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橡胶树乳管表达HbHMGR1基因双元表达载体构建与鉴定 被引量：4
1
作者 贺永国 李哲 +5 位作者 黄绵佳 曾宪海 林位夫 刘洁琼 张春红 马晓晓 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期163-168,共6页
【目的】克隆橡胶树乳管特异性强启动子HEV2.1(PHEV2.1),构建天然橡胶生物合成途径关键限速酶基因(Hb HMGR1)的乳管特异性植物表达载体,为橡胶树遗传转化奠定基础。【方法】根据已报道的HEV2.1序列(Gen Bank登录号AY247789.1)设计1对特... 【目的】克隆橡胶树乳管特异性强启动子HEV2.1(PHEV2.1),构建天然橡胶生物合成途径关键限速酶基因(Hb HMGR1)的乳管特异性植物表达载体,为橡胶树遗传转化奠定基础。【方法】根据已报道的HEV2.1序列(Gen Bank登录号AY247789.1)设计1对特异引物,采用PCR从橡胶树热研7-33-97基因组DNA中克隆PHEV2.1,与Hb HMGR1基因融合构建橡胶树乳管特异性植物表达载体,并以PCR和限制性内切酶酶切进行鉴定。【结果】用特异引物可从热研7-33-97基因组DNA中扩增获得1852 bp的PHEV2.1片段,其与AY247789.1启动子序列的同源性为98.6%。将PHEV2.1与Hb HMGR1基因融合构建乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1,经PCR和限制性内切酶酶切鉴定证明植物表达载体构建成功。【结论】将PHEV2.1和Hb HMGR1基因先构建到p CAMBIA3301载体上再克隆至p CAMBIA2301载体上,能有效解决直接克隆至p CAMBIA2301载体上出现Pst I突变、阻碍载体构建的难题,成功构建获得乳管特异性植物表达载体p CAMBIA2301-PHEV2.1-Hb HMGR1。 展开更多
关键词 橡胶树 乳管特异性启动子PhEV2.1 hbhMGR1基因 植物表达载体 构建 鉴定
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巴西橡胶树橡胶生物合成关键基因REF,SRPP,HRT1和HRT2的表达分析 被引量：4
2
作者 王艺航 康桂娟 +2 位作者 黎瑜 覃怀德 曾日中 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期3933-3943,共11页
橡胶延长因子REF、小橡胶粒子蛋白SRPP、橡胶转移酶HRT1和HRT2是巴西橡胶树胶乳中的主要橡胶粒子蛋白,它们在橡胶生物合成中发挥重要作用,与橡胶树胶乳产量密切相关。为进一步探明REF、SRPP、HRT1和HRT2的基因表达与橡胶树胶乳产量之间... 橡胶延长因子REF、小橡胶粒子蛋白SRPP、橡胶转移酶HRT1和HRT2是巴西橡胶树胶乳中的主要橡胶粒子蛋白,它们在橡胶生物合成中发挥重要作用,与橡胶树胶乳产量密切相关。为进一步探明REF、SRPP、HRT1和HRT2的基因表达与橡胶树胶乳产量之间的关系,以成龄未开割橡胶树无性系热研7-33-97胶乳为材料,通过实时荧光定量PCR的方法,对割胶伤害、外源乙烯利和茉莉酸刺激的处理条件下,橡胶树胶乳中的REF、SRPP、HRT1和HRT2的基因表达进行了分析。结果表明,随着割胶刀次的增加,REF基因在第4刀的表达量最高,而SRPP、HRT1和HRT2基因则在第6刀表达量达到最高;而在乙烯利和茉莉酸刺激处理下,REF、SRPP、HRT1和HRT2基因均在刺激8 h后表达量达到最高。因此,割胶（机械伤害）、外源乙烯利和茉莉酸刺激促进橡胶树产胶可能与它们提高橡胶生物合成相关橡胶粒子蛋白REF、SRPP、HRT1和HRT2的基因表达具有密切关系。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 胶乳 REF SRPP hRT1 hRT2
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钾水平对巴西橡胶树幼苗磷组分和酸性磷酸酶活性的影响
3
作者 吴敏 何鹏 +1 位作者 韦家少 吴炳孙 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第31期19191-19193,19197,共4页
[目的]研究不同钾水平对巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)幼苗各器官磷组分和酸性磷酸酶活性的影响。[方法]采用水培试验。试验材料为巴西橡胶树RRIM600种子实生幼苗,K2O浓度分别为0、1、10、50、250 mg/L。[结果]缺钾降低了橡胶幼苗各... [目的]研究不同钾水平对巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)幼苗各器官磷组分和酸性磷酸酶活性的影响。[方法]采用水培试验。试验材料为巴西橡胶树RRIM600种子实生幼苗,K2O浓度分别为0、1、10、50、250 mg/L。[结果]缺钾降低了橡胶幼苗各器官中可溶性磷含量及其比例,但提高了橡胶幼苗各器官中不可溶性磷含量及其比例。橡胶幼苗各器官中可溶性磷含量差异显著,且大小顺序为根>皮>叶,而不可溶性磷含量在根中极显著大于叶和茎部的皮,但根和茎部的皮中不可溶性磷含量差异不显著。酸性磷酸酶活性在各器官之间差异极显著,但同一器官中,不同钾营养浓度下,酸性磷酸酶活性则差异不显著。[结论]该揭示了不同钾水平下天然橡胶幼苗不同器官磷组分特性和酸性磷酸酶活性的变化特点,可以为天然橡胶生长中的磷钾营养合理配施奠定理论依据。 展开更多
关键词 钾水平 巴西橡胶树 磷组分 酸性磷酸酶
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巴西橡胶树HbSIP1基因启动子的克隆和序列分析
4
作者 朱家红 徐靖 +2 位作者 于晓惠 畅文军 张治礼 《中国农学通报》 CSCD 2013年第4期5-9,共5页
为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体p... 为研究橡胶焦磷酸酶基因的表达特征及其在天然橡胶生物合成中调控机理,根据巴西橡胶树焦磷酸酶基因HbSIP1序列,利用GenomeWalker方法对HbSIP1基因启动子序列进行了分离,对其序列进行了生物信息学分析,并构建了含有该序列的植物表达载体pSIP1-1381Z。结果表明:分离获得了1198bp的HbSIP1基因启动子序列,该序列具有真核生物典型启动子结构特征,并含有众多应答激素和胁迫信号的调控元件。对HbSIP1的启动子区的克隆和分析,为进一步研究HbSIP1的功能和表达调控机制奠定基础。 展开更多
关键词 巴西橡胶树 焦磷酸酶 启动子 调控元件
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