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人疱疹病毒6型基因编码蛋白研究进展 被引量：2
1
作者 姜兰兰 姚堃 《微生物与感染》 2009年第3期165-169,共5页
人疱疹病毒6型(HHV-6)是一类嗜人淋巴细胞的双链DNA病毒,属疱疹病毒β亚科。研究推测HHV-6基因组可编码80～100种蛋白质,包括膜蛋白、即刻早期(IE)蛋白、DNA蛋白、DNA包装蛋白、病毒装配蛋白等。本文就HHV-6基因编码蛋白的特性和功能研... 人疱疹病毒6型(HHV-6)是一类嗜人淋巴细胞的双链DNA病毒,属疱疹病毒β亚科。研究推测HHV-6基因组可编码80～100种蛋白质,包括膜蛋白、即刻早期(IE)蛋白、DNA蛋白、DNA包装蛋白、病毒装配蛋白等。本文就HHV-6基因编码蛋白的特性和功能研究进展予以综述。 展开更多
关键词 人疱疹病毒6型 基因编码蛋白 蛋白特性与功能
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编码天麻抗真菌蛋白cDNA的分子克隆 被引量：11
2
作者 舒群芳 孙勇如 徐锦堂 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1995年第9期685-690,共6页
用重组ＤＮＡ 技术研究了编码天麻抗真菌蛋白（ＧＡＦＰ）的基因，从天麻（Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａＢｌ．）块茎中提取Ｐｏｌｙ（Ａ） ｍ ＲＮＡ 后合成ｃＤＮＡ，构建成表达型ｃＤＮＡ 文库，用纯化的蛋白质探针通过免疫筛选找... 用重组ＤＮＡ 技术研究了编码天麻抗真菌蛋白（ＧＡＦＰ）的基因，从天麻（Ｇａｓｔｒｏｄｉａ ｅｌａｔａＢｌ．）块茎中提取Ｐｏｌｙ（Ａ） ｍ ＲＮＡ 后合成ｃＤＮＡ，构建成表达型ｃＤＮＡ 文库，用纯化的蛋白质探针通过免疫筛选找出对应的ｃＤＮＡ 克隆。在进一步证明所选用的ｃＤＮＡ 克隆含有重组的λ－ｐｈａｇｅ ＤＮＡ 后，提取和纯化含有插入片段重组子的ＤＮＡ，用Ｅｃｏ ＲＩ酶切分析可见插入片段。 展开更多
关键词 天麻 抗真菌蛋白 CDNA 分子克隆 药用植物
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柴胡皂苷d在肝癌模型大鼠体内的药效学评价 被引量：6
3
作者 王维 李海林 +3 位作者 韩光宁 宋国权 代海平 彭永海 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第20期2027-2030,共4页
目的评价柴胡皂苷d在二乙基亚硝胺诱发的肝癌模型大鼠体内的药效学。方法将60只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、实验组及对照组,每组20只;20只未处理的SD大鼠为安慰剂组。实验组予以腹腔注射10mg·kg-1柴胡皂苷d注射液,每日1次;... 目的评价柴胡皂苷d在二乙基亚硝胺诱发的肝癌模型大鼠体内的药效学。方法将60只建模成功的SD大鼠随机分为模型组、实验组及对照组,每组20只;20只未处理的SD大鼠为安慰剂组。实验组予以腹腔注射10mg·kg-1柴胡皂苷d注射液,每日1次;对照组予以腹腔注射200 mg·kg-1沙利度胺注射液,每日1次;模型组和安慰剂组均腹腔注射0.9%氯化钠注射液2m L,每日1次。所有干预均连续6周。干预结束后,用生化分析法检测大鼠肝功能指标,用免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和MKI-67基因编码核蛋白(Ki-67)表达,用HE染色法观察肝组织病理学形态。结果与模型组相比,实验组与对照组的肝功能指标较低(P<0.05),PCNA和Ki-67表达较低(P<0.05)。与对照组相比,实验组中各项肝功指标较低(P<0.05),PCNA和Ki-67表达较低(P<0.05)。安慰剂组的肝病理切片显示正常的肝小叶结构完整,肝索周围规整,肝细胞索排列整齐,细胞核清晰。模型组显示癌灶呈现片状坏死,正常肝小叶结构被破坏,白色结节处为肝癌细胞。对照组仍能观察到少量恶性度较低以及局灶性坏死的癌细胞,并且有较少的核分裂象,实验组的肝组织肝血窦中有少量充血,极少的核分裂象。结论柴胡皂苷d能显著改善肝癌模型大鼠的肝功能,修复损伤的肝细胞,降低肝癌模型大鼠PCNA和Ki-67蛋白的表达量。 展开更多
关键词 柴胡皂苷D 肝癌 增殖细胞核抗原 MKI-67基因编码核蛋白
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RT－cDNA克隆－PCR法获取犬瘟热病毒融合蛋白基因（F）
4
作者 江国托 卢景良 +3 位作者 刘长明 阎庆生 刘思国 刘滨东 《生物技术》 CAS CSCD 1996年第1期8-9,共2页
纯化鸡胚成纤维细胞培养的犬瘟热病毒（ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓ，ＣＤＶ），获得病毒基因组ＲＮＡ后，反转录合成双链病毒Ｆ基因ｃＤＮＡ。将此双链ｃＤＮＡ平端插入ＰＵＣ１９质粒ＳａｍⅠ位点构建重组质粒，进行ｃ... 纯化鸡胚成纤维细胞培养的犬瘟热病毒（ＣａｎｉｎｅＤｉｓｔｅｍｐｅｒＶｉｒｕｓ，ＣＤＶ），获得病毒基因组ＲＮＡ后，反转录合成双链病毒Ｆ基因ｃＤＮＡ。将此双链ｃＤＮＡ平端插入ＰＵＣ１９质粒ＳａｍⅠ位点构建重组质粒，进行ｃＤＮＡ克隆。以重组克隆质粒为模板ＰＣＲ扩增，获得ＣＤＶ全长Ｆ基因。将此Ｆ基因插入表达载体ＰＢＶ２２０，在大肠杆菌中表达，通过对表达产物的最终鉴定，可确认所获片段为ＣＤＶ全长Ｆ基因． 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 融合蛋白基因 反转录 CDNA克隆 PCR
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抑癌基因PTEN编码蛋白在癌旁胃黏膜、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中的表达 被引量：1
5
作者 周涛琪 孙娜莎 +2 位作者 程晓春 李晖 姚彬 《中国卫生检验杂志》 CAS 2021年第3期331-334,共4页
目的探讨抑癌基因PTEN编码蛋白在癌旁胃黏膜、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中的表达,分析抑癌基因PTEN编码蛋白于胃癌病程中发挥的作用。方法选择2017年5月-2019年5月175例胃癌患者作为研究对象,通过免疫组化法检测癌旁胃黏膜、肠上... 目的探讨抑癌基因PTEN编码蛋白在癌旁胃黏膜、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中的表达,分析抑癌基因PTEN编码蛋白于胃癌病程中发挥的作用。方法选择2017年5月-2019年5月175例胃癌患者作为研究对象,通过免疫组化法检测癌旁胃黏膜、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中抑癌基因PTEN编码蛋白表达,并观察抑癌基因PTEN编码蛋白表达和胃癌病理生物学特征关系。结果癌旁胃黏膜、肠上皮化生组织内抑癌基因PTEN编码蛋白阳性表达检出率均高于异型增生、胃癌组织内抑癌基因PTEN编码蛋白阳性表达检出率,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴结转移的胃癌组织内PTEN编码蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移的胃癌组织内PTEN编码蛋白阳性表达率,差异有统计学意义(P<0.05);弥漫型胃癌组织内PTEN编码蛋白阳性表达率低于肠型、混合型,且肠型低于混合型,差异有统计学意义(P<0.05);管状腺癌的PTEN编码蛋白阳性表达率高于黏液腺癌、印戒细胞癌,差异有统计学意义(P<0.05).结论抑癌基因PTEN编码蛋白在癌旁胃黏膜、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中表达显示为进行性下调、缺失,与肿瘤细胞相关生物学行为存在相关性。 展开更多
关键词 抑癌基因PTEN编码蛋白 癌旁胃黏膜 肠上皮化生 异型增生组织 胃癌组织
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基于P18蛋白基因的新型鸭呼肠孤病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：1
6
作者 沈丽雅 潘群兴 +6 位作者 卢凤英 董永毅 张敬峰 吴坤 刘青涛 姜平 张小飞 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第6期1481-1487,共7页
根据新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)特有的非结构蛋白P18基因保守序列设计1对特异性引物,建立了NDRV荧光定量RT-PCR检测方法。用该方法和普通RT-PCR方法对239份临床样品进行检测,NDRV阳性检出率分别为23.85%(57/239)和17.5... 根据新型鸭呼肠孤病毒(Novel duck reovirus,NDRV)特有的非结构蛋白P18基因保守序列设计1对特异性引物,建立了NDRV荧光定量RT-PCR检测方法。用该方法和普通RT-PCR方法对239份临床样品进行检测,NDRV阳性检出率分别为23.85%(57/239)和17.57%(42/239),荧光定量RT-PCR检测方法的检出率明显高于普通RT-PCR检测方法。随机取5份荧光定量RT-PCR检测方法检测的阳性的样品用鸭胚进行病毒分离培养,经普通RT-PCR扩增和基因测序证明均为NDRV。用10^(3.0) ELD_(50)剂量的NDRV-SY株人工感染14日龄雏鸭,不同时间采集泄殖腔肛拭子样品,通过荧光定量RT-PCR检测方法进行排毒情况监测,结果显示,雏鸭人工感染NDRV 48 h时可以从泄殖腔检测到病毒排出,持续时间可达20 d,并发现在病毒感染后的第5 d和第10 d出现2次排毒高峰。试验结果表明,建立的NDRV荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的特异性和较高的敏感性,可用于NDRV感染的排毒监测以及临床感染的早期诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 新型鸭呼肠孤病毒 P18蛋白基因 荧光定量RT-PCR
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