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河南省部分艾滋病患者抗病毒治疗的临床效果以及基因型耐药性分析 被引量:49
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作者 李韩平 李宏 +5 位作者 杨坤 王哲 鲍作义 辛天义 庄道民 李敬云 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期194-198,共5页
目的 了解河南省部分地区HIV 1感染者抗病毒治疗临床效果 ,分析服药依从性与治疗效果关系 ;与未进行抗病毒治疗的患者相比较 ,分析治疗后病毒耐药性突变发生和流行情况。方法通过问卷调查、CD4 +细胞测定评价抗病毒治疗的临床效果 ;用R... 目的 了解河南省部分地区HIV 1感染者抗病毒治疗临床效果 ,分析服药依从性与治疗效果关系 ;与未进行抗病毒治疗的患者相比较 ,分析治疗后病毒耐药性突变发生和流行情况。方法通过问卷调查、CD4 +细胞测定评价抗病毒治疗的临床效果 ;用RT PCR方法扩增HIV 1 pol区基因 ,进行基因型耐药性分析。结果 接受抗病毒治疗的人群中 ,坚持服药的病人 55.0 8%病情明显好转 ,而未坚持服药的病人仅有 6 .78%病情明显好转 ,服药依从性对病情趋势变化具有显著影响 (P <0 .0 5) ;接受抗病毒治疗的病人CD4 +淋巴细胞均值为 ( 4 2 9.38± 7.89)个 /μl,未治疗的病人CD4 +淋巴细胞均值为( 2 0 1 .4 3± 8.72 )个 /μl,治疗后患者CD4 +淋巴细胞计数显著高于未治疗的患者 (P <0 .0 5) ;基因型耐药性检测结果表明 ,相对于未经治疗的患者 ,经过抗病毒治疗的患者对逆转录酶抑制剂的耐药性突变显著高于未治疗的患者 ( χ2 =1 9.4 2 85,P <0 .0 5) ;治疗人群与未治疗人群对蛋白酶抑制剂的耐药突变差异无统计学意义 ( χ2 =0 .3478,P <0 .50 ) ;耐药性突变主要发生在CD4 +淋巴细胞 <2 0 0个 /μl病人中。结论 用国产抗病毒药物治疗可取得较好的临床效果 ,服药依从性对治疗效果有重要影响 ,治疗后耐药性突变发生率显著升高 。 展开更多
关键词 抗病毒治疗 耐药性分析 临床效果 基因型 河南省 艾滋病患者 CD4^+淋巴细胞 hiv-1感染者 RT-PCR方法 服药依从性 耐药性突变 逆转录酶抑制剂 蛋白酶抑制剂 治疗效果 治疗人群 病毒耐药性 耐药性病毒 治疗后 流行情况 突变发生
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金丝桃素分子结构及其与HIV病毒蛋白酶作用的分子动力学研究 被引量:12
2
作者 曲晓波 苏忠民 +4 位作者 胡冬华 鲍永利 孟祥颖 乌垠 李玉新 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1402-1405,共4页
采用用计算化学方法研究金丝桃素分子结构特征,并用分子动力学方法研究其与HIV蛋白酶的相互作用,探讨其可能的抗HIV病毒作用机理.结果表明,金丝桃素分子结构具有刚性特征,与HIV蛋白酶在酶的催化活性位点与ASP-A25 and ASP-B25以氢键作... 采用用计算化学方法研究金丝桃素分子结构特征,并用分子动力学方法研究其与HIV蛋白酶的相互作用,探讨其可能的抗HIV病毒作用机理.结果表明,金丝桃素分子结构具有刚性特征,与HIV蛋白酶在酶的催化活性位点与ASP-A25 and ASP-B25以氢键作用相结合. 展开更多
关键词 金丝桃素 hiv蛋白酶 分子动力学模拟 分子对接
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应用HIV-1耐药性基因型检测广东部分地区HIV耐药株 被引量:13
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作者 万卓越 李杰 +3 位作者 付笑冰 林萍 鄢心革 刁丽梅 《中国艾滋病性病》 CAS 2006年第3期204-206,共3页
目的利用艾滋病病毒1型(HIV-1)耐药性基因型检测法,在HIV-1感染者中监测HIV-1耐药性病毒株,掌握广东省HIV-1感染者在利用抗病毒药物治疗前是否存在耐药突变及其流行情况。方法从未接受高效抗逆转录病毒联合疗法(HAART)治疗的HIV-1感染... 目的利用艾滋病病毒1型(HIV-1)耐药性基因型检测法,在HIV-1感染者中监测HIV-1耐药性病毒株,掌握广东省HIV-1感染者在利用抗病毒药物治疗前是否存在耐药突变及其流行情况。方法从未接受高效抗逆转录病毒联合疗法(HAART)治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用套式PCR扩增目的基因片断,并对扩增片断进行序列测定和分析。结果HIV-1耐药性基因型检测法能够从HIV-1感染者血浆病毒载量大于1 000拷贝/ml以上、CD4低于400以下的样本中扩增到目的片断。在广东省50例未治疗对象中,低中度耐药相关突变例数为2例,占4%;高度耐药相关突变例数为0;总耐药相关突变例数为2例,占4%。结论HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测HIV-1感染者血浆中的耐药性病毒株的存在,并且方法提供的结果准确、可靠。对广东省未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者中耐药突变的检测表明,HIV-1感染者中存在病毒的耐药性突变,也反应了HIV毒株自然变异情况的存在。 展开更多
关键词 艾滋病病毒1 耐药性 蛋白酶基因 逆转录酶基因 RT—PCR 序列测定
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蛹虫草中抗HIV-1活性成分的研究 被引量:6
4
作者 傅明 乔文涛 +2 位作者 侯军 江筠 刘方 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期91-95,共5页
以蛹虫草子实体为材料,经水提醇沉后获得沉淀样品 P 和上清样品 L,初步抗 HIV-1蛋白酶检测显示活性成份集中在样品 L 中.进一步利用大孔吸附树脂和高压液相对 L 进行分离纯化,并对纯化样品的体外抗HIV-1蛋白酶活性和抗 HIV-1逆转录酶活... 以蛹虫草子实体为材料,经水提醇沉后获得沉淀样品 P 和上清样品 L,初步抗 HIV-1蛋白酶检测显示活性成份集中在样品 L 中.进一步利用大孔吸附树脂和高压液相对 L 进行分离纯化,并对纯化样品的体外抗HIV-1蛋白酶活性和抗 HIV-1逆转录酶活性进行了测定.结果显示,L 经大孔吸附树脂和高压液相分离纯化后得到三种物质均具有抗 HIV-1蛋白酶活性 f1,f2和 f3,其中 f1对 HIV-1蛋白酶抑制作用最强,比 L 提高了约29%;三种物质对 HIV-1逆转录酶均有一定的抑制作用. 展开更多
关键词 蛹虫草 hiv1蛋白酶 hiv1逆转录酶
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新型HIV-1蛋白酶抑制剂的研究进展(2015~2019年) 被引量:7
5
作者 周慧宇 朱梅 +2 位作者 张国宁 王菊仙 王玉成 《中国药物化学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期428-443,452,共17页
获得性免疫缺陷综合征是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种全球性流行疾病。针对HIV-1复制周期中的不同过程已有多种抗HIV-1药物应用于临床,其中HIV-1蛋白酶抑制剂通过干扰病毒成熟所需蛋白的产生来阻断病毒的复制,在抗病毒治疗中... 获得性免疫缺陷综合征是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的一种全球性流行疾病。针对HIV-1复制周期中的不同过程已有多种抗HIV-1药物应用于临床,其中HIV-1蛋白酶抑制剂通过干扰病毒成熟所需蛋白的产生来阻断病毒的复制,在抗病毒治疗中起着重要的作用,新型蛋白酶抑制剂的研发一直是抗HIV-1药物研究的热点和重点。本文对近5年来报道的新型HIV-1蛋白酶抑制剂的研究现状进行简要综述。 展开更多
关键词 获得性免疫缺陷综合征 hiv-1蛋白酶 抑制剂
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湖南省未经抗病毒治疗的HIV-1感染者耐药基因变异研究 被引量:7
6
作者 袁宏丽 郑煜煌 +2 位作者 周华英 李瑛 王敏 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第1期5-8,共4页
目的研究湖南省未经抗逆转录病毒治疗的人免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的HIV蛋白酶和逆转录酶区耐药基因变异情况,为更有效地开展高效抗逆转录病毒治疗提供参考。方法从184例研究对象的血浆中提取HIV-1RNA,采用套... 目的研究湖南省未经抗逆转录病毒治疗的人免疫缺陷病毒(HIV)/获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者的HIV蛋白酶和逆转录酶区耐药基因变异情况,为更有效地开展高效抗逆转录病毒治疗提供参考。方法从184例研究对象的血浆中提取HIV-1RNA,采用套式逆转录-聚合酶链反应扩增HIV-1POL基因片段,并对扩增片段进行序列测定直接分析。结果获得阳性结果的106例感染者中,蛋白酶基因区次要耐药变异以M36I、H69K、I13V和I93L为多,它们的累积可引起蛋白酶抑制剂的耐药。逆转录酶区的耐药变异较少见,但发现1例同时存在多个与核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)耐药基因相关的基因位点变异的HIV感染者。结论湖南省未经抗病毒治疗的HIV感染者中存在原发耐药相关基因位点变异,耐药基因变异处于较低水平的流行状态,感染者在抗病毒治疗开始前和后均应定期检测耐药基因突变情况以指导用药。 展开更多
关键词 AIDS hiv-1 耐药突变 蛋白酶基因 逆转录酶基因 抗药性 微生物
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6种藏族药提取物体外抗HIV-1活性的初步探讨 被引量:6
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作者 高丽娜 贾润清 +2 位作者 艾萍 胡秦 林鹏程 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期171-176,共6页
目的:对斑花黄堇、木藤蓼、野棉花、黄花铁线莲、黑心虎耳草和短尾铁线莲6种藏药提取物的体外抗艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒活性的评价及其作用机制的初步研究。方法:采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法细胞毒性实验和HIV-1假病毒单周期感染实... 目的:对斑花黄堇、木藤蓼、野棉花、黄花铁线莲、黑心虎耳草和短尾铁线莲6种藏药提取物的体外抗艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒活性的评价及其作用机制的初步研究。方法:采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法细胞毒性实验和HIV-1假病毒单周期感染实验检测提取物的体外抗病毒活性和细胞毒性;利用表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术、蛋白酶、整合酶和逆转录酶体外活性抑制实验初步探讨药物的作用靶点。结果:在这6种藏药提取物中,木藤蓼、野棉花、黑心虎耳草提取物具有较好的体外抗HIV-1病毒活性,半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为(6.47±0.78),(11.97±1.09),(11.7±0.79)mg·L-1,且细胞毒性较小,三者均具有较好的体外抑制整合酶活性。结论:木藤蓼、野棉花、黑心虎耳草提取物具有较好的抗HIV-1病毒的作用,其作用机制与整合酶的抑制作用有关。 展开更多
关键词 藏族药 hiv-1病毒 蛋白酶 整合酶 逆转录酶
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新疆紫草提取物抗HIV-1体外活性研究(Ⅱ) 被引量:3
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作者 买尔旦.马合木提 古丽仙.胡加 秦冬梅 《新疆医科大学学报》 CAS 2009年第4期377-379,共3页
目的:研究新疆紫草水溶性组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对HIV-13个关键酶的体外活性。方法:分别选用HIV-1整合酶(HIV-1 ingrase,HIV-1IN),HIV-1蛋白酶(HIV-1 protease,HIV-1PR),HIV-1逆转录酶(HIV-1 reverse transcriptase,HIV-1RT)体外药效筛选模... 目的:研究新疆紫草水溶性组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ对HIV-13个关键酶的体外活性。方法:分别选用HIV-1整合酶(HIV-1 ingrase,HIV-1IN),HIV-1蛋白酶(HIV-1 protease,HIV-1PR),HIV-1逆转录酶(HIV-1 reverse transcriptase,HIV-1RT)体外药效筛选模型,观察组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ对以上酶的抑制作用。结果:新疆紫草水溶性组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ对HIV-1IN具有一定的抑制活性,50%有效浓度(EC50)分别为2.21、14.71、5.71和66.08μg/ml。组分Ⅰ对HIV-1RT的抑制活性小,EC50为5.63μg/ml。结论:新疆紫草水溶性提取物对HIV-1IN具有抑制活性,对HIV-1PR均无抑制活性。 展开更多
关键词 新疆紫草 逆转录酶 整合酶 蛋白酶
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深圳地区男男同性恋人群中HIV-1感染者耐药基因变异研究 被引量:5
9
作者 赵广录 冯铁建 +5 位作者 洪福昌 王峰 蔡于茂 潘鹏 何亮 姜维娜 《中国艾滋病性病》 CAS 2009年第6期589-591,共3页
目的调查分析深圳地区未接受抗病毒治疗的男男同性恋人群中,人免疫缺陷病毒(HIV)感染者的耐药突变流行情况,以进一步指导抗病毒药物的选择。方法收集2007-2008年,从未接受抗病毒治疗的男男同性恋人群中HIV-1感染者的血浆,采用逆转录聚... 目的调查分析深圳地区未接受抗病毒治疗的男男同性恋人群中,人免疫缺陷病毒(HIV)感染者的耐药突变流行情况,以进一步指导抗病毒药物的选择。方法收集2007-2008年,从未接受抗病毒治疗的男男同性恋人群中HIV-1感染者的血浆,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和套式聚合酶链反应(Nested-PCR)方法,扩增蛋白酶(PR)l基因区和反转录酶(RT)基因区,并对扩增片断进行序列测定和分析,并用Mega等软件构建进化树及亚型分析。结果共获得94份HIV-1分离株的完整的PR和RT基因序列,发生耐药突变位点的35份(37.2%)样本序列检出42个耐药性突变位点,其中1份样本产生了核苷类抑制剂(NRTI)、非核苷类抑制剂(NNRTI)耐药性突变,以及蛋白酶抑制剂(PI)主要耐药突变和PI次要耐药突变;5份样本产生了NRTI耐药性突变,20份样本产生了NNRTI耐药性突变,9份样本产生了PI次要耐药突变。非核苷类耐药性突变、核苷类耐药性突变和PI次要耐药突变位点分别以V179E、V118I和A71V为主,分别占65.0%(13/20)、66.7%(4/6)和55.6%(5/9)。结论深圳地区男男同性恋人群中的、未经抗病毒治疗的HIV-1感染者中,存在原发性耐药相关基因突变位点变异,耐药基因变异处于较低水平的流行状态。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒I型 序列测定 蛋白酶基因 逆转录酶基因 耐药性
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深圳地区HIV-1感染者的本底耐药水平调查初探 被引量:5
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作者 吴永胜 马贞丽 +6 位作者 赵锦 赵广录 王晓辉 陈琳 甘永霞 张燕 冯铁建 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2008年第17期3388-3390,3393,共4页
[目的]建立一套完善,可靠,适合深圳人群的HIV-1耐药性基因型检测方法,调查分析深圳地区未接受抗病毒治疗的HIV感染者/AIDS患者的病毒株耐药突变及其本底流行情况。[方法]从未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用RT-PCR... [目的]建立一套完善,可靠,适合深圳人群的HIV-1耐药性基因型检测方法,调查分析深圳地区未接受抗病毒治疗的HIV感染者/AIDS患者的病毒株耐药突变及其本底流行情况。[方法]从未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆中提取病毒RNA,采用RT-PCR扩增目的基因片断,并对扩增片断进行序列测定和分析。[结果]通过HIV-1耐药性基因型检测法能够获得1300bp长度的目的基因片断。经序列分析所得的21份RT基因结果中有8份对NRTI产生耐药突变(38.5%),5份对NNRTI产生耐药突变(23.81%);另外分析所得的12份PR基因结果中1份产生对蛋白酶抑制剂主要耐药突变(8.33%),5份产生对蛋白酶抑制剂次要耐药突变(41.67%)。[结论]HIV-1耐药性基因型检测法能有效地监测HIV-1感染者血浆中的耐药性病毒株的存在,并且检测结果表明,深圳地区未接受抗病毒治疗的HIV-1感染者中已经存在耐药突变株。 展开更多
关键词 hiv-1 RT—PCR 序列测定 蛋白酶基因 逆转录酶基因 耐药性
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上海市浦东新区2014—2015年HIV-1感染者治疗前基因特性及耐药分析 被引量:5
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作者 马平 孙乔 +10 位作者 赵希畅 曹志钦 王涛 辛辛 张鹏 张枭 金樱枝 瞿镇宇 付文婕 陈盼盼 裴启星 《上海预防医学》 CAS 2016年第12期839-842,847,共5页
目的了解上海市浦东新区2014—2015年进入治疗的HIV-1感染者的基因特性及耐药情况。方法以巢式RT-PCR方法扩增91份治疗前HIV-1感染者样品HIV-1聚合酶片段,测序,构建进化树并进行HIV-1基因亚型分析,将获得的核酸序列提交至斯坦福大学HIV... 目的了解上海市浦东新区2014—2015年进入治疗的HIV-1感染者的基因特性及耐药情况。方法以巢式RT-PCR方法扩增91份治疗前HIV-1感染者样品HIV-1聚合酶片段,测序,构建进化树并进行HIV-1基因亚型分析,将获得的核酸序列提交至斯坦福大学HIV耐药数据库进行耐药位点分析。结果 91份样品测序成功53份,其中CRF01_AE重组体占67.9%(36/53),B亚型占7.5%(4/53),C亚型占3.8%(2/53),CRF07_BC重组体占20.8%(11/53)。在53条基因序列中41条检测到与HIV-1蛋白酶抑制剂(PIs)和逆转录酶抑制剂(RTIs)相关的共计66个突变位点,其中4个耐药突变位点与非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)及核苷类逆转录酶抑制剂(NRTIs)耐药相关,原发耐药率为7.5%(4/53);37条基因序列检测到的62个突变位点与HIV-1 PIs和RTIs继发耐药性突变或基因的多形态改变相关。结论 2014—2015年进入治疗的HIV-1感染者基因多种亚型并存,以CRF01_AE重组体为主。对基因序列发生的原发和继发耐药性突变应引起重视。 展开更多
关键词 艾滋病病毒 基因亚型 耐药 蛋白酶抑制剂 逆转录酶抑制剂
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蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性及机制的初步研究 被引量:3
12
作者 李春艳 曾艳波 +2 位作者 彭芳 戴好富 郑永唐 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1833-1838,共6页
目的研究蒲葵籽提取物的体外抗HIV-1活性,对有活性粗提物进行初步机制研究。方法采用细胞毒性、合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护实验和HIV-1 p24抗原测定等实验对蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性进行筛选和确认;采用重组HIV-1逆转录酶和蛋... 目的研究蒲葵籽提取物的体外抗HIV-1活性,对有活性粗提物进行初步机制研究。方法采用细胞毒性、合胞体抑制、HIV-1感染细胞保护实验和HIV-1 p24抗原测定等实验对蒲葵籽提取物体外抗HIV-1活性进行筛选和确认;采用重组HIV-1逆转录酶和蛋白酶活性抑制实验,融合阻断实验初步探讨活性粗提物的作用机制。结果蒲葵籽的醋酸乙酯(P3)提取物具有较强的体外抗HIV-1活性,P3抑制HIV-1诱导C8166细胞形成合胞体的EC50为5.64μg/mL,对C8166细胞的毒性较小,CC50大于200μg/mL,治疗指数(TI)大于35.46;P3抑制HIV-1急性感染中p24抗原表达的EC50为23.04μg/mL,抑制正常C8166细胞与慢性感染细胞H9/HIV-1 B融合的EC50为8.00μg/mL;P3在质量浓度为200μg/mL时,对HIV-1逆转录酶的抑制率为28.86%;P3抑制重组HIV-1蛋白酶活性的EC50为1.77μg/mL。结论蒲葵籽的醋酸乙酯提取物(P3)具有较强的体外抗HIV-1活性,其作用机制可能主要为阻断病毒进入和抑制HIV-1蛋白酶活性。 展开更多
关键词 蒲葵籽 提取物 hiv-1活性 hiv-1蛋白酶
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黑龙江省未经治疗的艾滋病患者蛋白酶和反转录酶基因型耐药性检测与分析 被引量:3
13
作者 周慧 王福祥 +1 位作者 周海舟 马英骥 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期484-487,共4页
目的 对黑龙江省流行的HIV-1毒株的蛋白酶基因及反转录酶基因进行基因型耐药分析,为开展大规模临床抗病毒治疗提供本底数据.方法 采用套式-PCR法扩增黑龙江省内49例HIV-1感染者及AIDS患者外周血单个核细胞中前病毒cDNA的部分蛋白酶和反... 目的 对黑龙江省流行的HIV-1毒株的蛋白酶基因及反转录酶基因进行基因型耐药分析,为开展大规模临床抗病毒治疗提供本底数据.方法 采用套式-PCR法扩增黑龙江省内49例HIV-1感染者及AIDS患者外周血单个核细胞中前病毒cDNA的部分蛋白酶和反转录酶基因,分析基因序列,与国际耐药数据库比对,分析耐药变异.结果 49例患者HIV毒株亚型分析为B'亚型.在扩增出蛋白酶基因的47份标本中,未发现对蛋白酶抑制剂的原发突变,但发现大量对蛋白酶抑制剂的次要突变,V771占91.5%、L63P占76.6%、I93L占74.5%、E35D占61.7%、R57K占19.1%、R41K占10.6%、A71V占8.5%、M36I占8.5%、L10I占6.4%、D60E占6.4%、L89M占4.2%和G16E占2.1%.在扩增出反转录酶基因的44份标本中,1份有反转录酶抑制剂的原发突变M184I,占2.3%,均有反转录酶抑制剂的次要突变,I135L/T/R/V占81.8%、V106I占22.7%、V179D/E占11.4%、R211K占9.1%、L214F占4.5%、V189I占4.5%和V108I占2.3%.结论 目前在黑龙江省未接受抗反转录病毒治疗的患者中未发现对蛋白酶抑制剂耐药的原发突变,耐药突变处于低水平,但应及时进行耐药突变检测,防止多重耐药和交叉耐药的出现和流行. 展开更多
关键词 hiv-1 反转录酶抑制剂 hiv蛋白酶抑制剂 突变 基因型 抗药性 病毒
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哈尔滨市39例HIV-1毒株原发耐药的变异研究 被引量:4
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作者 李文静 李航 +1 位作者 王福祥 李用国 《中国病毒病杂志》 CAS 2012年第6期440-445,共6页
目的分析哈尔滨市39例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者原发耐药的情况,明确哈尔滨市HIV/AIDS患者原发耐药的耐药谱,为今后该市确定对于HIV/AIDS患者进行高效抗逆转录病毒治疗方案提供参考。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对哈... 目的分析哈尔滨市39例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者原发耐药的情况,明确哈尔滨市HIV/AIDS患者原发耐药的耐药谱,为今后该市确定对于HIV/AIDS患者进行高效抗逆转录病毒治疗方案提供参考。方法应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法对哈尔滨市39例未经抗病毒治疗的HIV-1感染者血浆HIVpol基因序列进行扩增,分析耐药突变位点以及对各类抗病毒药物的耐药程度。结果 39例扩增阳性的pol区基因中,系统进化树分析结果显示:B亚型共18例(46.15%),包括泰国B′7例(17.95%),欧美B 11例(28.21%);CRF01_AE亚型15例(38.46%);07_BC亚型5例(12.82%);1例出现CRF01_AE与A亚型的重组(2.56%)。基因型耐药结果分析显示:针对蛋白酶抑制剂,未出现蛋白酶抑制剂(PI)主要耐药突变,9例出现次要耐药突变(L10I、A71T/V)。针对核苷类逆转录酶抑制剂(NRTI)和非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTI),出现3例核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变(K219Q、T69N),导致对去羟肌苷(ddI)、齐多夫定(AZT)、司他夫定(d4T)的潜在低度耐药;出现10例非核苷类逆转录酶抑制剂耐药突变(V179D/E),导致对依非韦伦(EFV)、奈韦拉平(NVP)潜在低度耐药。结论哈尔滨市未经治疗的HIV-1感染者中原发耐药的发生率出现上涨趋势,需引起足够的重视。 展开更多
关键词 hiv-1 反转录酶 蛋白酶 耐药相关变异
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W301水分子在HIV-1蛋白酶和配体ABT-538结合中作用的QM/MM研究 被引量:4
15
作者 刘宝山 张少龙 张庆刚 《山东师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2008年第4期32-34,共3页
结晶水分子W301在几乎所有的HIV-1蛋白酶(HIV-1PR)和配体的晶体结构中出现.在HIV-1PR中A链天门冬氨酸残基Asp25质子化状态或B链Asp25质子化状态下,QM/MM模拟后MM-GBSA方法计算得到W301水分子在HIV-1PR/ABT-538结合中的自由能贡献分别为-... 结晶水分子W301在几乎所有的HIV-1蛋白酶(HIV-1PR)和配体的晶体结构中出现.在HIV-1PR中A链天门冬氨酸残基Asp25质子化状态或B链Asp25质子化状态下,QM/MM模拟后MM-GBSA方法计算得到W301水分子在HIV-1PR/ABT-538结合中的自由能贡献分别为-16.88kJ/mol、-17.63kJ/mol,W301水分子在HIV-1PR/ABT-538的结合中起到了关键的作用.进一步分析发现W301水分子与HIV-1PR和ABT-538分别形成了两个、四个氢键. 展开更多
关键词 QM/MM方法 hiv-1蛋白酶 结合自由能 MM—GBSA
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HIV-1蛋白酶的表达、纯化及其抑制剂体外筛选方法的建立 被引量:4
16
作者 王云华 王睿睿 +3 位作者 杨柳萌 李健峰 徐维明 郑永唐 《中国病毒学》 CSCD 2006年第2期126-130,共5页
从HIV-1IIIB病毒RNA经RT-PCR得到HIV-1蛋白酶编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1蛋白酶表达载体。阳性克隆转染E.coliBL21DE3,经IPTG诱导,蛋白酶以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白量的40%。包涵体经TritonX-100洗涤后溶解于8M尿... 从HIV-1IIIB病毒RNA经RT-PCR得到HIV-1蛋白酶编码序列,克隆到pet28a质粒中构建HIV-1蛋白酶表达载体。阳性克隆转染E.coliBL21DE3,经IPTG诱导,蛋白酶以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白量的40%。包涵体经TritonX-100洗涤后溶解于8M尿素,溶解后的蛋白溶液经sephacyls-200H.R分子筛柱纯化后纯度达到90%以上,收集蛋白酶峰稀释复性并通过超滤进行浓缩。经检测,纯化的蛋白酶具有较高的活性。用荧光标记的蛋白酶底物检测不同浓度indinavir对蛋白酶活性的影响,表明该方法可以用于蛋白酶抑制剂的筛选。 展开更多
关键词 hiv-1 蛋白酶 表达 纯化 抑制剂
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HIV-1蛋白酶与抑制剂BEG相互作用的分子对接计算研究 被引量:4
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作者 伊长虹 梁志强 +3 位作者 王伟 张少龙 张庆刚 陈建中 《原子与分子物理学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期718-723,共6页
本文使用分子对接方法和MM/PBSA方法计算抑制剂BEG与HIV-1蛋白酶的结合自由能,结果表明范德华相互作用主宰了BEG与HIV-1蛋白酶的结合,还证明分子对接采用的分子力场相比于Amber12力场更适合于BEG-HIV蛋白酶系统.本文采用基于残基的自由... 本文使用分子对接方法和MM/PBSA方法计算抑制剂BEG与HIV-1蛋白酶的结合自由能,结果表明范德华相互作用主宰了BEG与HIV-1蛋白酶的结合,还证明分子对接采用的分子力场相比于Amber12力场更适合于BEG-HIV蛋白酶系统.本文采用基于残基的自由能分解方法计算了抑制剂-残基相互作用,结果表明残基Leu23、Gly49、Ile50、Val82、Ile84、Asp25′、Gly27′、Ala28′、Gly49′、Ile50′和Ile84′与BEG产生了较强的相互作用,同时也证明CH-π和CH-O相互作用驱动了抑制剂BEG与HIV-1蛋白酶的结合.我们期望这个研究能为艾滋病治疗药物的合理化设计提供理论上的指导和实验上的参考. 展开更多
关键词 分子动力学 结合自由能 H IV-1蛋白酶 分子对接方法
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Ⅰ型人免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂临床应用新进展 被引量:2
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作者 丁晓明 刘新泳 《中国新药与临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期623-627,共5页
HIV蛋白酶是病毒复制的必需酶,是寻找治疗获得性免疫缺陷病药物的重要靶点之一。本文对HIV蛋白酶抑制剂的特点、临床药效及不良反应的研究近况进行归纳总结并作此综述。
关键词 获得性免疫缺陷综合征 hiv1 hiv 蛋白酶抑制药
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HIV-1蛋白酶和逆转录酶抗药基因变异检测方法的建立及临床应用 被引量:3
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作者 俞敏 William Kabat +3 位作者 王健伟 洪涛 Ram Yogev 赵玉琪 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期325-329,共5页
目的 应用现有DNA序列分析技术对人类免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)的蛋白酶 (PR)和逆转录酶 (RT)基因进行简便、快速、准确的序列分析 ,在临床上为HIV 1患者治疗方案的确定提供可靠依据。方法 从HIV 1感染者血清中提取RNA ,用套式逆转录... 目的 应用现有DNA序列分析技术对人类免疫缺陷病毒 1型 (HIV 1)的蛋白酶 (PR)和逆转录酶 (RT)基因进行简便、快速、准确的序列分析 ,在临床上为HIV 1患者治疗方案的确定提供可靠依据。方法 从HIV 1感染者血清中提取RNA ,用套式逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增HIV 1的PR和RT基因片段 ,并对此片段进行核苷酸序列分析。结果 本方法对血清中HIV 1RNA含量约 2 0 0 0拷贝 ml以上的样品都能有效扩增。在序列分析时背景干扰少 ,对 2 5 %左右的混合序列均能准确反映。通过对临床治疗病人进行动态序列分析观察 ,发现在药物治疗过程中 ,病人血浆中HIV 1RNA含量变化与PR和RT基因抗药性变异具有很大相关性。结论 PR和RT基因序列分析方法能够及时、准确地反映HIV 1患者在抗病毒药物治疗过程中病毒的变异情况。该方法的建立能在临床上能为不同患者治疗方案的确定提供直接。 展开更多
关键词 hiv-1 蛋白酶 逆转录酶 序列分析 耐药性
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分子动力学模拟研究质子化态在HIV-1 Protease-Indinavir复合物中的作用 被引量:3
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作者 时术华 扈国栋 +2 位作者 陈建中 张少龙 张庆刚 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第24期2791-2797,共7页
I型人体免疫缺陷病毒(HIV-1)蛋白酶中Asp25/Asp25'的质子化对于理论研究HIV-1蛋白酶和抑制剂的作用机制以及氨基酸变异对抗药性的影响有重要意义.分别对Protease-Indinavir(PR-IDV)复合物的六种可能的质子化态进行了5ns的分子动力... I型人体免疫缺陷病毒(HIV-1)蛋白酶中Asp25/Asp25'的质子化对于理论研究HIV-1蛋白酶和抑制剂的作用机制以及氨基酸变异对抗药性的影响有重要意义.分别对Protease-Indinavir(PR-IDV)复合物的六种可能的质子化态进行了5ns的分子动力学模拟,分析了不同状态对动力学特征和结构的影响,用molecular mechanics/Possion-Boltzman surfacearea(MM-PBSA)方法计算了PR和IDV在各种状态下的结合自由能.计算结果说明A链Asp25的OD2的质子化是最为可能的状态.对PR-IDV复合物中起到媒介作用的水分子与PR-IDV复合物形成的氢键进行了分析,分析结果说明不同的质子化态对水分子在PR-IDV复合物中所起的媒介作用没有影响,这一结果与我们先前对PR-BEA369复合物的研究不同.我们的研究结果为更高效的PR抑制剂的设计以及PR氨基酸变异对药物抗药性的研究提供了理论上的指导. 展开更多
关键词 分子动力学 MM-PBSA 结合自由能 hiv-1蛋白酶 质子化态
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