金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24 被引量：4

1

作者 郑姬 蒋天伦 府伟灵 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期301-304,355,共5页

目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测... 目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体;报告DNA用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,并通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;并对检测的灵敏度和线性检测范围进行分析。结果金磁微粒上偶联抗体的效率可〉95%,偶联抗体的一致性较好,几乎不产生非特异性吸附,分离与洗涤步骤更简便更彻底;免疫PCR检测p24的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×10^4倍,线性检测范围为p24浓度在0.1～100ng/L。结论金磁微粒是较理想的免疫PCR反应载体,金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24是一种可兹应用的高灵敏度的检测方法。 展开更多

关键词 免疫pCR 金磁微粒 hiv-1 p24

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HIV/AIDS患者肝组织HIV-1 p24抗原的免疫组化检测 被引量：3

2

作者 姜天俊 赵敏 +5 位作者 赵景民 周光德 潘登 王健 张云辉 周志平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期152-154,共3页

目的　检测HIV抗原标志物在肝组织的表达情况,探讨HIV AIDS患者肝损伤发生的可能机制。方法　采用免疫组织化学方法对14例HIV AIDS患者的肝活检组织切片进行HIV 1p2 4抗原检测,比较不同病变肝组织中HIV 1p2 4抗原的表达数量。结果　在1... 目的　检测HIV抗原标志物在肝组织的表达情况,探讨HIV AIDS患者肝损伤发生的可能机制。方法　采用免疫组织化学方法对14例HIV AIDS患者的肝活检组织切片进行HIV 1p2 4抗原检测,比较不同病变肝组织中HIV 1p2 4抗原的表达数量。结果　在14例肝组织切片的Kupffer细胞、内皮细胞、肝细胞均发现HIV 1p2 4抗原表达;阳性肝细胞计数分析显示,表达数量随病变严重程度而增加(P <0 0 5 )。结论　HIV能够在HIV AIDS患者的肝脏内表达,并且可能参与肝细胞的凋亡。 展开更多

关键词 hiv/AIDS患者 p24抗原 免疫组化检测 KUpFFER细胞 hiv-1p24 免疫组织化学方法 活检组织切片 病变严重程度 抗原标志物 肝组织切片 表达情况 可能机制 抗原检测 内皮细胞 抗原表达 细胞计数 肝细胞 肝损伤 肝脏内

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HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的比较 被引量：3

3

作者 金光 王卫 +3 位作者 丛喆 蒋虹 陈霆 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期26-30,共5页

目的由于检测SIV p27抗原试剂盒来源困难,有时不稳定,鉴于HIV-1 p24与SIVp27有较强的交叉抗原,本研究比较HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原得出的结果是否存在一定的相关性。方法 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒... 目的由于检测SIV p27抗原试剂盒来源困难,有时不稳定,鉴于HIV-1 p24与SIVp27有较强的交叉抗原,本研究比较HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原得出的结果是否存在一定的相关性。方法 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒定性和定量检测样品中SIV p27抗原,并对检测结果进行回归和相关分析。结果 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的灵敏度分别是150 pg/mL和62.5 pg/mL。两种试剂盒检测病毒液和血浆中SIV p27抗原的定性结果一致。定量结果的统计分析得出病毒液的直线回归决定系数R2=0.857,直线相关系数r=0.926,P<0.01,直线正相关程度较高;血浆的直线回归决定系数R2=0.512,直线相关系数r=0.716,P<0.05,直线正相关程度较低。结论 HIV-1 p24 ELISA试剂盒能够替代SIVp27 ELISA试剂盒定性检测病毒液和血浆中SIV p27抗原,但只能定量检测病毒液中SIV p27抗原。 展开更多

关键词 hiv-1p24 SIVp27

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双抗体夹心ELISA法检测HIV-1 p24抗原的初步建立

4

作者 侯俊 胡燕 +4 位作者 沈宏辉 朱雷 王志杰 雷厉 貌盼勇 《中国艾滋病性病》 CAS 2008年第3期226-228,共3页

目的建立敏感、特异的艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)p24抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为试剂盒的研制奠定基础。方法用纯化的基因工程p24表达抗原免疫小鼠及兔子,获得单克隆抗体(单抗)及多克隆抗体(多抗),用单抗包被酶标板,辣根过氧... 目的建立敏感、特异的艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)p24抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,为试剂盒的研制奠定基础。方法用纯化的基因工程p24表达抗原免疫小鼠及兔子,获得单克隆抗体(单抗)及多克隆抗体(多抗),用单抗包被酶标板,辣根过氧化物酶标记多抗,初步建立HIV-1 p24抗原的ELISA检测方法。进一步与美国杜邦公司的HIV-1 p24抗原检测试剂同时检测88份HIV感染者血清和50份健康献血员血清中的p24抗原,确定其特异性;采用倍比稀释法的p24抗原标准品,测定试剂的灵敏度。结果两种方法检测88份HIV感染者血清和50份献血员血清中的p24抗原结果均为阴性(符合率为100%);自建ELISA法检测HIV-1 p24抗原的灵敏度为100pg/ml。结论初步建立了检测HIV-1 p24抗原的ELISA法,与国外同类试剂比较,本法的特异性和灵敏度均接近国外同类试剂,有较好的特异性和灵敏度,为进一步研制HIV-1 p24抗原ELISA检测试剂盒打下了基础。 展开更多

关键词 艾滋病病毒Ⅰ型 p24抗原 酶联免疫吸附试验

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第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性原因分析 被引量：19

5

作者 顾春瑜 刘英丽 +2 位作者 王海滨 孙婷婷 何丽婧 《武警医学》 CAS 2013年第9期758-760,共3页

目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送... 目的分析第四代HIV诊断试剂检测HIV抗体假阳性的原因,减少假阳性检出率。方法选取119例HIV四代试剂检测初筛阳性的标本,送HIV确认实验室确认HIV抗体结果,分析比对两者的结果,探讨出现假阳性的原因。结果119例HIV抗体初筛阳性的标本,送至确认实验室回报结果 40例HIV抗体阳性,28例HIV抗体不确定,51例HIV抗体阴性。随着S/CO值的增高,初筛结果与确证结果阳性符合率也随之升高。结论 HIV四代检测试剂假阳性率较高,这与试剂同时检测HIV抗体和P24抗原有关。当1<S/CO≤10时,实验室检测人员应依据实验检测结果,结合受检者相应病史和个体状况进行综合分析。 展开更多

关键词 hiv抗体 hiv-1p24抗原 hiv四代试剂 假阳性反应

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区分HIV-1p24抗原和HIV抗体检测方法的临床应用 被引量：4

6

作者 宋淑静 马小亮 +2 位作者 刘亚楠 杨晓玲 李娟 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期1089-1091,共3页

目的了解艾滋病病毒(HIV)-1p24抗原和抗体联合检测在临床应用的价值。方法总结从2012-2016年HIV-1p24抗原和抗体联合检测并且能区分是抗原还是抗体阳性的临床结果,并和不能区分抗原抗体的四代酶联试剂结果比较,对其中HIV-1p24抗原阳性... 目的了解艾滋病病毒(HIV)-1p24抗原和抗体联合检测在临床应用的价值。方法总结从2012-2016年HIV-1p24抗原和抗体联合检测并且能区分是抗原还是抗体阳性的临床结果,并和不能区分抗原抗体的四代酶联试剂结果比较,对其中HIV-1p24抗原阳性的样本进行CD4+T淋巴细胞及HIV核糖核酸(RNA)的检测。结果 2012-2016年共检测HIV-1p24抗原和抗体联合检测样本10 476例,其中HIV抗体阳性777例,HIV-1p24抗原阳性36例,其中抗原抗体同时阳性8例,单独HIV-1p24抗原阳性28例。结论 HIV-1p24抗原和抗体联合检测敏感性高、特异性强,尤其是能将抗原和抗体阳性区分开来,大大缩短了窗口期,提高了HIV急性期感染的检出率。 展开更多

关键词 艾滋病病毒 p24抗原 抗体检测

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3种HIV ELISA检测试剂灵敏度分析 被引量：1

7

作者 李艳 潘彤 +3 位作者 孔伟伟 许闫 韩红梅 袁玉华 《生物医学工程与临床》 CAS 2015年第1期53-56,共4页

目的通过检测人类免疫缺陷病毒(HIV)窗口期标本,比较目前中国使用的几种HIV酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂的灵敏度。方法 1例HIV核酸检测阳性、酶联免疫阴性首次献血者标本,于第1、2、3周各抽取血3份。用检测方法A(中国产第4代HIV EL... 目的通过检测人类免疫缺陷病毒(HIV)窗口期标本,比较目前中国使用的几种HIV酶联免疫吸附分析(ELISA)检测试剂的灵敏度。方法 1例HIV核酸检测阳性、酶联免疫阴性首次献血者标本,于第1、2、3周各抽取血3份。用检测方法A(中国产第4代HIV ELISA检测试剂A)、检测方法 B(中国产第3代HIV ELISA检测试剂B)、检测方法 C(进口第4代HIV ELISA检测试剂C)分别进行常规抗体检测,并用生物素-亲和素ELISA对该血样本的HIV-1 P24抗原进行了单独检测。结果用检测方法 B检测时,第1、2、3周标本均显示为阴性;用检测方法 A检测时,第1、2周标本均显示为阴性,第3周标本显示为阳性;用检测方法 C检测时,第1周标本显示为阴性,第2、3周标本均显示为阳性。用生物素-亲和素ELISA检测HIV-1 P24抗原,结果显示第1、2周标本HIV-1 P24抗原均显示为阴性,第3周标本HIV-1 P24抗原显示为阳性。结论实验所用检测方法 A的中国产第4代HIV检测试剂A的灵敏度比检测方法 B的中国产第3代HIV检测试剂B灵敏度高,但比实验所用检测方法 C的进口第4代HIV检测试剂C灵敏度低。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒(hiv) hiv-1 p24抗原 窗口期 灵敏度

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铁蛋白笼形纳米颗粒应用于HIV-1 P24抗原高灵敏检测的研究 被引量：1

8

作者 张利沙 曾德军 《国际检验医学杂志》 CAS 2019年第21期2572-2575,共4页

目的构建以铁蛋白笼形纳米颗粒为基础的分子展示平台,并应用于HIV-1 P24抗原检测,实现低丰度、高灵敏检测。方法采用分子生物学手段,构建生物素耦联的铁蛋白笼形纳米颗粒,基于链霉亲和素与生物素特异性结合,将其应用于HIV-1 P24抗原的... 目的构建以铁蛋白笼形纳米颗粒为基础的分子展示平台,并应用于HIV-1 P24抗原检测,实现低丰度、高灵敏检测。方法采用分子生物学手段,构建生物素耦联的铁蛋白笼形纳米颗粒,基于链霉亲和素与生物素特异性结合,将其应用于HIV-1 P24抗原的酶联免疫吸附测定(ELISA)检测中,并测试其检测灵敏度。结果构建出具有链霉亲和素特异性结合能力的生物素化铁蛋白笼形纳米颗粒,应用到HIV-1的P24抗原ELISA检测中,实现0.1 ng/mL的检测下限,显著提高检测灵敏度。结论成功建立基于铁蛋白笼形纳米结构的分子展示平台,以HIV-1 P24抗原ELISA检测为例,该平台能够应用于低丰度、高灵敏检测。 展开更多

关键词 铁蛋白 纳米颗粒 hiv-1 p24抗原 高灵敏检测

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在重组痘苗病毒中共表达HIV-1p24gag与hIL-6基因 被引量：1

9

作者 王玉红 金宁一 +6 位作者 房金波 李体远 王洪军 刘素寰 王弘郡 安汝国 殷震 《分子科学学报》 CAS CSCD 1999年第4期201-204,共4页

以ＨＩＶ－１ ｐ２４ｇａｇ 与ｈＩＬ－６ 基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的，将痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ） 基因作为侧翼，把编码人白细胞介素６（ｈＩＬ－６）的基因片段克隆到真核表达质粒ｐ１６ＱＦ１ －２４ 的下... 以ＨＩＶ－１ ｐ２４ｇａｇ 与ｈＩＬ－６ 基因在重组痘苗病毒中的共表达研究为目的，将痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ） 基因作为侧翼，把编码人白细胞介素６（ｈＩＬ－６）的基因片段克隆到真核表达质粒ｐ１６ＱＦ１ －２４ 的下游，构建成含有ＨＩＶ－ １ｐ２４ｇａｇ 和ｈＩＬ－６ 两种外源基因的重组表达质粒ｐ１６ＱＦ２４ －ＩＬ６ ，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选，获得了重组痘苗病毒ｖ１６ＱＦ２４ －ＩＬ６．经间接免疫荧光试验、Ｄｏｔ－ ＥＬＩＳＡ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｏｌｔ 等检测证明，重组病毒能同时表达ｐ２４ｇａｇ 蛋白和ＩＬ－６ 蛋白，表达产物的相对分子质量分别为２－４×１０４ ，２－６×１０４ ．此种方式表达的外源蛋白持续释放，可产生更强的免疫效果，可望用于ＨＩＶ疫苗的研究． 展开更多

关键词 hiv-1p24gag hIL-6 痘苗病毒

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HIV假病毒用于p24抗原检测试剂研制的研究 被引量：1

10

作者 赵赫龙 赵鹏翔 +3 位作者 李政 马雪梅 钟儒刚 曾毅 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期13-16,共4页

为了解决在研制新型HIV检测试剂盒时遇到的p24蛋白阳性对照物保存不便、阳性对照物稳定性不高以及蛋白结构和聚集形式与天然HIV病毒的p24存在差异等问题,通过将改造的HIV-1骨架质粒pNL43 EGFP R-E-和包膜蛋白质粒pGX-C共转染293T细胞后... 为了解决在研制新型HIV检测试剂盒时遇到的p24蛋白阳性对照物保存不便、阳性对照物稳定性不高以及蛋白结构和聚集形式与天然HIV病毒的p24存在差异等问题,通过将改造的HIV-1骨架质粒pNL43 EGFP R-E-和包膜蛋白质粒pGX-C共转染293T细胞后分离细胞培养液,获得具有单轮感染活性的HIV-1假病毒。通过对此假病毒颗粒的天然衣壳蛋白p24和市售HIV检测试剂盒中的p24蛋白阳性对照物的阳性反应有效性和保存稳定性的检测,证明了HIV-1假病毒p24蛋白具有更易保存、更稳定、更接近天然病毒p24蛋白的优点,适宜作为HIV检测试剂盒阳性对照物。 展开更多

关键词 假病毒 hiv-1 p24 ELISA

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利用噬菌体肽库筛选与HIV-1p24抗原结合的多肽 被引量：1

11

作者 王子晔 冯娟 +2 位作者 马雪梅 王明连 钟儒刚 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期104-107,共4页

通过噬菌体展示技术筛选出与HIV-1p24抗原结合的多肽,为用多肽辅助p24抗原检测提供实验基础。以重组p24抗原为靶蛋白,对噬菌体随机七肽库进行三轮筛选,用ELISA鉴定第三轮筛选到的噬菌体克隆与p24重组抗原的结合能力,再对噬菌体克隆进行... 通过噬菌体展示技术筛选出与HIV-1p24抗原结合的多肽,为用多肽辅助p24抗原检测提供实验基础。以重组p24抗原为靶蛋白,对噬菌体随机七肽库进行三轮筛选,用ELISA鉴定第三轮筛选到的噬菌体克隆与p24重组抗原的结合能力,再对噬菌体克隆进行测序分析,同时研究了ELISA中噬菌体加入量及多种封闭剂对噬菌体特异性结合能力的影响。在10个ELISA鉴定为阳性的噬菌体克隆中,有9个噬菌体克隆展示同一多肽序列FTTRANA,ELISA鉴定阳性克隆时噬菌体的加入范围为每孔8.13×1011～1.02×1014pfu,BSA作为封闭剂时效果最好。最终得到一种可与p24重组抗原结合的多肽,为多肽用于p24抗原检测打下基础。 展开更多

关键词 噬菌体展示 肽 hiv-1 p24

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艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原和抗体联合检测的临床价值分析 被引量：4

12

作者 李雷 王喆 《皮肤病与性病》 2019年第6期801-802,共2页

目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检... 目的分析联合检测艾滋病病毒(HIV)-1、p24抗原与抗体的临床价值。方法纳入本院2018年1月至2018年12月接收进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测患者1 000例血液样本,分别进行(HIV)-1、p24抗原与抗体检测,针对(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本检测CD4+T淋巴细胞与RNA,对比分析检测结果。结果 1 000份检测样本中,HIV抗体检测阳性80例、(HIV)-1、p24抗原检测阳性11例,(HIV)-1、p24抗原与抗体联合检测阳性6例。11例(HIV)-1、p24抗原检测阳性样本中,四代酶联试剂检测显示9例HIV抗原、抗体检测阳性,2例检测阴性,进行病毒载量检测均≥20 000拷贝/ml,检测CD4细胞显示<500个/μl样本4例。结论临床应用可区分(HIV)-1、p24抗原与抗体的四代试剂进行检测可提高对HIV感染患者的检出率并缩短检测窗口期,在检测过程中结合应用病毒载量与CD4细胞水平计数检测对于促进检验准确性的提高也具有积极意义。 展开更多

关键词 艾滋病病毒 (hiv)-1、p24抗原 hiv抗体 联合检测 临床价值

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HIV-1Gagp24蛋白的纯化及复性 被引量：1

13

作者 李体远 金宁一 +4 位作者 王宏伟 王玉红 王洪军 安汝国 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期519-522,共4页

为制备高纯度p24 抗原,在变性条件下,将大肠杆菌表达的重组p24 蛋白,使用Ni-NTA 亲和层析法进行了纯化。对包涵体中的p24 蛋白进行层析纯化时,回收率略有提高,但蛋白纯度(81% )低于菌体裂解纯化洗脱物(94% )。菌体中及纯化、复性后的目... 为制备高纯度p24 抗原,在变性条件下,将大肠杆菌表达的重组p24 蛋白,使用Ni-NTA 亲和层析法进行了纯化。对包涵体中的p24 蛋白进行层析纯化时,回收率略有提高,但蛋白纯度(81% )低于菌体裂解纯化洗脱物(94% )。菌体中及纯化、复性后的目的蛋白均能与抗HIV-1 p24 单克隆抗体发生特异性反应。用纯化的p24 蛋白免疫小鼠,4 周时小鼠血清抗p24 平均抗体效价达1∶400。试验结果表明,大肠杆菌表达的HIV-1 p24 全菌体裂解物纯化后,可用作HIV-1 检测试剂的原料。 展开更多

关键词 hiv-1 p24 大肠杆菌 纯化 复性

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探讨几种HIV病毒感染者血液标本检测指标的相关性 被引量：2

14

作者 耿肇平 王尔康 《首都医药》 2008年第24期25-26,共2页

目的通过检测临床已知病例血样HIV抗原抗体含量、HIV1-RNA及CD4+T细胞计数,了解HIV1-P24抗原及HIV抗体的含量与HIV/AIDS病程进展的关系,寻找监视和预测HIV感染者病程发展及疗效观察的敏感免疫学指标。方法收集162例不同感染阶段病人血... 目的通过检测临床已知病例血样HIV抗原抗体含量、HIV1-RNA及CD4+T细胞计数,了解HIV1-P24抗原及HIV抗体的含量与HIV/AIDS病程进展的关系,寻找监视和预测HIV感染者病程发展及疗效观察的敏感免疫学指标。方法收集162例不同感染阶段病人血清或血浆分别检测HIV1-P24、Anti-HIV含量、HIV(s/co)及CD4+淋巴细胞的数量和HIV1-RNA病毒载量,用统计学方法比较其相关性,评价其在HIV感染者/AIDS病程进展中的价值。结果对162例检测结果进行统计分析:HIV1-RNA病毒载量与HIV1-P24之间U=4.02,P<0.01,差异有显著性;HIV1-RNA阳性率为0.6667,HIV1-P24阳性率为0.1604,二者阴性/阳性符合率为0.5185,阳性预断值均为1.0;随着病程的发展,HIV1-RNA病毒载量、HIV1-P24检测结果呈现不同幅度上升趋势,而不同感染阶段相应CD4+T细胞计数结果呈现不同程度的下降趋势;Anti-HIV和HIV(s/co)具有良好的一致性,但HIV(s/co)变化与病程长短无相关性,对病程的进展整体表现为不敏感;162例HIV1-P24与Anti-HIV检测结果:急性无症状感染期(A)HIV1-P24(36例阴性)/Anti-HIV(36例阳性);有症状感染期(B)HIV1-P24(58例阴性,2例阳性)/Anti-HIV(60例阳性);艾滋病期(C)HIV1-P24(38例阴性,28例阳性)/Anti-HIV(66例阳性);HIV1-P24与Anti-HIV检测结果同时阳性共有30例(其中16例HIV1-P24Cut-off1.7-3.86;14例HIV1-P24Cut-off10.54-44.25),有53.33%HIV1-P24表现为低反应性(弱阳性)。结论用罗氏电化学发光法检测HIV1-P24及Anti-HIV的含量,其结果快速准确具有高灵敏性,更适合临床HIV感染的初筛和病程监测的需要。 展开更多

关键词 艾滋病 人类免疫缺陷病毒 hiv1-p24抗原 抗-hiv抗体 电化学发光免疫测定法

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石墨烯增敏的SPR技术应用于HIV1 p24抗原的检测 被引量：1

15

作者 彭芳 张良 何建安 《生物化工》 2021年第3期4-8,共5页

目的:建立石墨烯增敏的表面等离子体共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)用于检测HIV1 p24,为HIV感染者的早期快速筛查提供一种检测方法。方法:石墨烯通过静电连接在采用聚乙二醇高分子处理的SPR芯片表面,HIV1 p24特异性抗体通过... 目的:建立石墨烯增敏的表面等离子体共振技术(Surface Plasmon Resonance,SPR)用于检测HIV1 p24,为HIV感染者的早期快速筛查提供一种检测方法。方法:石墨烯通过静电连接在采用聚乙二醇高分子处理的SPR芯片表面,HIV1 p24特异性抗体通过石墨烯表面的羧基官能团和HIV1 p24抗体表面的氨基官能团共价结合作用固定在芯片的表面,建立一种石墨烯增敏的无标记、快速的表面等离子共振技术用于检测HIV1 p24抗原,通过优化芯片分析条件,检测HIV1 p24抗原,分析石墨烯增敏的SPR芯片技术的检测性能。结果:石墨烯增敏的SPR芯片技术检测HIV1 p24抗原的重复性、敏感性与特异性均较好;检测灵敏度为10 ng/mL,相较于相同条件传统Au-SPR生物传感器检测得到的最低检测限(63 ng/mL),降低了至少6倍。结论:初步构建的石墨烯增敏的SPR芯片技术,有望为HIV感染者的早期筛查提供一个有力的技术平台。 展开更多

关键词 石墨烯 SpR技术 hiv1 p24抗原 早期筛查

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探讨 81 例临床分型 HIV 感染者血液样本 HIV1-RNA 载量、HIV1-P24、Anti-HIV 及 CD4+T 细胞计数检测结果的相关性

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作者 唐敏云 熊冲 《中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生》 2016年第6期21-23,74,共4页

通过检测临床已知病例血样 HIV 抗原抗体含量、HIV1-RNA 及 CD4+T 细胞计数,了解 HIV1-P24 抗原及抗 HIV 抗体的含量与 HIV/AIDS 病程进展的关系,寻找监视和预测 HIV 感染者病程发展及疗效观察的敏感的免疫学指标。方法:收集81 例不同... 通过检测临床已知病例血样 HIV 抗原抗体含量、HIV1-RNA 及 CD4+T 细胞计数,了解 HIV1-P24 抗原及抗 HIV 抗体的含量与 HIV/AIDS 病程进展的关系,寻找监视和预测 HIV 感染者病程发展及疗效观察的敏感的免疫学指标。方法:收集81 例不同感染阶段病人血清或血浆分别检测 HIV1-P24、Anti-HIV 含量、HIV(s/co)及 CD4+淋巴细胞的数量和 HIV1-RNA 病毒载量,用统计学方法比较它们的相关性,评价它们在 HIV 感染者/AIDS 病程进展中的价值。结果:对 81 例检测结果进行统计分析:HIV1-RNA 病毒载量与 HIV1-P24 之间 U=4.02,P<0.01,数值相差非常显著;HIV1-RNA 阳性率为 0.6667,HIV1-P24阳性率为 0.1604,二者阴性/阳性符合率为 0.5185,阳性预断值均为 1.0;随着病程的发展 HIV1-RNA 病毒载量、HIV1-P24 检测结果呈现不同幅度上升趋势,而不同感染阶段相应 CD4+T 细胞计数结果呈现不同程度的下降趋势;Anti-HIV 和 HIV(s/co)具有良好的一致性,但 HIV(s/co)变化与病程长短无相关性,对病程的进展整体表现为不敏感;81 例 HIV1-P24 与 Anti-HIV检测结果:急性无症状感染期(A)HIV1-P24(18 例阴性)/Anti-HIV(18 例阳性) ;有症状感染期(B)HIV1-P24(29 例阴性,1 例阳性)/Anti-HIV(30 例阳性) ;艾滋病期(C)HIV1-P24(19 例阴性,14 例阳性)/Anti-HIV(33 例阳性) ;HIV1-P24与 Anti-HIV 检测结果同时阳性共有 15 例(其中 8 例 Cut-off:1.7-3.86;7 例 Cut-off:10.54-44.25) ,有 53.33%HIV1-P24表现为低反应性 (弱阳性) 。 结论: 用罗氏电化学发光法检测 HIV1-P24 及 Anti-HIV 的含量, 其具有结果快速准确和高灵敏性,更适合临床 HIV 感染的初筛和病程监测的需要。 展开更多

关键词 艾滋病 人类免疫缺陷病毒 hiv1-p24 抗原 抗-hiv 抗体 CD4%pLUS%淋巴细胞 hiv 载量 电化学发光 免 疫测定法 流 式细胞仪

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HIV-1核心蛋白的表达与纯化

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作者 金宁一 李体远 +5 位作者 刘晓明 王玉红 王宏伟 郭志儒 安汝国 殷震 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2000年第1期28-31,共4页

将编码人I型免疫缺陷病毒(HIV1)核心蛋白p24gag的基因序列克隆到原核表达载体pET28(b)中,高效表达了N,C端融合His·Tagp24蛋白,所表达的重组p24蛋白占菌体总蛋白的46%。在变性条件下,使用NiNTA亲和层析法纯化了p24蛋白,纯度为94%。... 将编码人I型免疫缺陷病毒(HIV1)核心蛋白p24gag的基因序列克隆到原核表达载体pET28(b)中,高效表达了N,C端融合His·Tagp24蛋白,所表达的重组p24蛋白占菌体总蛋白的46%。在变性条件下,使用NiNTA亲和层析法纯化了p24蛋白,纯度为94%。菌体中及纯化、复性后的目的蛋白均能与抗HIV1p24单克隆抗体发生特异性反应。用纯化的p24蛋白免疫小鼠,4周时小鼠血清抗p24抗体效价达1∶400。实验结果表明:大肠杆菌表达的HIV1p24蛋白纯化后可用作HIV1检测试剂的原料。 展开更多

关键词 大肠杆菌 纯化 基因表达 HZV-1 核心蛋白

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HIV-1 p24抗原检测的应用研究 被引量：5

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作者 尹红章 李秀华 +2 位作者 孟淑芳 宋爱京 李德富 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期151-152,154,共3页

目的 :用抗HIV 1p2 4单克隆抗体和多克隆抗体构建的间接ELISA试剂 ,检测HIV 1抗体阳性及其它样品 ,探讨应用的可行性。方法 :采用单克隆抗体固相、兔抗HIV 1p2 4抗体夹心 ,羊抗兔HRP结合物的间接ELISA法。结果 :显示试剂盒HIV 1p2 4抗... 目的 :用抗HIV 1p2 4单克隆抗体和多克隆抗体构建的间接ELISA试剂 ,检测HIV 1抗体阳性及其它样品 ,探讨应用的可行性。方法 :采用单克隆抗体固相、兔抗HIV 1p2 4抗体夹心 ,羊抗兔HRP结合物的间接ELISA法。结果 :显示试剂盒HIV 1p2 4抗原检出灵敏度为 5 0pg/ml(基因工程抗原 ) ;特异性 99 46 % ;HIV抗体阳性血样阳性率 3 2 % ;抗体阴性的特殊人群血样阳性率 3 9% ;抗体不确定血样阳性率为 15 4% ,明显高于抗体阳性和阴性组血样。病毒培养 1d ,抗原效价 1∶80 ,第 3天可达1∶5 12 0。结论 :该间接夹心HIV 1p2 4抗原检测试剂灵敏度高、特异性好 ,可应用于HIV感染的辅助检测及病毒的基础研究。 展开更多

关键词 hiv-1p24 ELISA 单克隆抗体 艾滋病

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HIV-1型衣壳蛋白P24在大肠杆菌中的表达、纯化及鉴定 被引量：4

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作者 陈伟 张为 +3 位作者 李茜 朱华松 闭兰 余模松 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期8-11,共4页

用聚合酶链式反应 (PCR)从 HIV - 1gag基因序列中扩增出衣壳蛋白 (P2 4)基因 ,插入表达载体p GEX- 4T3中 ,构成重组质粒 p GEX- p2 4,在大肠杆菌 BL 2 1中高效表达出重组 P2 4。经 Glutathione- Sepharose4B亲和层析纯化后 ,重组 P2 4... 用聚合酶链式反应 (PCR)从 HIV - 1gag基因序列中扩增出衣壳蛋白 (P2 4)基因 ,插入表达载体p GEX- 4T3中 ,构成重组质粒 p GEX- p2 4,在大肠杆菌 BL 2 1中高效表达出重组 P2 4。经 Glutathione- Sepharose4B亲和层析纯化后 ,重组 P2 4在间接 EL ISA和免疫印迹中表现出很高的抗原特异性和免疫反应性。 展开更多

关键词 hiv-1 p24 大肠杆菌 表达

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HIV抗体不确定的血清学特征及鉴别效果 被引量：9

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作者 黄良光 《中国医学创新》 CAS 2012年第35期118-118,共1页

目的:分析HIV抗体不确定标本的血清学特征,探讨HIV抗体不确定结果的鉴别方法。方法:对12例HIV抗体不确定孕妇的标本进行免疫印迹确认(WB);观察12例孕妇HIV抗体的发展情况;比较条带免疫印迹法(LIA)、HIV-1p24抗原检测法以及病毒载量法(VL... 目的:分析HIV抗体不确定标本的血清学特征,探讨HIV抗体不确定结果的鉴别方法。方法:对12例HIV抗体不确定孕妇的标本进行免疫印迹确认(WB);观察12例孕妇HIV抗体的发展情况;比较条带免疫印迹法(LIA)、HIV-1p24抗原检测法以及病毒载量法(VL)对HIV不确定标本的鉴别效果。结果:12例产妇HIV抗体p24、gp160+p24、gp160不确定所占比例最高;HIV抗体转阳率为8.33%。结论:只有条带类型为gp160+p24不确定的孕妇会发生HIV抗体转阳,LIA、VL实验检测方法能有效鉴别HIV抗体不确定孕妇感染情况。 展开更多

关键词 hiv抗体不确定 免疫印迹法 条带免疫印迹法 病毒载量 hiv—1p24抗原检测

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