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HLA-G α1结构域Met^(76)和Gln^(79)在KIR2DL4特异性识别中的作用研究 被引量:2
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作者 颜卫华 林爱芬 范丽安 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期875-878,共4页
目的探讨HLA-Gα1结构域中特异的Met^(76)和Gln^(79)两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用。方法采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgG Fc段的可溶性融合蛋白;利用“桥式”PCR和“点突变”方法,将位于HLA-G... 目的探讨HLA-Gα1结构域中特异的Met^(76)和Gln^(79)两个位点在HLA-G特异性受体KIR2DL4识别中的作用。方法采用真核表达载体CD51neg1,克隆表达KIR2DL4胞外区与IgG Fc段的可溶性融合蛋白;利用“桥式”PCR和“点突变”方法,将位于HLA-G目的基因α1结构域中编码Met^(76)和Gln^(79)的密码子突变为Ala^(76,79)(HLA-mG),通过逆转录病毒表达载体分别使野生型HLA-G及其突变体在HLAI分子阴性的K562细胞上表达。流式细胞术分别测定KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白与野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体结合的荧光强度,通过比较两者的平均荧光强度分析HLA-G分子Mel^(76)、Gln^(79)残基在HLA-G与其受体KIR2DL4识别过程中的作用。结果Western blot结果显示,本实验成功表达KIR2DL4-IgG Fc融合蛋白。FACS结果表明,野生型HLA-G及Met^(76)、Gln^(79)→Ala^(76,79)HLA-G突变体在K562细胞上高表达。Met^(76)、Gln^(79)突变为Ala^(76,79)后能显著影响KIR2DL4对HLA-G分子的识别。结论HLA-Gα1结构域中Met^(76)和Gln^(79)可能是其特异性受体KIR2DL4识别的关键位点。 展开更多
关键词 KIR2DL4 HLA-g 受体识别
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NK细胞在重度子痫前期发病中的作用 被引量:2
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作者 张展 贾莉婷 +7 位作者 侯磊 王雪梅 常彩红 杨如镜 张曦 刘胜洪 郑芳 龚非力 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期2457-2461,共5页
目的:探讨NK细胞在重度子痫前期发病中的作用及其机制。方法:采集重度子痫前期晚孕、正常晚孕孕妇外周血及其新生儿脐血,PERCOLL分离NK细胞,SAP法计数,MTT法检测其增殖活性,[51CR]释放法检测其杀伤活性,免疫组织化学法检测胎盘蜕膜组织N... 目的:探讨NK细胞在重度子痫前期发病中的作用及其机制。方法:采集重度子痫前期晚孕、正常晚孕孕妇外周血及其新生儿脐血,PERCOLL分离NK细胞,SAP法计数,MTT法检测其增殖活性,[51CR]释放法检测其杀伤活性,免疫组织化学法检测胎盘蜕膜组织NK细胞数量及HLA-G蛋白表达水平。结果:①重度子痫前期患者外周血、蜕膜组织及其新生儿脐血中NK细胞数量均显著高于正常晚孕组(P<0.05);②重度子痫前期患者外周血及其新生儿脐血NK细胞增殖和杀伤活性均高于正常晚孕组(P<0.05);③重度子痫前期患者胎盘蜕膜HLA-G蛋白表达水平显著低于正常晚孕组(P<0.05)。结论:重度子痫前期患者NK细胞功能异常增强,可能参与疾病发生。 展开更多
关键词 子痫 杀伤细胞 天然 hiag抗原 蜕膜
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