基于纳米金组合电极的HIV p24微流控安培免疫传感芯片研究 被引量：2

1

作者 陈亚东 李榕生 +2 位作者 干宁 杨欣 李天华 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期165-170,共6页

研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压... 研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压驱动和流动条件下,一次性加入p24样品和纳米金胶标记的p24二级抗体(Rp24Ⅱ-Au,金胶直径为50～100nm)溶液,利用不同物质因受电场影响而在微管道中的迁移速率不同,使得p24抗原和Rp24Ⅱ-Au依次到达GNEE电极,与其表面的Rp24I生成三明治型免疫复合物(Rp24I/p24/Rp24Ⅱ-Au)。接着以方波溶出伏安法(SWSV)将复合物上的金胶粒子溶出,由于溶出电流大小与被测定p24呈正比关系,从而获得p24的测定校正曲线。在pH6.2的磷酸缓冲液(PBS)中p24检测时间小于2min,线性范围为1～500ng/L(R2=0.9975),检测限为0.25ng/L。该芯片集成了加样、分离和检测系统,简化了分析步骤,缩短了检测时间,灵敏度达1μA.ng-1.mL,明显高于传统酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对艾滋病的早期诊断和大范围筛查具有应用价值。 展开更多

关键词 纳米金组合电极 方波溶出伏安法 微流控 hiv-p24 安培免疫传感芯片

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巯基丁二胺铜单层修饰金电极上HIV-p24抗原的电化学免疫检测 被引量：1

2

作者 干宁 李天华 +2 位作者 陈妮 葛从辛 徐伟民 《理化检验（化学分册）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期253-255,259,共4页

制备了用巯基丁二胺铜(CuL)修饰的金电极并用作HIV-p24抗原蛋白(简称p24)免疫检测的化学传感器。CuL通过单层自组装固定在金电极表面,其覆盖率为1.02×10-11mol.cm-2,在含有1.0 mmol.L-1过氧化氢并在pH 6.2的磷酸盐缓冲溶液中,制备... 制备了用巯基丁二胺铜(CuL)修饰的金电极并用作HIV-p24抗原蛋白(简称p24)免疫检测的化学传感器。CuL通过单层自组装固定在金电极表面,其覆盖率为1.02×10-11mol.cm-2,在含有1.0 mmol.L-1过氧化氢并在pH 6.2的磷酸盐缓冲溶液中,制备的校正曲线的线性范围为0.5-150μg.L-1p24对相应的伏安响应,方法的检出限为0.2μg.L-1。在10μg.L-1p24浓度水平作精密度试验,得RSD值为3.5%,于试样中分别加入5,15,20及30μg.L-1p24进行回收率试验,所得结果在98%-102%之间。此方法毋需另加电子传递媒介体。应用此方法于临床血清分析,所得结果与放射性免疫法的结果一致,且所得RSD值均小于0.3%。 展开更多

关键词 伏安分析法 金电极 巯基丁二胺铜 hiv-p24抗原蛋白 免疫传感器

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石墨烯增敏的SPR技术应用于HIV1 p24抗原的检测 被引量：1

3

作者 彭芳 张良 何建安 《生物化工》 2021年第3期4-8,共5页

目的:建立石墨烯增敏的表面等离子体共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)用于检测HIV1 p24,为HIV感染者的早期快速筛查提供一种检测方法。方法:石墨烯通过静电连接在采用聚乙二醇高分子处理的SPR芯片表面,HIV1 p24特异性抗体通过... 目的:建立石墨烯增敏的表面等离子体共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)用于检测HIV1 p24,为HIV感染者的早期快速筛查提供一种检测方法。方法:石墨烯通过静电连接在采用聚乙二醇高分子处理的SPR芯片表面,HIV1 p24特异性抗体通过石墨烯表面的羧基官能团和HIV1 p24抗体表面的氨基官能团共价结合作用固定在芯片的表面,建立一种石墨烯增敏的无标记、快速的表面等离子共振技术用于检测HIV1 p24抗原,通过优化芯片分析条件,检测HIV1 p24抗原,分析石墨烯增敏的SPR芯片技术的检测性能。结果:石墨烯增敏的SPR芯片技术检测HIV1 p24抗原的重复性、敏感性与特异性均较好;检测灵敏度为10 ng/mL,相较于相同条件传统Au-SPR生物传感器检测得到的最低检测限(63 ng/mL),降低了至少6倍。结论:初步构建的石墨烯增敏的SPR芯片技术,有望为HIV感染者的早期筛查提供一个有力的技术平台。 展开更多

关键词 石墨烯 SpR技术 hiv1 p24抗原 早期筛查

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免疫PCR检测HIV-p24抗原的实验研究 被引量：1

4

作者 郑姬 府伟灵 +1 位作者 蒋天伦 杨雅康 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-22,共4页

目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过... 目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;用方阵滴定法确定最适链亲和素和标记DNA浓度,用Quantity One凝胶定量软件分析电泳图像。结果链亲和素浓度和用于标记的DNA的浓度分别控制在0.1mg/L和10ng/L;免疫PCR检测的灵敏度为0.1ng/L,比传统ELISA法检测的灵敏度高。结论高灵敏度的免疫PCR适用于早期筛检HIV-p24抗原。 展开更多

关键词 免疫pCR 灵敏度 hiv—p24抗原 艾滋病 献血者 早期筛检

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第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性原因分析 被引量：19

5

作者 顾春瑜 刘英丽 +2 位作者 王海滨 孙婷婷 何丽婧 《武警医学》 CAS 2013年第9期758-760,共3页

目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送... 目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送至确认实验室回报结果 40例HIV抗体阳性,28例HIV抗体不确定,51例HIV抗体阴性。随着S/CO值的增高,初筛结果与确证结果阳性符合率也随之升高。结论 HIV四代检测试剂假阳性率较高,这与试剂同时检测HIV抗体和P24抗原有关。当1<S/CO≤10时,实验室检测人员应依据实验检测结果,结合受检者相应病史和个体状况进行综合分析。 展开更多

关键词 hiv抗体 hiv-1p24抗原 hiv四代试剂 假阳性反应

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电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的评价 被引量：4

6

作者 周琰 宋斌斌 +2 位作者 郑晓虹 郭玮 潘柏申 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第12期845-849,共5页

目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清... 目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清样本。采用Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数进行测定。以Roche Elecsys HIV Combi试剂盒为评估试剂,以生物梅里埃Vironostika Uni-FormⅡplus O HIV抗体试剂盒为参比试剂。定性检测血清HIV p24抗原和HIV1/2抗体并评价检测方法分析性能、结果一致性和血清转化灵敏度。结果 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒批内和天间不精密度良好,符合临床使用要求。血清样本检测结果和参比试剂检测结果一致性完全符合。评估试剂的血清转化灵敏度比参比试剂平均提前了5.1 d。结论 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒具有良好的精密度和血清转换灵敏度,有利于筛查HIV早期感染,能为临床HIV早期诊断、随访监测提供有效的实验室诊断依据。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 hiv p24抗原 hiv1/2抗体 ROCHE Elecsys hiv Combi试剂盒 一致性 血清转换灵敏度

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琼脂磁珠消减SELEX技术筛选HIV P24抗原适配体 被引量：5

7

作者 葸玉琴 赵运旺 +2 位作者 马梅兰 曾家豫 廖世奇 《西北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第5期79-84,94,共7页

建立以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,快速筛选高特异性、高亲和力的HIV P24抗原适配体的方法.利用消减SELEX技术及靶标替换的方法,以HIV P24抗原作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,进行6轮筛选,筛选到3条特异性核酸适配体.特异性检测表明,... 建立以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,快速筛选高特异性、高亲和力的HIV P24抗原适配体的方法.利用消减SELEX技术及靶标替换的方法,以HIV P24抗原作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,进行6轮筛选,筛选到3条特异性核酸适配体.特异性检测表明,筛选得到的HIV P24抗原适配体与HIV P24抗原的结合解离常数均在纳摩尔级水平.该方法为HIV早期检测提供了新的检测技术,对适配体与靶分子相互作用机理的研究具有重要价值. 展开更多

关键词 hiv p24抗原 消减SELEX技术 DNA适配体 靶标替换

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区分HIV-1p24抗原和HIV抗体检测方法的临床应用 被引量：4

8

作者 宋淑静 马小亮 +2 位作者 刘亚楠 杨晓玲 李娟 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1089-1091,共3页

目的了解艾滋病病毒(HIV)-1p24抗原和抗体联合检测在临床应用的价值。方法总结从2012-2016年HIV-1p24抗原和抗体联合检测并且能区分是抗原还是抗体阳性的临床结果,并和不能区分抗原抗体的四代酶联试剂结果比较,对其中HIV-1p24抗原阳性... 目的了解艾滋病病毒(HIV)-1p24抗原和抗体联合检测在临床应用的价值。方法总结从2012-2016年HIV-1p24抗原和抗体联合检测并且能区分是抗原还是抗体阳性的临床结果,并和不能区分抗原抗体的四代酶联试剂结果比较,对其中HIV-1p24抗原阳性的样本进行CD4+T淋巴细胞及HIV核糖核酸(RNA)的检测。结果 2012-2016年共检测HIV-1p24抗原和抗体联合检测样本10 476例,其中HIV抗体阳性777例,HIV-1p24抗原阳性36例,其中抗原抗体同时阳性8例,单独HIV-1p24抗原阳性28例。结论 HIV-1p24抗原和抗体联合检测敏感性高、特异性强,尤其是能将抗原和抗体阳性区分开来,大大缩短了窗口期,提高了HIV急性期感染的检出率。 展开更多

关键词 艾滋病病毒 p24抗原 抗体检测

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3种HIV ELISA检测试剂灵敏度分析 被引量：1

9

作者 李艳 潘彤 +3 位作者 孔伟伟 许闫 韩红梅 袁玉华 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第1期53-56,共4页

目的通过检测人类免疫缺陷病毒(HIV)窗口期标本,比较目前中国使用的几种HIV酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂的灵敏度。方法 1例HIV核酸检测阳性、酶联免疫阴性首次献血者标本,于第1、2、3周各抽取血3份。用检测方法A(中国产第4代HIV EL... 目的通过检测人类免疫缺陷病毒(HIV)窗口期标本,比较目前中国使用的几种HIV酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂的灵敏度。方法 1例HIV核酸检测阳性、酶联免疫阴性首次献血者标本,于第1、2、3周各抽取血3份。用检测方法A(中国产第4代HIV ELISA检测试剂A)、检测方法 B(中国产第3代HIV ELISA检测试剂B)、检测方法 C(进口第4代HIV ELISA检测试剂C)分别进行常规抗体检测,并用生物素-亲和素ELISA对该血样本的HIV-1 P24抗原进行了单独检测。结果用检测方法 B检测时,第1、2、3周标本均显示为阴性;用检测方法 A检测时,第1、2周标本均显示为阴性,第3周标本显示为阳性;用检测方法 C检测时,第1周标本显示为阴性,第2、3周标本均显示为阳性。用生物素-亲和素ELISA检测HIV-1 P24抗原,结果显示第1、2周标本HIV-1 P24抗原均显示为阴性,第3周标本HIV-1 P24抗原显示为阳性。结论实验所用检测方法 A的中国产第4代HIV检测试剂A的灵敏度比检测方法 B的中国产第3代HIV检测试剂B灵敏度高,但比实验所用检测方法 C的进口第4代HIV检测试剂C灵敏度低。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒(hiv) hiv-1 p24抗原 窗口期 灵敏度

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铁蛋白笼形纳米颗粒应用于HIV-1 P24抗原高灵敏检测的研究 被引量：1

10

作者 张利沙 曾德军 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第21期2572-2575,共4页

目的构建以铁蛋白笼形纳米颗粒为基础的分子展示平台,并应用于HIV-1 P24抗原检测,实现低丰度、高灵敏检测。方法采用分子生物学手段,构建生物素耦联的铁蛋白笼形纳米颗粒,基于链霉亲和素与生物素特异性结合,将其应用于HIV-1 P24抗原的... 目的构建以铁蛋白笼形纳米颗粒为基础的分子展示平台,并应用于HIV-1 P24抗原检测,实现低丰度、高灵敏检测。方法采用分子生物学手段,构建生物素耦联的铁蛋白笼形纳米颗粒,基于链霉亲和素与生物素特异性结合,将其应用于HIV-1 P24抗原的酶联免疫吸附测定(ELISA)检测中,并测试其检测灵敏度。结果构建出具有链霉亲和素特异性结合能力的生物素化铁蛋白笼形纳米颗粒,应用到HIV-1的P24抗原ELISA检测中,实现0.1 ng/mL的检测下限,显著提高检测灵敏度。结论成功建立基于铁蛋白笼形纳米结构的分子展示平台,以HIV-1 P24抗原ELISA检测为例,该平台能够应用于低丰度、高灵敏检测。 展开更多

关键词 铁蛋白 纳米颗粒 hiv-1 p24抗原 高灵敏检测

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HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价 被引量：5

11

作者 宋淑静 马小亮 +4 位作者 杨晓玲 刘亚楠 陈丽娟 李娟 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第10期1758-1761,共4页

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿... 目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒抗原抗体(hiv Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法) hiv p24抗原和hiv1/2抗体 结果一致性 血清转换灵敏度

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3种进口第四代人类免疫缺陷病毒检测试剂检测性能评价 被引量：5

12

作者 吴忠华 吕沁风 +2 位作者 郑伟 罗鹏 李禾 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第17期4412-4414,共3页

目的通过对比分析3种进口第四代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体诊断试剂检测HIV抗体和P24抗原的特异性及敏感性,评价这3种HIV检测试剂在临床实际应用中的意义。方法用HIV抗体阴性样品1 075份、HIV抗体阳性样品164份、BBI阳转血清盘(PRB9... 目的通过对比分析3种进口第四代人类免疫缺陷病毒(HIV)抗原抗体诊断试剂检测HIV抗体和P24抗原的特异性及敏感性,评价这3种HIV检测试剂在临床实际应用中的意义。方法用HIV抗体阴性样品1 075份、HIV抗体阳性样品164份、BBI阳转血清盘(PRB92901-07)和7种不同稀释度的P24抗原阳性对照血清等,对3种进口第四代HIV检测试剂的敏感性和特异性进行分析。结果方法1、2、3检测HIV抗体特异性分别为92.9%、99.4%和99.3%,经统计处理,方法2特异性高于方法1,差异有统计学意义(χ2=59.7,P<0.01),方法3特异性高于方法1,差异有统计学意义(χ2=57.3,P<0.01),方法2和方法3特异性差异无统计学意义;3种试剂检测HIV抗体的敏感性一致,皆为100.0%;但其检测P24抗原的敏感性不同,方法3检测P24抗原的敏感性最高,可检出最高稀释度为1∶32的P24抗原阳性对照血清;而方法1和方法2检测P24抗原敏感性较低,只能检出最高稀释度为1∶16的P24抗原阳性对照血清;3种试剂检测BBI阳转血清盘AD第18天的HIV抗体检测结果为阳性,而第三代HIV抗体检测试剂检测血清盘第21天的HIV抗体检测结果为阳性。结论 3种进口第四代抗原抗体检测试剂敏感性均高于第三代检测试剂,能检出HIV感染窗口期的样品;3种试剂检测HIV抗体的敏感性一致,但检测P24抗原的敏感性和HIV抗体的特异性不一致,方法1检测HIV抗体的特异性较低,而方法3检测P24抗原的敏感性最高。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒抗体 p^24抗原 ELISA BBI阳转血清盘 性能评价

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