抗HIV p24和人A型红细胞双特异性单克隆抗体的研制 被引量：7

1

作者 孟文霞 王润田 +2 位作者 张玉芬 张红中 王蕙芬 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期582-584,共3页

目的 :制备抗HIVp2 4和人A型红细胞双特异性单抗 (mAb) ,并建立检测HIVp2 4的间接血凝试验。方法 :将分泌抗HIVp2 4mAb的杂交瘤株 2 E4和分泌抗人A型红细胞mAb的杂交瘤株S2 ,分别用 8 Ag和 5 BrdU驯化 ,使成为HAT敏感株。将两者常规融... 目的 :制备抗HIVp2 4和人A型红细胞双特异性单抗 (mAb) ,并建立检测HIVp2 4的间接血凝试验。方法 :将分泌抗HIVp2 4mAb的杂交瘤株 2 E4和分泌抗人A型红细胞mAb的杂交瘤株S2 ,分别用 8 Ag和 5 BrdU驯化 ,使成为HAT敏感株。将两者常规融合 ,筛选分泌双特异性mAb的杂交 杂交瘤株。然后制备并纯化双特异性mAb ,用其建立的间接血凝法检测p2 4。结果 :共获得 6株杂交 杂交瘤细胞株 ,以其分泌的双特异性mAb建立了检测HIVp2 4的间接血凝法 ,敏感性可达 4 0 0ng/L。结论 :获得可稳定分泌双特异性mAb的杂交 杂交瘤株 ,并用纯化的双特异性mAb建立了快速检测HIVp2 展开更多

关键词 杂交.杂交瘤 双特异性mAb hiv p24 间接血凝试验 小鼠

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采用抗体包被金磁纳米微粒修饰电极的HIV p24/gp36安培联检芯片 被引量：4

2

作者 干宁 李榕生 +2 位作者 陈亚东 杨欣 李天华 《西安交通大学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期115-119,共5页

研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次... 研制了以聚碳酸酯为基底的双通道安培检测微流控免疫芯片,在其中分别集成了修饰有HIV核心抗原p24/gp36的单克隆一级抗体的纳米金修饰电极,并应用于人血清中p24和gp36抗原的同时分析.检测原理是：基于夹心免疫分析法,在电压驱动下,一次性加入含有p24和gp36样品及HRP酶标记的p24和gp36二级抗体溶液,与电极表面的一级抗体生成夹心免疫复合物;接着在体系中加入H2O2,以方波溶出伏安法检测免疫复合物上HRP催化H2O2的还原电流.在pH为6.2的磷酸缓冲液中,对HIV p24和gp36的检测时间均少于2 min,线性范围为0.5-400μg/L,检测限为0.25μg/L.该芯片集成了加样、分离和检测系统,检测时间短,灵敏度明显高于传统的酶联免疫吸附分析法,可应用于对艾滋病的早期诊断和大范围筛查. 展开更多

关键词 金磁纳米修饰电极 方波溶出伏安法 微流控芯片 hivp24 hivgp36

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HIV抗原抗体光激化学发光法联合检测试剂的评价 被引量：5

3

作者 宋淑静 马小亮 +4 位作者 杨晓玲 刘亚楠 陈丽娟 李娟 王雅杰 《标记免疫分析与临床》 CAS 2019年第10期1758-1761,共4页

目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿... 目的评价北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIV Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市HIV抗原抗体检测试剂盒的一致性以及血清转化灵敏度。方法收集363例血清样本,包括HIV患者样本、健康人员样本、以及类风湿因子样本、孕妇样本、ANA阳性样本、乙型病毒性肝炎和丙型病毒性肝炎患者等干扰样本;另外有10套HIV血清转换盘共120份血清样本。检测采用LiCA 500自动光激化学发光检测仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数,定性检测血清HIV1 p24抗原和HIV1/2抗体并评价与参比试剂结果一致性和血清转化灵敏度。结果北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)血清样本检测结果和参比试剂检测结果具有较好一致性;评估试剂的血清转化灵敏度同参比试剂相当。结论北京科美生物技术有限公司的人类免疫缺陷病毒抗原抗体(HIVAg/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法)与已上市同品种试剂盒检测结果具有一致性,血清转换灵敏度较高,有利于筛查HIV早期感染,为临床HIV早期诊断提供有效的实验室诊断依据。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒抗原抗体(hiv Ag/Ab)检测试剂盒(光激化学发光法) hiv p24抗原和hiv1/2抗体 结果一致性 血清转换灵敏度

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电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的评价 被引量：4

4

作者 周琰 宋斌斌 +2 位作者 郑晓虹 郭玮 潘柏申 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第12期845-849,共5页

目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清... 目的评价Roche电化学发光法联合检测HIV抗原抗体试剂的检测性能。方法收集包括健康献血员、人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者、丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性和高危人群在内的血清样本1 327例。购买美国BBI公司的7套HIV血清转换盘共计51份血清样本。采用Roche cobas e411(架式系统)电化学全自动免疫分析仪和相应的检测试剂、校准品和质控品以及检测参数进行测定。以Roche Elecsys HIV Combi试剂盒为评估试剂,以生物梅里埃Vironostika Uni-FormⅡplus O HIV抗体试剂盒为参比试剂。定性检测血清HIV p24抗原和HIV1/2抗体并评价检测方法分析性能、结果一致性和血清转化灵敏度。结果 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒批内和天间不精密度良好,符合临床使用要求。血清样本检测结果和参比试剂检测结果一致性完全符合。评估试剂的血清转化灵敏度比参比试剂平均提前了5.1 d。结论 Roche Elecsys HIV Combi试剂盒具有良好的精密度和血清转换灵敏度,有利于筛查HIV早期感染,能为临床HIV早期诊断、随访监测提供有效的实验室诊断依据。 展开更多

关键词 人类免疫缺陷病毒 hiv p24抗原 hiv1/2抗体 ROCHE Elecsys hiv Combi试剂盒 一致性 血清转换灵敏度

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琼脂磁珠消减SELEX技术筛选HIV P24抗原适配体 被引量：5

5

作者 葸玉琴 赵运旺 +2 位作者 马梅兰 曾家豫 廖世奇 《西北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2016年第5期79-84,94,共7页

建立以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,快速筛选高特异性、高亲和力的HIV P24抗原适配体的方法.利用消减SELEX技术及靶标替换的方法,以HIV P24抗原作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,进行6轮筛选,筛选到3条特异性核酸适配体.特异性检测表明,... 建立以羧基化琼脂磁珠为筛选介质,快速筛选高特异性、高亲和力的HIV P24抗原适配体的方法.利用消减SELEX技术及靶标替换的方法,以HIV P24抗原作为靶分子,羧基化琼脂磁珠为载体,进行6轮筛选,筛选到3条特异性核酸适配体.特异性检测表明,筛选得到的HIV P24抗原适配体与HIV P24抗原的结合解离常数均在纳摩尔级水平.该方法为HIV早期检测提供了新的检测技术,对适配体与靶分子相互作用机理的研究具有重要价值. 展开更多

关键词 hiv p24抗原 消减SELEX技术 DNA适配体 靶标替换

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HIV核心抗原p24检测方法的建立及应用 被引量：3

6

作者 刘荷中 凌世淦 +6 位作者 陈坤 宋晓国 韩保光 孟莉 马贤凯 董邦权 金伯泉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第4期51-54,共4页

ＨＩＶ感染的检测在预防ＡＩＤＳ传播方面有重要作用。本研究以重组抗原ｐＧ１免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术建立了５株识别ＨＩＶ核心抗原ｐ２４的杂交瘤细胞株Ｄ３，１Ｈ１，２Ｇ１０，３Ｈ５和４Ｈ６。经鉴定这５株... ＨＩＶ感染的检测在预防ＡＩＤＳ传播方面有重要作用。本研究以重组抗原ｐＧ１免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术建立了５株识别ＨＩＶ核心抗原ｐ２４的杂交瘤细胞株Ｄ３，１Ｈ１，２Ｇ１０，３Ｈ５和４Ｈ６。经鉴定这５株ＭｃＡｂ与其它病毒抗原无交叉反应，分别识别３个不同的抗原表位。应用两株识别不同表位的ＭｃＡｂ２Ｇ１０和３Ｈ５建立了检测ＨＩＶｐ２４抗原的夹心ＥＬＩＳＡ法，并初步检测了２４份ＨＩＶ抗体阳性血清。 展开更多

关键词 hiv p24 单克隆抗体 ELISA AIDS

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应用梭状芽孢杆菌口服疫苗载体表达HIV p24蛋白的研究 被引量：3

7

作者 石英 周育森 +5 位作者 郭彦 肖文君 于虹 吴昊 陈月 PhalguniGupta 《科学技术与工程》 2007年第17期4265-4270,4276,共7页

应用一种不产毒的梭状芽孢杆菌(Clostridium perfringens,C.P.)作为口服疫苗载体表达HIVp24蛋白。用PCR扩增HIVp24基因,酶切后插入到含有C.P.序列的pJRC200质粒的CPEORF中,将重组的cp24质粒转化无致病作用的ATCC3624菌株。使HIVp24基因... 应用一种不产毒的梭状芽孢杆菌(Clostridium perfringens,C.P.)作为口服疫苗载体表达HIVp24蛋白。用PCR扩增HIVp24基因,酶切后插入到含有C.P.序列的pJRC200质粒的CPEORF中,将重组的cp24质粒转化无致病作用的ATCC3624菌株。使HIVp24基因在C.P.形成芽孢时大量表达。结果应用SDS_PAGE和West Blot分析HIVp24在重组C.P.繁殖体和芽孢中的表达情况,发现HIVp24蛋白在C.P.芽孢体中大量表达,而在C.P.繁殖体中却没有表达。证明在体外构建了含有HIVp24基因的重组pJRC200质粒,成功地表达了HIVp24蛋白并得到了HIVp24的高表达ATCC3624菌株。为成功研究C.P.作为一种口服HIV疫苗载体奠定了基础。 展开更多

关键词 CLOSTRIDIUM perfringens hiv p24 OpE 口服疫苗

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HIV结构蛋白p24与三基序蛋白22胞内定位及出胞研究 被引量：1

8

作者 孙大康 宋向芹 +1 位作者 安新业 程艳丽 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期213-218,共6页

比较p24-DsRed1、p24-DsRed2、p24-DsRed-Monomer三种荧光蛋白的表达强弱,观察p24-DsRed1与TRIM22-EGFP结合物在细胞中的分布特点。构建pDsRed1-N1-p24及pDsRed2-N1-p24真核表达载体,转染HEK293T细胞,经荧光显微镜比较三种p24-DsRed荧... 比较p24-DsRed1、p24-DsRed2、p24-DsRed-Monomer三种荧光蛋白的表达强弱,观察p24-DsRed1与TRIM22-EGFP结合物在细胞中的分布特点。构建pDsRed1-N1-p24及pDsRed2-N1-p24真核表达载体,转染HEK293T细胞,经荧光显微镜比较三种p24-DsRed荧光偶联蛋白的表达强度。选择荧光强度最强的pDsRed1-N1-p24与pEGFP-N3-TRIM22共转染HEK293T细胞,荧光显微镜观察两者结合物在细胞中的分布特点。结果显示,经荧光显微镜检测,转染48h后红色荧光蛋白强度由大到小依次为p24-DsRed1、p24-DsRed2、p24-DsRedm。在HEK293T细胞中共转染p24-DsRed1和TRIM22-EGFP,发现两者存在共定位关系,有意思的是两者的结合体能以出胞形式脱离细胞。结果表明,p24-DsRed1荧光蛋白强度显著高于p24-DsRed2和p24-DsRedm,TRIM22-p24结合物能以出芽形式脱离细胞。 展开更多

关键词 hiv衣壳蛋白p24 三基序蛋白22 DSRED 出芽

原文传递

亲环蛋白的结构与功能 被引量：10

9

作者 HengmingKe 王易 谢长宜 《自然杂志》 2000年第3期134-141,共8页

亲环蛋白是一族在生物体内普遍存在的,具有多种生物学活性的蛋白质.其作用涉及抑制T细胞活化信号的传导、肽基脯氨酸顺反异构酶活性、蛋白折叠、伴侣分子活性、人类免疫缺陷病毒感染以及先转导等.亲环蛋白对于器官移植中免疫抑制剂的作... 亲环蛋白是一族在生物体内普遍存在的,具有多种生物学活性的蛋白质.其作用涉及抑制T细胞活化信号的传导、肽基脯氨酸顺反异构酶活性、蛋白折叠、伴侣分子活性、人类免疫缺陷病毒感染以及先转导等.亲环蛋白对于器官移植中免疫抑制剂的作用机理和人类类固醇激素受体的活化调节都具有重要意义.然而;亲环蛋白在体内的生理功能及其多种生物学活性间的相互关系仍未十分明了,本文将着重从结构角度联系亲环蛋白的功能,对近来了解的条环蛋白作用作一综述. 展开更多

关键词 亲环蛋白 免疫嗜素 免疫抑制剂

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金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24 被引量：4

10

作者 郑姬 蒋天伦 府伟灵 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期301-304,355,共5页

目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测... 目的建立以金磁微粒为载体的免疫PCR HIV-1 p24检测体系。方法以金磁微粒作为免疫PCR的载体并通过载体的特异性和非特异性反应验证其可行性;以小鼠抗HIV-1 p24单克隆抗体作为捕获抗体包被金磁微粒,生物素化的羊抗p24多克隆抗体作为检测抗体;报告DNA用生物素标记的引物通过PCR扩增预先制备,并通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被两抗体夹心捕获的人重组HIV-1 p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;并对检测的灵敏度和线性检测范围进行分析。结果金磁微粒上偶联抗体的效率可〉95%,偶联抗体的一致性较好,几乎不产生非特异性吸附,分离与洗涤步骤更简便更彻底;免疫PCR检测p24的灵敏度为0.1ng/L,比ELISA法检测的灵敏度高1.5×10^4倍,线性检测范围为p24浓度在0.1～100ng/L。结论金磁微粒是较理想的免疫PCR反应载体,金磁微粒为载体的免疫PCR检测HIV-1 p24是一种可兹应用的高灵敏度的检测方法。 展开更多

关键词 免疫pCR 金磁微粒 hiv-1 p24

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HIV-p24抗原的电化学免疫传感器研究 被引量：4

11

作者 干宁 李天华 +2 位作者 陈妮 葛从辛 徐伟民 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期269-272,共4页

制备了一种基于巯基丁二胺铜（Ⅱ）（CuL）的自组装修饰传感器，用于人血清中HIV-p24水平免疫分析。其主要参数为：电极表面直径2mm、高2cm，CuL覆盖率为1．02×10^-11 mol/cm^2，检测用血量〈10mL，检测速度〈10S。其电化学行为表... 制备了一种基于巯基丁二胺铜（Ⅱ）（CuL）的自组装修饰传感器，用于人血清中HIV-p24水平免疫分析。其主要参数为：电极表面直径2mm、高2cm，CuL覆盖率为1．02×10^-11 mol/cm^2，检测用血量〈10mL，检测速度〈10S。其电化学行为表现出表面控制过程。结合电化学酶联免疫分析法，在含有1．0mmol/L H2O2的pH：6．2磷酸盐缓冲溶液中，获得HIV-p24的测定校正曲线为0．5-200ng/mL，检测限为0．2ng/mL。该传感器准确性、精确性和制备重复性良好。测定10ng/mL HIV-p24时的变异系数为3．5％。该方法避免了常规电化学免疫测定中电子媒介体的加入，简化了分析步骤，缩短了分析时间。对艾滋病的诊断和检测具有一定价值。该研究的新颖性，已为宁波市科学技术情报研究所2006年9月20日出具的第20063360800348号《科技查新报告》所证实，属未见文献报道。 展开更多

关键词 伏安法 自组装 巯基丁二胺铜 hiv-p24 免疫传感器

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HIV-P24核酸适配体的筛选 被引量：5

12

作者 张宁 毛爱红 +4 位作者 马瑾 廖世奇 张丽琼 王晓清 马君 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2012年第9期987-991,共5页

目的利用SELEX技术筛选HIV-P24的核酸适配体,为艾滋病的诊断和治疗奠定基础。方法以重组P24为筛选靶,用SELEX技术从随机寡核苷酸库中筛选与HIV-P24结合的寡核苷酸,利用凝胶阻滞实验鉴定第12轮筛选到的寡核苷酸与HIV-P24的结合,再用Dot-b... 目的利用SELEX技术筛选HIV-P24的核酸适配体,为艾滋病的诊断和治疗奠定基础。方法以重组P24为筛选靶,用SELEX技术从随机寡核苷酸库中筛选与HIV-P24结合的寡核苷酸,利用凝胶阻滞实验鉴定第12轮筛选到的寡核苷酸与HIV-P24的结合,再用Dot-blot法筛选出与HIV-P24结合的核酸适配体,并检测核酸适配体识别HIV-P24的特异性。结果 Dot-blot筛选到5条与HIV-P24有较强结合能力的核酸适配体,且均为不同的序列。特异性检测显示,18和26号配体只与HIV-P24特异性结合,而与人血清白蛋白、牛血清白蛋白和脱脂奶粉均无明显结合。结论成功筛选到2条特异结合HIV-P24的核酸适配体,为其应用于艾滋病诊断和治疗提供了实验基础。 展开更多

关键词 SELEX技术 hiv-p24 核酸适配体

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基于纳米金组合电极的HIV p24微流控安培免疫传感芯片研究 被引量：2

13

作者 陈亚东 李榕生 +2 位作者 干宁 杨欣 李天华 《传感技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期165-170,共6页

研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压... 研制了以聚碳酸酯(PC)为基底,以表面修饰了人免疫缺陷病毒(HIV)核心抗原p24单克隆一级抗体(Rp24I)的纳米金组合电极(GNEE)为工作电极的微流控安培免疫传感芯片,并应用于p24抗原(简称p24)实时分析。检测原理是基于夹心免疫分析法,在电压驱动和流动条件下,一次性加入p24样品和纳米金胶标记的p24二级抗体(Rp24Ⅱ-Au,金胶直径为50～100nm)溶液,利用不同物质因受电场影响而在微管道中的迁移速率不同,使得p24抗原和Rp24Ⅱ-Au依次到达GNEE电极,与其表面的Rp24I生成三明治型免疫复合物(Rp24I/p24/Rp24Ⅱ-Au)。接着以方波溶出伏安法(SWSV)将复合物上的金胶粒子溶出,由于溶出电流大小与被测定p24呈正比关系,从而获得p24的测定校正曲线。在pH6.2的磷酸缓冲液(PBS)中p24检测时间小于2min,线性范围为1～500ng/L(R2=0.9975),检测限为0.25ng/L。该芯片集成了加样、分离和检测系统,简化了分析步骤,缩短了检测时间,灵敏度达1μA.ng-1.mL,明显高于传统酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,对艾滋病的早期诊断和大范围筛查具有应用价值。 展开更多

关键词 纳米金组合电极 方波溶出伏安法 微流控 hiv-p24 安培免疫传感芯片

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HIV/AIDS患者肝组织HIV-1 p24抗原的免疫组化检测 被引量：3

14

作者 姜天俊 赵敏 +5 位作者 赵景民 周光德 潘登 王健 张云辉 周志平 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期152-154,共3页

目的　检测HIV抗原标志物在肝组织的表达情况,探讨HIV AIDS患者肝损伤发生的可能机制。方法　采用免疫组织化学方法对14例HIV AIDS患者的肝活检组织切片进行HIV 1p2 4抗原检测,比较不同病变肝组织中HIV 1p2 4抗原的表达数量。结果　在1... 目的　检测HIV抗原标志物在肝组织的表达情况,探讨HIV AIDS患者肝损伤发生的可能机制。方法　采用免疫组织化学方法对14例HIV AIDS患者的肝活检组织切片进行HIV 1p2 4抗原检测,比较不同病变肝组织中HIV 1p2 4抗原的表达数量。结果　在14例肝组织切片的Kupffer细胞、内皮细胞、肝细胞均发现HIV 1p2 4抗原表达;阳性肝细胞计数分析显示,表达数量随病变严重程度而增加(P <0 0 5 )。结论　HIV能够在HIV AIDS患者的肝脏内表达,并且可能参与肝细胞的凋亡。 展开更多

关键词 hiv/AIDS患者 p24抗原 免疫组化检测 KUpFFER细胞 hiv-1p24 免疫组织化学方法 活检组织切片 病变严重程度 抗原标志物 肝组织切片 表达情况 可能机制 抗原检测 内皮细胞 抗原表达 细胞计数 肝细胞 肝损伤 肝脏内

原文传递

基于巯基丁二酰肼铜(Ⅱ)单层修饰电极的HIV-p24电化学免疫传感器 被引量：2

15

作者 干宁 李天华 +2 位作者 雷建平 王鲁雁 杨欣 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1167-1171,共5页

研制了基于巯基丁二酰肼铜(Ⅱ)(CuL)单层修饰金电极(Au|CuL)测定艾滋病人血清中HIV核心抗原p24水平的免疫传感器。该传感器通过将CuL直接自组装到金电极表面制备而成。CuL对H2O2的还原具有催化作用,可作为p24抗体(antip24)上标记的辣根... 研制了基于巯基丁二酰肼铜(Ⅱ)(CuL)单层修饰金电极(Au|CuL)测定艾滋病人血清中HIV核心抗原p24水平的免疫传感器。该传感器通过将CuL直接自组装到金电极表面制备而成。CuL对H2O2的还原具有催化作用,可作为p24抗体(antip24)上标记的辣根过氧化物酶(HRP)与电极之间电子传递媒介体。结合竞争性免疫分析,HRP-antip24抗体(HRP-antip24)与待测p24反应生成的免疫结合物游离在反应池中,通过测定在免疫结合物上HRP作用下电极表面CuL对H2O2催化增强电流,采用示差脉冲伏安法(DPV)直接获得待测抗原的含量。该免疫传感器的测定无需分离和洗涤步骤,温育时间短,为艾滋病诊断提供了一种新的方法。 展开更多

关键词 巯基丁二酰肼铜(Ⅱ) hiv-p24抗原 过氧化氢 电化学免疫传感器

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HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的比较 被引量：3

16

作者 金光 王卫 +3 位作者 丛喆 蒋虹 陈霆 魏强 《中国比较医学杂志》 CAS 2011年第2期26-30,共5页

目的由于检测SIV p27抗原试剂盒来源困难,有时不稳定,鉴于HIV-1 p24与SIVp27有较强的交叉抗原,本研究比较HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原得出的结果是否存在一定的相关性。方法 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒... 目的由于检测SIV p27抗原试剂盒来源困难,有时不稳定,鉴于HIV-1 p24与SIVp27有较强的交叉抗原,本研究比较HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原得出的结果是否存在一定的相关性。方法 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒定性和定量检测样品中SIV p27抗原,并对检测结果进行回归和相关分析。结果 HIV-1 p24和SIV p27两种ELISA试剂盒检测SIV p27抗原的灵敏度分别是150 pg/mL和62.5 pg/mL。两种试剂盒检测病毒液和血浆中SIV p27抗原的定性结果一致。定量结果的统计分析得出病毒液的直线回归决定系数R2=0.857,直线相关系数r=0.926,P<0.01,直线正相关程度较高;血浆的直线回归决定系数R2=0.512,直线相关系数r=0.716,P<0.05,直线正相关程度较低。结论 HIV-1 p24 ELISA试剂盒能够替代SIVp27 ELISA试剂盒定性检测病毒液和血浆中SIV p27抗原,但只能定量检测病毒液中SIV p27抗原。 展开更多

关键词 hiv-1p24 SIVp27

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HIV-1Gagp24蛋白的纯化及复性 被引量：1

17

作者 李体远 金宁一 +4 位作者 王宏伟 王玉红 王洪军 安汝国 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期519-522,共4页

为制备高纯度p24 抗原,在变性条件下,将大肠杆菌表达的重组p24 蛋白,使用Ni-NTA 亲和层析法进行了纯化。对包涵体中的p24 蛋白进行层析纯化时,回收率略有提高,但蛋白纯度(81% )低于菌体裂解纯化洗脱物(94% )。菌体中及纯化、复性后的目... 为制备高纯度p24 抗原,在变性条件下,将大肠杆菌表达的重组p24 蛋白,使用Ni-NTA 亲和层析法进行了纯化。对包涵体中的p24 蛋白进行层析纯化时,回收率略有提高,但蛋白纯度(81% )低于菌体裂解纯化洗脱物(94% )。菌体中及纯化、复性后的目的蛋白均能与抗HIV-1 p24 单克隆抗体发生特异性反应。用纯化的p24 蛋白免疫小鼠,4 周时小鼠血清抗p24 平均抗体效价达1∶400。试验结果表明,大肠杆菌表达的HIV-1 p24 全菌体裂解物纯化后,可用作HIV-1 检测试剂的原料。 展开更多

关键词 hiv-1 p24 大肠杆菌 纯化 复性

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免疫PCR检测HIV-p24抗原的实验研究 被引量：1

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作者 郑姬 府伟灵 +1 位作者 蒋天伦 杨雅康 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期19-22,共4页

目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过... 目的建立检测HIV-p24抗原的高灵敏度免疫PCR方法。方法以金磁微粒为免疫PCR载体、鼠抗HIV-p24单抗为捕获抗体、生物素化的羊抗p24多克隆抗体为检测抗体,通过链亲和素的桥联标记生物素化的多抗,被双抗体夹心捕获的人重组HIV-p24抗原通过PCR扩增报告DNA的方式予以检测;用方阵滴定法确定最适链亲和素和标记DNA浓度,用Quantity One凝胶定量软件分析电泳图像。结果链亲和素浓度和用于标记的DNA的浓度分别控制在0.1mg/L和10ng/L;免疫PCR检测的灵敏度为0.1ng/L,比传统ELISA法检测的灵敏度高。结论高灵敏度的免疫PCR适用于早期筛检HIV-p24抗原。 展开更多

关键词 免疫pCR 灵敏度 hiv—p24抗原 艾滋病 献血者 早期筛检

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探讨 81 例临床分型 HIV 感染者血液样本 HIV1-RNA 载量、HIV1-P24、Anti-HIV 及 CD4+T 细胞计数检测结果的相关性

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作者 唐敏云 熊冲 《中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生》 2016年第6期21-23,74,共4页

通过检测临床已知病例血样 HIV 抗原抗体含量、HIV1-RNA 及 CD4+T 细胞计数,了解 HIV1-P24 抗原及抗 HIV 抗体的含量与 HIV/AIDS 病程进展的关系,寻找监视和预测 HIV 感染者病程发展及疗效观察的敏感的免疫学指标。方法:收集81 例不同... 通过检测临床已知病例血样 HIV 抗原抗体含量、HIV1-RNA 及 CD4+T 细胞计数,了解 HIV1-P24 抗原及抗 HIV 抗体的含量与 HIV/AIDS 病程进展的关系,寻找监视和预测 HIV 感染者病程发展及疗效观察的敏感的免疫学指标。方法:收集81 例不同感染阶段病人血清或血浆分别检测 HIV1-P24、Anti-HIV 含量、HIV(s/co)及 CD4+淋巴细胞的数量和 HIV1-RNA 病毒载量,用统计学方法比较它们的相关性,评价它们在 HIV 感染者/AIDS 病程进展中的价值。结果:对 81 例检测结果进行统计分析:HIV1-RNA 病毒载量与 HIV1-P24 之间 U=4.02,P<0.01,数值相差非常显著;HIV1-RNA 阳性率为 0.6667,HIV1-P24阳性率为 0.1604,二者阴性/阳性符合率为 0.5185,阳性预断值均为 1.0;随着病程的发展 HIV1-RNA 病毒载量、HIV1-P24 检测结果呈现不同幅度上升趋势,而不同感染阶段相应 CD4+T 细胞计数结果呈现不同程度的下降趋势;Anti-HIV 和 HIV(s/co)具有良好的一致性,但 HIV(s/co)变化与病程长短无相关性,对病程的进展整体表现为不敏感;81 例 HIV1-P24 与 Anti-HIV检测结果:急性无症状感染期(A)HIV1-P24(18 例阴性)/Anti-HIV(18 例阳性) ;有症状感染期(B)HIV1-P24(29 例阴性,1 例阳性)/Anti-HIV(30 例阳性) ;艾滋病期(C)HIV1-P24(19 例阴性,14 例阳性)/Anti-HIV(33 例阳性) ;HIV1-P24与 Anti-HIV 检测结果同时阳性共有 15 例(其中 8 例 Cut-off:1.7-3.86;7 例 Cut-off:10.54-44.25) ,有 53.33%HIV1-P24表现为低反应性 (弱阳性) 。 结论: 用罗氏电化学发光法检测 HIV1-P24 及 Anti-HIV 的含量, 其具有结果快速准确和高灵敏性,更适合临床 HIV 感染的初筛和病程监测的需要。 展开更多

关键词 艾滋病 人类免疫缺陷病毒 hiv1-p24 抗原 抗-hiv 抗体 CD4%pLUS%淋巴细胞 hiv 载量 电化学发光 免 疫测定法 流 式细胞仪

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利用琼脂磁珠作为载体建立快速HIV-P24核酸适配体的筛选方法

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作者 李志忠 马瑾 +3 位作者 王芳 廖世奇 马宁 杨楠 《中国食品工业》 2013年第11期49-52,共4页

目的：利用磁珠作为载体，建立快速HIV-P24核酸适配体的SELEX筛选方法。方法：利用SELEX技术、磁珠分离及实时定量PCR技术，从随机寡核苷酸库中快速筛选出能与HIV-P24特异结合的寡核苷酸，利用凝胶阻滞实验鉴定所筛选到的HIV-P24核酸适... 目的：利用磁珠作为载体，建立快速HIV-P24核酸适配体的SELEX筛选方法。方法：利用SELEX技术、磁珠分离及实时定量PCR技术，从随机寡核苷酸库中快速筛选出能与HIV-P24特异结合的寡核苷酸，利用凝胶阻滞实验鉴定所筛选到的HIV-P24核酸适配体复合物，通过连接Pmd18-Tvector，转化E.ColiDH5a感受态细胞得到了阳性克隆。结果：经过4轮筛选并运用凝胶阻滞实验验证了HIV-P24核酸适配体复合物条带明显被阻滞，利用交错PCR鉴定了所挑取的阳性克隆，也得到了测序序列。结论：利用SELEX技术、磁珠核酸分离技术和实时定量PCR技术成功筛选到了2条能与HIV-P24特异性结合的核酸适配体，这几种方法相结合操作简单、能有效提高筛选效率，并且便于机械化操作，为今后的适配体筛选打下良好基础。 展开更多

关键词 磁珠 SELEX技术 实时定量pCR hiv-p24 核酸适配体

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