地黄汤含药血清对脂多糖(LPS)诱导的人肾小球内皮细胞(HRGEC)的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法:LPS诱导体外肾小球内皮细胞损伤模型。实验分为5组:①正常组:完全培养基培养;②模型组:终浓度为10 mg/L LPS的完全培养基培养;③10%参芪地黄汤含药血清+终浓度为10 mg/L LPS的完全培养基培养;④大鼠空白血清+终浓度为10 mg/L LPS的完全培养基培养;⑤阳性对照组:终浓度为10μmol/L GS-5829+终浓度为10 mg/L LPS的完全培养基培养。采用CCK-8法测定细胞增殖率;ANNEXIN V-FITC/PI法检测细胞凋亡;硝酸还原酶法测定NO含量;ELISA法检测TNF-α含量。结果:与正常组相比,模型组细胞增殖率显著降低(P<0.01),细胞早凋率显著增加(P<0.01),细胞NO含量升高,TNF-α的释放增加;与模型组相比,参芪地黄汤含药血清可显著提升细胞增殖率(P<0.01),降低细胞早凋率,减少NO含量及TNF-α的释放。结论:参芪地黄汤可减少LPS诱导的HRGEC凋亡,其机制可能为:维持NO含量稳定,保护血管内皮;减少TNF-α释放,改善炎症反应。 展开更多
关键词 参芪地黄汤 血清药理学 肾小球内皮细胞(hrgec) 脂多糖(LPS) 细胞增殖 凋亡 NO TNF-α 体外实验
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