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一株嗜热菌的分离鉴定及其苯酚降解特性 被引量:28
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作者 唐赟 刘沐之 +2 位作者 梁凤来 冯露 刘如林 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期39-44,共6页
从油田地层水中分离到一株嗜热并高效降解苯酚的BF80菌株,其最适生长和降解苯酚的温度为60℃65℃。利用API50CHB/E系统和16SrDNA序列分析对菌株BF80进行了分类鉴定,该菌株的形态和生理生化特性与Geobacillusthermoglucosidasius基本相同... 从油田地层水中分离到一株嗜热并高效降解苯酚的BF80菌株,其最适生长和降解苯酚的温度为60℃65℃。利用API50CHB/E系统和16SrDNA序列分析对菌株BF80进行了分类鉴定,该菌株的形态和生理生化特性与Geobacillusthermoglucosidasius基本相同,其16SrDNA序列与GeobacillusthermoglucosidasiusBGSCW95A1(=ATCC43742)的相似性为99·22%。在接种量为1%的条件下,该菌在20h内能完全降解3mmol/L的苯酚;在pH值5·59·0范围内能保持对苯酚良好的降解能力,并在12mmol/L苯酚的无机盐培养基中也能生长和降解苯酚,表明该菌能耐受高浓度苯酚并可用于高温含酚废水的生物处理。 展开更多
关键词 geobacillus thermoglucosidasius 嗜热菌 苯酚 生物降解
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Geobacillus研究进展 被引量:22
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作者 周卫民 杨世忠 +1 位作者 T.N.Nazina 牟伯中 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期46-49,共4页
Geobacillus是国际上2001年新命名的一类细菌。由于其具有嗜热、兼性厌氧,降解烃和产生表面活性剂的特性,在微生物采油、环境治理等领域中有潜在应用价值;同时,这类细菌可能具有特殊的功能基因和特种酶,对构建工程菌亦具有重要的研究价... Geobacillus是国际上2001年新命名的一类细菌。由于其具有嗜热、兼性厌氧,降解烃和产生表面活性剂的特性,在微生物采油、环境治理等领域中有潜在应用价值;同时,这类细菌可能具有特殊的功能基因和特种酶,对构建工程菌亦具有重要的研究价值。对Geobacillus的研究历史、分类组成和生物学特性、生态分布及其分子生物学研究和应用进行了综述。 展开更多
关键词 geobacillus 生物学特性 分子生物学 应用
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3株高温蛋白酶产生菌的分离与鉴定 被引量:17
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作者 张燕新 赵印 +3 位作者 许敬亮 吴莹 胡冰 沈标 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期561-564,共4页
从云南温泉的污泥样品中分离到3株产蛋白酶的高温菌SB11、SB31和SC5,通过其形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对分析等,初步鉴定这3株菌都属于土芽孢杆菌属(Geobacillus),其最适生长温度为60℃,最适pH为6.三者的蛋白酶活力分别可... 从云南温泉的污泥样品中分离到3株产蛋白酶的高温菌SB11、SB31和SC5,通过其形态特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对分析等,初步鉴定这3株菌都属于土芽孢杆菌属(Geobacillus),其最适生长温度为60℃,最适pH为6.三者的蛋白酶活力分别可达35.6、26.1和26.6UmL-1,最适酶反应温度都在70℃以上,其中菌株SB31的蛋白酶其最适酶反应温度高达80℃,远高于一般动植物来源的蛋白酶. 展开更多
关键词 高温蛋白酶 高温菌 土芽孢杆菌属
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堆肥中高温降解菌的筛选、鉴定及堆肥效果 被引量:15
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作者 程旭艳 霍培书 +2 位作者 尚晓瑛 王定美 李季 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期105-111,共7页
为分离得到高温高效降解菌,促进堆肥腐熟、提高堆肥品质,采用稀释平板法和水解试验初筛以及酶活性复筛的方法,从好氧堆肥样品中分离得到一株可同时高效降解纤维素、蛋白质和淀粉的高温细菌HN-5,其纤维素酶活性、蛋白酶活性和α-淀粉酶... 为分离得到高温高效降解菌,促进堆肥腐熟、提高堆肥品质,采用稀释平板法和水解试验初筛以及酶活性复筛的方法,从好氧堆肥样品中分离得到一株可同时高效降解纤维素、蛋白质和淀粉的高温细菌HN-5,其纤维素酶活性、蛋白酶活性和α-淀粉酶活性分别为7.308、13.296和76.136U/mL。通过对菌株的形态特征观察、部分生理生化实验和16SrDNA基因鉴定,初步确定其为Geobacillus属的菌株。菌株最适生长温度为60℃;最适生长pH为6.0;在NaCl质量浓度为10mg/mL、装液量为10%(体积分数)时,菌株生长量最大。将HN-5接种至鸡粪+锯末堆肥中进行堆肥效果验证,结果表明接种HN-5可以有效地促进堆肥升温,延长高温期持续时间。 展开更多
关键词 高温细菌 筛选 鉴定 geobacillus 堆肥效果
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高温产生物乳化剂菌株SL-1的性能评价及物模驱油研究 被引量:8
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作者 李彩风 吴晓玲 +2 位作者 刘涛 巴燕 曹嫣镔 《安徽大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2014年第1期90-95,共6页
从胜利油田油井产出液中获得一株高温产乳化剂菌SL-1,经形态观察和16SrDNA基因序列分析,初步判定为嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus steaothermophilus).耐温性和耐盐性实验显示,菌株SL-1最适生长温度为65~70℃,最高耐受盐度为8%.... 从胜利油田油井产出液中获得一株高温产乳化剂菌SL-1,经形态观察和16SrDNA基因序列分析,初步判定为嗜热脂肪地芽孢杆菌(Geobacillus steaothermophilus).耐温性和耐盐性实验显示,菌株SL-1最适生长温度为65~70℃,最高耐受盐度为8%.高温下,该菌能以原油为唯一碳源生长且能有效合成、分泌生物乳化剂,原油乳化现象显著.发酵实验显示该菌发酵液的乳化指数高达99%,乳化效果稳定,发酵62 h后生物乳化剂产量达到最大.高温物模驱油实验结果发现,注入SL-1发酵液后可提高原油采收率8.3%,菌株SL-1有望应用于高温油藏进行微生物驱油试验. 展开更多
关键词 嗜热微生物 地芽孢杆菌 生物乳化剂 烃类乳化 物模驱油
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餐厨垃圾高温好氧生物减量菌种的筛选及特性 被引量:7
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作者 吉雨霁 王娜 +2 位作者 杨宁 史吉平 刘莉 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期4513-4524,共12页
【背景】随着餐厨垃圾产生量的逐步提高,如何实现其快速降解,成为餐厨垃圾处理亟待解决的问题。餐厨垃圾的高温好氧生物减量技术是一种可以快速降解餐厨垃圾的有效方法。【目的】筛选能够适应餐厨垃圾环境且具有高效降解餐厨垃圾中有机... 【背景】随着餐厨垃圾产生量的逐步提高,如何实现其快速降解,成为餐厨垃圾处理亟待解决的问题。餐厨垃圾的高温好氧生物减量技术是一种可以快速降解餐厨垃圾的有效方法。【目的】筛选能够适应餐厨垃圾环境且具有高效降解餐厨垃圾中有机物能力的菌株,以提高餐厨垃圾的降解效率和减量效果。【方法】采用温度梯度耐受性实验和餐厨垃圾浸出液高油高盐耐受性实验进行菌种初筛,并利用产酶培养基复筛及餐厨垃圾生物减量实验验证。【结果】通过初筛、复筛和功能验证,最终获得4株生物减量效果优良的菌株N3-1、C7、N3-3和G6-1,其对餐厨垃圾挥发性固体(volatile solid,VS)的降解率分别为36.95%、33.23%、32.83%和31.91%,是对照组的3.02、2.71、2.68和2.61倍。经鉴定,这4株菌分别属于热嗜油地芽孢杆菌(Geobacillus thermoleovorans)、史氏芽孢杆菌(Bacillus smithii)、热解木糖地芽孢杆菌(Geobacillus caldoxylosilyticus)和立陶宛地芽孢杆菌(Geobacillus lituanicus)。【结论】筛选出的4株菌均具有较强的餐厨垃圾原料适应性和高效的生物降解能力,为开发餐厨垃圾高温好氧复合菌剂奠定了基础,并为实现餐厨垃圾减量化、无害化处理和资源化利用提供了技术支持。 展开更多
关键词 餐厨垃圾 生物减量 高温好氧菌 地芽孢杆菌 芽孢杆菌
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胜利油田沾3区块油藏中Geobacillus菌的激活研究 被引量:5
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作者 李彩风 李阳 +3 位作者 吴昕宇 曹嫣镔 汪卫东 包木太 《中国石油大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第1期163-167,共5页
利用16S rRNA克隆文库技术分析胜利油田沾3区块油藏样品的微生物群落结构,使用不同激活剂对沾3区块油藏样品进行内源微生物激活,对激活后样品进行乳化能力、产生表面活性物质能力评价及微生物群落结构分析,并开展物理模拟驱油实验。结... 利用16S rRNA克隆文库技术分析胜利油田沾3区块油藏样品的微生物群落结构,使用不同激活剂对沾3区块油藏样品进行内源微生物激活,对激活后样品进行乳化能力、产生表面活性物质能力评价及微生物群落结构分析,并开展物理模拟驱油实验。结果表明:沾3区块油藏样品中含有2%的Geobacillus,该菌是沾3区块油藏内源微生物中产生表面活性物质、发挥乳化功能的关键菌群;加入适宜的激活剂体系可以选择性激活该类细菌,使其成为优势菌;利用选择性激活Geobacillus的配方激活沾3区块油藏内源微生物,可以在水驱基础上提高原油采收率10.8%。 展开更多
关键词 geobacillus 乳化能力 激活 内源微生物 微生物种群
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产纤维素酶嗜热地芽孢杆菌HTA426的筛选鉴定、酶学性质分析及其应用 被引量:7
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作者 张耿崚 韩业钜 +5 位作者 陈细妹 王小琴 约比 黄佳钦 叶志超 李清荷 《环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期1444-1453,共10页
为解决现今纤维素酶生产的低效率和高成本问题,以及实现利用木质纤维素废弃物生产纤维素酶的目的,本研究结合羧甲基纤维素钠(CMC)水解圈法和胞外酶活测定法,从嗜热菌资源丰富的温泉区土壤中筛选出一株具有产羧甲基纤维素酶(CMCase)的嗜... 为解决现今纤维素酶生产的低效率和高成本问题,以及实现利用木质纤维素废弃物生产纤维素酶的目的,本研究结合羧甲基纤维素钠(CMC)水解圈法和胞外酶活测定法,从嗜热菌资源丰富的温泉区土壤中筛选出一株具有产羧甲基纤维素酶(CMCase)的嗜热地芽孢杆菌HTA426(Geobacillus kaustophilus HTA426).对菌株生产的酶进行酶学性质分析并将菌株应用于以木质纤维素为替代碳源产纤维素酶.采用硫酸铵沉淀法和离子交换层析法对粗酶液进行二级纯化,回收率和纯化倍数分别为10.14%和5.12,纯化后的CMCase的分子量约为40 k Da.其CMCase活性在温度为60℃,pH为7.0下达到最高.培育5 h后,酶的活性在温度为50~70℃下也能保持相对稳定.HAT426菌株能够在已经经过碱处理的甘蔗渣、稻杆及水葫芦为碳源的培养液中生长和生产CMCase.以甘蔗渣为碳源的培养液最适合于生产CMCase,其活性为103.67U·m L^(-1).菌株HTA426是首次报道的具有产纤维素酶能力的嗜热地芽孢杆菌,经纯化的纤维素酶具有广泛的pH适用性(pH 5~8)和良好的热稳定性(50~70℃),在运用于木质纤维素能源化中具有较大潜力. 展开更多
关键词 地芽孢杆菌 纤维素酶 酶学性质 木质纤维素 碱处理
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Geobacillus sp.A27的分离筛选及其淀粉酶酶学性质研究 被引量:4
9
作者 王晓燕 高润池 +5 位作者 廖昌珑 孟艳芬 唐湘华 李俊俊 许波 黄遵锡 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期151-155,共5页
用淀粉平板透明圈法,从分离自腾冲热泉的高温菌中筛选到一株产胞外淀粉酶的菌株,经16sRNA序列比对,在Genbank中与Geobacillus sp.sbs4s有99%同源性,定名为Geobacillus sp.A27。该菌最适生长温度为60~65℃,在LB培养基上不生长,但能在以... 用淀粉平板透明圈法,从分离自腾冲热泉的高温菌中筛选到一株产胞外淀粉酶的菌株,经16sRNA序列比对,在Genbank中与Geobacillus sp.sbs4s有99%同源性,定名为Geobacillus sp.A27。该菌最适生长温度为60~65℃,在LB培养基上不生长,但能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长,并能将来自植物种子、根茎的淀粉质底物水解为以麦芽二糖为主的麦芽寡糖。Geobacillus sp.A27菌株产生的胞外α-淀粉酶最适pH5.6,最适温度70℃。金属离子Fe3+、Cu2+、EDTA对酶活有显著抑制作用,推测AmyA27可能属于金属酶。粗酶液经饱和硫酸胺沉淀、无水乙醇沉淀、8%分离胶的SDS-PAGE电泳和蛋白质复性,确定该淀粉酶分子量为67kD。 展开更多
关键词 α-淀粉酶 geobacillus 筛选 酶学性质
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Geobacillus sp.POT5 α-淀粉酶基因的克隆及表达 被引量:2
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作者 杨灵 侯瑛 +2 位作者 余霖霖 刘国生 张志芳 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期135-139,共5页
从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌... 从高温环境土壤中分离到1株能在75℃生长并产生α-淀粉酶的菌株(POT5),扩增了其16Sr DNA核苷酸序列,序列分析表明该菌属于Geobacillus属.根据该属全基因序列测定数据中推定的α-淀粉酶基因,利用PCR方法从G.sp.POT5基因组中扩增得到该菌α-淀粉酶基因(amyP).序列分析表明该基因全长1.545 kb、G+C含量51.33%,编码514个氨基酸.构建重组表达质粒pET22b(+)-amyP,转化Escherichia coliBL21系统,表达产物经SDS-PAGE分析、活性染色及淀粉酶活力分析,表明amyP基因得到了表达,且产物具有生物学活性. 展开更多
关键词 geobacillus 16SrDNA 淀粉酶 基因表达
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乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase的影响 被引量:5
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作者 林晓栩 林新坚 +2 位作者 邱宏端 陈龙军 陈济琛 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期114-120,126,共8页
以重组环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)表达菌株BL21(DE3)作为研究对象,比较IPTG和乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase量的影响,确定优化诱导方式。以Geobacillus CHB1的基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆CGTase基因;利用分子操作技术构建... 以重组环糊精葡萄糖基转移酶(CGTase)表达菌株BL21(DE3)作为研究对象,比较IPTG和乳糖诱导对重组大肠杆菌表达CGTase量的影响,确定优化诱导方式。以Geobacillus CHB1的基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆CGTase基因;利用分子操作技术构建携带有大肠杆菌Omp A信号肽的分泌型表达质粒p EASY-E2-Omp A-CGT,重组质粒热激转化至Escherichia coli BL21中进行表达;在摇瓶发酵条件下,分别以IPTG和乳糖作为诱导剂,通过SDSPAGE分析和测定胞外酶活,确定优化诱导方式。CGTase基因在Escherichia coli BL21中实现表达,且具有一定量的重组CGTase分泌至胞外;乳糖诱导的蛋白表达量优于IPTG诱导,不易形成包涵体;乳糖最佳的诱导起始菌浓度OD600为1.4,诱导浓度、温度分别为0.5%和25℃,分批流加乳糖5次和一次性加入,重组CGTase表达量无明显差异;经初步优化,胞外酶活达19.87 U/m L。Geobacillus CHB1 CGTase基因在大肠杆菌中成功实现胞外表达,乳糖可替代IPTG诱导重组CGTase。 展开更多
关键词 geobacillus CHB1 环糊精葡萄糖基转移酶 乳糖 IPTG 诱导表达
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Study on the Optimization of Bio-emulsifier Production by Geobacillus sp.XS2 Based on Response Surface Methodology 被引量:2
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作者 XU Shuang1,2,HUANG Zhi-yong2,LU Fu-ping1,WANG Yong-li3 1.Key Laboratory of Industrial Microbiology,Ministry of Education,College of Biotechnology,Tianjin University of Science & Technology,Tianjin 300457,China 2.Tianjin Institute of Industrial Biotechnology,Chinese Academy of Sciences,Tianjin 300308,China 3.Key Laboratory of Oil and Gas Resources Study,Chinese Academy of Sciences,Lanzhou 730000,China 《Meteorological and Environmental Research》 CAS 2011年第3期43-45,共3页
[Objective] The aim was to study the optimization of bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2 based on response surface methodology.[Method] Firstly,single factor experiment was conducted to find out the main m... [Objective] The aim was to study the optimization of bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2 based on response surface methodology.[Method] Firstly,single factor experiment was conducted to find out the main medium components influencing bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2,and then response surface model was established by using response surface methodology and Design-Expert 7.0,so as to optimize the fermentation medium for bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2.[Result] Glucose,KH2PO4 and K2HPO4 were the main impact factors of bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2,and its optimal fermentation medium was composed of 68 g/L glucose,2 g/L NaNO3,5.03 g/L KH2PO4,1.36 g/L K2HPO4,0.2 g/L MgSO4·7H2O,0.02 g/L FeSO4·7H2O,0.01 g/L CaCl2·2H2O and 2 ml microelement solution.Under the optimal conditions,the measured emulsifying activity of bio-emulsifier (67.0%) was close to predictive value (66.7%) and increased by 27% compared with previous value before optimization.[Conclusion] Response surface methodology was applicable to the optimization of fermentation medium of bio-emulsifier production by Geobacillus sp.XS2,and its optimal result was consistent with actual result. 展开更多
关键词 geobacillus sp.XS2 Bio-emulsifier Fermentation medium Response surface methodology China
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嗜热石油降解菌YBW1的筛选、鉴定及性能研究 被引量:2
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作者 付烈 周稳 +3 位作者 王俊卿 曾一梅 熊平 汪浩勇 《湖北工业大学学报》 2011年第2期84-87,共4页
为了获得能在极端环境下降解原油的微生物,以江汉油田地下高温储水为样品成功分离出一株嗜热原油降解菌YBW1.根据生理生化鉴定和系统发育学分析,该菌鉴定为Geobacillus kaustophilus,革兰氏阳性,杆状,好氧,无运动性,菌体大小为(0.6-1.... 为了获得能在极端环境下降解原油的微生物,以江汉油田地下高温储水为样品成功分离出一株嗜热原油降解菌YBW1.根据生理生化鉴定和系统发育学分析,该菌鉴定为Geobacillus kaustophilus,革兰氏阳性,杆状,好氧,无运动性,菌体大小为(0.6-1.0)μm×(2.0-3.5)μm.生长环境温度为45℃-75℃,最适生长温度为65℃.生长能力测试表明该菌能利用液体石蜡和原油为主要碳源生长.在5%(体积分数)接种量,65℃培养18 d,原油黏度降低18.5%.并且当鼠李糖脂添加体积质量为0.2%获得14.3%的最大原油降解率.因此YBW1在原油污染高温生物降解和微生物提高石油采收率方面可能会有一定的应用潜力. 展开更多
关键词 嗜热细菌 原油降解 菌株筛选 geobacillus kaustophilus
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嗜烃乳化功能菌在多孔介质中的生长规律及驱油机理 被引量:4
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作者 李彩风 束青林 +5 位作者 韩保锋 曹嫣镔 汪卫东 宋永亭 吏锋兵 张勇 《油气地质与采收率》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期27-33,共7页
嗜热脂肪地芽孢杆菌Geobacillus stearothermophilus SL-1(简称SL-1)菌是从油藏环境中分离获得的一种嗜烃乳化功能菌,烃类乳化能力强,适宜生长温度为65~70℃。利用微观可视模型和岩心填砂模型,对该菌进行了多孔介质中的生长分布规律及... 嗜热脂肪地芽孢杆菌Geobacillus stearothermophilus SL-1(简称SL-1)菌是从油藏环境中分离获得的一种嗜烃乳化功能菌,烃类乳化能力强,适宜生长温度为65~70℃。利用微观可视模型和岩心填砂模型,对该菌进行了多孔介质中的生长分布规律及驱油机理研究。结果表明,高温高压油藏环境下,与空白对照只添加激活剂体系激活内源菌相比,添加SL-1菌后可以改变孔壁润湿性,乳化膜状油,剥离盲端油,二次水驱后残余油驱替能力显著增强。物理模拟驱油实验显示,外源菌+内源菌体系提高原油采收率最高达13.5%,内源菌提高原油采收率为8.8%,外源菌发酵液提高原油采收率为7.2%;外源菌+内源菌体系中微生物数量最高,基因拷贝数约为109 copies/mL,内源菌体系中微生物数量约为107 copies/mL,外源菌发酵液体系中微生物数量最低,约为102 copies/mL。4轮次注入培养中Geobacillus菌始终是微生物生态系统的优势菌群之一,该菌数量与岩心残余油饱和度呈负相关。显示出嗜烃乳化菌在油藏环境下具有增加微生物数量,强化微生物驱油效果的重要作用。 展开更多
关键词 嗜烃乳化功能菌 地芽孢杆菌 外源菌 微生物种群 提高采收率
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西藏搭格架铯硅华区热泉高温菌株的分离及特征研究 被引量:3
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作者 孔凡晶 王海雷 +1 位作者 郑绵平 郑小娟 《地质学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1750-1753,共4页
从西藏搭格架铯硅华矿床区热泉中分离培养高温菌T4-1,并进行了格兰氏染色、显微镜观察、室内温度实验、16SrRNA基因分析等。结果表明,T4-1为杆状菌,格兰氏染色阳性,其生长范围为45-80℃,最适生长温度70℃。16SrRNA基因分析结果表明,该... 从西藏搭格架铯硅华矿床区热泉中分离培养高温菌T4-1,并进行了格兰氏染色、显微镜观察、室内温度实验、16SrRNA基因分析等。结果表明,T4-1为杆状菌,格兰氏染色阳性,其生长范围为45-80℃,最适生长温度70℃。16SrRNA基因分析结果表明,该菌株属于地芽孢杆菌属(Geobacillus),在发育树上,T4-1菌株与高温烷烃地芽孢杆菌(Geobacillus the rmoleovorans)非常近。本研究为进一步开展西藏高温微生物资源以及微生物参与成矿作用的研究提供了首例。 展开更多
关键词 西藏热泉 高温菌 地芽孢杆菌 16SRRNA基因
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地芽孢杆菌Y565-5分离鉴定及其木糖异构酶基因xylA的克隆表达和酶学性质 被引量:1
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作者 张洁 黄志勇 +2 位作者 王钦宏 王永莉 王硕 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1147-1154,共8页
从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5。利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA。该基因开放阅读框长1182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%。将... 从甘肃玉门油田地表土中分离到一株嗜热木糖利用菌,地芽孢杆菌Y565-5。利用PCR方法从该菌株中克隆得到一个木糖异构酶基因,xylA。该基因开放阅读框长1182 bp,编码394个氨基酸,XylA氨基酸序列与Geobacillus sp.Y412MC52相似性达到99%。将xylA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,得到重组质粒pET-28a(+)-xylA,然后将此重组质粒转化至BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,通过SDS-PAGE电泳检测出明显的45 kD(相对分子质量)特异性蛋白质条带,并且通过半胱氨酸咔唑法检测出表达产物具有木糖异构酶的活性。对其酶学性质的研究发现,XylA最适温度为90°C,最适pH值为8.0。 展开更多
关键词 geobacillus sp.Y565.5 木糖异构酶 克隆 表达
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豆渣降解高温菌的筛选及应用 被引量:1
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作者 陈枭嘉 李立 +2 位作者 马新新 史吉平 赵志军 《河南农业科学》 北大核心 2021年第1期172-179,共8页
为了在高温条件下降解豆渣,从马粪、猪粪、豆渣以及生活污泥中筛选分离高温菌,初步筛选后获得7株可在70℃条件下利用豆渣生长的细菌,通过16S rDNA鉴定确定其分别属于Geobacillus toebii、Geobacillus sp.、Methylobacterium sp.和Thermu... 为了在高温条件下降解豆渣,从马粪、猪粪、豆渣以及生活污泥中筛选分离高温菌,初步筛选后获得7株可在70℃条件下利用豆渣生长的细菌,通过16S rDNA鉴定确定其分别属于Geobacillus toebii、Geobacillus sp.、Methylobacterium sp.和Thermus thermophilus 4个类别的属种,其中Geobacillus toebii(G.T1)对豆渣的降解率最高(4.8%)。研究表明,高温菌株G.T1的最佳增殖培养条件为生长温度65℃,初始培养基pH值7.5,菌株24 h内可达到生长稳定期。将菌株G.T1转接至豆渣(含5%的黄浆水污泥)中保温70℃好氧发酵5 d,结果表明,发酵5 d后,试验组的碳氮比(C/N)降低至14.43,低于空白(CK);试验组的种子发芽指数为135.00%,远高于CK(86.42%);此外,作为有机肥重要营养指标的氮、磷、钾元素含量,在试验组中分别是27.72、7.69、17.92 g/kg,比CK分别提升了18.46%、25.04%、22.74%。因此,高温菌株G.T1不仅能加快豆渣的腐熟进程,而且还有助于提高有机肥产品中氮、磷、钾营养元素的含量。 展开更多
关键词 豆渣 高温菌 筛选 geobacillus toebii 有机肥 好氧发酵 氮磷钾
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Geobacillus thermodenitrificans α-半乳糖苷酶原核表达及其酶学性质 被引量:1
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作者 石征宇 鲁晶娣 +4 位作者 韦盘秋 伍时华 程谦伟 黎娅 易弋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第10期179-183,共5页
本文利用大肠杆菌原核表达系统对来源于Geobacillus thermodenitrificans的α-半乳糖苷酶编码基因进行了重组表达,并对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明,该α-半乳糖苷酶的分子量为100~110 kDa,以p NPG为底物时,该酶的最适反应温度... 本文利用大肠杆菌原核表达系统对来源于Geobacillus thermodenitrificans的α-半乳糖苷酶编码基因进行了重组表达,并对该酶的酶学性质进行了研究。结果表明,该α-半乳糖苷酶的分子量为100~110 kDa,以p NPG为底物时,该酶的最适反应温度为70℃,最适pH6.0,且该酶具有较好的温度稳定性和pH稳定性; Hg^+、Ag^+、Cu^(2+)离子能完全抑制α-半乳糖苷酶的活性,Fe^(3+)、Mn^(2+)、Zn^(2+)等离子对α-半乳糖苷酶的活性具有不同程度的激活作用;以pNPG为底物测得该酶的米氏常数K_m=10.04 mmol/L,最大反应速度V_(max)=18.25μmol/min。 展开更多
关键词 geobacillus thermodenitrificans Α-半乳糖苷酶 原核表达 酶学性质
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Characterization of Lipases from Geobacillus stearothermophilus and Anoxybacillus flavithermuscell Lysates
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作者 Teif A. Najm Marie K. Walsh 《Food and Nutrition Sciences》 2022年第3期238-251,共14页
The aim of this study was to characterize lipases from two thermophilic bacteria, Geobacillus stearothermophilus (GS) and Anoxybacillus flavithermus (AF) in heat treated cell lysates. The pH optimum, pH stability, tem... The aim of this study was to characterize lipases from two thermophilic bacteria, Geobacillus stearothermophilus (GS) and Anoxybacillus flavithermus (AF) in heat treated cell lysates. The pH optimum, pH stability, temperature stability and substrate kinetics and specificity of the lipases were determined. Optimum activity of the lipase from GS (LGS) was observed at pH 7.5, and the optimum activity of the lipase from AF (LAF) was at pH 8.0. LGS was stable up to 70&deg;C after 12 hrs while LAF was stable up to 90&deg;C after 12 hrs. Both enzymes were stable at a pH range of 6 to 8 over 12 h at 4&deg;C. LGS had a highest V<sub>max</sub><sub></sub> value of 22 mM&middot;min<sup>-</sup><sup>1</sup>&middot;mg<sup>-</sup><sup>1</sup> with p-nitrophenyl acetate while the lowest K<sub>m</sub><sub></sub> was 0.8 mM with p-nitrophenyl laurate. The highest V<sub>max</sub><sub></sub> of LAF was 2.5 mM&middot;min<sup>-</sup><sup>1</sup>&middot;mg<sup>-</sup><sup>1</sup> with p-nitrophenyl myristate, and the lowest K<sub>m</sub><sub></sub> was 0.4 mM with p-nitrophenyl octanoate. LGS preferentially hydrolyzed p-nitrophenyl acetate and p-nitrophenyl octanoate while LAF preferentially hydrolyzed p-nitrophenyl myristate and p-nitrophenyldodecanoate. Lipases from both GS and AF showed characteristics that would be beneficial in food processing. 展开更多
关键词 geobacillus ANOXYBACILLUS THERMOSTABLE LIPASE
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嗜烃乳化菌SL-1与内源菌协同驱油的菌群作用关系研究
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作者 李彩风 王晓 +5 位作者 李岗建 林军章 汪卫东 束青林 曹嫣镔 肖盟 《化工学报》 EI CSCD 北大核心 2022年第9期4095-4102,共8页
为了探究稠油开采过程内-外源菌的协同驱油机理,以嗜烃乳化菌Geobacillus stearothermophilus SL-1作为外源菌,考察了该菌与内源菌群的协同降黏、降烃性能。通过16S rDNA扩增子测序,探讨了内-外源菌的协同作用关系。研究结果表明,添加菌... 为了探究稠油开采过程内-外源菌的协同驱油机理,以嗜烃乳化菌Geobacillus stearothermophilus SL-1作为外源菌,考察了该菌与内源菌群的协同降黏、降烃性能。通过16S rDNA扩增子测序,探讨了内-外源菌的协同作用关系。研究结果表明,添加菌株SL-1后,稠油中的长链烷烃被显著降解,原油黏度降低约79.5%。菌群结构分析表明,菌株SL-1的加入有效激活了烃降解菌、产氢菌等采油功能菌,产气量及甲烷含量升高,同时增强了菌群结构的稳定性,进而有利于采油功能菌代谢性能的发挥。物种相关性分析表明,菌株SL-1与Pseudothermotoga、Coprothermobacter、Gelria等产氢菌呈正相关性,这些物种间的相互协同可推动烃降解及产甲烷等进程,进而有利于提高稠油的采收率。本研究为菌株SL-1在稠油开采中的现场应用提供了理论支撑。 展开更多
关键词 geobacillus 协同 微生物采油 降解 石油 生物技术
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