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断奶仔猪源大肠杆菌LEE及HPI毒力岛的检测 被引量:21
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作者 成大荣 孙怀昌 +1 位作者 徐建生 高崧 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期368-372,共5页
应用Duplex_PCR方法,对240株断奶仔猪源大肠杆菌分离株的LEE毒力岛的eaeA基因和耶尔森菌强毒力岛核心区的irp2基因进行了检测,并对HPI毒力岛的fyuA基因及其在大肠杆菌染色体中的插入位置进行了分析,以及随机选取部分PCR产物进行了克隆... 应用Duplex_PCR方法,对240株断奶仔猪源大肠杆菌分离株的LEE毒力岛的eaeA基因和耶尔森菌强毒力岛核心区的irp2基因进行了检测,并对HPI毒力岛的fyuA基因及其在大肠杆菌染色体中的插入位置进行了分析,以及随机选取部分PCR产物进行了克隆和序列分析。结果表明:其中29株(12.08%)为LEE+HPI+,39株(16.25%)为LEE+,11株(4.58%)为HPI+;另外还发现:不同病例来源的分离株之间,两种毒力岛的携带率不同;在断奶仔猪腹泻源分离株中,29株(20.71%)为LEE+HPI+,22株(15.71%)为LEE+,9株(6.43%)为HPI+;断奶仔猪水肿病源分离株中,仅5株(6.58%)为LEE+,2株(2.63%)为HPI+,未发现LEE+HPI+菌株;断奶仔猪水肿病并发腹泻源分离株中,仅12株(50%)为LEE+,未发现HPI+及LEE+HPI+菌株。本实验克隆的eaeA(425bp)与已发表序列完全一致,irp2(280bp)f、yuA(948bp)、asn_tRNA_intB(1391bp)均与已发表的序列高度同源,同源性分别在98.2%、98.3%、95.8%以上;40株LEE+HPI+或HPI+分离株中,29株(72.5%)为fyuA+,且其HPI毒力岛位于大肠杆菌染色体asn_tRNA位点。 展开更多
关键词 大肠杆菌 毒力岛 LEE hpi
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我国腹泻病患者和家畜家禽粪便标本中携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的调查 被引量:6
2
作者 程伯鲲 崔树玉 +6 位作者 温宪芹 姜桂香 李连青 刘巧突 赵斌秀 叶长芸 徐建国 《中华流行病学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第2期130-133,共4页
目的 了解携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国腹泻病患者粪便标本、动物粪便标本及部分食品标本中的存在情况和所致腹泻病的临床特征。方法 使用菌落原位杂交、DNA打点杂交和PCR扩增等方法。结果 在各地送检的从腹... 目的 了解携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国腹泻病患者粪便标本、动物粪便标本及部分食品标本中的存在情况和所致腹泻病的临床特征。方法 使用菌落原位杂交、DNA打点杂交和PCR扩增等方法。结果 在各地送检的从腹泻病患者粪便标本中分离到的、用常规方法不能鉴定的大肠杆菌中 ,均检出带有小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌菌株 ,检出率为 2 7.0 5 % (436 / 16 12 )。从市售食品标本中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的检出率为 10 .2 3% (9/ 88)。从家畜家禽粪便中分离的大肠杆菌中 ,携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌检出率为 5 .71% (16 / 2 80 )。携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌所致腹泻的典型临床表现为食欲不振、腹痛、寒战乏力、正常体温或低热、每日腹泻多在 6次以上、多为粘液便。结论 携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌在我国分布广泛 ,检出率高于其他几类致泻性大肠杆菌 。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耶尔森氏菌 毒力岛 腹泻 hpi
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禽源性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法的建立与应用 被引量:6
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作者 王艳萍 董林 +5 位作者 郭时金 徐倩倩 莫玲 王金良 刘吉山 沈志强 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2017年第1期86-89,共4页
为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据Gen Bank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性... 为了解临床禽源致病性大肠杆菌中高致病性毒力岛(High pathogenicity island HPI)流行情况和基因特征,根据Gen Bank已知禽源irp2基因序列,设计、合成一对特异性引物,建立irp2基因PCR检测方法,优化、确定PCR扩增特性,进行敏感性、特异性、重复性检测评价。对256份临床分离禽源大肠杆菌进行irp2基因PCR检测和基因遗传变异分析。结果显示,建立的PCR检测方法敏感性可达2.14×10^(-4)ng/μL;特异性显示与鸡沙门菌、副鸡嗜血杆菌、鸭疫里默菌、禽巴氏杆菌、鸡毒支原体、鸡新城疫病毒、禽流感病毒(H9N5)核酸均无交叉反应;重复性显示3份阳性样品重复5次检测,变异系数3.4%~5.0%。256份临床样品PCR检测irp2基因,阳性率30.6%。获得了9株分离株irp2基因序列,分析显示,与GenBank已知基因同源性高达96.2%以上。说明建立的禽源大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可应用于临床致病性大肠杆菌毒力岛基因快速检测。 展开更多
关键词 禽源大肠杆菌 hpi 毒力岛 irp2基因
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携带HPI毒力岛的大肠杆菌的毒力基因分析 被引量:6
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作者 卢珊 任志鸿 +2 位作者 陈凯 叶长芸 徐建国 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期639-642,646,共5页
目的检测分离自腹泻病人、家禽粪便和食品标本的携带HPI毒力岛的大肠杆菌携带其他致病性相关基因组岛的情况。方法运用PCR和DNA打点杂交方法。结果在被检测的82株大肠杆菌中,志贺氏菌属的Shi-2岛检出率为62.2%(51/82);大肠杆菌O157:H7的... 目的检测分离自腹泻病人、家禽粪便和食品标本的携带HPI毒力岛的大肠杆菌携带其他致病性相关基因组岛的情况。方法运用PCR和DNA打点杂交方法。结果在被检测的82株大肠杆菌中,志贺氏菌属的Shi-2岛检出率为62.2%(51/82);大肠杆菌O157:H7的8个O岛中,OI55和OI140的检出率为57.3%(47/82),且二者协同存在;OI28的检出率为35.4%(29/82),OI115的检出率为68.3%(56/82),OI144的检出率为9.8%(8/82),OI43和OI122则均未检出。该82株大肠杆菌中78株携带至少2个毒力岛,如编码RTX的OI28岛、编码III型分泌系统的OI115岛以及编码粘附素的OI144岛,另外还有4株菌携带7个基因岛,20株菌携带6个基因岛。结论一些和细菌致病性有关的基因组岛在肠道大肠杆菌中广泛存在,其中一部分有可能是致病性的,提示基因横向转移在致病性大肠杆菌进化过程中具有重要意义。 展开更多
关键词 hpi毒力岛 致泻性大肠杆菌 毒力基因 基因岛
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大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立 被引量:4
5
作者 蔡树东 成大荣 +2 位作者 朱善元 吴双 左伟勇 《动物医学进展》 北大核心 2017年第1期1-5,共5页
根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HP... 根据GenBank中大肠埃希菌ETT2毒力岛保守基因ECs3703和HPI毒力岛的保守基因irp2分别设计一套LAMP引物,在同一体系中进行LAMP扩增,通过对体系Mg2+、dNTP、内引物及反应温度和反应时间等进行优化,建立了在60℃恒温下对大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛进行同步检测的LAMP方法,并进行了特异性和灵敏性试验。结果显示,所建立的双重LAMP检测方法同时检测ETT2和HPI毒力岛大肠埃希菌检测限均可达到100fg,比常规PCR灵敏度高100倍。利用该方法对8株非大肠埃希菌进行LAMP扩增,结果均为阴性。用该方法对采集的20份临床样品进行检测,与双重PCR检测结果一致。结果显示,该双重LAMP方法可用于大肠埃希菌ETT2和HPI毒力岛的同步快速检测,可作为临床疫病诊断的有效手段。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 ETT2毒力岛 hpi毒力岛 双重LAMP
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利用Red重组系统敲除APEC毒力岛irp2基因 被引量:4
6
作者 李叶芳 涂健 +2 位作者 邵颖 刘红梅 祁克宗 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期854-858,共5页
应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基... 应用质粒pKD46介导的Red同源重组系统,以质粒pKD3为模板,设计irp2基因序列敲除引物,引物5′端有51 bp的拟敲除基因的同源臂,3′端为扩增引物,扩增两侧含FRT位点的氯霉素抗性基因,通过第1次同源重组将拟敲除的irp2基因替换为氯霉素抗性基因,再通过重组酶质粒pCP20在FRT位点发生第2次同源重组,消除抗性基因。结果表明,利用该重组系统成功敲除了禽致病性大肠杆菌HPI毒力岛irp2基因。为深入研究irp2基因在禽致病性大肠杆菌致病过程中所发挥的作用打下基础。 展开更多
关键词 禽致病性大肠杆菌 hpi毒力岛 Red同源重组酶 irp2 缺失
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皖北地区仔猪源大肠杆菌毒力因子及HPI毒力岛的检测 被引量:2
7
作者 吕锦芳 闻爱友 +7 位作者 宁康健 姜锦鹏 王璇 路振香 刘畅 应如海 孙浩楠 王稳 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1782-1785,1791,共5页
我国皖北地区哺乳仔猪腹泻频发,临床直肠棉拭子培养物有34例符合大肠杆菌特征,并进行产肠毒素大肠杆菌(ETEC)毒力因子(STa、STb、LT、SLT-2e)和HPI毒力岛的PCR快速检测。结果,仅有10例表达STa和STb(29.41%),其中3例表达STa基因(8.82%),... 我国皖北地区哺乳仔猪腹泻频发,临床直肠棉拭子培养物有34例符合大肠杆菌特征,并进行产肠毒素大肠杆菌(ETEC)毒力因子(STa、STb、LT、SLT-2e)和HPI毒力岛的PCR快速检测。结果,仅有10例表达STa和STb(29.41%),其中3例表达STa基因(8.82%),2例表达STb基因(5.88%),2例表达STa和STb基因,1例表达STa和irp2基因(2.94%),2例表达STa和STb及irp2基因,揭示HPI+大肠杆菌与ETEC混合感染共有3例(8.82%);未检测到LT和STL-2e毒力因子。有10例表达irp2基因(29.41%),其中7例独立表达irp2基因(20.59%)。STa、STb和Irp2的PCR产物测序结果分别与GenBank检索的目标序列比对,其同源性均达到100%。结果初步揭示了皖北地区致哺乳仔猪腹泻ETEC毒力因子及HPI毒力岛的分布情况。 展开更多
关键词 仔猪腹泻 大肠杆菌 毒力因子 hpi毒力岛
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缺失HPI毒力岛的EAggEC O42突变菌株的构建及鉴定 被引量:1
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作者 胡静 俞守义 +1 位作者 阚飙 刘志华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第11期1352-1356,共5页
目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部... 目的构建并鉴定HPI毒力岛缺失的EAggEC突变株。方法运用基因重组方法,以irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有卡那霉素(Km)抗性基因(kan)标记。以pCVD442作为载体,构建含有irp8部分序列和irp5基因的重组自杀质粒pCO85。以EAggECO42为出发菌株,构建缺失irp8 ̄irp5约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域的全岛缺失株EAG85。结果通过接合转移和同源重组,利用蔗糖抗性筛选,pCO85上的同源序列有效的置换了EAggECO42的irp8和irp5基因。PCR方法扩增irp3、ybtA、irp9等基因的结果显示,筛选出的EAG85确为缺失HPI毒力岛基因的EAggEC菌株。结论成功地构建了缺失HPI毒力岛的EAggECO42突变菌株,为进一步阐明HPI毒力岛在EAggEC菌株中的功能建立了重要的物质基础。 展开更多
关键词 肠集聚性粘附大肠杆菌 hpi毒力岛 耶尔森菌 缺失
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奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析 被引量:15
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作者 徐继英 杨志强 +4 位作者 陈化琦 刘俊林 邢娟 李建喜 李宏胜 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1199-1205,共7页
【目的】研究奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌HPI携带情况及其与O血清型的关系,并对部分菌株的相关基因序列进行分析。【方法】从中国北京、内蒙古、甘肃、四川、重庆、云南、贵州等7个省市部分地区1 260份临床型和隐性奶牛乳腺炎奶样... 【目的】研究奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌HPI携带情况及其与O血清型的关系,并对部分菌株的相关基因序列进行分析。【方法】从中国北京、内蒙古、甘肃、四川、重庆、云南、贵州等7个省市部分地区1 260份临床型和隐性奶牛乳腺炎奶样中分离得到190株大肠杆菌,对分离菌株进行耶尔森菌强毒力岛核心区irp2基因、fyuA基因及HPI毒力岛在大肠杆菌染色体中插入位置的鉴定,分析HPI毒力岛的携带情况及其与分离菌株O血清型之间的关系。【结果】190株大肠杆菌分离株中,irp2基因阳性率为26.31%(50/190),fyuA基因阳性率为18.94%(36/190)。50株HPI+分离株中检出asn_tRNA_intB基因32株,阳性率为64%(32/50)。本试验克隆的irp2基因(273 bp)、fyuA基因(1 071 bp)、asn_tRNA_intB基因(1 512 bp)均与已发表序列高度同源,同源性分别在97.1%、98.2%、97.2%以上,且其HPI毒力岛大多位于大肠杆菌染色体的asn_tRNA位点上。【结论】耶尔森菌HPI在奶牛乳腺炎源大肠杆菌中广泛流行分布,但也存在差异,而不同血清型菌株携带HPI的倾向性可能只与特定的血清型有一定的关系。 展开更多
关键词 奶牛乳腺炎 大肠杆菌 hpi毒力岛 O血清型
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吉林省部分地区犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定与强毒力岛(HPI)相关序列分析 被引量:7
10
作者 王姣姣 孙武文 +4 位作者 陈龙 康元环 刘少鲲 单晓枫 钱爱东 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第5期58-61,共4页
为了研究吉林省犊牛腹泻病病原,试验采用灭菌棉拭子无菌采集吉林省部分地区奶牛场发生典型腹泻症状的64份犊牛直肠拭子样品进行病原菌的分离、理化、16S r DNA鉴定,O因子血清型鉴定,致病性分析以及强毒力岛(HPI)核心区irp2、fyu A和ybt ... 为了研究吉林省犊牛腹泻病病原,试验采用灭菌棉拭子无菌采集吉林省部分地区奶牛场发生典型腹泻症状的64份犊牛直肠拭子样品进行病原菌的分离、理化、16S r DNA鉴定,O因子血清型鉴定,致病性分析以及强毒力岛(HPI)核心区irp2、fyu A和ybt A基因携带情况检测。结果表明:试验共分离出致病性大肠杆菌39株,irp2基因阳性率85%(33/39),即33株大肠杆菌HPI阳性。HPI阳性分离株中检出fyu A基因10株,阳性率为30%(10/33);ybt A基因6株,阳性率为18%(6/33)。共有15株大肠杆菌分离株对小鼠有较高的致病性。39株菌共覆盖8种血清型,其中O14为优势血清型,占定型菌株的56%。说明HPI在犊牛腹泻大肠杆菌中广泛分布且HPI的携带率与菌株的致病性呈明显的正相关。 展开更多
关键词 犊牛腹泻 大肠杆菌 分离鉴定 强毒力岛(hpi) O血清型
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动物源性大肠杆菌ESBLs类耐药基因与HPI基因的双重PCR检测及相关性分析 被引量:6
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作者 陈伟 张永正 +3 位作者 汪雪雁 薛秀恒 涂健 祁克宗 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期800-805,共6页
为研究大肠杆菌ESBLs类耐药基因和HPI基因在环境中的污染状况及相关性,采用双重PCR对大肠杆菌中HPI基因irp1、irp2、fyuA和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因TEM、SHV进行了检测分析,选择irp2缺失株对两类基因的相关性进行了分析。37... 为研究大肠杆菌ESBLs类耐药基因和HPI基因在环境中的污染状况及相关性,采用双重PCR对大肠杆菌中HPI基因irp1、irp2、fyuA和产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)耐药基因TEM、SHV进行了检测分析,选择irp2缺失株对两类基因的相关性进行了分析。37株大肠杆菌的检测结果显示,TEM、SHV耐药基因的阳性率分别为94.5%、56.8%;irp1+TEM、irp1+SHV、irp2+TEM、irp2+SHV、fyuA+TEM、fyuA+SHV基因的阳性率分别为13.5%、13.5%、21.6%、21.6%、16.2%、16.2%。从大肠杆菌中扩增出118、132、799、414、948bp的特异性目的条带,而从甲型副伤寒沙门氏菌、绿脓假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌中则不能扩增出上述特异性条带。灵敏度试验表明,该反应体系的检测灵敏度为1.5×103 CFU/mL。irp2缺失株试验表明,irp2中仍能检测出TEM、SHV基因。上述结果表明,采用双重PCR能特异地从大肠杆菌中检测出β-内酰胺类耐药基因和HPI基因,且两类基因间无明显相关性。 展开更多
关键词 动物源性大肠杆菌 超广谱Β-内酰胺酶 hpi基因 双重PCR irp2缺失株
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高致病性毒力岛Irp1介导的细菌对Vero细胞黏附作用 被引量:4
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作者 金文杰 郑志明 +2 位作者 吉荣 钱文正 秦爱建 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期1-4,共4页
高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入... 高致病性毒力岛(HPI)已经在多种类型大肠杆菌中被发现。为了解HPI-Irp1在细菌致病中的作用,通过生物软件DNAStar的分析,筛选出HPI中irp1和fyuA基因上10个表位作用优势较强的区域。设计特异性引物10对,进行PCR扩增,将获得的PCR产物,插入原核表达载体pET32a,构建重组质粒;将获得的重组质粒转化进入菌毛阴性宿主菌BL21,获得的重组菌用IPTG诱导表达后与Vero细胞混合进行体外作用。结果表明:带有irp1-1基因片段的重组菌BL21-rpET32a-irp1-1表现出对Vero细胞较强的聚集黏附作用,空载体对照和宿主菌对照均未出现相关现象。因而推测irp1-1基因片段编码的产物在细菌对宿主致病过程中,介导了细菌与宿主细胞的相互作用。 展开更多
关键词 大肠杆菌 高致病性毒力岛(hpi) Irp1 黏附作用
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HPI毒力岛缺失的EAggEC17-2突变菌株的构建及其功能研究
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作者 胡静 俞守义 +1 位作者 阚飙 刘志华 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期691-696,共6页
目的构建HPI毒力岛缺失的EAggEC172突变株,初步研究EAggEC菌株携带的耶尔森菌HPI毒力岛合成铁载体Ybt的功能。方法以EAggEC172为出发菌株,irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有氯霉... 目的构建HPI毒力岛缺失的EAggEC172突变株,初步研究EAggEC菌株携带的耶尔森菌HPI毒力岛合成铁载体Ybt的功能。方法以EAggEC172为出发菌株,irp8基因部分序列作为同源重组的一侧序列,irp5基因序列作为同源重组的另一侧序列,中间插入有氯霉素(Cm)抗性基因(cat基因)标记。通过接合转移和同源重组,构建了缺失约24kb的HPI毒力岛功能核心区区域EAggEC172的全岛缺失株EA85。应用流式细胞技术(FACS)检测指示菌株WACSirp1::KN(pCJG3.3N)荧光强度的变化情况,对EA85缺失株和出发菌株进行了合成Ybt的功能比较研究。结果成功构建了EAggEC172HPI全岛缺失株EA85。EAggEC172菌株具有表达Ybt的功能,而缺失株EA85丧失了合成Ybt的能力。结论EAggEC172HPI毒力岛的缺失,使Ybt的合成彻底阻断。EAggEC172具有的合成Ybt的功能是由其染色体携带的HPI毒力岛所决定的。 展开更多
关键词 EAggEC hpi毒力岛 耶尔森杆菌素 缺失 耶尔森菌hpi毒力岛 突变菌株 功能研究 基因序列 同源重组 流式细胞技术
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撒坝猪源大肠杆菌高致病性毒力岛诱导病理损伤的超微结构特征 被引量:1
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作者 单春兰 张博 +8 位作者 赵维薇 王浩 杨伟 邓静 赵汝 高利波 肖鹏 吕龙宝 高洪 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第9期3491-3499,共9页
为探究撒坝猪源大肠杆菌(E.coli)高致病性毒力岛(HPI)诱导小鼠病理损伤的超微结构特征,本研究将实验室保存的E.coli HPI阳性株(HPI^(+))和E.coli HPI基因缺失株(ΔHPI)进行复苏和培养,分别用E.coli HPI^(+)、E.coli^(Δ)HPI菌株以腹腔... 为探究撒坝猪源大肠杆菌(E.coli)高致病性毒力岛(HPI)诱导小鼠病理损伤的超微结构特征,本研究将实验室保存的E.coli HPI阳性株(HPI^(+))和E.coli HPI基因缺失株(ΔHPI)进行复苏和培养,分别用E.coli HPI^(+)、E.coli^(Δ)HPI菌株以腹腔接种的方式感染昆明小鼠,检测菌株的半数致死量(50%lethal dose,LD50),通过HE染色和透射电镜观察并分析菌株对小鼠病理损伤的超微结构特征,利用免疫组织化学标记白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)阳性细胞在被感染小鼠肝脏和肾脏组织中的分布,以反映E.coli HPI+及E.coliΔHPI菌株所引起炎症水平的差异。结果显示,E.coli HPI^(+)和E.coli^(Δ)HPI菌株的半数致死量分别为1×10^(7.39)和1×10^(8.62)CFU/mL;HE染色显示,E.coli感染小鼠后,可见肝脏细胞肿胀、变性,肝窦淤血,肾脏间质淤血,肾小管上皮细胞变性脱落等病理变化;超微结构变化显示,肝脏细胞的完整形态消失,胞核呈不规则形态,线粒体畸形,粗面内质网上核糖体脱落,滑面内质网增生;多数肾小管上皮细胞出现胞核固缩,部分细胞核核仁边移、体积增大,足突融合,系膜细胞间隙变宽。此外,E.coli HPI^(+)感染组小鼠于肝脏、肾脏的水肿现象较E.coli^(Δ)HPI菌株感染的小鼠更为明显。免疫组化结果显示,大肠杆菌感染小鼠后,IL-1β蛋白主要表达于肝细胞、中央静脉周围、肾间质细胞和肾小管上皮细胞,且E.coli HPI^(+)感染组的IL-1β表达量高于E.coli^(Δ)HPI感染组。综上所述,撒坝猪源E.coli HPI能够调控E.coli对小鼠的致病性,HPI的调控作用可使E.coli对小鼠肝脏、肾脏造成的病变及超微结构变化更明显,并且能够增加小鼠的炎症反应。 展开更多
关键词 大肠杆菌 高致病性毒力岛(hpi) 致病性 白细胞介素-1β(IL-1β)
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Detection of High Pathogenicity Island(HPI) in Pathogenic Escherichia coli of Mink by PCR
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作者 Xiao Lirong Li Qiaoling +3 位作者 Gao Guisheng Jia Qinghui Zhang Zhaoxing Shi Qiumei 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2018年第3期189-190,212,共3页
[Objective] The paper was to analyze the carrying status of high pathogenicity island (HPI) in pathogenic Escherichia coli of mink. [Method] Eight strains of E. coli were isolated from dead mink, and conducted patho... [Objective] The paper was to analyze the carrying status of high pathogenicity island (HPI) in pathogenic Escherichia coli of mink. [Method] Eight strains of E. coli were isolated from dead mink, and conducted pathogenicity test of artificial infection. The carrying status of HPI (irp2, fyuA) was detected by PCR. [Result] Eight strains of E. coli were pathogenic E. coli, and the carrying rate of HPI (irp2, fyuA) was 100%, positively correlated with the pathogenicity. [Conclusion] The results lay a foundation for further exploring the pathogenic mechanism of E. coli.. 展开更多
关键词 MINK Pathogenic E. coli High pathogenicity island hpi PCR
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银川地区鸡源致病性大肠杆菌耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析 被引量:1
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作者 刘文淼 曾瑾 +1 位作者 王东 邓光存 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第10期93-95,共3页
为了研究耶尔森菌强毒力岛(HPI)在银川地区鸡源致病性大肠杆菌中的分布情况,试验根据HPI相关基因irp2和fyuA的参考序列设计引物,采用双重PCR方法对分离的20株鸡源致病性大肠杆菌进行这两种基因的扩增和检测,以及基因克隆和核苷酸序列分... 为了研究耶尔森菌强毒力岛(HPI)在银川地区鸡源致病性大肠杆菌中的分布情况,试验根据HPI相关基因irp2和fyuA的参考序列设计引物,采用双重PCR方法对分离的20株鸡源致病性大肠杆菌进行这两种基因的扩增和检测,以及基因克隆和核苷酸序列分析。结果表明:irp2和fyuA基因在鸡源致病性大肠杆菌分离株中的阳性率均为40%(8/20);这两种毒力岛相关基因的核苷酸序列与GenBank中报道的基因核苷酸同源性高达98%以上。说明irp2和fyuA基因具有较高的保守性。 展开更多
关键词 鸡源致病性大肠杆菌 耶尔森菌毒力岛(hpi) irp2基因 fyuA基因
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